科学院团队有新发现：植物如何区分有害或是有益微生物？ 百欧博伟生物：近日，中国科学院分子植物科学卓越创新中心王二涛团队、张余团队以及何祖华院士团队在水稻免疫机制研究上取得了重大突破。该成果以“Release of a ubiquitin brake activates OsCERK1-triggered immunity in rice（水稻通过释放泛素制动器来激活由OsCERK1介导的免疫反应）”为题，在国际顶级学术期刊《自然》上发表，为深入理解植物如何巧妙使用免疫系统这把双刃剑协调抗病、共生和生长的平衡奠定了理论基础。 团队研究发现了一种名为OsCIE1的调控蛋白能够束缚OsCERK1激酶活性。在无病原菌侵染的时期，OsCIE1能够像“紧箍圈”一样，将一种名为泛素的小蛋白分子连接到OsCERK1蛋白表面，抑制OsCERK1的激酶活性，防止免疫过度激活。然而，当水稻面临病原真菌入侵时，真菌细胞壁上的长链几丁质迅速诱导OsCERK1的激酶活性。该激酶将磷酸基团分子添加至OsCIE1蛋白表面的关键区域，抑制OsCIE1限制OsCERK1的能力，从而解除“紧箍圈”的束缚。此时，免疫信号通路被OsCERK1成功激活，启动植物免疫反应，抵抗病原菌的侵染。 水稻是我国的主要作物，其对磷、氮等营养元素的巨大需求，导致过度施肥，严重污染环境。因此，深入探索水稻免疫和共生的机制，提高作物抗病性和营养吸收是农作物育种的重要方向之一。 值得注意的是，促进水稻营养吸收和生长的丛枝菌根菌与对水稻造成毁灭性病害的稻瘟病菌均属于真菌界。它们的细胞表面都覆盖着一种名为几丁质的多聚糖类物质。那么植物又是如何区分“有益”还是“有害”微生物的呢？原来“长短有别”。短链几丁质可以作为共生信号，而长链几丁质则会触发植物的抗病免疫反应。 在建立互惠互利共生关系时，共生菌根真菌会释放大量短链几丁质作为信号，通知植物为建立共生关系做准备。而病原菌则会极力避免几丁质分子的泄漏，尤其是长链几丁质，以免被植物识别并激活免疫反应。水稻细胞表面的关键受体蛋白OsCERK1能够辨别免疫或是共生信号，特异介导植物的共生或免疫反应。但这也需要一定监管，若受体OsCERK1触发的免疫反应失控，将引发过度的免疫反应，虽然对病原体抵抗增强，但也阻碍了植物生长和与互惠菌根共生的建立。 关于水稻体内如何有效调控这种潜在的过度激活的免疫反应，长久以来一直是科研界尚待揭晓的谜团。 科研人员通过合作利用结构生物学方法，精确鉴定了控制OsCIE1 “紧箍圈”松紧的关键位点Ser237。当Ser237位点被OsCERK1磷酸化修饰时，如同紧箍咒失效，OsCERK1便可展现其威力，积极抵御外敌。而一旦Ser237位点未被磷酸化，紧箍咒再次发挥作用，OsCERK1则恢复平静。 中国科学院分子植物卓越中心王二涛研究员、张余研究员和何祖华院士作为文章共同通讯作者，王二涛研究组的博士后王钢、博士生陈曦以及张余研究组的已毕业博士生俞承志作为共同第一作者。 微生物菌种查询网隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，成立于二〇一四年十月份，是一家专业提供中国微生物菌种，标准菌种，质控菌株,ATCC菌种,细胞系以及培养基等产品的查询网站！自成立至今，已提供各类微生物菌种、细胞、培养基数量达四万余份，接待咨询客户数量5万余人次，成交合同数量2万余份！是国内微生物菌种及细胞信息Z全的网站！ 我们拥有自主研发能力，提供的ATCC菌种达15000余份,ATCC各类细胞系达3000余份,保藏中心涵盖菌种资源更达数十万余份！ 除此之外，我们还拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到Z终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得Z优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

                 DB人弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞的培养操作规程！ 一、产品信息平台编号：Bio-131317 规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶细胞信息：DB 细胞名称：人弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞用途：STR鉴定正确 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准） 二、细胞介绍从一位45岁男性弥漫性大细胞淋巴瘤的腹水中建立；细胞株携带ezh2y641N突变；分为gcb样淋巴瘤亚型(生发中心B细胞)。 三、细胞特性1）来源：B细胞淋巴瘤2）形态：圆形不同大小的单细胞，悬浮生长，部分成群3）含量：>1x106 细胞数4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装5）用途：仅供科研使用。 四、细胞的运输和保存干冰运输及复苏好存活细胞（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 五、细胞接收后的处理方法1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。 2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。3）悬浮细胞：T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基）。4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代。                       六、细胞培养步骤1、培养基及培养冻存条件准备：（1）准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。（2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。（3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。2、细胞处理：冻存细胞的复苏：（1）将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。（2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。（3）细胞冻存：收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：悬浮状态下生长的细胞，可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态，一般情况下细胞密度维持在1×105~1×106个/mL（不同细胞对密度要求不同，）可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 下面T25瓶为例；（1）细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.（2）1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。（3）将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。 七、注意事项1、收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。2、先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置数小时（4h左右），稳定细胞状态，切忌在温箱内静置过夜。3、静置后镜检，拍照，记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。4、贴壁细胞：若细胞密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，收集细胞瓶内的培养基，留8ml继续培养至80%左右再传代，瓶盖可稍微拧松。5、细胞瓶内的培养基含血清和双抗，可收集后4℃保存备用，可补加2%血清。刚开始传代时建议一半用细胞瓶内的培养基，一半用客户自备的培养基，使细胞逐渐适应培养条件，以免因不适应而造成生长状态不佳。6、细胞胰酶消化液建议使用PBS配制，7、因为细胞培养过程外因太多，所以我们的售后保障期为一周，超过一周的细胞我们会酌情处理，但不提供免费更换服务。  北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                 用于秸秆腐熟和产高温菌的：嗜热脂肪地芽胞杆菌  嗜热脂肪地芽孢杆菌（Bacillusstearothermophilus）属嗜热性需氧芽孢杆菌，但兼有厌氧的特性，细菌繁殖体G兰氏染色阳性呈紫色，细菌芽胞孔雀绿着色。嗜热脂肪地芽孢杆菌比较容易识别且对人体没有危害性，一般作为空间消毒的指示生物。 一、菌种简介平台编号：Bio-18497 提供形式：冻干物英文名称：Geobacillus thermophilus中文名称：嗜热脂肪地芽胞杆菌属名：Geobacillus种名加词：thermophilus其它保藏中心编号：=DSM22＝ATCC 12980＝CCM 2062＝CCUG 26241＝IAM 11062＝IFO 12550＝NCIB 8923＝NCTC 10339＝VKM B-2231来源历史：← DSMZ ← ATCC ←NCA, 26资源归类编码：15131311103模式菌株：模式菌株主要用途：a:3:{i:0;s:4:分类;i:1;s:4:研究;i:2;s:4:教学;}具体用途：秸秆腐熟，高温菌生物危害程度：四类致病对象：无培养基编号1：0266资源保藏类型：a:1:{i:0;s:6:培养物;}保存方法：a:3:{i:0;s:14:真空冷冻干燥法;i:1;s:8:矿物油法;i:2;s:10:定期移植法;}共享方式：a:4:{i:0;s:10:公益性共享;i:1;s:16:资源纯交易性共享;i:2;s:12:合作研究共享;i:3;s:14:资源交换性共享;}用途：秸秆腐熟，高温菌 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）                   二、培养方法1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。 三、实验内容1、称量→溶化→调ph→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2、干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3、高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4、过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 四、保存方法1、传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。2、悬液保存法：①蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。②糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。3、载体保存法：土壤保存法；砂土保存法；硅胶保存法；磁珠保存法；麸皮保存法；纸片(滤纸)保存法。4、常用的冷冻保存法：①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。②干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。③液氮保存法(-196℃)：是适用范围最广的微生物保存法。 五、注意事项1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解，接种在 2 支斜面上，因冻干粉处于休眠状态，请勿接种多支斜面或平板，以避免因接种量不足而导致复苏不成功；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                 小鼠肺大动脉平滑肌细胞试剂盒的生理结构及应用！ 一、背景 小鼠肺大动脉平滑肌细胞试剂盒适用于分离培养小鼠肺大动脉平滑肌细胞。小鼠肺大动脉平滑肌细胞试剂盒提供了的组织分离条件，分离单个细胞的效率高。此外，小鼠肺大动脉平滑肌细胞试剂盒还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。 二、生理结构 小鼠肺大动脉平滑肌细胞分离自正常小鼠肺动脉组织，细胞呈梭形或多角形。该细胞所表达的钙通道表面表达的ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁炎症反应。该细胞也是多数重要动脉疾病的靶细胞。虽然肺大动脉组织机械韧性很强，但利用小鼠肺大动脉平滑肌细胞试剂盒中提供的肺大动脉组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的肺大动脉组织片能使得肺大动脉组织中成肺大动脉细胞的一些功能特性发生改变，从而将成肺大动脉细胞分离开来。 平滑肌细胞是指构成平滑肌组织。平滑肌即无纹肌的通称，是被视为较横纹肌原始的一种肌肉。平滑肌除作为无脊椎动物的躯体肌而有广泛分布外，在脊椎动物除心肌之外而大部分内脏肌也是由平滑肌组成的。 三、应用 用于AS小鼠主动脉平滑肌上TRPC1-BK信号复合体分子表达量的变化研究： 冠状动脉粥样硬化性心脏病、缺血性脑血管病等缺血性心脑血管疾病已成为严重威胁人类健康的流行性非传染病,而动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）斑块的发生和发展是其重要的病理生理基础。AS发生机制复杂,在斑块的形成和发展过程中,血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）的迁徙、增殖、表型转换及细胞外基质的产生起到主要作用。因此,研究VSMCs功能在AS斑块发生和发展中的作用对于防治冠心病具有重要意义。而VSMCs内钙离子(calcium ion,Ca2+)不仅是VSMCs收缩和舒张的主要调节因子,而且作为第二信使对于VSMCs的迁徙、增殖、表型转换及细胞外基质的产生也起到了关键的作用。 瞬时受体电位通道（Transient receptor potential channel,TRPC）是一类非选择性的阳离子通道,为细胞感受器,包括TRPC1、TRPC2、TRPC3、TRPC4、TRPC5、TRPC6、TRPC7这七种类型,而这七种TRPC通道中,最早发现研究最深入的是TRPC1通道,这种通道在VSMCs上广泛分布。与经典电压门控性Ca2+通道不同的是TRPC1通道无电压依赖性。当肌浆网内Ca2+耗竭时,TRPC1通道开放,Ca2+内流增加,血管收缩,故TRPC1通道功能主要是参与VSMCs收缩和增生、细胞凋亡及信号转导等。TRPC1通过调控Ca2+内流影响机体的生理机能。 研究表明,多种病理生理状态与TRPC通道表达量增多和减少、通道开闭活性异常存在相关性。使用抑制剂来抑制TRPC通达蛋白的表达或使用特异性TRPC通道的阻滞剂可使细胞内Ca2+浓度降低、血管舒张,目前认为,TRPC家族成员是构成细胞膜上钙池操纵性Ca2+通道和受体操纵性Ca2+通道的分子基础,它作为主要的Ca2+内流通道,不仅参与机体许多生理功能,还与多种病理过程相关。 采用动脉粥样硬化组和对照组小鼠分别10只,处死后分离得到主动脉血管平滑肌组织,从组织中提取总RNA及总蛋白,使用反转录-聚合酶链式反应（reverse-transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）、免疫蛋白印记（Western blot）及免疫组化等方法检测并比较两组小鼠主动脉血管平滑肌组织中TRPC1、大电导钙离子激活钾通道α亚单位(large conductance Ca2+-activated K+channelαsubunit,BKα)及大电导Ca2+激活钾通道β1亚单位(large conductance Ca2+-activated K+channelβ1 subunit,BKβ1)亚基m RNA和蛋白表达量的差异。 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

                   重大突破：开启微生物生命暗物质的合成开关！ 微生物具有合成多种天然产物的能力。但在微生物合成天然产物时，大量合成基因仍处于沉默状态，限制了更多新天然产物的合成，这些产物被称为微生物“生命暗物质”。 近日，中国科学院深圳先进技术研究院合成生物学研究所研究员罗小舟与美国加州大学伯克利分校教授杰·基斯林、深圳湾实验室化学生物学研究所研究员唐啸宇，联合在《自然·代谢》发表最新研究成果。研究团队利用泛基因组分析技术，在链霉菌属中鉴定了597个基因。他们发现了一个关键途径，能显著提升链霉菌的天然产物产量，并产生具有药物潜力的新化合物。这一成果对开发新型抗生素及提高天然产物产量具有重要意义。 中国科学院院士邓子新评价：“这项成果不仅激发了我们重启微生物天然产物‘暗物质’生物合成的兴趣，也为合成生物学在药物研发等领域的应用提供了新策略。” 开发改造“细胞工厂”的新方法 放线菌是用于生产抗生素的主要微生物之一。作为放线菌门类中最典型的一类，链霉菌是已知生物合成基因簇最丰富的微生物之一。因此，链霉菌也被称为“细胞工厂”。 “为了在自然环境中生存，链霉菌可以进化出大量次级代谢基因，以基因簇形式生产各种生物活性物质，来抵抗外敌和抑制竞争者。”中国科学院深圳先进技术研究院合成生物学研究所助理研究员王欣然介绍，相比其他微生物，链霉菌中的次级代谢基因簇更多，不同菌株间能力差异也很大。 在研究团队看来，如果能找到产生生物活性物质能力有差异的链霉菌菌株，并研究哪些基因可能与活性物质的高产共同进化，就有望找到改造链霉菌促进产物合成、激活沉默基因簇的新方法，进而揭秘微生物“生命暗物质”。 然而，与大肠杆菌、酵母菌等微生物相比，放线菌的遗传改造技术并不成熟。目前，该领域研究主要集中在对单个菌株的遗传物质、生活环境和代谢物质等进行调控，鲜有通用策略来提高不同天然产物产量。 为此，罗小舟团队花了将近4年时间，利用泛基因组分析技术，系统分析整个链霉菌属基因组，跳过了对放线菌单个菌株的研究，聚焦种群规律，建立了囊括20余种不同放线菌菌株的公共操作平台，通过“自下而上”的方式开发了普适性的改造方法。罗小舟说，这一方法节省了传统基于机理研究所耗费的时间与人力成本，为开发适用于多种植物和微生物的天然产物生产改造技术提供了新思路，并加快了探索天然产物合成未知领域的进程。 找到提升天然产物产量关键途径 研究团队利用泛基因组分析技术，鉴定了链霉菌中与聚酮化合物基因簇共同进化的597个基因，并发现其中合成辅酶吡咯喹啉醌（PQQ）的基因簇，在链霉菌合成天然产物的过程中发挥了关键作用。通过与上海交通大学教授白林泉、华中科技大学教授孙宇辉合作，研究人员在链霉菌菌株和工业放线菌菌株中引入PQQ的生物合成途径后发现，至少有16385种代谢产物的产量显著提高。其中，庆大霉素、安丝菌素等36种已知天然产物，有望用于制备菌剂、抗真菌剂和抗癌剂等。 值得一提的是，研究团队还观察到有新的代谢产物产生，其中一些具有潜在抗生素活性和临床感染菌株活性。“这证实了引入PQQ的生物合成途径使得链霉菌中一些沉默的基因簇被唤醒，激活了链霉菌中未被发现的潜在代谢途径，为新型抗生素等药物的开发提供了重要线索。”罗小舟说。此外，研究通过深入的蛋白质组和代谢组分析发现，引入PQQ的生物合成途径增强了链霉菌合成多种天然产物的效率。 “未来，我们将利用合成生物研究重大科技基础设施，对链霉菌中已发现的597个基因进行自动化分析，并随着更多基因功能表征，深入研究各个基因对天然产物的增产和激活机理等。”罗小舟介绍，团队将持续推进菌株的开发改造工作，探索链霉菌在生产抗生素和天然产物等方面的产业应用。 微生物菌种查询网作为中国微生物菌种中心引航者，单位代为引进美国ATCC微生物菌种保藏中心，德国DSMZ菌种保藏中心，荷兰CBS菌种保藏中心，日本JCM微生物菌种保藏中心，包括其中的ATCC微生物细菌与噬菌体（18382）；细胞系和杂交瘤（4997）；真菌和酵母（58183）；原代细胞（146）；原生动物和藻类（2428）；干细胞（102）；载体，克隆与分子（18006）；病毒（3594）；核酸 - DNA / RNA（1350），引进进口微生物菌种货期短，质量保证，UPS国际快递运输。

                 抗衰进入细胞级时代，下一步是定制化需求大爆发！ 百欧博伟生物：柏拉图就曾简明扼要地指出人生三大财富——“第一财富是健康，第二财富是美丽，第三财富是财产。” 胡润研究院发布的《2022高净值人群价值观及生活方式研究报告》数据显示，个人资产超过600万的高净值人群的人生价值前十排序中，“健康”稳居首位，占比超过一半，金钱目标权重降级。 随着年龄的增长、衰老的加剧，健康如指间流沙，功成名就的商界精英们也难以免俗。 免疫学家阿瑟·麦克法拉尼在著作《拉长生命的黄金时期》中提到，“科学将赋予人类健康，我们有理由期待一个新的时代的到来”。 一个多世纪后的当下，以科技之名，这则预言也在照进现实。年龄不可逆，但与衰老相抗，尚有希望，曾用大把时间和精力博财富的商界大佬们纷纷开启探索之旅。 抗衰需求大涨，先打断细胞衰老 出于抗衰目的，硅谷富豪布莱恩·约翰逊每年花1400万亲自试用各式超前的“抗衰法”，甚至置换血浆；美权威专家辛克莱教授在社交媒体公布的“私家抗衰清单”中，民用高压氧舱赫然在列，引发争议…… “抗衰极客”们在滴答作响的时钟催促下作出激进的选择，而更多被困于衰老时钟里的事业高手们，追逐抗衰的热情也随着前沿科技的进步而持续高涨，他们不仅追求皮肤紧致、身形精干，还希望保持整体高能量状态，以兼顾事业、家庭和个人兴趣等。 从某种程度来说，这是倒推之下的需求。职场之中，追求高标准，擅于达成目标的事业高手们有着多重健康焦虑，而且随着年龄渐长，已经影响到生活质量。 李果是一名80后职场强人，从基层做起一步步走到公司的销售一把手位置，完成财富积累后购车买房，不论是生活还是金钱，都后顾无虞，但年入百万与日益加剧的健康焦虑是两条轨道，朝着不同的方向延伸，长期的应酬与饮食不规律导致她难以拥有高质量的睡眠，身体长期处于亚健康状态。 环境影响加之年龄增长，带来的衰老正在精英人群中间“显化”。人类的衰老有三大关键年龄阶段，分别是25岁左右的初老开启，32-35岁的“中年危机”和40岁以上的慢病高发期。 对于30岁以上的职场精英来说，要逃离活力下滑、失眠多梦、记忆力减退以及皮肤问题等困扰并重获充沛精力，选择有效的抗衰路径尤为关键。 在衰老的九大标志中，细胞衰老是重要一员。打断细胞衰老成为内源性抗衰的科学逻辑支撑，细胞级抗衰赛道就此掀起风潮，崇尚科技力的精英人士是首批拥趸。 日前，Swisse PLUS与中国医药卫生事业发展基金会携手，在明德医院举办了一场围绕细胞级“高阶抗衰”主题的私享会，共同探讨精英人士的生活方式与抗衰需求，以及中国高端消费者对于抗衰领域认识的迭代水平等议题，以便为他们带来定制化的细胞级抗衰方案。 NAD+是激活细胞的“密钥” 2017年的诺贝尔医学奖已经揭示其中原理，可以理解为人体的每一个细胞中都有一套高精密的时钟系统，控制着个体何时犯困、何时兴奋、何时饥饿。 在人体健康的状况下，这套时钟始终规律运转，但它并非自发运行的“永动机”，其齿轮是“长寿蛋白”SIRT1，需要特定的激活剂NAD+（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）作为“燃料”。但人体的NAD+会随着衰老持续减少，细胞衰老自然伴随发生，精力不振、失眠焦虑找上门来。 从多个维度来看，NAD+是对抗衰老、维持能量峰值的“密钥”，包括降低自由基带来的危害、通过细胞自噬维持内部稳态等等。 自由基被称为细胞，人体正常代谢氧化的过程中所产生的副产品正是自由基，环境污染和不健康的生活方式同样会让人体产生大量自由基，过量的自由基会导致DNA损伤，损伤积累会引发细胞生命的崩溃和细胞死亡。 要“改写”自由基对细胞的“屠杀”进程，就要维持有效的DNA修复机制，首先是活化参与DNA单链断裂后监测与修复过程的核糖聚合酶（PARP），这种酶的激活需要NAD+。 在保证细胞长寿的众多机制中，多国实验中呈现抗衰潜力的“细胞自噬”（autophagy）尤为瞩目——当细胞衰老时，自噬能力会明显下降，细胞内受损的蛋白质、细胞器和脂质就不能被自噬清除，不但不能为细胞代谢活动和新原料提供场所，还会导致线粒体等细胞器更新缓慢，引发炎症和细胞死亡，加速机体整体性衰老。 SIRT1通过脱乙酰化参与自噬过程的蛋白质来调节细胞自噬，其激活也需要依赖NAD+。 此外，NAD+还被认为是线粒体能量转化的关键分子，NAD+水平下降会导致线粒体功能障碍，使得细胞、组织、器官的异常，最终加速老化的发生。 基于上述前沿科技研究成果，NAD+被称为是可以激活人体“长寿因子”的关键辅酶，但随着年龄增长，人体内的NAD+会减少。细胞级抗衰产品正是以补充人体内的NAD+为核心目的。因为NAD+分子量过大，无法通过细胞膜进入人体，直接口服没有意义，但补充NAD+前体却是切实可行的方法。 临床研究表明，每天补充100mg的NR（烟酰胺核糖），2周能使全血NAD+水平提高22%。目前，NR被EFSA专家意见认为可作为新型食品，已被世界公认最严格最完备的产品管理制度澳洲TGA加入药用原料清单。 Swisse PLUS面向精英人士推出的细胞级抗衰产品NAD+细胞焕活瓶和NAD+细胞能量瓶，核心的NAD+前体成分正是专利成分NR。 各个击破，细胞级抗衰走入定制化时代 作为口服抗衰行业的先行者，Swisse PLUS是全球精英名流定制的细胞级养护旗舰品牌，已经围绕“细胞级修护 健康新科技”理念，形成了全面覆盖肌肤抗衰、机能衰老、大脑抗衰、代谢抗衰等多个维度的细胞级口服养护产品体系。 Swisse PLUS的细胞级抗衰产品覆盖全身养护，但各有侧重。 为女性专研的NAD+细胞焕活瓶，在提升整体机能抗衰能力的NAD+前体NR核心成分外，还包含葡萄籽、玫瑰果油、VC、VE等多重抗老成分，更侧重于皮肤抗衰。 根据权威第三方检测机构的功效报告，34名30-45岁女性受试者在口服NAD+细胞焕活瓶产品28天后，近9成受试者认为日常精力得到改善、焦虑情绪有所缓解、睡眠质量提升、运动体力增强。 皮肤抗衰效果方面的检测数据更为明显，在服用产品14天和28天后，受试者女性面颊皮肤角质层含水量分别上升了20.83%和42.87%；服用产品28天后，受试者女性眼下纹数量、体积和面积分别下降了31.01%、10.42%和10.59%。 专为男性推出的NAD+细胞能量瓶，在含有NR专利成分外，增加了维生素E、镁、硒、姜黄，实现减轻疲劳、缓解焦虑头痛、提高睡眠质量、提升大脑活力的多重功效。 Swisse PLUS的产品策略也在根据新的变化不断调整，新冠疫情后，大脑认知功能下降成为30岁至45岁年龄段人士的能量新困境，这在高强度用脑的商务精英人群、高压作业的自身中产、熬夜晚睡的备考人和打工人群体中间最为明显，推理能力下滑、记忆力减退、大脑加速老化接踵而至。 为满足市场对“大脑年轻化”的需求，Swisse PLUS在2023年新推出前沿科技产品PQQ醒脑丸，其核心成分是被称为“大脑减龄素”的PQQ（吡咯并喹啉醌），以及“脑黄金”成分DHA（不饱和脂肪酸）。PQQ+DHA双管齐下，通过深度调节脑细胞秩序，提升大脑专注力、注意力的同时，降低焦虑感。 除此之外，Swisse PLUS还针对肝脏抗衰和血管抗衰推出了细胞级净肝、清脂产品，以实现肝脏、血管的正向循环，协同对抗衰老。 条条大路通罗马，从多个维度做到细胞级抗衰产品全覆盖，到为高阶人士提供专业化、个性化的抗衰管理，Swisse PLUS要实现的是在衰老发生的关键节点，以科学的方式，为高质量的生命长度保驾。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

               MTEC小鼠肾小管上皮细胞的培养步骤及验收注意事项！ 小鼠肾小管上皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小管、后用胶原酶消化，结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来；细胞经Cytokeratin-18/PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 一、细胞简介平台编号：Bio-131291 规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶 细胞信息：MTEC 细胞名称：小鼠肾小管上皮细胞MTEC产品规格：T25培养瓶x1；1.5ml冻存管x2细胞数量：1x10^6；1x10^6保存温度：37℃；-198℃运输方式：常温保温运输；干冰运输安全等级：1用途限制：仅供科研2类培养体系：DMEM高糖培养基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%双抗（Hyclone）培养温度：37℃二氧化碳浓度：5%简介：小鼠肾小管上皮细胞MTEC取自ICR小鼠，经过SV40永生化处理，贴壁细胞，上皮样。用途：研究注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）　　二、细胞特性1）细胞来源于术后人的皮脂腺组织。2）细胞鉴定：CK7免疫荧光染色为阳性。3）经鉴定细胞纯度高于90%。4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。5）细胞生长方式：多角形细胞，贴壁培养。 三、产品的运输和保存视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 四、产品使用1)本产品仅能用于科研2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核3)本产品未通过用于活体诊断的审核 五、细胞接收后的处理方法1）收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。2）在显微镜下确认细胞生长状态时，最好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下，同时给刚收到的细胞拍照，（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。3）观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。4）贴壁细胞：在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象，如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长，可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基的原培养瓶中（或新的培养瓶中）。5）悬浮细胞：T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基）。6）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1：2传代。 六、细胞培养步骤1、培养基及培养冻存条件准备1）准备MEM 培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。2、细胞处理：1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。 对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2、加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3、按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4、将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 下面T25瓶为例；1、细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。2、1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3、将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 七、验收细胞注意事项1、收到小鼠肾小管上皮细胞MTEC细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。2、收到小鼠肾小管上皮细胞MTEC细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。3、收到小鼠肾小管上皮细胞MTEC细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时血清浓度可以加到15％去培养。若细胞迏到80%左右，血清浓度还是在10％。4、收到小鼠肾小管上皮细胞MTEC细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下5-10ML培养基继续培养：超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心3分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。5、将培养瓶置于37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于4℃冰箱，以备不时之需。6、24小时后，小鼠肾小管上皮细胞MTEC细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般1-3分钟，不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。7、贴壁细胞，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2培养。特别提醒：原瓶中培养基不宜继续使用，请更换新鲜培养基培养。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                微生物力量：抑菌芽孢杆菌的应用前景与发展趋势！ 抑菌芽孢杆菌是一种常见的芽孢杆菌，广泛存在于自然界中的土壤、水体和植物表面等环境中。作为一种重要的益生菌，抑菌芽孢杆菌在农业、生物防治等领域发挥着重要作用。 抑菌芽孢杆菌是一种革兰氏阳性细菌，具有形成芽孢的能力，这种芽孢能够在恶劣环境下存活，并具有较强的抵抗力。抑菌芽孢杆菌能够产生一系列的抗菌物质，如抗生素、胞外酶和毒素，可以抑制一些植物病原菌和土壤病原菌的生长。此外，抑菌芽孢杆菌对许多有害微生物具有明显的抑制作用，可通过竞争营养物、产生抗菌物质等方式抑制有害菌种的生长，有助于改善环境和保护作物健康。 一、农业应用 在农业领域，抑菌芽孢杆菌被广泛用于生物防治、提高土壤肥力、促进农作物生长等方面。作为一种生物制剂，抑菌芽孢杆菌可以代替化学农药，对抗土传病原菌、真菌等病害，有效控制作物病害的发生。同时，其还能够分解有机质、促进有机质的矿化和土壤养分的释放，有助于改善土壤结构和提高作物产量。 二、环境工程应用 抑菌芽孢杆菌在环境工程领域发挥着重要作用。例如，在油污处理中，抑菌芽孢杆菌能够分解石油类物质，清除水体中的油污，起到环境净化的作用。此外，它还被应用于生活污水处理和污泥处理等环境保护领域，有助于改善环境质量和生态平衡。 三、食品安全与健康 抑菌芽孢杆菌被广泛应用于食品工业中，用于食品防腐和保鲜。其在食品中的应用可以有效抑制食品中的病原菌和霉菌的生长，延长食品的保质期。同时，抑菌芽孢杆菌还被用于制备益生菌制品，如益生菌饮品和保健品，对调节肠道菌群平衡、增强免疫力、维护肠道健康有益。 四、环境生态保护 在环境生态保护领域，抑菌芽孢杆菌可以作为生物修复剂应用于油污、重金属污染场地的治理。通过其生物修复作用，可以降解有机化合物和有毒金属，恢复土壤和水体的生态平衡，减少污染对环境的危害。 五、发展趋势 1、基因工程技术的应用 随着基因工程技术的不断进步，抑菌芽孢杆菌的基因组学和代谢组学研究取得了重大突破。基因工程技术的应用可以实现对抑菌芽孢杆菌菌株的能力进行改良和优化，进而提高其在农业、食品工业和环境保护领域的应用效果。 2、生产技术的提升 随着发酵工程、分离纯化技术和微生物制剂加工技术的不断提升，抑菌芽孢杆菌制剂的生产工艺将更加成熟和高效。这将降低抑菌芽孢杆菌制剂的生产成本，提高产品质量，满足不同领域对产品的需求。 3、国际合作与产品标准化 随着国际间合作交流的加强，抑菌芽孢杆菌制剂的产品标准化和规范化将得到推动。国际水平的产品标准化将有助于抑菌芽孢杆菌制剂产品更好地融入国际市场，提高技术竞争力和品牌影响力。 抑菌芽孢杆菌作为一种重要的微生物资源，其在农业生物防治、食品安全和环境生态保护等方面的应用前景广阔。在技术创新、产业化推广和国际合作的推动下，抑菌芽孢杆菌必将迎来更加广阔的发展空间，为推动绿色、可持续发展贡献更多力量。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                  营养肉汤(NB)的制备和使用方法及安全操作规范！ 一、背景 营养肉汤(NB)也被称为营养肉汤培养基或Nutrient Broth，是一种常用的细菌培养基，用于细菌的传代、培养、转种、复壮和增菌等。 营养肉汤(NB)的主要成分包括蛋白胨、牛肉浸粉（或牛肉膏粉）和氯化钠。其中，蛋白胨和牛肉浸粉为微生物生长提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子，同时也提供碳源；氯化钠则用于维持培养基的渗透压。 在制备营养肉汤(NB)时，需要将适量的培养基粉末溶解在蒸馏水中，并加热溶解。然后，将溶液分装到三角瓶或试管中，进行高压灭菌处理，备用。 营养肉汤(NB)适合营养需求较高的细菌的生长，但不适用于苛养型微生物。它广泛用于食品、牛奶、奶制品的微生物检测，以及其他需要一般细菌培养的实验中。 营养肉汤(NB)混合后微热溶解，然后调整pH值至7.4-7.6，滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液，pH值应为7.2-7.4。这种培养基广泛用于细菌的培养，尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。 二、营养肉汤的制备和使用需要遵循以下安全操作规范： 1、穿戴防护设备：在制备过程中，应穿戴实验服、护目镜、手套等防护设备，以防止培养基飞溅到皮肤或眼睛中。 2、确保实验环境清洁：实验环境应保持清洁，以减少微生物污染的可能性。 3、无菌操作：制备营养肉汤时应确保所有使用的工具、容器和试剂都是无菌的。避免用手直接接触培养基。 4、高压灭菌：制备好的营养肉汤应经过高压灭菌处理，以杀死可能存在的细菌和其他微生物。 5、储存条件：灭菌后的营养肉汤应储存在适当的条件下，通常是在冷藏环境中。确保在有效期内使用。 6、避免交叉污染：在使用营养肉汤时，应避免与其他实验材料或试剂发生交叉污染。例如，不要使用同一支移液管在不同类型的培养基之间转移液体。 7、处理废弃物：使用后的培养基废弃物应按照实验室废弃物处理规定进行妥善处理。 8、遵守实验室规章制度：在制备和使用营养肉汤时，应严格遵守实验室的规章制度和安全操作规范。 三、应用 营养肉汤(NB)可以用于抗菌塑料砧板抗菌性能的评价方法优化及其应用研究： 选择常见的食品接触材料制品“抗菌塑料砧板”为研究对象,主要探讨了其抗菌性和抗菌耐久性相关的评价技术与方法,在此基础上对市场上销售的抗菌塑料砧板进行了合格率调查,相关结果总结如下: 1、首先针对食品接触材料抗菌性能贴膜法(GB/T 31402-2015)中接种液在阴性对照和空白对照培养24 h后菌落回收出现明显增殖这一现象,研究了接种液中营养肉汤浓度对贴膜法菌落回收的影响。结果显示,试验菌种为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌时,菌液制备用营养肉汤(NB)的最佳浓度比分别为1/500和1/1000,相比原国标法大肠杆菌的接种液浓度为1/500营养肉汤(1/500NB),本实验改进的方法更能保障测试结果的准确。 2、分别采用原国标法及本实验改进的国标法对20种抗菌塑料砧板进行抗菌性能评价,验证改进方法的有效性。营养肉汤(NB)结果显示,13种抗菌塑料砧对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有抗菌作用,抗菌率都>90%,其余7种抗菌率40 mg/Kg时,抗菌率均高于99.99%。此外,数据显示相对于国标法,改进的方法更严格、准确,20种受试砧板对大肠杆菌的抗菌合格率为70%,而国标法对大肠杆菌的抗菌合格率为80%。 3、对市售的两种纳米银抗菌塑料砧板用改进的国标法进行抗菌性能评价,结果表明,两种纳米银抗菌塑料砧板对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都具有抗菌效果,抗菌性能值都>3.00,但较低湿度下大部分的细菌会干燥死亡。当使用正常浓度的营养肉汤(NB)制备的菌悬液用于测试时,纳米银抗菌塑料砧板表现出弱的甚至无抗菌作用。表皮葡萄球菌,沙门氏菌,沙雷氏菌和单核细胞增生李斯特菌等4种食源细菌接种实验结果表明,纳米银抗菌塑料砧板在正常浓度NB和高湿度下抗菌效果并不理想。与实际的食物使用情况相比,标准贴膜试验可能会高估纳米银抗菌塑料砧板的抗菌效果。 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

                 小鼠胎儿真皮成纤维细胞提取物的知识与应用研究！ 一、背景 小鼠胎儿真皮成纤维细胞提取物是从小鼠原代胎儿真皮成纤维细胞提取的，小鼠原代胎儿真皮成纤维细胞从正常小鼠胚胎组织制备。小鼠胎儿真皮成纤维细胞提取物可以用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 小鼠胎儿真皮成纤维细胞主要分布于黏膜和皮下疏松结缔组织，胞质内富含嗜碱性颗粒，细胞表面能够表达高亲和力FcεRI，可结合游离IgE，参与I型超敏反应。小鼠胎儿真皮成纤维均来自正常小鼠胎儿真皮组织，采用组织块培养法制备而来。 小鼠胎儿真皮成纤维细胞提取物可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。小鼠真皮成纤维细胞分离自真皮组织；真皮，位于表皮深层，向下与皮下组织相连，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维，使皮肤既有弹性，又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。 二、应用 小鼠胎儿真皮成纤维细胞提取物可用于真皮间充质干细胞对瘢痕疙瘩成纤维细胞生物学活性的影响： 目的通过研究FDMSCs条件培养基(FDMSCs conditioned medium,F-CM)对瘢痕疙瘩成纤维细胞(Keloid fibroblasts,KFs)生物学活性的影响,探索FDMSCs相关疗法治疗瘢痕疙瘩的可行性。真皮成纤维细胞(Adult dermal fibroblasts,ADFs)、FDMSCs和KFs,并应用ADFs和FDMSCs制备ADFs条件培养基(ADFs conditioned medium,A-CM)和F-CM。 KFs分别用空白对照培养基(SFM)、A-CM和F-CM培养,培养48h后对各组KFs进行一系列实验分析,包括细胞形态观察(倒置显微镜下)、细胞数量变化(MTT比色实验)、细胞增殖率和凋亡率改变(BrdU细胞增殖实验和TUNEL细胞凋亡实验)、细胞共培养干预实验和条件培养基干预实验对比、凋亡相关基因和蛋白的表达变化(qPCR和Western blot)、细胞凋亡时期检测(Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测)结果通过一系列实验,结果显示相对于对照组和A-CM组,F-CM可以诱导KFs出现凋亡形态,并可减少活细胞的数目。但KFs增殖率没有明显改变但凋亡率明显增加,这说明细胞数目的减少主要得益于细胞凋亡的增多。 FDMSCs与KFs共培养实验的结果同培养基干预KFs实验结果没有明显区别。进一步实验表明F-CM可促进细胞促凋亡蛋白BCL-2的表达并抑制细胞抑凋亡蛋白BAX的表达,导致BCL-2/BAX升高而促进细胞凋亡。Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡实验结果表明细胞凋亡时期主要为晚期凋亡。 结论： (1)FDMSCs可成功从早期人胎儿皮肤中提取并进行体外培养、传代,并能维持稳定的生物学特性。 (2)F-CM干预KFs实验结果与细胞共培养干预实验结果一致,避免了FDMSCs直接应用于机体的潜在风险。 (3)F-CM可以通过抑制细胞抑凋亡蛋白BCL-2的表达并促进细胞促凋亡蛋白BAX的表达来促进细胞凋亡。 (4)F-CM所诱导的KFs凋亡时期主要为晚期凋亡。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                  揭秘肠道菌群与全身健康：十万亿大军的健康使命！ 百欧博伟生物：“肠道菌群”指的是居住在我们肠道里的数十万亿微生物，其中大多数都非常“友好”，与我们形成一种共生的关系。菌群帮助我们消化食物，合成营养物质，保护我们免受有害微生物的侵害，并与免疫系统紧密相连。本文就来聊一聊，这十万亿“大军”如何保护我们的身体健康。 肠道菌群与全身健康 有千丝万缕关系 1、肠道菌群与消化系统 肠道菌群与我们的消化系统存在着密不可分的关系。这一庞大的“微生物社区”协助我们分解食物中复杂的碳水化合物，产生关键的营养物质，例如短链脂肪酸，这些物质在维持肠道健康和整体新陈代谢中发挥着至关重要的作用。 肠道菌群能够促进肠道蠕动，帮助消化，并与免疫系统互动，保护我们免受有害微生物的侵害。健康的肠道菌群平衡对于预防一系列消化系统疾病，如肠炎和肠漏综合征，具有重要意义。 另一方面，由于抗生素使用、不良饮食习惯或其他因素引起的肠道菌群失衡，可能与消化系统的多种疾病关联，包括炎症性肠病和过敏反应等。因此，维护肠道菌群的稳定和多样性对促进健康的消化功能及预防相关疾病具有重大意义。 2、肠道菌群与心血管系统 近期研究发现，肠道菌群不仅与我们的消化系统健康紧密相关，它们还在维护心血管健康方面发挥着至关重要的作用。例如，某些有益菌群能够降低血液中的“坏”胆固醇（低密度脂蛋白）水平，而有害菌的过度生长可能导致慢性炎症，增加心血管疾病的风险。通过优化饮食或补充益生菌，调整肠道菌群的平衡，可以作为预防心血管疾病的一个有效手段。 3、肠道菌群与神经系统 事实上，肠道微生物可以通过多种方式影响我们的神经系统和行为。它们通过产生多种神经递质（例如血清素和多巴胺）或其他信号分子与大脑沟通，并可能影响我们的情绪和认知。一些早期研究暗示，调整肠道菌群可能成为治疗某些精神疾病（如焦虑、抑郁和自闭症）的新途径。 4、肠道菌群与内分泌系统 肠道菌群和内分泌系统之间的关系正在成为研究热点，尤其是与糖尿病的联系。肠道菌群通过其代谢物，如短链脂肪酸，能够影响宿主的胰岛素敏感性和能量平衡，进而与糖尿病的发生、发展相关联。一些研究发现，糖尿病患者的肠道菌群组成与健康人存在明显差异，如某些能够产生丁酸的有益细菌在糖尿病患者体内可能较少。 此外，肠道菌群还能影响肠道黏膜的屏障功能和免疫反应，这与糖尿病的发病机制相关。因此，调整肠道菌群的平衡可能成为预防和治疗糖尿病的策略之一。不过，关于肠道菌群如何具体影响糖尿病的发生和进展，以及如何通过调整肠道菌群来改善糖尿病的治疗效果，还需要进一步研究来阐明。 维持肠道菌群平衡 益生元很关键 人们的肠道菌群受到基因和环境因素的共同影响。例如，双胞胎研究表明，虽然基因对肠道菌群的多样性和组成有一定的影响，但环境因素（如饮食和药物使用）在我们一生中起着更大的作用。肠道菌群既然如此重要，那么如何保护和维护这些“小伙伴们”的平衡呢？ 首先，保持健康的生活方式至关重要。这包括保证充足的睡眠、规律的运动和健康的饮食。特别是饮食，高纤维的食物（如蔬菜、水果和全谷物）能够提供益生元，促进“好”菌的生长。 此外，在某些情况下，我们可能需要借助益生菌和益生元来调整我们的菌群结构。益生菌是活的微生物，能够在适量摄入的情况下为宿主带来健康益处，而益生元则是一种非消化性的食物成分，能够刺激益生菌的生长和活动。 在我们的日常生活中，应更加注重保护它们，在我们的身体内部建立和谐的微生态环境，为健康保驾护航。 粪菌移植 肠道菌群未来的潜力 当谈到如何保护肠道菌群时，会提到抗生素。抗生素在抵抗细菌性感染方面具有巨大的威力，但同时，它们也会杀死肠道中的有益菌群，可能导致一系列的问题，比如消化不良、免疫力下降等。因此在使用抗生素时，务必在医生的指导下合理用药。 同时，也可以考虑在用药期间或用药后服用一些益生菌制品，来帮助肠道菌群尽快恢复到正常水平。此外，日常饮食习惯也与肠道菌群健康息息相关。比如，过多地摄入糖分和油脂可能会导致肠道菌群失衡，而摄入富含纤维的食物，如蔬菜、水果和全谷类食物，有助于维护肠道菌群的平衡。 因此，保持健康的饮食习惯，是维护肠道健康的重要一环。同样值得注意的是，肠道菌群的研究也提供了一种全新的预防和治疗疾病的方法——粪便移植。粪便移植，即将健康人的粪便移植到患者的肠道中，通过调整其肠道菌群来达到治疗疾病的目的。虽然这听起来可能有些让人不适，但粪便移植已经在治疗某些疾病了，如在难治性抵抗药物的艰难梭菌感染中显示出了巨大潜力。 随着科学技术的不断发展，在未来，我们或许能看到更多关于肠道菌群的研究，以及更多基于肠道菌群的治疗方法。而作为普通人的我们，保护好肠道菌群，就是保护好健康。在我们探索更多未知领域的同时，也不要忘记关爱好身体内的这群“小伙伴们”。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                 清酒广泛乳杆菌清酒亚种的培养方法与实验内容！ 清酒广泛乳杆菌清酒亚种是Lactobacillus属的微生物，原产地为中国。主要用途为研究；教学；生产，具体用途为发酵制乳制品，生产青贮饲料，制作泡菜。 一、菌种简介平台编号：Bio-67313 规格：冻干物拉丁属名：Latilactobacillus Sakei Subsp. Sakei 中文名称：清酒广泛乳杆菌清酒亚种拉丁名称：Latilactobacillus sakei subsp. sakei曾用名：清酒乳杆菌清酒亚种 Lactobacillus sakei subsp. sakei模式菌株：是其它保藏中心编号：=ATCC 15521来源历史：←中国检验检疫科学研究院(23307)←ATCC收藏时间：2010/12/21特征特性：G+杆菌，不运动，无芽胞，精氨酸双水解酶阴性，过氧化氢酶阳性，氧化酶阴性，发酵葡萄糖、蔗糖、木糖，不发酵阿拉伯糖、海藻糖、棉子糖。最适pH 5.5~6.2。参考用途：培养基质控，分类学研究。生物危害程度：四类致病对象：无分离基物：清酒自动发酵剂培养条件培养基：MRS培养基酪蛋白胨 (胰酶消化) 10.0 g 牛肉浸粉 10.0 g 酵母浸粉 5.0 g 葡萄糖 20.0 g 吐温 80 1.0 g 乙酸钠 5.0 g 柠檬酸三铵  2.0 g K2HPO4 2.0 g MgSO4·7H2O  0.2 g MnSO4·H2O 0.05 g 琼脂 15.0 g 蒸馏水 1000.0 mL pH 6.2～6.5 分离乳酸菌可添加CaCO3 20.0g。以上成分121℃，灭菌15 min。液体培养基不加琼脂。推荐使用成品培养基。培养温度：37 ℃需氧类型：好氧用途：分类；研究；分析检测；培养基质控，分类学研究。注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准） 二、形态特征菌落圆形、光滑、乳白色，0.8-1mm；细胞球形，0.5-0.9×0.5-1.2µm，排列成对或成短链；G+，不形成芽胞；趋酸，化能异养，兼性厌氧；利用蔗糖产生粘稠物；葡萄糖发酵产乳酸。将种子液接入混合蔬菜汁中发酵48 h的产酸量为0.99%（以乳酸计）。  三、培养方法1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在 上延续使用半年左右。6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 四、实验内容1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 五、使用范围(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 (2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。 (3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。  六、保存方法1、传代保存法：培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙。2、液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。3、悬液保存法：①蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。②糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。4、载体保存法：①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。5、常用的冷冻保存法：①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。②干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。③液氮保存法(-196℃):是适用范围最广的微生物保存法。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                  肉色明串珠菌的菌株培养与化学机理及实验内容！ 肉色明串珠菌，革兰氏阳性细菌，是一类不产生孢子，G+C含量低于50%的革兰氏阳性细菌，可以在厌氧或有氧条件下生长，通常表现为过氧化氢酶阴性，不水解精氨酸，其细胞大小为0.5～0.7x0.7～1.2μm。 一、菌种简介平台编号：Bio-03472 提供形式：冻干物拉丁属名：Leuconostoc Carnosum 中文译名：肉色明串珠菌拉丁学名：Leuconostoc carnosum原始编号：JCM 9695菌株来源：←中国科学院微生物研究所←日本保藏人：周培瑾直接来源国家：日本保藏时间：3/7/2000其他保藏编号：=ATCC 49367 =CCUG 30059 =CIP 103319 =DSM 5576 =KCTC 3525 =LMG 11498生物危害：四类模式菌株：模式菌株菌株用途：模式菌株。培养温度：30℃培养基：0006    其他培养条件分离源：真空包装的肉用途：模式菌株。 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准） 二、化学机理明串珠菌细胞球状，直径0.9—1.2微米，成对、成短链或长链。在蔗糖溶液中，链外常有一厚厚的、胶质的无色葡聚糖荚膜，即代血浆（右旋糖酐）。革兰氏染色阳性，菌落小，灰白，隆起。不液化明胶，发酵多种糖产酸产气，不还原硝酸盐，不产吲哚，微好氧或兼性厌氧。此菌是制糖工业的一种危害菌，常使糖液发黏稠而无法加工。常存在于水果、蔬菜中，能在含高浓度糖的食品中生长。 三、菌株培养1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯 菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在 上延续使用半年左右。6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 四、实验内容1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 五、注意事项1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。2、试管斜面菌种请尽快转接，不建议长期存放。3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。4、使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系或更换新的菌种。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                人原代瘢痕疙瘩成纤维细胞的运输与保存及注意事项！ 一、细胞简介平台编号：Bio-135725 规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶 细胞信息：原代细胞细胞名称：人原代瘢痕疙瘩成纤维细胞用途：原代细胞 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准） 二、细胞详述瘢痕疙瘩是一种具有浸润生长特性的病理性瘢痕，治疗后复发率高。成纤维细胞是瘢痕疙瘩形成与增生的效应细胞，瘢痕疙瘩组织学特点为大量成纤维细胞增生。 三、细胞特性1）细胞来源于手术切除的瘢痕疙瘩组织。2）细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色为阳性。3）经鉴定细胞纯度高于90%。4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。5）细胞生长方式：成纤维样细胞，贴壁培养。 四、产品的运输和保存视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 五、产品使用1)本产品仅能用于科研2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核3)本产品未通过用于活体诊断的审核 六、注意事项1、收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。2、收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。3、由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。4、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。5、客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术售后服务电话，我们随时给予解答。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                铜绿假单胞菌外毒素A的抗原性及其与辅助细胞的关系！ 1、目的　 研究铜绿假单胞菌外毒素A（PE)的某些抗原性及其与辅助细胞的关系。  2、方法　 用MTT法观察PE在有无辅助细胞参与条件下对鼠脾淋巴细胞的刺激作用,并用鼠细胞毒性T细胞株CTLL进行证实。 3、结果　 PE在0.01～100ng/ml浓度范围能刺激鼠脾淋巴细胞增殖，PE的丝裂原作用无需粘附细胞的辅助，但粘附细胞及其粘附细胞的PE刺激上清能协同PE对鼠脾淋巴细胞的刺激作用。PE在丝裂原作用范围内能刺激CTLL细胞生长，并与IL-2有协同作用。PE在体内能使小鼠脾淋巴细胞自发淋转率增高，对ConA刺激的增殖反应增强，但对淋巴细胞自发分泌IL-2和ConA诱导IL-2的产生水平无影响。结论　PE在无辅助细胞参与条件下也能刺激淋巴细胞增殖。 铜绿假单胞菌外毒素A（PE)为条件致病菌铜绿假单胞菌分泌的一种相对分子质量(Mr)为66×103的单链多肽，可分为三个结构功能区：Ⅰ区系氨基末端区，与靶细胞上2-巨球蛋白受体结合；Ⅱ区为跨膜区，与毒素“越膜就位”有关；Ⅲ区是羧基末端区，具有ADPR转移酶活性，为毒素分子的活性部分，通过抑制蛋白质的合成而导致细胞死亡。在亚致死剂量，PE具有其它微生物抗原的性质，如：PE能诱导鼠胸腺细胞转化，其刺激作用需要辅助细胞的处理及提呈等。我们在研究PE对鼠脾淋巴细胞的抗原作用时，发现PE在无辅助细胞参与的情况下也能刺激淋巴细胞增殖，现报告如下： 一、材料与方法 动物和细胞株：纯系BALB/c雄性小鼠，8～12周龄，购自本院动物中心，IL-2依赖株CTLL，引自本院六所；小鼠成纤维细胞L929，引自本所二室。 培养基和试剂：PE(Cal Biochemical Corporation Lot 072291)；ConA(Sigma)；MTT(Fluka)；RPMI 1640(GIBCO)；抗PE多克隆抗体(本室制备)。 淋巴细胞转化试验：断颈处死小鼠，无菌取脾，制备脾细胞悬液(8×106/ml)，取细胞悬液、PE、ConA等样品各100μl，加入96孔板，37℃，5%CO2培养箱孵育不同时间，用MTT法检测，每组设3个复孔。 脾细胞悬液中粘附细胞的去除：调整BALB/c 小鼠脾细胞浓度为4×106/ml，置大空斑瓶(底面积5×8cm2)中培养2h，使粘附细胞贴壁，收集未贴壁细胞，即为脾非粘附细胞，通过姬姆萨染色观察，粘附细胞的去除率在95%以上。 小鼠腹腔巨噬细胞（MΦ）的制备：将3ml培养液注入小鼠腹腔，轻揉腹部，吸出腹腔液体，用培养液洗涤细胞2次配成2×106/ml，加到24孔平底培养板，1ml/孔，置37℃，CO2孵箱培养2h，弃去未粘附细胞，粘附细胞即为小鼠腹腔巨噬细胞。 CTLL细胞增殖试验：CTLL细胞株用含20%小牛血清、IL-2 200U/ml的RPMI 1640完全培养基传代培养，将处于对数生长期的CTLL细胞用不含IL-2的完全培养基洗涤2次，取细胞悬液(106/ml)及PE等样品各100μl，加入96孔培养板中，置37℃，5%CO2及饱和湿度下培养24～48h，用MTT法测定。设标准IL-2和完全培养基对照。 PE免疫小鼠：按本室常规进行。亚致死剂量PE腹腔注射3次，间隔7～10d。 二、结果 1、PE的抗原性：用台盼蓝染料排除法计算不同浓度PE与脾细胞共同孵育不同时间细胞存活率，结果显示：PE浓度大于或等于100ng/ml，表现出毒性作用，所以我们将PE的刺激剂量定在100ng/ml以内。 PE的丝裂原作用：PE在0～100ng/ml范围设6个浓度组，与鼠脾细胞共同培育1、2、4、7d，测定淋转值，结果表明：PE的淋转刺激浓度在0.01～10ng/ml之间，最适浓度为0.01～1.0ng/ml。PE组培育24h，未观察到淋转现象，随培养时间延长，吸光度A值逐渐升高，第4天A值最高。ConA刺激组24h即有淋转现象，最高刺激指数在第2天就能观察到。PE的淋转刺激指数为ConA的1/2，刺激时间相对延长，可见，PE为弱丝裂原。 PE协同ConA对鼠脾细胞致有丝分裂作用：将ConA固定在2.5μg/ml，分别加入不同浓度的PE，与鼠脾细胞37℃孵育3～4d，作淋转测定。结果显示：PE在丝裂原作用最适浓度范围对ConA的淋转刺激有协同作用。 PE的丝裂原作用与粘附细胞的关系：文献报道，PE诱导胸腺细胞淋转需要辅助细胞。我们试验了PE刺激脾细胞淋转与粘附细胞的关系，结果发现：PE诱导去除粘附细胞后的脾细胞淋转虽不如去除粘附细胞以前高，但仍能刺激淋转，加入腹腔巨噬细胞（MΦ）后，刺激值又恢复到以前的水平。 为了弄清是粘附细胞还是其产生的细胞因子协同PE诱导淋转，我们将PE与小鼠腹腔MΦ共培育24h，取培育上清，加入脾非粘附细胞培育4d，结果表明：PE与MΦ的培育上清能诱导脾非粘附细胞转化。刺激值大于PE单独刺激的值。虽然PE与粘附细胞共育上清中残留一定量的PE，但淋转刺激值较单独PE刺激的值要高，则上清中存在某种细胞因子参与PE的刺激作用。 2、PE免疫小鼠脾细胞免疫功能的测定：为了了解PE在体内对细胞免疫的影响，我们用PE免疫小鼠3次后，无菌取脾制成细胞悬液，观察在有或无ConA刺激下，脾淋巴细胞增殖反应和IL-2产生水平。表1显示：PE免疫小鼠脾淋巴细胞自发淋转A值高于正常小鼠对照组，而IL-2分泌水平两组差异无显著性。PE免疫小鼠脾细胞对ConA的增殖反应较正常小鼠对照组明显增强，而对ConA诱导IL-2产生水平与对照组差异无显著性。结果表明：PE的丝裂原作用可促进小鼠脾细胞增殖，对脾细胞分泌IL-2能力无影响。 3、PE对CTLL细胞的作用：为了验证PE的抗原作用在无辅助细胞参与的情况下也能进行，我们用鼠细胞毒性T细胞株CTLL进行了证实。 PE刺激CTLL细胞生长：以不同浓度PE与洗涤后的CTLL细胞共孵育24～48h，用MTT法观察CTLL细胞生长情况时发现：PE能刺激IL-2依赖株CTLL细胞生长，最佳刺激剂量范围与淋转相同，即0.01～1ng/ml，可见PE在无辅助细胞的参入下也能刺激淋巴细胞增殖。 PE协同IL-2刺激CTLL细胞生长：将IL-2浓度固定在50U/ml，加入不同浓度PE，与CTLL细胞共孵育24～48h，发现PE在较大范围(0.001～10ng/ml)内对IL-2的刺激有协同作用，最佳刺激剂量为0.01～1.0ng/ml。 我们采用2种方法使PE失活：①PE与抗PE血清37℃作用60min。②PE经70℃加热处理30min。2种方法处理后，PE对细胞L929的毒性消失(传代细胞L929是文献报道对PE最敏感的细胞，能作为指示细胞判断PE的毒力)，处理后的PE对CTLL细胞的刺激作用消失，说明CTLL细胞的增殖由PE引起。 三、讨论 铜绿假单胞菌外毒素A具有双向免疫调节作用，可诱导鼠胸腺细胞增殖分化，PE对鼠胸腺细胞的抗原作用需要辅助细胞的处理和提呈，为了了解PE对细胞免疫的影响，我们观察了PE在体内外对鼠脾淋巴细胞的作用。鉴于PE对许多哺乳动物细胞有毒性，所以在实验前，首先用台盼蓝试验确定了PE对鼠脾细胞的毒性剂量范围。结果显示：当PE剂量大于或等于100ng/ml时，对脾细胞显示明显毒性作用。以亚致死剂量PE与脾细胞共孵育时发现：PE对脾细胞有丝裂原作用，最佳刺激剂量为0.01～1ng/ml，刺激高峰时间为4d。与ConA相比，其所需剂量比ConA低1000倍，但刺激时间较长，淋转刺激值比ConA低1倍以上。所以PE是弱丝裂原。我们在实验中得出的PE最适剂量范围较国外报道的剂量低100倍，可能是产品来源不同、纯度不同或其它原因。进一步观察PE的丝裂原作用与粘附细胞的关系时发现：在没有粘附细胞参入下，PE也能刺激淋巴细胞增殖，不象国外报道的那样需要粘附细胞的辅助。但国外报道的是PE刺激胸腺细胞淋转需要粘附细胞辅助，可能胸腺细胞与脾细胞的表面受体和分子有所不同或其转化机制不同所致。此外，我们发现：分别加入鼠腹腔巨噬细胞、PE刺激腹腔巨噬细胞培养上清能提高PE对脾非粘附细胞的转化作用，这与国外报道PE刺激的粘附细胞上清能取代粘附细胞导致胸腺细胞淋转的结果有相似之处。这些结果说明：上清中存在的某种细胞因子可刺激淋巴细胞转化，而不是由辅助细胞处理PE再呈递给淋巴细胞而使后者转化。推测PE对脾细胞丝裂原作用的可能机制是：PE对脾细胞中的淋巴细胞和粘附细胞均有作用，脾淋巴细胞直接受毒素结构上某表位的刺激而导致转化，粘附细胞则吞噬、处理PE，释放出PE片段或(和)某种细胞因子，再进一步促进淋巴细胞转化，在PE对脾淋巴细胞转化中，粘附细胞（吞噬细胞）起到协同、辅助的作用。 为了探讨PE淋转的直接诱发机理，我们将PE与鼠细胞毒性T细胞株CTLL（IL-2依赖株）共孵育24～48h，发现PE在0.01～1ng/ml剂量范围能刺激CTLL细胞生长，并与IL-2有协同作用。CTLL细胞为传代细胞，不含有粘附细胞，PE能使CTLL细胞增殖，必然也能直接作用于脾细胞而无需依赖粘附细胞的辅助。PE加热70℃处理和抗PE血清中和后失去对CTLL细胞的刺激作用，PE究竟与细胞上哪部分结合，通过何种途径刺激淋巴细胞增殖将是我们今后要研究的课题。国内外目前还未见此方面的研究报道。 我们观察到：PE在体内能增强脾细胞的自发转化，但对脾细胞的IL-2分泌无影响，与国外报道PE在体外不能诱导脾细胞IL-2分泌的结果相似。实验中观察到：PE免疫的鼠脾细胞对ConA的反应增强，同时发现PE在体外与ConA也有协同作用，而国外报道PE在体外抑制PHA诱导的人外周血淋巴细胞转化作用，两者实验结果相反，有可能是人与鼠的免疫应答不同，或ConA与PHA丝裂原作用机理、方式不同之故。 目前，对铜绿假单胞菌感染的防治是世界上迫切期望解决的问题，弄清PE的作用机制，包括PE对机体免疫功能的影响，将有助于人类最终攻克这一疾病。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                 国台加码探索微生物代谢，进一步提升产品质量！ 百欧博伟生物：中国白酒是世界上唯一一种采用固态发酵、固态蒸馏生产的高度蒸馏酒。白酒生产是开放式、多菌种参与。参与整个发酵过程的微生物种类超过了1000种。这些微生物通过他们自身分泌各种生物酶，并利用这些生物酶将高粱、小麦原料中的大分子的淀粉和蛋白质，水解成小分子的糖和氨基酸。 这些微生物利用这些小分子的生物物质，代谢产生大量的新的物质，主要有醇、醛酸、酯几大类物质。白酒中物质组成目前研究表明已经超过3000种。物质组成十分丰富且复杂，但多为微量组分。 微生物的种类和它们之间的丰度比例决定了白酒质量和风格特点。受外部环境中微生物的种类和丰度影响，并和自身生产工艺有明显的相关性。也就是说，在同样的产地环境中，不同酒企生产的酒在质量和风格特点上也会有差异。这样就造成了不同产地、不同企业的产品存在差异。 那么人们所采用的工艺和所在产地的地理环境、气候条件最终都是服务于微生物，通过微生物的代谢转化来发挥作用。所以酿酒过程当中最重要的因素就是微生物。 5月9日，国台酒业集团与天津科技大学签约，将共同开展研究课题《酱酒酿造微生态三系标准评价体系及调控技术开发》，探索制定发酵过程中的“三系标准”。就是除了过去行业内常用的理化检测物质组分来评价和控制外，增加了生物酶和微生物的检测和控制，从根本上解决生产质量的稳定优质。 白酒其实是这些微生物的复杂的代谢产物。白酒质量好坏和风格特点是微生物代谢产生的产物之间相互作用给人们带来感觉上的体验结果。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                 人胶质瘤细胞的处理方法与培养步骤及注意事项！ 一、细胞简介平台编号：Bio-73178 规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶 细胞信息：U251 细胞名称：U251（人胶质瘤细胞） 种属：人 生长特性：贴壁 细胞形态：成纤维细胞样 背景描述：U251细胞源自一位患者的胶质母细胞瘤组织。 生长培养基：DMEM高糖＋10% FBS＋1% P/S培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃用途：(STR鉴定正确)注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准） 二、细胞的运输和保存采用干冰保存运输收到细胞时，若干冰已经完全融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。  三、细胞用途本产品只提供给进一步的科研使用，不可应用于治疗等其他方面。 四、细胞处理方法（一）贴壁细胞1、接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张）。2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。3、严格遵循无菌操作规范，打开细胞培养瓶。4、37度平衡1-2小时。5、用移液管吸取培养基，到50ml离心管中，剩下细胞密度达到80%至90%可以传代，如没有达到添加6ml新鲜培养基继续培养。6、如果肉眼检查上清有细胞，对50ml上清进行离心收集细胞，如果细胞连片状态，弃掉上清对收集的细胞进行胰酶消化（1ml胰酶37度），接种培养。 （二）悬浮细胞1、接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张）。2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。3、严格遵循无菌操作规范，打开细胞培养瓶。4、细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒）。5、1000rpm，5min 离心，用吸管小心吸出上清，加入培养基，重悬细胞。6、将重悬好的细胞转入六孔板或者细胞培养瓶种，加入新鲜培养基，置于 37℃，5%CO2 培养（大部分细胞）。 五、注意事项1、收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。2、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。3、用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                   脱氮假单胞菌的特点与优势及培养与使用方法！ 一、菌种简介平台编号：Bio-52963 规格：冻干物拉丁属名：Pseudomonas Sp. 菌株名称：脱氮假单胞菌其他编号：ATCC13867培养基编号：2培养温度：30℃用途：研究注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准） 二、产品特点1、菌种功能明确、品种稳定、应用;2、产品仅限用于科研本品芽孢含量高,稳定性好、耐高温和挤压;3、繁殖能力快、定植能力强、易存活、耐受低pH值环境;4、复活迅速,可在短期内成为优势种群;5、本品安全高效、无抗药性、不污染环境;6、对多数抗生素不敏感,可与低浓度抗革兰氏阴性菌抗生素同时使用。 三、产品优势1、产品质量稳定,是为科研和 提供微生物菌种资源共享服务的专业平台。2、国内首创封闭管包装,冻干后的菌株使用时添加配套的复苏培养基后迅速而完全溶解。针对不同的菌株提供八种不同的培养方法,保证菌种的复苏质量。3、严格的质检程序,确保产品质量的稳定性。4、该类产品广泛使用到食品、药品、化妆品、水产品、化工等行业,疾控中心、质检局、出入境、药检局等等,得到广泛好评。 四、培养方法1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。 五、使用范围（1）合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，酿酒酵母菌组成成分精确，重复性强，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。 （2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，培养效果好，所以常被采用。 （3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。 六、保藏方法1、传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4-6℃冰箱内保存。2、液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。3、载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4、寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。5、冷冻保藏法可分低温冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                   大鼠肝实质细胞的知识与应用及培养操作步骤！ 一、背景 大鼠肝实质细胞是指大鼠肝脏中的主要功能细胞，也称为肝细胞。这些细胞占据了肝脏的大部分体积，并承担着多种重要的生理功能，包括代谢、解毒、合成和分泌等。 大鼠肝实质细胞在实验室研究中常被用作模型来探讨肝脏疾病、药物代谢和毒理学等方面的问题。它们可以通过原代培养或传代培养的方式获得，并用于各种体外实验。 原代培养是指从大鼠肝脏中直接分离出肝细胞并进行培养。这种方法可以保持细胞的原始特性，但细胞寿命相对较短，通常只能进行有限次数的传代。传代培养则是将原代培养的肝细胞进行传代扩增，使其能够在实验室中长期保存并进行反复实验。然而，传代培养的大鼠肝实质细胞可能会逐渐失去某些原始特性。 大鼠肝实质细胞在培养过程中需要特定的培养基和条件来维持其生长和功能。通常，这些细胞需要在含有适当比例的胎牛血清（FBS）、抗生素和生长因子的培养基中进行培养。同时，细胞培养的环境也需要保持恒定的温度、湿度和二氧化碳浓度。 大鼠肝实质细胞具有多种功能，包括合成和分泌蛋白质、代谢碳水化合物、脂肪和药物等。因此，它们常被用于研究肝脏的代谢途径、药物代谢和毒理学等方面。此外，这些细胞还可以用于评估药物对肝脏的潜在毒性以及开发新的治疗策略。 二、大鼠肝实质细胞培养操作 1)复苏大鼠肝实质细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)大鼠肝实质细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3)大鼠肝实质细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。 下面T25瓶为例； a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 三、应用 大鼠肝实质细胞可以用于葡萄糖对大鼠肝细胞白蛋白基因表达的影响： 首先观察大鼠Kupffer细胞与肝实质细胞体外共同培养时肝实质细胞生长、形态及功能状况,建立实验细胞模型。进一步观察不同浓度葡萄糖对大鼠肝实质细胞白蛋白基因表达的影响。 方法： (1)原位二步Ⅳ型胶原酶灌注法联合Percoll液密度梯度离心法分离肝细胞与Kupffer细胞;体外进行肝细胞单独培养、大鼠肝实质细胞与Kupffer细胞按6:1比例共同培养,观察不同情况下肝细胞生存时间和形态,每隔24h检测培养上清中白蛋白和ALT、AST的水平,并在36h放免法检测上清液TNF-α、IL-1、IL-6含量。 (2)用终浓度分别为3.9mmol/L,7.0mmol/L,11.1mmol/L,22.2mmol/L的葡萄糖处理联合培养体系,以3.9mmol/L组作为对照组,分别于4h、24h留取细胞上清液,全自动生化仪检测白蛋白浓度,放免法检测上清液TNF-α、IL-1、IL-6含量,提取大鼠肝实质细胞RNA及逆转录聚合酶链法(RT-PCR)检测白蛋白mRNA含量。 结果： (1)单独培养组大鼠肝实质细胞的生长、增殖迅速,并向正常肝细胞的形态演变,肝细胞可培养存活至15d;共同培养组肝细胞细胞生长增殖缓慢,细胞可培养存活至10d。混合培养组上清白蛋白水平在24、36、48、60h比单独培养组低(t=2.980,3.139,2.551,2.605;p (2)不同浓度葡萄糖处理大鼠肝实质细胞4h后,各组肝细胞上清中IL-1,IL-6,TNF水平与对照组相比差异无统计学意义,与此同时,各组肝细胞上清中白蛋白水平与肝细胞白蛋白mRNA表达与对照组相比下降不明显;而培养24h以后,各组肝细胞上清中IL-1,IL-6,TNF水平与对照组相比上升明显,并且,随着葡萄糖浓度的增加肝细胞上清中IL-1,IL-6,TNF浓度不断上升,并且呈现剂量依赖关系,各组肝细胞上清中白蛋白水平与肝细胞白蛋白mRNA表达与对照组相比下降明显,呈现剂量依赖关系,与肝细胞上清中IL-1,IL-6,TNF水平变化一致。 结论： (1)大鼠肝实质细胞和Kupffer细胞在适宜的培养条件下可进行共同培养,kupffer细胞分泌细胞因子的功能和肝细胞白蛋白合成分泌功能保持良好,可用于实验研究。 (2)高浓度葡萄糖糖能促进Kupffer细胞释放IL-1、IL-6和TNF-α,间接抑制大鼠肝细胞白蛋白mRNA的表达。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

              微生物检测方法和标准：出口食品中微生物学检验通则！ 1、主肠内容与适用范围 本标准规定了食品中微生物学检验的取样、检验和结果报告的一般要求。  本标准适用于出口食品中微生物学检验一般规则。 2、取样2.1 一般要求2.1.1 取样必须遵循无菌操作程序，防止一切可能的外来污染。每取完一份样品，应更换新的取样用具或将用过的取样用具迅速消毒后，再取另一份样品，以免交叉污染。2.1.2 从取样至开始检验的全过程中，应采取必要的措施防止食品中固有微生物的数量和生长能力发生变化。2.1.3 确定检验批，应注意产品的均质性和来源。如厂产 r 包括若干不同的质量档次或来源，应将质量档次或来源相同的那些产品划分在一起，组成若干分批，然 I 由这些分批按分层随机取样法取样。2.1.4 取样必须是随机取样，可利用随机取样表或其他适当方法进行。2.2 取样数量2.2.1 出口贸易合同对食品取样数量有明确规定的，按合同规定取样; 出口贸易合同没有规定具体取样数量的，可参照同一产品的品质检验取样数量取样，或按单位包装件数N的、I W N值取样。无论采取何种方法取样，每批货物的取样数量不得少于5 件。2.2.2 对于需要检验沙门氏菌的食品，取样数量应适当增加，最低不少于8件。2.2.3 如出口贸易合同规定在一批货物的若干个子样中，任何一个子样均不得发现致病菌或含菌量不得超过某一限量，而检验方法又有足够的灵敏度时，可将各子样合并为一个样品进行检验，并根据并样后的检验结果判定整批产品合格与否。2.2.4 实验室检验样品一般为25 g，如合同有特殊规定，按合同规定办理。2.3 取样方法2.3.1 直接食用的小包装食品；尽可能取原包装，直到检验前不要开封，以防污染。2.3.2 统装或大容器包装的液体食品2.3.2.1 取样前摇动或用灭菌棒搅拌液体，尽量使其达到均质。2.3.2.2 取样时应先将取样用具浸人液体内略加漂洗，然后再取所需量的样品。装入灭菌盛样容器的量，不应超过其容量的四分之三，以便于检验前将样品摇匀。2.3.2.3 取完样品后，应用消毒的温度计播入液体内测量食品的温度， 并作记录。 尽可能不用水银温度计测量，以防温度计破碎后水银污染食品。2.3.2.4 如为非冷藏易腐食品，应迅速将所取样品冷却至 。 -4 0 C  o2.3.3 统装或大容器包装的固体和半固体食品2.3.3.1 侮份样品应用灭菌取样器由几个不同部位采取，一起放入一个灭菌容器内。2.3.3.2 注意不要使样品过度潮湿，以防食品中固有的细菌增殖。2.3.4 统装或大容器包装的冷冻食品2.3.4.1 对大块冷冻食品，应从几个不同部位用灭菌工具取样，使之有充分的代表性。2.3.4.2 在将样品送达实验室前，要始终保持样品处于冷冻状态。样品一旦融化，不可使其再冻，保持冷却即可。2.3.5 生产过程中的取样2.3.5.1 划分检验批次，应注意同批产品质量的均一性。2.3.5.2 如用固定在贮液桶或流水作业线上的取样笼头取样时，应事先将笼头消毒。2.1.5.3 当用自动取样器取不需要冷却的粉状或固定食品时，必须履行相应的管理办法，保证产品的代表性不被人为地破坏。2.4 样品的标记2.4.1 所有盛样容器必须有和样品一致的标记。在标记上应记明产品标志与号码和样品顺序号以及其他需要说明的情况。标记应牢固‘具防水性，字迹不会被擦掉或脱色。2.4.2 当样品需要托运或由非专职取样人员运送时，必须封识样品容器。2.5 取样报告当取样结束后，应由取样人写出完整的取样报告。取样报告应包括以下内容:a.产品名称;b.加工者和买卖双方名称:c.发货地点和到达地点;d.发货日期和到达日期;e.发运工具;f.每批货物的标志和号码;g.每批货物所包含的产品数量、大小和单位;h.取样目的;1.取样方法:S.样品的大小和数量;k.取样时产品的温度;1.取样时的气象状况;m.取样 日期、地点和时间;n.检验样品的实验室名称和地址;0.要求检验的项目;P.取样人签名。样品的保存和运送取样结束后应尽快将样品送往实验室检验。如不能及时运送，冷冻样品应存放在一1 5 ℃以下冰n 匕砂 ﹄ U箱或冷藏库内；冷却和易腐食品存放在。-4 ℃冰箱或冷却库内；其他食品可放在常温冷暗处。2.6.2 运送冷冻和易腐食品应在包装容器内加适量的冷却剂或冷冻剂。保证途中样品不升温或不融化。必要时可于途中补加冷却剂或冷冻剂。2.6.3 如不能由专人携带送样时，也可托运。托运前必须将样品包装好，应能防破损，防冻结或防易腐和冷冻样品升温或融化。在包装上应注明“ 防碎”、“ 易腐”、“ 冷藏”等字样。2.6.4 作好样品运送记录，写明运送条件、日期、到达地点及其他需要说明的情况，并由运送人签字样品的验收、存放和检验样品的制备。 3、样品的验收和存放3.1 当样品送达实验室后，应立即对照取样报告单核查样品。核查内容包括:a.样品件数;b.包装是否完整;c.样品容器上的标记是否清晰可认;d.测量样品温度并核对是否和取样时的食品温度一致;e.干燥样品有无受潮和细菌增殖征象;f.冷冻样品是否融化;8.易腐样品有无腐败征象。3.1.2 记录样品核查结果并由核查人签字。3.1.3 样品如不能及时检验，应及时存放在妥善的地方。a.冷冻样品应放入一1 5 ℃以下的冰箱内;b.易腐和冷却样品应放入 。 -4℃冰箱内;c.干燥食品可放在常温冷暗处。3.1.4 待检样品存放时间一般不应超过 3 6  h o3.2 检验样品的制备3.2.1 样品的全部制备过程均应遵循无菌操作程序。3.2.2 检验冷冻样品前应先使其融化。可在^ - 4 " C 融化，时间不超过 18 h ，也可在温度不超过45‘C 的环境中融化，时间不超过 15 mine。3.2.3 检验液体或半固体样品前应先将其充分摇匀 如容器已装满，可迅速翻转容器 25次; 如未装满，可于7s 内以 30  c m的幅度摇动 25 次。从混样到取样检验相隔时间不应超过3min。3.2.4 检验千燥样品前应先用灭菌勺或刮板将样品搅拌均匀。3.2.5 开启样品容器前，先将容器表面擦干净，然后用 7 0 %乙醇消毒开启部位及其周围。3.2.6 非粘性液体样品( 粘度不大于牛乳)，可直接用吸管吸取一定量，加于适量的稀释液或培养基内。吸管插人样品内的深度不应超过 2.5cm， 也不得将吸有样品的吸管浸入稀释液或培养基内。3.2 了粘性液体样品可用灭菌容器称取一定量，然后加入适量的稀释液或培养基。3.2.8 固体和半固体祥品可用灭菌的均质杯称取一定量，再加适量的稀释液或培养基进行均质。从样品的均质到稀释和接种，相隔时间不应超过15 min , 4、检验4.1飞凡出口食品的微生物学检验。必须按出口食品微生物学检验方法标准执行。4.2 在检验中和食品及其稀释液、试剂、培养基接触的一切器皿必须经过有效的灭菌。所有检验操作，必须严格遵循无菌操作程序。4.3 制备试剂和培养基所用的水，应为无离子水或用玻璃器皿蒸馏的蒸馏水。水的质量应符合以下规格:a.单一金属含量在 。.05 mg 八 0 0 0 mL以下;b.总金属含量不高于1. 0  m g / 1 0 0 0  mL ;c.p H值在 5.5 至5.7 之间;d.残留氯含量不高于。.1 m g / 1 0 0 0  mL4.4 实验室所用仪器、设备的性能，应定期检查和校正。4.5 新购的试剂和脱水合成培养基，在使用前应用已知菌进行试验，证明无毒、被检菌能正常在其中生长时，方可使用。4.6 每次检验都应用已知阳性菌和阴性菌作对照。4.7 了检验结束后，所有带菌的培养基、试剂、稀释液和器皿必须尽快灭菌和洗刷。清洗过的器皿，不应残留洗涤剂痕迹。 5、检验记录和结果的报告5.1 经检验的每份样品都应有完整的检验记录。记录的内容应包括:a.样品名称;b.样品来源( 货主和产地) ;c.样品编号;d.收样和开始检验日期;e.检验项目和生长及各项反应情况;f.评语和判定;B.检验结束日期;h.检验者和复核人签字。5.2 检验结束后，应尽快根据实际检验结果填写检验结果报告单，经有关负责人审核签字后，及时发长时，方可使用。4.6 每次检验都应用已知阳性菌和阴性菌作对照。4.7了检验结束后，所有带菌的培养基、试剂、稀释液和器皿必须尽快灭菌和洗刷。清洗过的器皿，不应残留洗涤剂痕迹。5、检验记录和结果的报告5.1 经检验的每份样品都应有完整的检验记录。记录的内容应包括:a.样品名称;b.样品来源( 货主和产地) ;c.样品编号;d.收样和开始检验日期;e.检验项目和生长及各项反应情况;f.评语和判定;B.检验结束日期;h.检验者和复核人签字。5.2 检验结束后，应尽快根据实际检验结果填写检验结果报告单，经有关负责人审核签字后，及时发证。        北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

                两种生命融为一体，海藻与细菌内共生出新细胞器！ 百欧博伟生物：进化是一个相当奇妙而漫长的过程，一些随机活动的爆发，造就了当今地球上生命的多样性。它们可能会大规模发生，比如高效的肢体进化；也可能发生在微观细胞层面，比如细胞不同部分的首次形成。 现在，一组科学家发现了一个重大生命事件的迹象，该事件可能至少十亿年来都没有发生过了。他们在实验室环境中观察到初级内共生现象，即两种生命形式融合成一个有机体。 这种极为罕见的事件发生在一种海洋藻类和一种细菌之间。最近发表在《细胞》和《科学》杂志上的两篇论文描述了这些研究结果。 每次“内共生”都是进化的重大突破 当一种微生物吞噬另一种微生物时，就会发生初级内共生。宿主为这个内共生体提供多种好处，包括营养、能量和保护。最终，被吞噬的微生物会成为宿主的一个被称为细胞器的器官。 “发生这种情况非常罕见。”《细胞》论文的合著者、美国加州大学圣克鲁斯分校博士后学者泰勒·科尔说，“它第一次发生时，就产生了所有复杂的生命。” 一种生命形式成为另一种生物体功能基础的内共生，仅发生过3次。这3次实例都是进化过程中的重大突破。 第一个事件发生在大约22亿年前。那时，一种称为古细菌的单细胞生物吞噬了一种细菌，最终形成了线粒体。现在，每个生物学学生都知道这种特殊的细胞器是“细胞的动力源”，它的出现使复杂的生物体得以进化。 第二个事件发生于更高级的细胞吸收蓝细菌时。蓝细菌可从阳光中获取能量，它们最终成为叶绿体的细胞器。叶绿体提供了生物学的另一个核心知识——绿色植物可利用阳光制造食物。 第三次，也是最新发现的内共生事件显示，藻类有可能将大气中的氮转化为氨，用于其他细胞过程。 一个新的细胞器出现了吗？ 在《细胞》杂志发表的论文中，一组科学家观察了一种名为B.bigelowii的藻类。吞噬了蓝细菌的藻类有了一种超能力：它可直接从空气中“固定”氮气，并与其他元素结合形成更有用的化合物。这是植物通常无法做到的。 氮是维持生命存在的重要营养物质。深入分析后，研究小组认为B.bigelowii藻类与一种名为UCYN-A的细菌具有特殊的共生关系。 他们发现，在与B.bigelowii藻类相关的不同物种中，藻类和UCYN-A细菌之间的大小比例非常相似。它们的生长似乎是通过关键营养物质的交换来控制的。这种生长速度的同步性，使得研究人员将UCYN-A称为类细胞器。 这正是细胞器出现的标志。加州大学圣克鲁斯分校微生物海洋学家乔纳森·泽尔说，“它和线粒体、叶绿体是同一回事，它们随着细胞的大小而变化。” “硝基体”诞生 这里还存在一个问题：这究竟是一个内共生体，还是一个真正的细胞器？在《科学》杂志发表的另一篇论文中，研究人员通过X射线成像表明，藻类宿主和内共生体的复制和分裂过程是同步的，这提供了一个更强有力的证据。 他们还将分离的UCYN-A细菌的蛋白质与藻类细胞内的蛋白质进行了比较。研究小组发现，分离出的细菌只能产生其所需蛋白质的大约一半。它需要藻类宿主为其提供生存所需的其余蛋白质。 泽尔指出，这是从内共生体转变为细胞器的标志之一。它们丢弃DNA片段，基因组变得越来越小，并开始依赖母细胞将这些基因产物或蛋白质本身运输到细胞中。 这表明，UCYN-A是一个完整的细胞器。他们将其命名为“硝基体”。它可能在大约1亿年前就开始进化。这一时间听起来很长，但与另两个事件相比，这个进化“很新”。 以此次研究为基础，科学家还可能会发现其他具有相似进化故事的生物体。但今天的这一发现“值得载入教科书”。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                 自养假诺卡氏菌的特征特性与资源描述及培养方法！ 自养假诺卡氏菌用于实验和科研检测用，属于菌株类。该菌能够利用二氧化碳或碳酸氢钠为唯一碳源。也可异养生长。 一、菌种简介平台编号：Bio-02368 提供形式：冻干物拉丁属名：Pseudonocardia Autotrophica 中文译名：自养假诺卡氏菌拉丁学名：Pseudonocardia autotrophica原始编号：ATCC 19727菌株来源：←中国科学院微生物研究所←美国IMRU保藏人：刘志恒直接来源国家：美国保藏时间：11/1/1991其他保藏编号：=ATCC 19727 =BCRC 12444 =CBS 466.68 =CIP 107114 =DSM 40011 =ISP 5011 =JCM 4348 =KCTC 1816 =NBRC 127生物危害：四类模式菌株：模式菌株菌株用途：模式菌株培养温度：28℃培养基：0240    用途：模式菌株 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准） 二、资源描述该菌孢子丝直或柔曲。分生孢子为柱形或卵圆形，表面光滑。明胶不液化。淀粉不水解。硝酸盐不还原。纤维素上不生长。不产生类黑色素和酪氨酸酶，不产生硫化氢。该菌能够利用二氧化碳或碳酸氢钠为唯一碳源。也可异养生长。 三、特征特性菌落致密，圆形，黑毛发状。分生孢子梗2～3根簇生，直或弯曲，上部1～2次分枝，暗棕色，向顶逐步变淡，基部膨大，厚壁，多个隔膜。产孢细胞圆柱形,瓶体产孢,瓶口平截，合生和顶生,棕色。分生孢子单生，顶侧生，棕色，倒棍棒形，基部平截，厚壁，5～6个横隔膜。 四、培养方法1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。 五、使用范围（1）合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。 （2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，培养效果好，所以常被采用。 （3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。  六、保存方法1、传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。2、悬液保存法：①蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。②糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。3、载体保存法：土壤保存法；砂土保存法；硅胶保存法；磁珠保存法；麸皮保存法；纸片(滤纸)保存法。4、常用的冷冻保存法：①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。②干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。③液氮保存法(-196℃)：是适用范围最广的微生物保存法。 七、注意事项1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解，接种在 2 支斜面上，因冻干粉处于休眠状态，请勿接种多支斜面或平板，以避免因接种量不足而导致复苏不成功；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                   小鼠Muller细胞的复苏与传代及冻存操作说明！ 菌种简介平台编号：Bio-129532 规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶 细胞信息：QMMuC-1 细胞名称：小鼠muller细胞QMMuC-1产品规格：T25培养瓶x1；1.5ml冻存管x2细胞数量：1x10^6；1x10^6保存温度：37℃；-198℃运输方式：常温保温运输；干冰运输安全等级：1用途限制：仅供科研3类培养体系：DMEM高糖+10%FBS+1%三抗培养温度：37℃二氧化碳浓度：5%简介：小鼠muller细胞QMMuC-1取自7日龄C57BL/6J小鼠，贴壁培养。注释：Characteristics:Morphology and phenotype are similar to those of primary Muller glial cultures(PubMed=29625493).用途：细胞系 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准） 细胞复苏操作说明（针对冻存细胞）实验仪器：超净工作台 ，CO2 培养箱 ，倒置显微镜 ，水浴锅 ，离心机实验试剂：DMEM 培养基 ，胎牛血清 ，三抗实验材料：T25 细胞培养瓶 ，需复苏的细胞 ，移液枪 ，枪头 ，离心管实验步骤：1、从液氮罐中取出冻存管 ，直接浸入 37℃温水中 ，并不时摇动令其尽快融化。2、从 37℃水浴中取出冻存管 ，打开盖子，移液枪吸出细胞悬液 ，加到离心管并滴加 5 倍以上完全培养基并混匀。3、操作离心，调至 1000 转/分 ，时长 10 分钟4、弃去上清液，重悬离心管底部细胞沉淀，在 T25 培养瓶中加入 5-6ml 完全培养基，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，37℃培养箱静置培养。5、次日更换一次培养液，继续培养。6、注意：冻存细胞建议三管一起复苏到一个 T25 培养瓶中。 细胞传代操作说明（贴壁细胞）实验仪器：超净工作台 ，CO2 培养箱，倒置显微镜，离心机实验试剂：DMEM 培养基，胎牛血清，0.25%胰酶 ，三抗实验材料：T25 细胞培养瓶，需传代的细胞，移液枪，枪头 ，离心管实验步骤：1、细胞于培养箱中，愈合度达到 80% ，可进行传代。2、按 T25 培养瓶计，吸出完全培养基，并 PBS 缓冲液轻冲 3 遍，添加 0.25%含 EDTA 胰酶 2ml ，消 化 2min（具体时间视细胞而定），后用完全培养基将细胞冲洗下来。1000r/min 离心 10 min ，弃上清收集细胞，铺至 2 个 T25 培养瓶中培养，各添加 7ml 完全培养基。3、注意：消化时间不易过长，消化前血清成分务必去除干净，终止消化请用新鲜完全培养基，原瓶培养基不可继续使用（终止消化或传代）。  细胞传代操作说明（悬浮细胞）实验仪器：超净工作台 ，CO2 培养箱 ，倒置显微镜 ，离心机实验试剂：DMEM 培养基 ，胎牛血清 ，三抗实验材料：T25 细胞培养瓶 ，需传代的细胞 ，移液枪 ，枪头 ，离心管实验步骤：1、细胞于培养箱中，密度达到悬浮细胞传代标准（沉降后可铺满底面），可进行传代。2、按 T25 培养瓶计，吹打均匀，吸出完全培养基，1000r/min 离心 10 min，弃上清收集细胞，铺至 2 个T25 培养瓶中培养，各添加 7ml 完全培养基。3、注意：原瓶培养基不可继续使用（传代）。 细胞冻存操作说明实验仪器：超净工作台，CO2 培养箱，倒置显微镜，离心机实验试剂：DMEM 培养基，胎牛血清，0.25%胰酶 ，三抗 ，DMSO实验材料：T25 细胞培养瓶，需冻存的细胞，移液枪，枪头 ，离心管，冻存管，记号笔实验步骤：1、取待冻存的细胞（按 T25 计 ）用 0.25EDTA 胰酶 2ml 消化 2min ，用完全培养基将细胞冲洗下来。1000r/min 离心 10min ，弃上清收集细胞。如果是悬浮生长的细胞，则可直接离心收集细胞。2、加入 1ml 冻存液(90%FBS+10%DMSO )制成细胞悬液。3、细胞悬液装入 3 支冻存管中。4、冻存管在 4℃下存放 30 min ，转放-20℃ 1.5～2 h ，再转人-70℃ 4-12 h 后即可转移到液氮内(- 196℃) ，并登记。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                  原始菌种和菌液的制备与保存的标准操作规程！ 百欧博伟生物：菌种保藏使微生物的代谢活动处于最/低的状态，但又不至于死亡，从而达到保藏的目的。规范菌种原始菌液的制备及长期保存。 1、定义 原始菌液--由冻干菌或冷冻菌直接传代的孢子或生长菌的原始悬浮液。 工作菌液--由原始菌液直接稀释，或根据一般试验需要而等量稀释的特定浓度的孢子或细菌的悬浮液。 2、总则 微生物室收到实验菌种后应进行活化及纯化，并进行传代（芽孢杆菌除外）。每一新菌种在适宜的琼脂平板上划线分离，检查是否纯种，观察菌落形态并用革兰氏染色或芽孢染色法进行镜检，如果是芽孢悬浮液，用常规方法测定其存活孢数。 经检查如果满意，贴上合适的标签，并将贮备菌存放在实验室专用的冰箱里（2 ～8℃）或冷冻室内，以避免与实验室正在使用的其它菌种相混淆，作好菌种传代的记录以便能追踪传代史。 生孢梭菌的孢子悬浮菌应每年制备一次。 原始菌种的传代次数最多传至第五代。 一、培养基 冻干菌制备原始菌液 由甘油冷冻菌制备原始菌液 1、把冻干菌加入100ml液体培养基后所得的菌作为第一代。 2、从冷冻箱内取出冷冻菌，使其在室温下慢慢融化； 3、把冷冻菌无菌转移至100ml该菌所适用的液体培养基中； 4、根据菌种的类型，将接种后的培养基在适当温度下培养24h或更长一些时间； 5、把甘油冷冻菌加入100ml液体培养基后所得的菌作为第二代。 二、由集菌平板制备原始菌液 1、在超净工作台内，把经过24h（或更长时间）培养的菌液摇匀，各取1ml，无菌转移至5只培养基平板上，轻轻转动平板，使菌液均匀分布于平板表面。不同培养基适用于不同菌种。 2、另用一只平板，划线分离菌液，培养之，以检查菌液是否纯种。 在适当的温度下培养以上平板，不同菌种所需培养周期不一。 1、生长菌-24h以内即可显见增长； 2、孢子-需要3～7天或更长时间才能得到50%孢子，这样可确保提到浓的悬浮液。对需长时间培养或培养温度较高（55℃）的平板进行适当密封，以免培养基失水干裂。 3、分生孢子，一般需要5～14天才能获得明显的分生孢子生长物，将平板封口，以免分生孢子污染空气。 4、在超净工作台内，各取约0ml氯化钠磷酸缓冲液（PBS）加至经培养后的集菌平板内。 5、用弯曲的接种棒（或无菌玻璃弯头）轻轻地刮平板表面，使菌落与平板分离。但注意不要划破培养基。倾斜平板，使菌悬液集中于平板一端，用无菌注射器或无菌吸管吸取菌悬液，把5只平板中的菌悬液收集于一只大小合适，便于封口的试管中。 三、标记 在原始菌液的标签上记述下列内容： 1、菌种名称 2、原始菌种制备编号（代数+制备日期） 3、有效期（孢子悬浮液的有效期为一年） 4、操作者姓名（菌液浓度一经标定后，即应补记在标签上） 四、原始菌液的浓度标定 1、标定孢子初始制备液的浓度并进行记录，以后，每次使用该原始菌液时，不论直接使用或用其配制工作菌液，都应事先重新标定其浓度。前一次标定浓度仅供参考； 2、除非有定量要求，一般生长态菌的原始菌液无需标定，生长菌很易死亡，因此不能保持稳定可靠的浓度。 五、菌种的斜面保存 1、经常使用的菌种。将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移至2℃～8℃的冰箱中保藏。 2、保藏时间依微生物的种类而有不同，霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2-4个月，移种一次。酵母菌两个月，细菌最好每月移种一次。 六、菌液甘油冷冻管保存 1、将液体培养基培养或固体培养基培养制备的剩余原始菌液中加入足量的无菌甘油得到10%甘油液。轻轻振摇，使其充分混合； 2、各取0ml上述混合液，无菌分装于10支冷冻用小试管或冷冻管中，在管子上注明菌种名称、菌种号等以及从冷冻日起2年的有效期。做好记录，并妥善保存。 3、制备好的菌液甘油冷冻管在-80℃超低温或液氮罐内贮存。 七、液体石蜡管的保藏 1、将液体石蜡分装于三角烧瓶内，塞上棉塞，并用牛皮纸包扎，121℃灭菌30min，然后放在40℃温箱中，使水汽蒸发掉，备用。 2、将菌种接种在新鲜琼脂斜面中，并在相应的适宜条件下培养（培养时间一般为24h）； 3、在超净工作台下无菌操作，用无菌吸管吸取无菌液体石蜡至培养好的菌种管内，并使石蜡高出菌种表面约1cm，再将菌种管于2℃～8℃保藏。 4、将试管直立，置低温或室温下保存。 5、液体石蜡保藏菌种有效期为一年。 八、注意事项 1、每天应检查菌种保藏室或冰箱的温湿度状况，并用专用记录本记录 2、经常检查菌种管的塞子是否松动，如有异常应及时处理 3、经多次传代的菌种，应定期检查其纯度及其变异性（与原始记录相比较），若有异常，应更换新菌种 4、带有实验菌的废弃物和超过有效期的菌种，121℃高压灭菌后按有关规定销毁，并认真填写"检定菌液使用、销毁记录表。 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有Biolog微生物鉴定系统，超低温冰箱，生物安全柜等仪器设备可进行对微生物分离、鉴定等常规的分子实验研究。对我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展的需求进行积极的面对社会乃至国外收集保藏提供微生物菌种资源。在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供微生物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。 除此之外，我们还拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

                   微生物实验生物环境中各种生物之间的相互影响！ 百欧博伟生物：同一生态环境和中的各种生物之间相互影响。互为环境，相互联系，相互依赖，相互制约，相互影响。 一般表现为：互生、共生、竞争、拮抗、寄生、猎食六种关系。 一、互生关系： 是指二种可以单独生活的生物，当它们共同生活在一起时，相互有利或者一种生物生命活动的结果为另一种生物创造了有利的生活条件。 如：①分解纤维素的细菌和固氮菌之间。 分解纤维素细菌分解纤维素产生有机酸，固氮菌不能利用纤维素，而利用有机酸为硫源，进行固氮，固定的氮被纤维细菌利用。 ②土壤表层的好氧微生物和厌氧生物之间。 好氧微生物利用氧气为厌氧微生物创造条件。 ③根际微生物与高等植物之间。 根际：跟系周围的土壤里根际中生活的微生物叫根际微生物。根的脱落物及分泌物为根际微生物提供有机质。根际微生物加速有机质愤激外，或固氮为微生物提供无机盐。 ①人、恒温动物肠道内微生物提供与人和动物之间 人、动物为微生物提供适宜温度及营养物质。微生物活动。为人、及动物提供了氨基酸、维生素等营养。 ②植物体表面也存在着许多正常的微生物区系 如：种子表面草生假单胞菌可以抑制，霉菌（青霉、曲霉）及酵母菌的生长。 二、共生关系： 两种生物共同居住在一起，彼此有利，创造相互有利的营养和生活条件，较单独生活时更有利，更有生命力。 如： ①地衣：典型例子。是单细胞澡类或是细菌与真菌的共生体，藻类或兰细菌从真菌中获得水份、无机盐等养料，真菌从藻类或兰细菌中获得有机养料，二者相互依存，形成特定的共生体。 ②根瘤菌与豆科植物：根瘤菌从植物中获得有机物进行固氮，植物利用根瘤菌固定的氮素进行生长。 ③细菌与原生动物：细菌栖息于原生动物细胞内，获得营养及保护，原生动物利用细菌的合成物质。 ④微生物与反刍动物：微生物在反刍动物胃内，获得营养，及温度等环境条件，动物利用微生物分解纤维素产生的葡萄糖或纤维二糖，或有机酸等。 ⑤微生物与昆虫： A：外共生：微生物生活在动物细胞外面，动物肠道内及生活环境中，如：白蚁与肠道内微生物，白蚁不消化纤维素，靠微生物分解。 B：内共生：微生物在动物细胞内生活。许多昆虫细胞内含有微生物，对昆虫生活是必要的，它可以合成维生素等。 三、竞争关系： 二种微生物生活在一起，为争夺食物、空间等而发生的斗争。（使生长受抑制，适应强的微生物占优势，而排斥另一种微生物。） 如：将二种微生物在液体培养中做分别培养和混合培养，然后计数。结果：分别培养二种微生物个体数多，混合培养个体数少，说明二者混合培养为争夺食物空间而发生斗争。 四、拮抗关系： 一种微生物在生命活动中产生某种代谢产物或改变环境条件（温度、ＰＨ）而抑制或杀死一种微生物的现象。 （一）非特异性拮抗：无专一性 如： ①酵母菌产生的乙酸（无氧条件下）可以抑制其他微生物。 ②乳酸菌、醋酸菌：发酵产生乳酸和醋酸，使ＰＨ下降，而抑制多种不耐酸的微生物生长。（腌酸菜） （二）特异性拮抗：有专一性。 微生物生命活动中产生的代谢产物，只对某一种或某一类微生物有杀死或抑制作用。可选择性杀死或抑制其他种微生物生长。 如：微生物代谢产物——抗生素。 ①青霉素：可抑制Ｇ＋、部分Ｇ－菌生长。 ②制霉素：抑制酵母菌和霉菌生长。 ③链霉素等抑制原核微生物生长。 五、寄生关系： 是一种生物生活在另一种生物体的体表或体内，从中摄取营 养物质而进行生长，繁殖，并在一定条件下杀死或伤害另一种生物。前者为寄生物，后者为宿主或寄主。 种类：专性寄生物：寄生物对寄主一般有害，寄生物离开寄主不能生活——专性寄生物。 兼性寄生物：寄生物离开寄主可以营腐生活不死亡。 如： ①噬菌体与细菌和放线菌。 ②真菌和真菌间，细菌和细菌间。 食菌蛭弧菌能寄生在鼠伤害沙氏门菌，大肠杆菌。假单胞菌内。 盘菌菌丝寄生于毛霉菌丝中，木霉寄生于马铃薯丝核菌内。 ③微生物与高等植物之间，引起植物传染性病害，导致减产。植物病毒：３５０种，其次真菌、细菌病害。 ④微生物与人体或动物体的寄生关系：主要是人和动物的病原微生物。有许多细菌、真菌、病毒及病原菌都可寄生在人及动物体内、体表。 六、猎食关系： 一种生物捕食另一种生物的现象。原生动物捕食细菌、真菌、藻类等。如：细菌，放线菌，单细胞藻类，真菌孢子是原生动物的食物，为猎食关系。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                ATCC 27419 亲和素链霉菌的培养方法与打管说明！ 亲和素链霉菌是Herbiconiux属的微生物，原产地为中国。主要用途为分类；研究；教学。 一、菌种简介平台编号：Bio-67957 规格：冻干物拉丁属名：Streptomyces Avidinii 菌株名称：亲和素链霉菌其他编号：AS 4.1583 =ATCC 27419 =BCRC 13384 =CBS 730.72 =DSM 40526=KCTC 9757 =NBRC 13429培养基编号：70培养温度：28用途：模式菌株；产生抗生素 MSD-235分离源：土壤培养基信息培养基编号：70备注：酵母提取物 2.0克 可溶性淀粉 10.0克 琼脂 15.0克 蒸馏水 1000ml pH7.3 用途：模式菌株；产生抗生素 MSD-235 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准） 二、形态特征G+。高氏一号琼脂培养基：气丝淡青莲色，基丝凤仙花红色，产生草株红色色素。液化明胶，不凝固并胨化牛奶，水解淀粉，产H2S，不产纤维素酶。利用葡萄糖、果糖、半乳糖、蔗糖、鼠李糖、肌醇、木糖、甘露醇，山梨醇上生长微弱。  三、培养方法1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。 四、保藏方法1、传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。2、液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。3、载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4、寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。5、冷冻保藏法可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。6、冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。 五、注意事项1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。2、菌种恢复培养前，建议将收到的菌种安瓿保存在 6-10°C 的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，延迟期较长，如在说明建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成，有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说菌种培养稳定后才能用于您的后续实验。3、初次使用时请严格按照本说明书推荐条件和操作步骤进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。4、恢复培养厌氧菌时，在操作过程中应严格控制厌氧条件：制作培养基时，应使用厌氧螺口试管，并利用高纯氮气去除试管和培养基中的氧气，使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。5、与菌种相关的其它信息请参阅微生物菌种查询网网站(www.biobw.org）。 六、冻干管打管说明书1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂（应避免过多水蒸气影响菌种的复苏），用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。2、用无菌吸管吸取 0.3ml（建议勿超过 0.5ml）适宜的液体培养基(不添加琼脂)，滴入管内，轻轻振荡，待安瓿管内的菌体溶解呈悬浮状，在用无菌吸管吸取全部菌悬液接在 1-2 支建议的培养基试管中（不超过 2 支，单位所提供的培养基配方中有琼脂，请务必做成试管斜面，配方中没有琼脂，试管中液体培养基不超过 5ml），并在建议的条件下静止培养。3、冻干管打开后需一次用完，不能留存。另外，安瓿管内大部分是用牛奶做保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功。4、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。5、打管操作应在烧杯或托盘上方进行，用完冻干管应灭菌处理后丢弃。6、菌种复苏时，请务必记录好菌种的编号和制备批号，否则不予售后。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                 HCMECS永生化人心脏微血管内皮细胞的培养方法！ 一、细胞简介平台编号：Bio-132159 规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶 细胞信息：HCMECS 产品简称：HCMECS中文名称：永生化人心脏微血管内皮细胞细胞数量：1*10^6组织来源：人，心脏，微血管形态特征：内皮细胞样生长方式：贴壁生长背景描述：原代的人心脏微血管内皮细胞转入SV40和hTERT基因得到的永生化细胞培养条件：ECM；空气95%，二氧化碳5%；37℃培养换液频率：2-3天传代比例：1:3-1:5冻存液配方：95%完全培养基，5%DMSO安全性：BSL-1供应限制：仅供科研运输方式：常温运输（T25培养瓶）用途：STR鉴定正确 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准） 二、培养步骤1、培养基及培养冻存条件准备：1）准备内皮细胞专用基础培养基；优质胎牛血清，5%；添加对应因子1%；双抗，1%。2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。2、细胞处理：1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜。第二天检查细胞密度。2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。 对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2、加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3、按6ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4、将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含6ml培养基瓶中。注：第一次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。 下面T25瓶为例；1、细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。2、1000rpm离心分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3、将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 三、使用方法人心脏微血管内皮细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈内皮细胞样，在澳睿赛技术部标准操作流程下，细胞可传2-3代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。1、取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。2、贴壁细胞消化1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          3、细胞收货脱落1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。4、细胞实验因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。 四、注意事项1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月。2、在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。3、传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。4、建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。5、该细胞只可用于科研。1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核2)本产品未通过用于活体诊断的审核  北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                 鲁考弗美奇酵母的菌株培养与实验内容及保存方法！ 鲁考弗美奇酵母是Metschnikowia属的微生物，原产地为中国。菌落大而厚，易挑起，为乳白色圆形菌落，表面光滑，边缘整齐，中央微有隆起。生殖方式为出芽生殖，细胞呈棒状。最适生长温度在20～30℃。主要用途为分类；研究；教学。 一、菌种简介平台编号：Bio-64056 规格：冻干物 拉丁属名：Metschnikowia Reukaufii 中文名称：鲁考弗美奇酵母拉丁名称：Metschnikowia reukaufii其它保藏中心编号：=AS 2.1754来源历史：←湖南轻工研究院(5.200) ←中科院微生物研究所收藏时间：2007/2/16原始编号：3047资源归类编码：15151113118模式菌株：非模式菌株主要用途：研究特征特性：不发酵葡萄糖、蔗糖、棉籽糖、山梨糖、麦芽糖、乳糖、纤维二糖、木糖、半乳糖、可溶性淀粉；同化乙醇；不同化木糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、棉籽糖、麦芽糖、乳糖、纤维二糖、山梨糖、可溶性淀粉。生物危害程度：四类培养基编号：CM0077培养基名称：5 °Bé麦芽汁琼脂培养基成分：5°Bé麦芽汁 1.0L，琼脂 15.0g，自然pH。培养温度：28-30℃需氧类型：好氧保存方法：真空冷冻干燥法共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享提供形式：冻干物用途：研究； 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准） 二、培养方法1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。 三、实验内容1、称量→溶化→调ph→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2、干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3、高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4、过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 四、保存方法1、传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。2、悬液保存法：①蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。②糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。3、载体保存法：土壤保存法；砂土保存法；硅胶保存法；磁珠保存法；麸皮保存法；纸片(滤纸)保存法。4、常用的冷冻保存法：①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。②干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。③液氮保存法(-196℃)：是适用范围最广的微生物保存法。 五、注意事项1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解，接种在 2 支斜面上，因冻干粉处于休眠状态，请勿接种多支斜面或平板，以避免因接种量不足而导致复苏不成功；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

              微生物来源活性多糖的作用机制和构效关系及研究进展！ 百欧博伟生物：活性多糖是新药研发中的一个热点，其中研究相对较多的是来源于微生物的多糖。近年来，关于微生物多糖的研究有了进一步的发展，本文对药用微生物多糖在生物活性、作用机制和构效关系等各方面的最新研究进展进行了综述。　多糖广泛分布于高等植物、地衣、海藻、动物和微生物中。微生物来源的多糖是至今研究得比较详细的一类多糖，其广泛的生物活性使得其已成为微生物药物一个重要的组成部分，且在新药研发中越来越受到重视。本文对迄今为止所发现的微生物多糖的药用生物活性进行了综述，并总结了近年来关于多糖构效关系和作用机理方面的研究成果。 一、免疫调节功能 免疫调节剂在疾病治疗中的作用越来越受到重视。多糖免疫调节剂于40余年前被首次发现，近二十年来，有更多微生物来源的多糖被确认对机体免疫反应的调节有着极为重要的意义。这些多糖的免疫调节作用涉及到免疫系统的各个方面，对于其免疫调节机制的研究也体现在各个层次上，对这些多糖分子决定它们与宿主免疫系统相互作用的结构特征也已经进行了更为深入的研究。以下对几种比较典型的免疫调节剂分别进行介绍。 1、两性离子多糖 两性离子多糖(zwitterionic polysaccharides,Zps)是有同时含有阳离子和阴离子结构以实现其生物功能的一类多糖。多糖A(PS A)是Zps的分类原型。PS A是从革兰阴性厌氧菌脆弱拟杆菌中分离得到的两种荚膜多糖中的一种。Zps在菌体表面组装成荚膜多糖复合物(CPC)。早期研究证明，CPC能调节腹腔内脓毒症伴随性脓肿的形成。CPC的腹膜内给药能诱导脓肿形成，而皮下和肌肉的预防性给药则能防止宿主在细菌感染后形成脓肿。一方面，在诱导脓肿形成过程中，Zps扮演了多重角色，它能诱导细菌在腹腔间皮表面的粘附，并能刺激某些促免疫细胞因子和化学增活素，进而诱导宿主细胞CAMs的表达，完成腹腔内多形核白细胞的募集。另一方面，Zps预防脓肿形成、保护机体免于免疫反应的作用，并非是作为一种经典的免疫原去介导特异性的免疫反应，而是对宿主的免疫系统进行调节，从而对导致脓肿形成的免疫反应实现全面抑制。其具体机制是Zps对CD4+T细胞活性和IL2生成的调节，而IL2似乎是Zps调节机体免疫以预防脓肿的中心环节。对于其构效关系的研究表明，Zps同时含有阴阳电荷基团的重复单元是其免疫调节作用的关键性结构，破坏多糖的电荷结构能使其活性显著降低。 2、β(13)葡聚糖从酵母和真菌中纯化得到的β(13)葡聚糖是另一类免疫调节剂。沿着β(13)葡聚糖主链随机分布着β(16)葡聚糖基支链。Williams等证明β(13)葡聚糖能显著增加动物体内嗜中性粒细胞水平并增加骨髓细胞的增殖。PGG是Williams研究组经高度纯化已获专利的一种β(13)葡聚糖。PGG给药后，嗜中性和嗜酸性粒细胞的比例增加，从给药小鼠体内得到的嗜中性粒细胞，在体外对大肠埃希菌的吞噬作用增加；巨噬细胞的形态发生改变，巨噬细胞同时表现出磷酸酶活性增加和脂多糖(LPS)刺激的NO生成的特征。研究表明，β(13)葡聚糖能调节淋巴细胞和单核细胞中促免疫细胞因子的产生。β(13)葡聚糖对NFκB样和NFIL6样转录因子的调节作用具有时间和浓度依赖性。其所涉及的信号转导通路与超抗原LPS不同。PGG用于预防治疗也获得了肯定的实验结果。能显著降低腹腔内脓毒症的致死率。Williams在脓毒症小鼠模型试验中研究了β(13)葡聚糖对转录激活、细胞因子表达的影响，发现与对照动物相比，NFκB和NFIL6的核结合活性降低，TNFα和IL6的mRNA水平也有所下降。转录因子活性和细胞因子表达的下调和败血症动物的存活率升高是正相关。β(13)葡聚糖的免疫调节生物活性基于它们与巨噬细胞和多形核中性粒细胞(PMNs)的直接作用。Muller等的工作表明，磷酸葡聚糖，一种水溶性的(13)βD葡聚糖，能够与人或鼠的单核/巨噬细胞结合。这种结合特异地导致了外来细菌的内在化和增加的胞浆空泡化。β(13)葡聚糖的免疫调节还涉及到补体途径。补体受体3(CR3)也已经被确认是某些葡聚糖的受体。CR3介导的吞噬作用和脱颗粒作用需要CR3结构域上一个iC3b结合位点和一个葡聚糖结合位点同时与配基的结合。用抗PGG葡聚糖受体的单克隆抗体对中性白细胞处理，可以抑制NFκB样因子的激活。将酵母菌株煮沸和酶处理得到可溶和不可溶的葡聚糖粗品。不可溶的葡聚糖可通过磷酸化、硫酸化和氨基化等方式进行衍生化修饰以提高其溶解性。可溶性葡聚糖在水溶液中主要以线形的三螺旋结构存在。研究表明，糖链的螺旋结构构象是其生物活性存在的必要条件，而糖链中的亲水性基团(多羟基)应位于螺旋体的表面。微粒酵母葡聚糖的免疫调节活性还受其分子量和β(16)糖苷键数目的影响。同样的情况也发生在其他的一些β(13)D葡聚糖上，如真菌多糖pestalotan等。另外，支链长度也会影响多糖的活性。从真菌Phytophthoraparasitica中分离得到的活性β(13)D葡聚糖，其具有葡聚三糖支链的组份，活性大大高于具有葡聚二糖支链的组分。 3、甘露聚糖从白念珠菌中分离得到了有一定免疫调节活性的甘露聚糖。巨噬细胞递呈的甘露糖结合凝集素(MBL)能与甘露聚糖结合，并通过一种非自身识别机制激活宿主免疫系统。甘露聚糖包裹感染性抗原并介导了内吞和吞噬作用，甘露聚糖受体识别多糖里的一个重复单位，这种识别导致了细胞信号转导、细胞因子产生和补体的激活。研究表明，白念珠菌甘露聚糖在皮下注射给药后对宿主的免疫抑制作用与用药后迟发型超敏反应被抑制有关。IL4是介导甘露聚糖特异性诱导免疫下调的关键性细胞因子。另外也有研究表明，IL12p40、IL10和IFNγ对CD+T细胞(下调效应细胞)的产生也有一定作用。 4、蛋白结合多糖从真菌蘑菇中分离得到了蛋白结合多糖PSK和PSP。这些化合物在结构上比较相近，分子量约为100kDa。其单糖间以α(14)和β(13)糖苷键连接，蛋白部分则以天门冬氨酸和谷氨酸为主，蛋白含量约为15%。这类多糖能够抑制体外肿瘤细胞系的生长并具有体内的抗肿瘤活性。对食道癌、胃癌、肺癌、卵巢癌和子宫颈癌等有肯定的防治效果。这类多糖的免疫调节作用机制尚不清楚。有研究表明，小鼠在PSK给药处理后，PSK能结合并抑制免疫抑制细胞因子TGFβ。PSK还能够激活嗜中性粒细胞，这些可能是PSK抗癌活性的部分原因。PSK和PSP是生物反应调节剂，能刺激T细胞的激活和诱导IFNγ和IL2的生成。也有研究发现PSK和PSP能增强小鼠体内的超氧化物歧化酶(SOD)的活性。 5、透明质酸透明质酸(HA)可以由链球菌产生，同时也是组成哺乳动物组织胞外基质的一种主要的糖类成分，在皮肤、关节、眼和大多数其它的器官和组织中都有存在。透明质酸是一个二糖的重复。该二糖是一种最简单的阴离子氨基葡聚糖。透明质酸是通过与真核细胞CD44受体的结合来完成对免疫系统的调节作用。这种配体受体间的相互作用对于T细胞胞间通信和白细胞外渗的调节是至关重要的。低分子量HA则可被用于阻断T淋巴细胞CD44和真核细胞来源HA之间的相互作用。这在临床上可被用于防止同种异体移植的排斥反应以保护机体器官的功能。另外，HA能促使创伤愈合，并能在眼睛和关节外科中被用作人体HA的替代品。 二、抗肿瘤活性微生物 多糖的抗肿瘤活性多与其免疫调节功能密切相关。多糖能激活免疫细胞，并诱导多种免疫细胞因子和细胞因子受体基因的表达，增强机体的抗肿瘤免疫力。从担子菌门真菌中得到的香菇多糖、裂褶多糖、云芝多糖、茯苓多糖等抗肿瘤多糖，在国内外临床上已普遍应用，都具有上述免疫调节剂的特征结构。从香菇子实体和深层发酵菌丝体中得到的两种具抗肿瘤活性的多糖分别为β(13)葡聚糖和含少量肽的α甘露糖。云芝多糖PSK则具有蛋白结合多糖结构。裂褶多糖和茯苓多糖也是β(13)葡聚糖，但当茯苓多糖含有β(16)葡聚糖侧链时没有活性，而用高碘酸盐氧化反应将侧链除去后，却表现出显著的抗肿瘤活性。免疫调节多糖的抗肿瘤作用需要宿主免疫系统的参与，但有些微生物多糖在体外也表现出对肿瘤细胞生长的抑制作用。除了免疫调节外，近年来对多糖抗肿瘤活性的其它作用机制也有所研究。主要有以下几个方面：(1)影响细胞的生化代谢：茯苓多糖对肉瘤S180细胞的增殖有抑制作用，可导致S180细胞膜唾液酸(SA)含量增加，而膜磷脂、花生四烯酸和豆蔻酸的含量下降，细胞膜的PI转换被显著抑制，影响了肿瘤细胞转移和相关抗原的表达。香菇、猪苓、茯苓多糖能抑制人早幼粒细胞白血病HL60细胞酪氨酸蛋白激酶(TPK)的活性，激活磷酸酪氨酸蛋白磷酸酶(PTPP)，可降低细胞酪氨酸蛋白的磷酸化程度；(2)影响细胞周期：某些多糖可能作用于肿瘤细胞的细胞周期。Kamei等将云芝多糖与结肠癌细胞AGS一起培养4d后，肿瘤细胞的数量比对照组明显减少，流式细胞术检测表明，肿瘤细胞的生长被阻滞于S期和G2/M期。(3)抗氧化作用：机体内过量的超氧化自由基和脂质过氧化物(LPO)对DNA的持续损伤，会导致细胞的癌变。动物和临床试验表明云芝多糖PSK能增强超氧化物歧化酶(SOD)的活性，缓解肿瘤宿主体内的氧化应激状态。Kariya等在联氨氧化反应体系中观察到云芝多糖有自由基清除剂作用，并通过电子自旋共振检测，证明其有拟SOD的作用。又有报道云芝多糖能增强正常小鼠和正常迟发型超敏感性(DH)小鼠淋巴细胞、脾及胸腺中SOD的活力，而对肿瘤组织中SOD则有明显的抑制作用。(4)其它：香菇、云芝和灵芝等多糖均能抑制鼠肝细胞对致癌物苯并芘的吸收。香菇多糖能使肿瘤部位的血管扩张和出血，造成肿瘤组织坏死。有些微生物来源的多糖与肿瘤细胞表面的糖类分子很相似，能抑制肿瘤细胞的粘附，从而抑制了肿瘤细胞的侵袭与转移。 三、抗病毒活性 多糖的抗病毒作用已引起医药界的高度重视。尤其在抗HIV方面，硫酸酯化多糖因为其活性明确，已成为近年来的研究热点。研究表明，其作用机制除了多糖的免疫激活作用外，该类聚合物可以通过阻断HIV病毒gp120与宿主细胞CD4受体的结合而发挥作用，这可以阻断病毒对宿主细胞的吸附，防止合细胞的形成。某些硫酸多糖还能够抑制HIV逆转录酶活性，硫酸化侧链与RNA模板引物上的某些酶有相同的结合位点，从而产生竞争性抑制作用。最近的研究又发现，硫酸多糖与HIV1反式激活因子tat的结合能阻止tat蛋白进入胞内，使HIVLTR的转录激活受到抑制，从而抑制了HIV1的复制和整合。硫酸多糖的抗病毒活性首先源于其聚阴离子特性，因此硫酸基团是该类多糖活性的必要条件。分子中硫酸基团的含量越高，其抗HIV的作用越强。但硫酸根过多会产生抗凝血等不良反应。硫酸基团分布的空间构象对抗病毒活性也有影响，如Tat蛋白与肝素的结合要求至少有2O、6O和N位置的硫酸化。糖链柔性的降低能升高硫酸多糖的抗病毒活性。分子大小是多糖抗病毒活性的另一个影响因素。硫酸葡聚糖抗HIV的活性随着相对分子质量的增加而增加，相对分子质量在1×104～5×105的范围内能保持最大活性。除了抗HIV外,多糖对其他类型病毒也有抑制作用，如单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus，HSV1，HSV2)、巨细胞病毒(Cytomegalovirus，CMV)、流感病毒(Influenza virus)、囊状胃炎病毒(Vesicular stomatitis virus，VSV)等。香菇多糖具有抗肿瘤作用，硫酸酯化后则具有显著的抗艾滋病作用，在浓度为100mg/L时能完全抑制RT活性，10～100mg/L时能抑制合体细胞的形成，10mg/L时能强烈抑制HIV抗原的合成，并能保护被HIV感染的MT4细胞。但硫酸酯化后的多糖却失去了原有的抗肿瘤活性。由此推测硫酸酯化多糖和非硫酸化多糖的免疫调节作用机制是不同的。通过13CNMR、苯胺蓝荧光法及粘度法测定证明，硫酸基团的引入造成多糖理化性质及其空间立体构象的变化，而这正是多糖活性的决定因素。 四、其它活性 多糖的免疫调节功能使其在临床上具有抗感染和抗炎活性。免疫调节剂的使用相对于常规药物治疗具有其独特的优点。对宿主免疫系统的先天抗感染能力的增强可能会有效地解决抗生素耐药的问题。吴倩等应用重组sIL1 RⅠ为靶点建立抑制剂筛选模型，从链霉菌的代谢产物中得到IL1的拮抗剂139A，动物模型的研究表明它们具有抗类风湿性关节炎的作用。对139A生物合成中引导糖基转移酶基因的克隆和鉴定工作也已经完成。对中药植物多糖降血糖活性的研究较为普遍，近年来，从微生物中也发现了一些有明显降血糖作用的多糖。从Cordyccps sinensis中提取得到的多糖CSF10能增强葡萄糖激酶活性，加速葡萄糖的代谢；并可以降低GLUT2蛋白水平从而抑制肝脏葡萄糖的输出，最终达到降低血糖的目的。另外，发现某些微生物来源多糖(如银耳多糖)和一些多糖的硫酸化衍生物，具有肝素样抗凝血作用，其抗凝活性与多糖分子量和硫酸化程度相关；木耳多糖、银耳多糖等对血栓的形成有抑制作用，这可能与它们降低血栓纤维蛋白原含量，降低血小板数目及其粘附力的能力有关；香菇多糖可促进胆固醇代谢而降低血清胆固醇含量，从而达到降血脂的目的；灵芝多糖能抑制人嗜中性粒细胞自发和Fas介导的细胞凋亡，这与抗衰老活性相关；灵芝中的一种小分子多糖能增加蛋白和核酸的合成；而某些微生物多糖对RNase有抑制作用，可减少RNA降解，对RNA治疗可起到协同作用。 五、结语 多糖类药物具有多效性、低毒性、来源广泛、天然绿色等优点，多糖与现有药物的联合用药可以提高药物的作用范围和效力，减少用药量，并可防止或推迟耐药的出现。但由于多糖结构太复杂，所以不易控制其质量标准，结构测定及合成难度较大；缺乏明确的作用机制研究；而有些多糖在天然产物中含量很低且不易分离得到。这使它们在临床上的应用受到限制。近年来，随着结构分析技术的进步和作用机制研究的不断积累和深入，人们对多糖如何作用于细胞因子网络、协调生物学功能的结构特征有了更多的了解，发现了一些多糖的特异受体，为新活性化合物的开发提供了基础。对于多糖构效关系的认识也更为丰富，为提高活性而进行的结构改造工作也有很大进展。多糖的结构研究是多糖研究中亟待解决的薄弱环节。在确保多糖纯度的前提下，现有二维核磁技术的结合(如：COSY谱、NOESY谱、HOHAHA谱、TOCSY谱等)使我们有可能推导出部分多糖完整的一级结构。而质谱由于其高度的灵敏性，在多糖尤其是极少量多糖的结构分析中，也发挥了越来越重要的作用，FABMS和液质联用技术已越来越广泛地用于多糖的结构分析中。多糖的高级结构分析也有所发展，但还无法做到像核酸和蛋白质结构测定那样自动化、微量化和标准化。关于药用微生物多糖生物合成的研究也逐渐开展起来。对这些微生物菌株进行的多糖合成基因分析发现有共同的操作子结构，暗示了这些多糖的生物合成拥有相同的分子机制。对于多糖合成基因簇及其生物合成途径更深入的了解，能为进一步的组合生物学研究，以及最终获得新结构多糖、改变天然多糖理化性质、提高多糖的活性和产量提供理论基础。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

               小小微生物，却有大用处：人类生存发展的重要资源！ 百欧博伟生物：面包、酸奶、豆腐、泡菜，这些人们经常享用的食物都与微生物关系密切。顾名思义，微生物是我们瞪大眼睛也难以发现的微小生物。常见的微生物杆菌宽0.5微米，即使80个杆菌“肩并肩”地排列成行，也只有一根头发丝的宽度。当然，万千微生物中也有特殊者，并没有那么微小，比如蘑菇、灵芝。这些或大或小的微生物在食品、农业、医药、环保、能源等领域广泛应用。 小小微生物，是人类生存发展的重要资源，也是科学研究的前沿领域。科学家在观察细菌对抗病毒入侵的过程中，发现细菌通过剪切DNA，解除了病毒的“武装”。受此启发，两位科学家研究出一种基因编辑技术，这一技术像是自带身份识别功能的“小剪刀”，精准剪裁微生物、植物、动物乃至人体的遗传基因。两位科学家凭此在2020年被授予诺贝尔化学奖。 微生物很古老，也很前沿；很微小，也很强大。这个生命的源头，正带给我们越来越多惊喜。 不显山露水，在食品、农业、医药领域大展身手 微生物主要包括细菌、真菌、病毒三大类。细菌是原核细胞型微生物，它像是一间毛坯房，没啥家具，但也能维持正常生活。真菌是真核细胞型微生物，好比一座精装修的房子，家具家电齐全。而病毒是非细胞型微生物，和前两种细胞型微生物截然不同，喜欢利用其他细胞来供养自己。动植物患上病毒性疾病，就是病毒利用动植物细胞来快速繁育子子孙孙。不过，我们不必谈“微”色变，绝大多数微生物对人类生存是有益的，甚至是必要的。人体内微生物数量多达数百万亿个，总重量可超1公斤。 食品加工是人类利用微生物的最早实践。古人利用微生物创制了营养丰富、风味独特、种类繁多的发酵食物。这些食物保存期长，消化吸收率和营养价值高，还包含有益健康的生理活性物质。今天，食品工业领域到处都有微生物的身影。以酶制剂为例，它由传统或经基因改造的微生物发酵、提取制得，具有催化功能，能够改善食品的色、形、味，提升食品的功能和品质，可用于淀粉制品、乳制品、烘焙食品、酒和饮料等的制造。食品酶种类丰富，有用于制作奶酪和酸奶的凝乳酶，有增加肉类鲜嫩程度的木瓜蛋白酶，还有提升面包口感的木聚糖酶、制备功能多肽的蛋白酶，等等。有些食品酶作用独特，乳糖酶分泌少的人可以食用富含乳糖酶的食物，减轻乳糖不耐受症状；纳豆激酶可以溶解血栓、降低血黏度。 往食品的上游追溯，就是农业生产，这也是微生物的用武之地。随着环保和食品安全问题越来越受到重视，微生物农药需求日益增长。微生物农药的最大优势在于，不会像传统化学农药那样产生污染，还可以提升农副产品品质，推动绿色农业发展。以典型的微生物农药赤霉酸为例，它是一种天然的植物生长调节剂，能够促进细胞分裂，增加细胞数量，有利于植物生长发育，进而增加产量。当前，大量杂交水稻制种田通过喷洒赤霉酸来制种，赤霉酸还被广泛应用于棉花、蔬菜、瓜果等的种植，对保障我国农业丰产起到重要作用。 微生物还帮助人们保持健康。人体里的微生物主要寄居在肠道内，它们和免疫系统不断“对话”，像双歧杆菌等益生菌可以产生短链脂肪酸等有益物质，不仅降低炎症疾病发病率，还时刻维持着人体的健康平衡。利用微生物及其代谢产物，可以生产具有多种健康功能的产品。以二十碳五烯酸为例，它是细胞膜的重要成分，帮助维持细胞膜的流动性和稳定性。此外，二十碳五烯酸还在调节炎症反应、降低血压、延缓血栓形成等方面起到关键作用。过去，二十碳五烯酸主要来源于金枪鱼、鲑鱼等深海鱼的鱼油，资源有限，难以满足市场需求。借助微生物发酵技术，人们可以从菌类中提取二十碳五烯酸，缩短了生产周期，有利于其稳定供应，还改善了相关产品的口感和品质。 近年来，人工合成微生物作为活菌药物，为医药领域科技创新打开了一扇窗口。科学家利用新技术，创制了富含酶的高活性细菌药物，罕见病患者吃下去后，可以补充自身缺乏的酶。下一步，若能提高这些酶在体内的作用时间和效率，将为万千罕见病家庭带来希望。在癌症治疗中，微生物经过基因改造，可以成为抗肿瘤药物的“运输车”，携带激活免疫系统的成分，深入化疗等现有疗法难以触及的地方，有望成为抗击癌症的利器。 “小身板”有大能量，助力生态保护和能源开发 在整个地球生态系统中，微生物称得上微小却强大。数十亿年前，微生物就是地球上最早的生命体。在生物圈中，微生物作为“分解者”把动植物遗体、粪便等有机物分解为无机物，回归自然，促进物质循环。没有微生物，地球的生态系统将不复存在。随着研究不断取得突破，微生物在生态保护和能源开发上发挥着越来越大的作用。 比如微生物降解塑料。这些微小的生物，通过其独特的代谢途径和酶系统，能够有效分解塑料，减少塑料污染。链球菌属、假单胞菌属、葡萄球菌属、芽孢杆菌属等细菌，以及曲霉属的一些真菌，都被发现能够降解塑料。特别是塔宾曲霉，在高倍显微镜下，可以观察到其内部的细丝网络像一个高效运转的工厂，分解着塑料内的聚合物。通常情况下，塑料污染物需要10年乃至更长时间才能被自然降解，将这些塑料放到塔宾曲霉面前，几周便被彻底分解。 相比于物理和化学降解，微生物降解塑料更温和、更环保、更可持续。它不需要高温、高压或强酸、强碱等极端条件，只需在适宜的环境下，就能自发降解。微生物降解还可以将塑料转化为有价值的生物降解产物，进一步用于农业、化工等领域，实现资源循环利用。不同种类塑料具有不同的化学结构和稳定性，微生物降解也是“一物降一物”。找到针对不同塑料特性的微生物，提高降解效率，是当前的研究重点。例如通过基因工程技术改造微生物，使其具备更强的降解能力和更广泛的适应性；或者利用微生物共培养技术，构建具有协同降解能力的微生物群落。纳米技术、人工智能、生物反应器等新兴技术，也在与微生物降解塑料技术结合，有望提高微生物降解塑料的效果和可操作性。 寻找替代化石能源的可再生能源，是全世界共同面临的难题。其中，生物乙醇生产就要靠微生物发挥关键作用。通过发酵，微生物可以将纤维素、淀粉等可再生生物资源转化为糖，进而生产出乙醇。微生物发酵生产乙醇不仅环保，而且原料来源广泛，生产成本低。与之相似，微生物也可以通过发酵产出生物柴油和生物甲烷。 能源领域还有一个重点课题，固碳。固碳微生物广泛存在于陆地土壤，这些微生物包括自养型土壤细菌和光能微生物等。它们通过光合作用或化学自养固定二氧化碳，并将其转化为有机物，从而增加土壤有机碳含量，提高土壤肥力。未来，科学家有望开发出新的微生物技术，比如通过优化微藻培养条件和代谢途径进行大规模固碳，减缓全球变暖。 海洋深处的微生物研究是前沿课题。对深海微生物的研究，有助于我们解开生命在极端环境中诞生演化的谜团，为我们理解地球生命本质提供宝贵线索，还为我们探索宇宙生命提供新的视角。在科技应用方面，科幻电影里经常出现的太空采矿，有可能成为微生物利用的新场景。在微重力环境下，微生物能够巧妙地分解岩石，提取出珍贵材料，为长期太空驻留提供资源保障。这种采矿方式不仅高效，而且对环境影响极小，几乎不产生有害物质，是太空资源开发的理想选择之一。 现在，科学家们正在发挥聪明才智，探寻微生物的未解之谜。未来，一定会有更多微生物种类被发现，微生物的潜在应用也将得到更加充分的挖掘。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！