白假丝酵母菌的生物学性状与微生物学检查！白假丝酵母菌属于假丝酵母菌属，亦称白色念珠菌，假丝酵母菌属种类很多，其中对人致 病的有白假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌和伪热带假丝酵母菌等。 一、生物学性状 主要致病菌白假丝酵母菌的形态特征是菌体呈圆形或椭圆形，直径为3-6um。革兰染色阳性，着色不均。以芽生孢子出芽繁殖，孢子伸长形成芽管，不与母体分离，形成较长的假菌丝。在临床标本中如有大量菌丝，提示白假丝酵母菌为致病状态，对诊断具有重要意义。 白假丝酵母菌的培养特征是在普通琼脂、血琼脂和沙保养基上均生长良好。在沙保培养基于室温或37℃培养1—3d长出菌落，呈奶油色或呈蜡状，柔软、光滑、湿润，有浓厚的酵母气味。培养稍久，有大量向下生长的营养假菌丝，无向上生长的气中菌丝，呈类酵母型菌落。在玉米粉培养基上可长出厚膜孢子。在血琼脂培养基上菌落中等大小呈暗灰色。 二、致病性 白假丝酵母菌通常存在于人的口腔、上呼吸道、肠道及阴道黏膜。机体抵抗力下降或菌群失调是其侵入机体的主要原因。可侵犯皮肤、黏膜和内脏，表现为急性、亚急性或慢性炎症，大多为继发性感染。在几种假丝酵母菌中致病力也最强，目前白假丝酵母菌感染已成为临床上的一个严重问题，血培养阳性率仅次于大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌。白假丝酵母菌发生致病作用与多种因素有关：①黏附：其细胞壁的甘露糖蛋白是黏附于上皮细胞的主要介导物。在菌体内基因控制的转换系统作用下，使孢子转为芽管或菌丝，可促进其黏附。②入侵：黏附于上皮细胞后，其芽管（菌丝）可直接插入细胞膜。③产生毒素和酶：产生的念珠菌毒素可抑制机体的细胞免疫功能，促进感染；产生的一些水解酶和酸性蛋白酶，如磷酸脂酶和卵磷酸脂酶等，可引起组织损伤，有利于其侵入。白假丝酵母菌主要引起以下感染： ⒈皮肤黏膜感染皮肤感染好发于皮肤皱褶处，如腋窝、腹股沟、乳房下、会阴部及指（趾）间等皮肤潮湿部位。黏膜感染可发生鹅口疮、口角糜烂、外阴与阴道炎等，以鹅口疮最为常见。鹅口疮多发生于老年人、儿童、长期患慢性消耗性疾病患者及免疫功能低下者。发病较急、发展较快，如治疗不及时，可迅速扩散蔓延，引起深部病变。 ⒉内脏感染常可引起支气管炎、肺炎、食管炎、肠炎、膀胱炎、肾盂肾炎、心内膜炎及心包炎等，偶尔也可引起败血症。 ⒊中枢神经系统感染可引起脑膜炎和脑脓肿等。常由呼吸系统及消化系统病灶播散所致。 三、微生物学检查 ⒈直接镜检取感染部位的新鲜标本涂片直接镜检，镜下必须同时看到出芽的酵母菌和假菌丝，才能确定假丝酵母菌在组织中定居。若只见酵母菌细胞不见假菌丝，可能只是腐生性假丝酵母菌的污染。 ⒉分离培养将标本接种于沙保培养基做分离培养，形成类酵母型菌落。镜下可见假菌丝及成群的芽生孢子。用玉米粉培养基培养可见形成厚膜孢子。 ⒊抗原、抗体检测可用乳胶凝集试验等方法检测血清中特异抗体。也可用ELISA方法检测血清中的白假丝酵母菌抗原。   中国微生物菌种查询网可以定制制备常用4代定量微生物菌种（生孢梭菌，大肠埃希氏菌，白色念珠菌，铜绿假单胞菌，黑曲霉等）不同浓度如10E3，10E5,10E6浓度。为了满足更广用户的不同需求，单位代理引进国际知名质控菌种产品生产厂家：法国梅里埃MBL，BIOBALL定量产品，赛默飞REMEL科技定性定量商业产品。接种量，即用型使用方便快捷，产品种类齐全并且提供产品COA分析证书。PS：Remel质控微生物；BIOBALL质控微生物；Microbiologis（MBL）质粒微生物，点击有链接详细介绍。欢迎您的咨询！

                   液体培养基的配制方法与原则！液体培养基（ liquid culture medium），固体培养基的对应词，是微生物或动植物细胞的液状培养基。它具有进行通气培养、振荡培养的优点。在静止的条件下，在菌体或培养细胞的周围，形成透过养分的壁障，养分的摄入受到阻碍。由于在通气或在振荡的条件下，可消除这种阻碍以及增加供氧量，所以有利于细胞生长，提高生产量。一、简介培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。液体培养基是培养基物理分类一种，是相对固体培养基而言的，是微生物或动植物细胞的液状培养基。在液体培养基中的培养称为液中培养、液体培养或液内培养。培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在3~6℃的冰箱内。二、培养基的配制1.配料配方换算→在容器中加入少量水〔蒸馏水，自然水〕→按照配方称取各种药品〔依次加入〕→加足所需水量《一药一勺，取药后立即盖上瓶盖》。2.溶解淀粉溶解：少量冷水调成糊状加热溶解，特别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂的熔解温度95～97℃ ，且需要边加热边搅拌以防止烧焦。3.调PH用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。4.过滤滤纸或棉花进行过滤。5.分装一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。⑴三角瓶若作静置培养，则100 ml培养基/250 ml的三角瓶，最多不能超过150 ml培养基/250 ml的三角瓶，否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌；若作摇瓶培养，则15～20 ml培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。⑵试管分装液体培养基一般装4～5 ml，约试管的1/4高度；固体斜面培养基一般装3～4 ml，约试管的1/5高度。6.包扎分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。7.灭菌按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。8.摆斜面灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。9.贮存培养基在30℃下放置一天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。三、配制培养基的原则⒈根据培养目的需要选择适宜的营养物质由于微生物营养类型复杂，不同微生物有不同的营养要求。因此，要根据不同微生物的营养需求选择适宜的营养物质，配制针对性强的培养基。自养微生物有较强的合成能力，能以简单的无机物如co2和无机盐合成复杂的细胞物质。因此，培养自养微生物的培养基应由简单的无机物组成。异养微生物的合成能力较弱，不能以CO2作为weiyi碳源或主要碳源，故应在培养基中至少添加一种有机物。⒉注意营养物质的浓度与配比要合适微生物只有在营养物质浓度及其比例合适时才能良好生长。营养物质浓度过低不能满足现生长需要，过高又抑制其生长。例如，适量的蔗糖是异养微生物的良好碳源和能源，但高浓度蔗糖则抑制菌体生长。金属离子是微生物生长所不可缺少的矿质养分，但浓度扩大，尤其是重金属离子，反而抑制其生长，甚至产生杀菌作用。⒊控制培养基的条件⑴控制培养基的pH 配制培养基必须根据微生物的特点调节pH。各大类微生物要求的适宜生长pH范围不同。如霉菌与酵母菌一般为5.0-6.0, 细菌为6.5-7.5.放线菌为7.5-8.5.培养基的pH与其C/N有极大关系。C/N高的培养基，例如培养各种真菌的培养基，经培养后其pH明显下降;相反，C/N低的培养基，例如培养一般细菌的培养基， 经培养后，其pH则明显上升。这是由于营养物质的消耗与代谢产物的积累，改变了培养基的pH，若不及时控制，将导致菌体生长停止。⑵调节氧化还原电位(Eh) 各种微生物对培养基的Eh要求不同。适宜好氧微生物生长的Eh值一般为+0.3~+0.4V，厌氧微生物只能在+0.1V以下生长，因此，培养好氧微生物必须保证氧的供应，可在培养基中加入氧化剂提高Eh值。⑶调节渗透压 多数微生物能耐受较大范围渗透压的变化。培养基中营养物质的浓度过大，会使渗透压过高，使细胞发生质壁分离而抑制微生物生长。低渗溶液则使细胞吸水膨胀易破裂，因此，配制培养基时要掌握营养物质的浓度。常在培养基中加人适量的Nacl以提高渗透压。⒋原料来源的选择力求节约配制培养基还应遵循力求节约的原则，尽量选用价格便宜、来源方便的原料。特别是在工业发酵中，培养基用量大，更应注意利用低成本的原料，降低产品成本。⒌灭菌处理为了避免杂菌污染，获得微生物纯培养物，培养基必须及时严格灭菌。通常采用高压蒸汽灭菌。一般培养基用0. IMPa (121℃)维持15 ~ 30min即可彻底灭菌。长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏，如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。因此，含糖培养基常用0.05MPa (110℃) 灭菌20 ~ 30min某些对糖类要求更高的培养基，可先将糖过滤除菌或间歇灭菌，再与其他已灭菌的成分混合。长时间高温灭菌也会使磷酸盐、碳酸盐与钙、镁铁等阳离子形成难溶性化合物而产生沉淀。为了防止这类沉淀发生，可将这些物质分别灭菌，冷却后再混合；也可在培养基中加入少量整合剂(0.01%乙二胺四乙酸，即EDTA)使金属离子形成可溶性络合物，防止沉淀的产生。高压蒸汽灭菌一般使培养基 pH降低， 应在配制培养基时加以调节。北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                        细菌的生理与生化试验方法！百欧博伟生物：微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一,微生物检验中常用的生化反应介绍如下：一、糖酵解试验不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。　　试验方法：以无菌操作，用接种针或环移取纯培养物少许，接种于发酵液体培养基管中，若为半固体培养基，则用接种针作穿刺接种。接种后，置36±1.0°C培养，每天观察结果，检视培养基颜色有无改变（产酸），小倒管中有无气泡，微小气泡亦为产气阳性，若为半固体培养基，则检视沿穿刺线和管壁及管底有无微小气泡，有时还可看出接种菌有无动力，若有动力，培养物可呈弥散生长。本试验主要是检查细菌对各种糖、醇和糖苷等的发酵能力，从而进行各种细菌的鉴别，因而每次试验，常需同时接种多管。一般常用的指示剂为酚红、溴甲酚紫，溴百里蓝和An-drade指示剂。二、淀粉水解试验某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。　　试验方法：以18~24h的纯培养物，涂布接种于淀粉琼脂斜面或平板（一个平板可分区接种，试验数种培养物）或直接移种于淀粉肉汤中，于36±1°C培养24~48h，或于20℃培养5天。然后将碘试剂直接滴浸于培养表面，若为液体培养物，则加数滴碘试剂于试管中。立即检视结果，阳性反应（淀粉被分解）为琼脂培养基呈深蓝色、菌落或培养物周围出现无色透明环、或肉汤颜色无变化。阴性反应则无透明环或肉汤呈深蓝色。　　淀粉水解系逐步进行的过程，因而试验结果与菌种产生淀粉酶的能力、培养时间，培养基含有淀粉量和pH等均有一定关系。培养基pH必须为中性或微酸性，以pH7.2最适。淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱，因而以临用时制备为妥。三：V-P试验某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中的氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。　　试验方法：　　１）O’Meara氏法：将试验菌接种于通用培养基，于36±1°C培养48h，培养液1ml加O’Meara试剂（加有0.3%肌酸Creatine或肌酸酐Creatinine的40%氢氧化钠水溶液）1ml，摇动试管1~2min，静置于室温或36±1°C恒温箱，若4h内不呈现伊红，即判定为阴性。亦有主张在48~50°C水浴放置2h后判定结果者。　　２）Barritt氏法：将试验菌接种于通用培养基，于36±1°C培养4天、培养液2.5ml先加入a萘酚（2-na-phthol）纯酒精溶液0.6ml,再加40%氢氧化钾水溶液0.2ml，摇动2~5min，阳性菌常立即呈现红色，若无红色出现，静置于室温或36±1°C恒温箱，如2h内仍不显现红色、可判定为阴性。　　３）快速法：将0.5%肌酸溶液2滴放于小试管中、挑取产酸反应的三糖铁琼脂斜面培养物一接种环，乳化接种于其中，加入5%α-萘酚3滴，40%氢氧化钠水溶液2滴，振动后放置5min，判定结果。不产酸的培养物不能使用。　　本试验一般用于肠杆菌科各菌属的鉴别。在用于芽胞杆菌和葡萄球菌等其它细菌时，通用培养基中的磷酸盐可阻碍乙酰甲基醇的产生，故应省去或以氯化钠代替。四：甲基红（Methyl Red）试验肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至pH4.5以下，使甲基红指示剂变红。　　试验方法：挑取新的待试纯培养物少许，接种于通用培养基，培养于36±1°C或30°C（以30°C较好）3~5天，从第二天起，每日取培养液1ml，加甲基红指示剂1~2滴，阳性呈鲜红色，弱阳性呈淡红色，阴性为黄色。迄至发现阳性或至第5天仍为阴性、即可判定结果。　　甲基红为酸性指示剂，pH范围为4.4~6.0，其pK值为5.0。故在pH5.0以下，随酸度而增强黄色，在pH5.0以上，则随碱度而增强黄色，在pH5.0或上下接近时，可能变色不够明显，此时应延长培养时间，重复试验。五：靛基质（Imdole）试验某些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合，形成玫瑰吲哚，为红色化合物。　　试验方法：将待试纯培养物小量接种于试验培养基管，于36±1°C培养24h时后，取约2ml培养液，加入Kovacs氏试剂2~3滴，轻摇试管，呈红色为阳性，或先加少量乙醚或二甲苯，摇动试管以提取和浓缩靛基质，待其浮于培养液表面后，再沿试管壁徐缓加入Kovacs氏试剂数滴，在接触面呈红色，即为阳性。　　实验证明靛基质试剂可与17种不的靛基质化合物作用而产生阳性反应，若先用二甲苯或乙醚等进行提取，再加试剂，则只有靛基质或5-甲基靛基质在溶剂中呈现红色，因而结果更为可靠。六、硝酸盐（Nitrate）还原试验有些细菌具有还原硝酸盐的能力，可将硝酸盐还原为亚硝酸盐、氨或氮气等。亚硝酸盐的存在可用硝酸试剂检验。　　试验方法：临试前将试剂的A（磺胺酸冰醋酸溶液）和B（α－萘胺乙醇溶液）试液各0.2ml等量混合、取混合试剂约0.1ml、加于液体培养物或琼脂斜面培养物表面，立即或于10min内呈现红色即为试验阳性，若无红色出现则为阴性。　　用α-萘胺进行试验时，阳性红色消退很快、故加入后应立即判定结果。进行试验时必须有未接种的培养基管作为阴性对照。α-萘胺具有致癌性、故使用时应加注意。七、明胶（Gelatin）液化试验有些细菌具有明胶酶（亦称类蛋白水解酶），能将明胶先水解为多肽，又进一步水解为氨基酸，失去凝胶性质而液化。　　试验方法：挑取18~24h待试菌培养物，以较大量穿刺接种于明胶高层约2/3深度或点种于平板培养基。于20~22℃培养7~14天。明胶高层亦可培养于36±1℃。每天观察结果，若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动、静置冰箱中待其凝固后、再观察其是否被细菌液化，如确被液化，即为试验阳性。平板试验结果的观察为在培养基平板点种的菌落上滴加试剂，若为阳性，10~20min后，菌落周围应出现清晰带环。否则为阴性。八、尿素酶（Urease）试验有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。尿素酶不是诱导酶，因为不论底物尿素是否存在，细菌均能合成此酶。其活性最适pH为7.0。　　试验方法：挑取18~24h待试菌培养物大量接种于液体培养基管中，摇均，于36±1℃培养10，60和120min，分别观察结果。或涂布并穿刺接种于琼脂斜面，不要到达底部，留底部作变色对照。培养2，4和24h分别观察结果，如阴性应继续培养至4天，作最终判定，变为粉红色为阳性。九、氧化酶（Oxidase）试验氧化酶亦即细胞色素氧化酶，为细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶，氧化酶先使细胞色素C氧化，然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。　　试验方法：在琼脂斜面培养物上或血琼脂平板菌落上滴加试剂1~2滴，阳性者Kovacs氏试剂呈粉红色~深紫色，Ewing氏改进试剂呈蓝色。阴性者无颜色改变。应在数分钟内判定试验结果。十、硫化氢（H2S）试验有些细菌可分解培养基中含硫氨基酸或含硫化合物，而产生硫化氢气体，硫化氢遇铅盐或低铁盐可生成黑色沉淀物。　　试验方法：在含有硫代硫酸钠等指示剂的培养基中，沿管壁穿刺接种，于36±1℃培养24~28h，培养基呈黑色为阳性。阴性应继续培养至6天。也可用醋酸铅纸条法：将待试菌接种于一般营养肉汤，再将醋酸铅纸条悬挂于培养基上空，以不会被溅湿为适度；用管塞压住置36±1℃培养1~6天。纸条变黑为阳性。十一、三糖铁（TSI）琼脂试验试验方法：以接种针挑取待试菌可疑菌落或纯培养物，穿刺接种并涂布于斜面，置36±1℃培养18~24h，观察结果。　　本试验可同时观察乳糖和蔗糖发酵产酸或产酸产气（变黄）；产生硫化氢（变黑）。葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的少量酸，因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成碱性产物，故使斜面后来又变红，底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以仍保持黄色。十二、硫化氢-靛基质-动力（SIM）琼脂试验试验方法：以接种针挑取菌落或纯养物穿刺接种约1/2深度，置36±1℃培养18~24h，观察结果。培养物呈现黑色为硫化氢阳性，混浊或沿穿刺线向外生长为有动力，然后加Kovacs氏试剂数滴于培养表面，静置10min，若试剂呈红色为靛基质阳性。培养基未接种的下部，可作为对照。　　本试验用于肠杆菌科细菌初步生化筛选，与三糖铁琼脂等联合使用可显著提高筛选功效。北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得z优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

                  β-半乳糖苷酶试验方法与操作步骤！一、液体法（ONPG法）⒈成分邻硝基苯β-D-半乳糖苷(ONPG) 60.0 mg0.01mol/L 磷酸钠缓冲液(pH7.5) 10.0 mL1%蛋白胨水(pH7.5) 30.0 mL⒉制法将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mm×75mm 试管内，每管0.5mL，用橡皮塞塞紧。⒊试验方法自琼脂斜面挑取培养物一满环接种，于36 °C1 °C培养1 h~3 h和24 h观察结果。如果β-D-半乳糖苷酶产生，则于1 h~3 h变黄色，如无此酶则24 h不变色。二、平板法（X-Gal法）⒈成分蛋白胨 20.0 g氯化钠 3.0 g5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-Gal) 200.0 mg琼脂 15.0 g蒸馏水 1 000.0 mLpH 7.20.1⒉制法将上述各成分加热煮沸于1L水中，冷却至25 ℃左右校正pH至7.20.1，115 °C 高压灭菌10 min。倾注平板避光冷藏备用。⒊试验方法挑取琼脂斜面培养物接种于平板，划线和点种均可，于36 °C1 °C培养18h~24 h观察结果。如果β-D-半乳糖苷酶产生，则平板上培养物颜色变蓝色，如无此酶则培养物为无色或不透明色，培养48 h~72 h后有部分转为淡粉红色。北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                        芽孢杆菌的功效和作用！芽孢杆菌（Bacillus），细菌的一科，能形成芽孢（内生孢子）的杆菌或球菌。包括芽孢杆菌属、芽孢乳杆菌属、梭菌属、脱硫肠状菌属和芽孢八叠球菌属等。它们对外界有害因子抵抗力强，分布广，存在于土壤、水、空气以及动物肠道等处。芽孢杆菌（bacillus） 杆菌科的一属细菌。芽孢是芽孢杆菌进入动物肠道的主要形式。芽孢能否在动物肠道中萌发、增殖是影响其饲用效果的主要因素。⒈芽孢杆菌对肠道不良环境的抵抗动物的肠道内存在诸多不良的环境，如低pH值的胃酸、高浓度的胆盐、相对厌氧的环境等，这些环境不利于微生态制剂发挥作用。因此如何有效抵御这些不良环境的影响，是芽孢杆菌在动物体内发挥作用的前提。⒉芽孢在动物肠道中的萌发另一方面，芽孢在不同试验动物肠道中的保留特性差异很大。在禽类中的定植时间要显著高于哺乳动物。⒊芽孢杆菌在动物肠道中抑菌作用机理添加芽孢杆菌能够减少肠道中有害微生物的数量，同时提高肠道益生菌的数量。Han等（1984）研究发现，生长猪连续饲喂5周含有丁酸梭菌的饲料，排出的粪便中肠球菌和肠杆菌的数量显著降低，而丁酸梭菌和乳酸杆菌的数量则显著增加。关于芽孢杆菌的抑菌机理，目前主要有生物夺氧、菌群调整、生物拮抗、提高免疫功能和增强酶活性，防止动物肠道病原菌等多种说法。芽孢杆菌为需氧菌，在生长过程中需要消耗大量的氧气，该环境有利于乳酸菌、双歧杆菌等厌氧菌的生长，抑制需氧肠杆菌的繁殖，从而减少消化道疾病的发生。Maruta等（1996）采用饲喂生猪含有10^7 CFU/g B. subtilis的日粮3周后发现，粪便中的厌氧菌如双歧杆菌和乳酸杆菌数量显著上升，而需氧菌如肠杆菌的数量显著下降，其它病原菌如链球菌和产气荚膜梭菌的数量也显著下降。为了更好的服务社会，创造双方利益zuida化，我们特设了中国微生物菌种查询网（www.biobw.org）！专业为各企事业单位，科研院所，各级学校提供微生物菌种产品查询、购买服务！网站主要提供的产品：质控菌种，标准菌种，中国微生物菌种4万多株，细胞系/株1万多株其中金黄色葡萄球菌，大肠埃希氏菌（大肠杆菌），沙门氏菌，黑曲霉，铜绿假单胞菌，枯草芽孢杆菌，链球菌，白色念珠菌，志贺氏菌等为常用菌株。

              注意！发酵罐使用前要先用高压蒸汽灭菌　百欧博伟生物：发酵罐指工业上用来进行微生物发酵的装置。其主体一般为用不锈钢板制成的主式圆筒，其容积在1m?至数百m?。在设计和加工中应注意结构严密，合理。能耐受蒸汽灭菌、有一定操作弹性、内部附件尽量减少（避免死角）、物料与能量传递性能强，并可进行一定调节以便于清洗、减少污染，适合于多种产品的生产以及减少能量消耗。　　发酵罐分为机械搅拌通风发酵罐和非机械搅拌通风发酵罐；按照微生物的生长代谢需要，分为好气型发酵罐和厌气型发酵灌。 实验室用小试发酵罐是一种对物料进行机械搅拌与发酵的设备。该设备采用内循环方式，用搅拌桨分散和打碎气泡，它溶氧速率高，混合效果好。当发酵罐发酵完毕后清洗罐体和电极，将pH电极插入有3M氯化钾的三角瓶中待用，溶氧电极的探头用保护套套好，保存备用。 在使用中，有的微生物对灭菌的要求较高，如食品企业等，发酵罐需要用高压蒸汽灭菌，如抗生素生产；有些则较低，热水消毒即可，如酒精发酵。 生物发酵罐的结构比较复杂，对于内部的边边角角不容易消毒，一般的发酵罐有自动清洗装置，清洗完之后彻底灭菌。　　1、在培养基灭菌之前，通常应先将与罐相连的分空气过滤器用蒸汽灭菌并用空气吹干。实罐灭菌时，先将输料管路内的污水放掉冲净，然后将配制好的培养基泵送至发酵罐（种子罐或料罐）内，同时开动搅拌器进行灭菌。无论与罐连通的管路如何配制，在实行消毒时均应遵循“不进则出”的原则。这样才能保证灭菌彻底，不留死角。灭菌时，总蒸汽管道压力要求不低于0.3~0.35Mpa，使用压力不低于0.2Mpa。 2、空罐灭菌（空消）即发酵罐罐体的灭菌。空消时一般维持罐压0.15~0.2Mpa，罐温125~130℃，保持30~45min；要求总蒸汽压力不低于0.3~0.35Mpa，使用汽压不低于0.25~0.3MPa。生物发酵罐做好消毒是生产中不可忽视的一部分，一定要认真仔细发酵，医药食品业注意发酵罐的消毒才能保证食品药品的生产规范。北京百欧博伟生物技术有限公司拥有Biolog微生物鉴定系统，超低温冰箱，生物安全柜等仪器设备可进行对微生物分离、鉴定等常规的分子实验研究。对我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展的需求进行积极的面对社会乃至国外收集保藏提供微生物菌种资源。在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供微生物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。除此之外，我们还拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得z优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

                       细胞实验前应做的准备工作！一、细胞的培养进行细胞实验前，首先要做的便是进行细胞培养，要提供给维持细胞生长的全部营养基质，即所谓的细胞培养基。细胞所需的基本条件包括适宜的温度、ph和渗透压。还要提供充足的光照和气体，培养之后可以得到实验所需的细胞株或细胞系。　　二、细胞的运输有时实验者会委托专业机构代替其进行细胞培养，此时要注意妥善地进行运输。细胞运输可选用冷冻贮存运输和充液法两种。前者是将细胞培养液冻存在液氮或者干冰之中，并且为了缩短运输时间，大多需要空运。后者是给细胞注入新的培养液，并使其充满培养瓶从而隔绝空气。三、细胞的计数有些细胞实验前需要统计细胞的数目，则先要使得细胞悬液中的细胞均匀分布，再抽取部分细胞悬液测定其体积和其中的细胞数目，再通过简单的体积换算即可算出细胞悬液中所含的细胞总数。　　四、周期的测定为了便于掌控实验的时间，有些细胞实验前还要进行细胞周期的测定，即细胞从上次分裂结束到下次分裂结束。在周期测定时也包括单个细胞周期测定和细胞群体周期测定两种。测定细胞周期的方法包括细胞计数法和同位素标记法等，主要是通过测定细胞内染色体的染色比例间接测定细胞周期。　　五、实验的设备当然，周密的细胞实验离不开合适的设备支持，细胞实验的准备阶段常用的实验设备有：单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、二氧化碳缸瓶以及倒置显微镜等。北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得z优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

              嗜热脂肪芽孢杆菌抑制法的原理与程序！⒈原理：培养基预先混合嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢，并含有 pH 指示剂（溴甲酚紫）。加入样品并温浴后，若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限，细菌芽孢将在培养基中生长并利用糖产酸，pH 指示剂的紫色变为黄色。相反，如果样品中含有高于检测限的抗生素，则细菌芽孢不会生长，pH 指示剂的颜色保持不变，仍为紫色。⒉芽孢悬液：将嗜热脂肪芽孢杆菌菌种划线移种于营养琼脂平板表面，56 ℃培养 24 h 后挑取乳白色半透明圆形特征菌落，在营养琼脂平板上再次划线培养，56 ℃培养24 h 后转入 36 ℃培养 3 d～4 d，镜检芽孢产率达到 95%以上时进行芽孢悬液的制备。每 块平板用 1 mL～3 mL无菌磷酸盐缓冲液洗脱培养基表面的菌苔（如果使用克氏瓶，每瓶使用无菌磷酸盐缓冲液 10 mL～20 mL）。将洗脱液 5 000 r/min离心 15 min。取沉淀物加无菌0.03 mol/L 磷酸盐缓冲液（pH 7.2）制成 10 ９ cfu/mL 芽孢悬液，置 80 ℃恒温水浴中 10 min 后，密封防止水分蒸发，置冰箱保存备用。⒊测试培养基：在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培养基中加入适量芽孢悬液，混合均匀，使最终的芽孢浓度为 8×10 ５ ～2×10 ６ cfu/mL。混合芽孢悬液的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培养基分装小试管，每管 200 μL，密封防止水分蒸发。这样配制好的测试培养基可以在冰箱保存 6 个月。⒋培养操作：吸取样品100 μL加入含有芽孢的测试培养基中，轻轻旋转试管混匀。每份检样作二份，另外再作阴性和阳性对照各一份，阳性对照管为 100 μL 青霉素 G 参照溶液，阴性对照管为 100 μL 无抗生素的脱脂乳。于 65℃水浴培养 2.5 h，观察培养基颜色的变化。如果颜色没有变化，须再于水浴中培养 30 min 作最终观察。⒌判断方法：在白色背景前从侧面和底部观察小试管内培养基颜色。保持培养基原有的紫色为阳性结果，培养基变成黄色或黄绿色为阴性结果，颜色处于二者之间，为可疑结果。对于可疑结果应继续培养30 min 再进行最终观察。如果培养基颜色仍然处于黄色－紫色之间，表示抗生素浓度接近方法的z低检出限，此时建议重新检测一次。⒍报告：最终观察时，培养基依然保持原有的紫色，可以报告为抗生素残留阳性。培养基变为呈黄色或黄绿色时，可以报告为抗生素残留阴性。本方法检测几种常见抗生素的z低检出限为：青霉素3 μg/L，链霉素 50 μg/L，庆大霉素 30 μg/L，卡那霉素 50 μg/L。北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得z优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

            营养琼脂与液体硫乙醇酸盐培养基工作原理！一、营养琼脂在此培养基中蛋白胨提供氮源，牛肉浸粉提供氮源和维生素、氯化钠维持渗透压，琼脂是一种凝固剂。能够满足绝大多数微生物的生长。不同厂家生产的营养琼脂质量相差非常大，作为基础性培养基，使用前应作详细对比试验。1、产品溶解后溶液澄清透明无不溶物2、产品凝固点不高，以防倾注时凝固根据使用情况对营养琼脂的质量要求3、产品凝固点不低，以防覆盖时等待4、产品凝胶强度适中，以防倒置时不凝5、平板保水性好，避免菌落蔓延无法计数6、灵敏度高，使其接近正确值二、液体硫乙醇酸盐培养基胰酪蛋白胨提供微生物生长所需的氮源、氨基酸；酵母浸粉提供B族维生素；葡萄糖提供碳源；氯化钠维持渗透压；L-胱氨酸盐酸盐和硫乙醇酸钠是还原剂，可以吸附氧气，制造厌氧环境；微量琼脂可增加培养基粘度，使氧气不易进入，刃天青是氧化还原指示剂，被氧化时呈红色-紫色，还原时呈无色。根据使用情况对液体硫乙醇酸盐培基的理化要求1、培养基有轻微臭味，但不应太大以影响使用。2、培养基高压灭菌后应澄清透明，无论是试管装还是根据使用情况对液体硫乙醇酸盐培基的理化要求瓶装在高压放置1-2周仍澄清透明，不出现浑浊现象。3、氧化层的高度最差应不大于1/5。北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                   马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)的应用！一、概述马铃薯葡萄糖琼脂是食用菌母种最常用培养基之一，可用于霉菌，酵母菌计数。配方如下：马铃薯200g制成浸出液，葡萄糖20g，琼脂15〜20g，水1000mL，不调节pH。制备方法如下：取新鲜马铃薯200g，洗净去皮切成小块，加水煮沸20〜30min（能被玻璃棒戳破即可），然后用四层纱布过滤，再根据需要加入葡萄糖或蔗糖20g和琼脂15〜20g，继续加热搅匀，稍冷却后补足水分至1000mL制备PDA培养基有时可加入氯霉素或土霉素等抑制细菌的生长，减少干扰。若不加琼月旨，可用于真菌的液体培养。 二、产品用法称取本品 46.0g,加入 1000ml  蒸馏水中,115℃高压灭菌 20分钟,备用。灭菌好的培养基仅可重复加热熔化一次。三、微生物灵敏度试验按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置20-25℃需氧培养48-72小时。注：回收率计算时，用SDA 琼脂做对照培养基。四、制备其配方为马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂20克，水1000毫升。制作时先将马铃薯去皮，洗净，发芽薯块要挖去芽眼(因芽眼处含龙葵碱，有毒)，切成薄片，加水煮沸直至软而不烂，用8层纱布(经浸湿拧干)过滤取汁。然后将浸水漂洗并拧干的琼脂加入马铃薯液汁中，煮至全部融化，再用纱布过滤，加水补足至1000毫升。zuihou加葡萄糖搅拌溶化后分装试管、灭菌。本培养基适用于培养和保藏各种食用菌。五、应用CN201110315661提供一种桑黄菌丝体的制备方法。步骤包括：桑黄菌种活化；马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板培养；刮取桑黄菌丝体接种于马铃薯葡萄糖液体培养基中进行振荡培养；收集桑黄菌丝体；提取桑黄菌丝体总RNA；琼脂糖凝胶电泳观察结果。本发明使用的菌种是保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)桑黄菌种(鲍姆层孔菌，保藏号为桑黄DL101 CCTCC M 2011137)。本发明操作简单，原理易懂，为今后获得大规模的、高纯度的桑黄菌丝体和高质量的桑黄总RNA提供了简便快捷的方法，也为桑黄的基础研究和应用开发奠定了基础。北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得z优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

           食品卫生微生物学蜡样芽胞杆菌的检验方法！食品卫生微生物学蜡样芽胞杆菌检验操作步骤⒈样品处理冷冻样品应在45℃以下不超过15 min或在2℃～8℃不超过18 h解冻。若不能及时检验，应放于-15℃左右保存；非冷冻而易腐的样品应尽可能及时检验。若不能及时检验，应置于2℃～8℃冰箱保存，在24 h内检验。⒉样品制备以无菌操作取样品25 g（mL），加入PBS 225 mL，用旋转刀片式均质器以8000 r/min～10000 r/min均质1 min～2 min，或拍击式均质器拍击2 min。如无均质器，则将样品放入无菌乳钵中磨碎，然后称取25 g（mL）置合适的容器中，加225 mL PBS，充分振荡混匀。制成1:10的样品匀液。⒊增菌取1：10的样品匀液10 mL（液体样品可以选择原液），加入90 mL胰酪胨大豆多粘菌素肉汤中，于30 ℃±1 ℃培养24 h±2 h。⒋分离取胰酪胨大豆多粘菌素增菌液划线接种于MYP琼脂平板上。于30 ℃±1 ℃培养24 h～48 h。观察平板上生长的菌落。在MYP琼脂平板上，典型菌落为灰白色至微粉红色，周围有白色至淡粉红色沉淀环。⒌纯培养从每个平板选取至少5个典型或可疑菌落，划线接种于营养琼脂平板做纯培养，30 ℃±1 ℃培养24 h±2 h，进行确证实验。营养琼脂平板上，典型菌落在为灰白色，偶有黄绿色，不透明，表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状，边缘常呈扩展状，直径为4 mm～10 mm；⒍样品的稀释吸取1：10的样品匀液1 mL加到装有9 mL PBS的稀释管中，充分混匀制成1：100的样品匀液。据对样品污染状况的估计，按上述操作，依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。每递增稀释1次，换用1支1mL无菌吸管或吸头。⒎平板计数⑴选择2～3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度分别吸取0.1mL接种到MYP琼脂平板上，每稀释度接种两个MYP琼脂平板。用无菌L棒涂布整个平板，注意不要触及平板边缘。使用前，如MYP琼脂平板表面有水珠，可放在25℃ ～ 50℃的培养箱里干燥，直到平板表面的水珠消失。⑵涂布后，将平板置于30 ℃±1 ℃培养24 h±2 h后（原标准为36 ℃±1 ℃培养12 h～20 h） ，选取具有15个～150个典型或可疑蜡样芽胞杆菌菌落的平板，进行计数。并计算同一稀释度两个平板的平均菌落数。如果菌落不典型，可继续培养18 h～24 h再计数。⑶计数后，从每个平板选取至少5个已计数的典型或可疑菌落，如果一个平板上少于5个典型或可疑菌落，则取所有典型或可疑菌落，分别划线接种于营养琼脂平板，30 ℃±1 ℃培养24 h±2 h，进行确证实验。⑷根据确证实验确定为蜡样芽胞杆菌的菌落数，按比例计算出该平板上蜡样芽胞杆菌菌落数，然后计算同一稀释度两个平板的平均蜡样芽胞杆菌数，再乘其稀释倍数，再乘以10，即得每g（mL）样品中蜡样芽胞杆菌数并作出报告。欢迎访问中国微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                 小鼠肠微血管细胞试剂盒的应用！一、背景小鼠肠微血管细胞试剂盒适合于培养小鼠的肠微血管细胞。本试剂盒包含：（1）OptiTDSTM小鼠肠微血管细胞组织解离液（2）小鼠肠微血管细胞组织处理缓冲液（3）FibrOutTM小鼠肠微血管细胞成纤维抑制剂（4）小鼠肠微血管组织洗液（5）小鼠肠微血管细胞生长因子及血清（6）小鼠肠微血管细胞基础培养基（7）小鼠肠微血管组织预备液。微血管是指心血管系统的微细血管，它们在显微镜下才能见到。微血管指通连小动脉和小静脉间的细小血管，分布于各种组织和器官中，分支通连成网，故也称终末血管床。小鼠肠微血管细胞可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。虽然肠微血管组织机械韧性很强，但利用小鼠肠微血管细胞试剂盒中提供的肠微血管组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的肠微血管组织能使得肠微血管组织中微血管细胞的一些功能特性发生改变，从而将肠微血管细胞分离开来。二、应用用于巨噬细胞金属弹力酶基因转染CT-26细胞对小鼠原位结肠癌生长及微血管生成的影响巨噬细胞金属弹力酶(mouse macrophage metalloelastase,MME)是基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)家族成员之一,也称MMP-12。与其它MMP成员不同,MME可以分解纤溶酶原,产生具有抑制血管内皮细胞增殖作用的血管抑素(angiostatin),进而抑制体内肿瘤细胞的生长,在抗肿瘤血管生成中具有重要作用。方法PCR扩增编码MME基因结构域Ⅰ和Ⅱ的cDNA片段,克隆入pGEM-T载体中,限制性内切酶、DNA序列分析鉴定目的基因后,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1(+)中,并进行双酶切及PCR鉴定。再将构建的真核细胞表达载体pcDNA3.1-MME稳定转染小鼠CT-26结肠癌细胞。采用RT-PCR、免疫细胞化学和Western blot方法,鉴定MME mRNA和重组蛋白在CT-26细胞中的表达。采用体外分解Ⅰ型胶原蛋白和明胶酶谱方法,鉴定MME重组蛋白的酶活性。建立MME转染组及对照组小鼠原位结肠癌种植模型,观察MME对原发性结肠癌生长的影响,采用免疫组织化学、原位杂交及Western blot方法检测肿瘤组织中微血管密度(microvessel density,MVD)和VEGF的表达。结果以重组质粒pUC9-MME cDNA为模板进行PCR扩增,PCR产物经纯化后,在1%琼脂糖凝胶电泳中可见一条清晰的条带,位于750bp和1000bp之间,与预期的840bp目的基因片段长度相符。pGEM-T-MME用BamHI和XbaI双酶切,产生2个大小分别为3.0kb和832bp左右的条带,与预期结果基本一致。pGEM-T-MME核苷酸序列正向测序和反向测序结果表明,与小鼠MME cDNA序列的碱基符合率为99.63%。北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网自设细胞系板块，是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

    黄杆菌属细菌的生物危害评估及防护！  一、细菌的传播与致病 黄杆菌属广泛存在于自然界及医院内的水龙头、阴沟、制冰机、冰水、增湿器、呼吸机、浴盆、药瓶及多种导管中。对氯己定（洗必泰）等消毒剂有抵抗力，在42℃时可被杀死。它是条件致病菌，一般引起散发性感染，但也可引起医院内感染的流行，如手术后的感染以及败血症等。 其中脑膜败血性黄杆菌主要引起新生儿及早产儿脑膜炎。常见症状为发热，以轻、中度不规则发热多见，部分为驰张热。婴儿有神志萎靡、少动、少哭、拒食、呕吐及腹胀等中毒症状，常产生神经系统损害如：脑积水，病死率高。成人中可引起败血症、肺炎、心内膜炎、伤口感染等。肺炎病人有咳嗽、咯血、气促、进行性呼吸困难，常在短期内出现呼吸衰竭，肺胞内有炎性渗出物，透明膜形成，水肿伴淋巴细胞、组织细胞及中性粒细胞浸润。少数病人出现少量血性胸腔积液或积气。Ⅱb群感染常继发于颅内手术或使用污染导管后；所致的脑膜炎病情较轻。 二、细菌的生物学特性 黄杆菌属尚未定科，是一群氧化酶阳性，无动力、产色素、吲哚阴性或阳性的非发酵细菌。分为A、B、C、D四组和CDClle、llh、lli。A组包括脑膜炎败血黄杆菌、Flavobacterium llb、短小黄杆菌。B组包括芳香黄杆菌。C组包括F.thalpophilum、F.migzutaii、嗜糖黄杆菌、嗜醇黄杆菌、F.yabuuchiae。尚有多种黄杆菌的分类未定。 黄杆菌属是以产生黄色素为特征的一个菌属，革兰染色阴性，菌体呈杆状或球杆状，无动力芽胞和荚膜。在血琼脂培养基上35℃培养18~24h的菌落呈淡黄色（或黄色、棕黄色）、圆形、直径1~1.5mm、光滑、透明或半透明，稍凸、边缘整齐。氧 化酶、触酶阳性，可分解甘露醇，发酵糖的能力缓慢而稍弱，需氧生长，能水解七叶苷和液化明胶。 三、细菌的实验室检查及其它检查 1、标本采集采集来自临床的各种标本。2、镜检 革兰染色阴性，无动力。3、分离培养血液标本先用肉汤增菌培养，尿液、各种体液、痰、脓汁和分泌物标本可直接接种于血琼脂平板或巧克力平板。35~37℃孵育18~24h，挑取可疑的淡黄色菌落进一步试验。4、生化鉴定 可进行属种的鉴定。 四、细菌的防治 本菌属的细菌如脑膜炎败血性黄杆菌、芳香黄杆菌等对广谱抗菌药物（如氨基糖甙类、β-内酰胺类、四环素、氯霉素等）都有耐药性，但对利福平、红霉素、氯林可霉素及磺胺增效剂敏感。因此抗菌药物的选用应尽可能以药物敏感试验的结果为依据。 对于严重感染的病人，应在送验标本培养和药敏试验尚未获得结果以前即开始经验治疗，待化验结果获知后，并根据病人对治疗的反应加以调整。待病原菌分离后应进行药敏试验和联合药敏试验，作为选用药物的参考。此外采用体外有协同作用的抗菌药物联合，可提高疗效。 五、细菌的生物安全防护 根据《病原微生物生物实验室生物安全管理条例》中的有关规定，人间传播的微生物名录（待颁布）黄杆菌属于三类，BSL-2。相关的防护事宜包括： （1）操作要求1、实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。2、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。3、所有的操作过程应尽量细心，避免产生和溅出气溶胶。4、对于污染的锐器，必须时刻保持高度的警惕，包括针、注射器、玻片、加样器等。5、注射和吸取感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次性注射器（即注射器和针头是一体的）。用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不会被刺穿的、用于收集废弃锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，转移至处理区消毒，高压杀菌。6、打碎的器皿不能直接用手处理，必须用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊子。盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在倒掉前，应按照相关的规定进行消毒。7、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消毒，如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实验室。离开该系统进行消毒的物料，在转移前应包装，其包装应符合有关的法规。8、溅出或偶然事件中，明显暴露于传染源时，要立即向实验室主任报告。进行适当的医学评估、观察、治疗，保留书面记录。9、按日常程序、在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其他传染源污染后，实验室设备和工作台面应当使用有效的消毒剂消毒。污染的设备在送去修理、维护前，要按照相关的规定消毒；在离开设施转移前，要按照相关的规定打包运输。 （2）安全设备1、正确使用和保养生物安全柜、是二级生物安全柜、或其他合适的人员防护设施、或物理遏制装置。2、确定可能形成传染性气溶胶或溅出物的实验过程，包括离心、研磨、匀浆、剧烈震荡或混匀、超声波破裂、开启装有传染源的容器、采集感染标本等。3、涉及高浓度或大体积的传染源时，若选用密封转头或带安全罩的离心机，若转头或安全罩仅在生物安全柜中打开，则可在开放实验室内离心。4、当必须在生物安全柜外处理标本时，需采取面部保护措施（跟镜、口罩、面罩、或其他防溅装置），以免传染源或其他有害物溅或洒到面上。5、在实验室内，必须使用专用的防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非实验室区域时，防护服必须留在实验室内。防护服可以在实验室内处理，也可以在洗衣房中洗涤，但不能带回家中。6、可能接触潜在传染源、被污染的表面或设备时，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重复使用，不能用于接触“洁净”的表面（键盘、电话等），也不应当戴着到实验室外。要备有带滑石粉的乳胶手套。脱掉手套后，要洗手。 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

                  人脑静脉血管组织提取物的应用！一、背景人脑静脉血管组织提取物来自新鲜或冷冻人体脑静脉血管组织中可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。大脑大静脉与直窦是脑静脉系统的重要组成部分，主要引流大脑深部的静脉血流。大脑大静脉根据其形式的不同可分为四型，大脑大静脉多起于松果体的后上方，绝大多数为单干，其长度和管径分别为9.65±4.12mm和3.88±1.52mm。直窦（staight sinus）始于大脑大静脉与下矢状窦汇合的膨大处，是仅次于上矢状窦的第二大引流静脉，横切面呈三角形，成人面积为12.6mm2，儿童为9.5mm2。汇入该血管的主要有以下几支静脉：（1）大脑前静脉（anterior cerebral veins）：该静脉主要引流眶叶、额叶内侧以及胼胝体嘴侧的血液，然后汇入基底静脉，最终汇入直窦。（2）大脑中静脉（middle cerebral veins）：该静脉较粗大，并构成深、浅两个管道。深静脉引流侧裂内各脑回的血液，浅静脉引流侧裂周围脑回以及额叶外侧凸面及眶叶外侧脑回的血液。大脑中静脉浅支的血液进入海绵窦，而深静脉汇入Rosenthal基底静脉并最终汇入直窦。（3）Rostnthal基底静脉(basal veins of Rosenthal)：该静脉是大脑大静脉形成前的zuida脑外静脉，由大脑前静脉、大脑中深静脉、纹状体静脉汇集形成，在横池处与大脑内静脉以及按枕-额方向引流距状区静脉血液的大脑后静脉汇合。这些静脉汇聚脑内后形成zuida的桥静脉即Galen静脉，是汇入直窦的zuida静脉血管。大脑浅静脉收集大脑半球背外侧面及部分内侧面和底面的静脉血。丛皮质穿出的小静脉互相连接形成丰富的静脉网，再汇集成较大的小支，在软膜内走行一小段，穿人蛛网膜下隙，后合成较大的静脉。这些静脉复杂多变。通常以大脑外侧沟为界，分为上、中、下三组，外侧沟以上的静脉，属大脑上静脉;在外侧沟部位的静脉称大脑中浅静脉;外侧沟以下的静脉属大脑下静脉。这三组静脉之间有广泛的吻合，有细小支间的支间吻合和静脉干间的吻合，其中主要的静脉吻合有上、中、静脉间的前上大吻合静脉(Trolard静脉），上、下静脉间的后（下）大吻合静脉(静脉）。二、应用用于血管内皮细胞生长因子、Tie受体和血管生成素在人脑动静脉畸形血管内皮细胞中的表达及缺氧对其诱导作用的研究探讨脑动静脉畸形(cAVM)血管生成因子和原癌基因c-myc表达及其与内皮细胞增殖活性的关系。方法采用免疫组化(ABC法)检测47例cAVM血管内皮细胞生长因子(VEGF)、Tie受体、血管生成素(angiopoietins)、c-myc和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果cAVM血管内皮细胞表达极低水平的Tie1和Angl，但VEGF、Tie2、Ang2、c-myc和PCNA表达上调，并随cAVM分级升高而递增，与对照组及组间比较差异有显著性(P人脑动静脉畸形血管内皮细胞的体外培养和VEGF、Tie受体及血管生成素表达目的为获取较纯净的脑动静脉畸形(cAVM)血管内皮细胞，探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)、Tie受体及血管生成素(angiopoietins)在cAVM病变中的作用。方法组织块贴壁法对cAVM血管内皮细胞进行培养和形态学观察。采用免疫组化(ABC法)检测内皮细胞第八因子相关抗原(FⅧ-RA)、VEGF、Tie1、Tie2、Ang1、Ang2阳性表达。结果相差显微镜下，培养的活细胞具有单层“卵石样”排列的典型特征。欢迎访问中国微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                  环境和饮食与肠道微生物的关系！中国微生物菌种查询网：近年来，微生物领域研究发展迅速，提出了有关人类和动物体内微生物的新知识和新问题。一项新的研究通过使用DNA分析来研究饮食、环境和微生物之间的关系，对这一领域的基础知识进行了补充。该研究的diyi作者、布朗大学生态学和进化生物学助理教授、前普林斯顿大学的博士后研究员Tyler Kartzine说：“环境变化会影响动物吃什么，从而以多种方式影响它们的肠道微生物和机体健康。这项基于DNA研究的创新方法最终可能也会为理解人类肠道微生物提供新的途径。”这项研究发表在美国国家科学院院刊》(Proceedings of The National Academy of Sciences)上。研究人员收集并分析了非洲大草原上33种食草动物的1000多个粪便样本。这些食草动物中既有矮小的羚羊，又有巨型的长颈鹿和大象。为了在以往研究的基础上开展进一步工作，来自布朗大学和普林斯顿大学生态学和进化生物学部门的科学家们以及肯尼亚国家博物馆的植物学部门的工作人员组成了一个研究团队，分析了来自自然栖息地的多种物种样本。大部分的野外工作是在位于肯尼亚的穆帕拉研究中心（Mpala Research Centre）完成的，该中心由普林斯顿大学与史密森学会（Smithsonian Institution）、肯尼亚国家博物馆和肯尼亚野生动物服务机构合作管理。该研究的作者之一、普林斯顿大学生态学和进化生物学副教授Robert Pringle说：“粪便样本为野生动物研究提供了一个窗口，通过粪便我们可以了解到它们的饮食、肠道微生物乃至体内寄生虫的种类。我们这才刚刚起步，而基于DNA技术的野生动物生态学方法可以帮助我们实现过去很难进行的研究。”通过分析样本中的DNA来推断动物的饮食和肠道微生物，研究人员得出了三个主要结论。首先，他们发现近亲物种有着相似的肠道微生物，饮食结构也在一定程度上较为相似。其次，饮食结构不同的物种（以及同一物种内的不同个体）往往具有不同的肠道微生物。zuihou，研究发现，如果动物的饮食结构随季节而变化，那么它们的肠道微生物往往也会出现季节变化。研究小组还惊奇地发现，牛、羊、山羊、驴和骆驼等家养动物的肠道微生物随季节的变化比野生动物肠道微生物的变化更大，即使与饮食相似的亲缘关系最密切的野生动物相比也是如此。Kartzinel和他的同事们想要探索为什么某些物种的肠道微生物对季节变化更敏感，提出了三个可能的原因来解释家畜和野生动物之间的微生物组差异：家畜受到了驯化，牧民会引导家畜获得zuijia食物和水源，以及夜间家畜在畜栏中能够得到保护。研究人员过去通过两种方式来研究动物的肠道微生物：一种是研究人员进行了“种间”研究，检查几种代表不同物种的动物的肠道微生物，例如比较绵羊和奶牛的肠道微生物；另一种是进行“种内”研究，比较了不同季节、同一物种的更多动物的肠道微生物。Kartzinel指出，新研究中使用的方法可以进行更深层次的分析。他和同事分析了来自同一环境中许多不同物种的个体样本的DNA以评估其饮食结构，因此他们能够同时进行物种间和物种内的研究。以前的种间研究倾向于发现亲缘关系密切的物种有更多相似的肠道微生物，而种内研究则发现季节影响动物的肠道微生物。目前的研究为这些发现增添了更多的细微差别。Kartzinel说：“我们发表的研究成果开始将这些发现联系起来，使它们之间的关系不再分裂。例如，肠道微生物的季节变化并非一个单纯的‘有’或者‘没有’的问题，而是存在一梯度差异——有些肠道微生物对季节变化的响应很大，另一些则很小。”研究中产生了各种的附加问题。例如，微生物组的季节敏感性是健康的信号还是亚健康的信号？Kartzinel说：“在环境变化时，善于适应环境的变化的动物在压力下改变了它们的饮食和肠道微生物以生存下来。”Kartzinel和他的同事们还希望更进一步，确定到底是动物的饮食结构还是微生物对环境更敏感。他说：“一种植物在一个季节为动物提供多汁的果实，而在另二个季节只提供耐嚼的嫩枝。如果动物在两个季节都吃这种植物，我们的方法不会察觉到动物的饮食有任何变化，但动物的肠道微生物会。”他还想要通过实验来确定饮食和肠道微生物更替对野生动物健康的重要性。他问道：“在这个不断变化的环境里，草食动物微生物群的敏感性是否有助于它保持健康的饮食？又或者其他的条件会在动物生存决策中占据上风？因为我们研究的是几种濒临灭绝的物种，还有与人类紧密相关的家畜，所以必须考虑到这些可能性。”Kartzinel说：“如果微生物组确实会对动物的健康和行为产生重大影响，那么它可能影响整个食物网和生态系统，因为它将决定谁能生存。”他补充说，他们的团队正在与更多的合作者一起，试图探讨这项研究对人类的可能影响。Kartzinel说：“生物医学领域对能否以及如何管理人类肠道微生物以改善健康、压力和营养非常感兴趣。我们认为，结合一整套的研究方法，这些将饮食和微生物组联系起来的遗传学方法可以为野生动物生态学家和生物医学研究者提供更多信息。”

             化妆品中微生物的控制指标和检测标准！微生物对化妆品的污染，不仅影响产品本身的质量，而更严重的是它危及消费者的健康和安全。因此世界各国极为重视，各国都制定了化妆品中微生物的卫生标准，将化妆品中微生物的污染状况作为产品的一个质量指标，以防止和控制微生物对化妆品的污染，这对提高化妆品的质量和保证化妆品的安全性具有重要的意义。⒈化妆品中微生物的控制指标关于化妆品中微生物的控制指标，世界上并无统一标准，各国都是依据本国的情况自己制定化妆品的微生物指标。需要说明两点：⑴在各国关于化妆品中微生物控制指标的diyi项是细菌总数指标，如我国规定在眼部、口唇、口腔粘膜用化妆品以及婴儿和儿童用化妆品细菌总数不得大于500个／ml 或500个／8，其他化妆品细菌总数不得大于1000个／mi 或1000个屯。    它是指在单位容量(m1)(或单位重量(g))中的细菌个数，这里讲的细菌计数单位是个。而在实际检测化妆品的细菌总数时，活的细菌总数是通过对检测试样处理后，在一定条件下培养生长出来的细菌菌落形式单位(colony—formingunits，以cfu 表示)的个数。    菌落(colony)它是微生物细菌存在的一种特有形式，是指细菌在固体培养基上发育而形成的能被肉眼所识别的生长物，它是由数以万计的相同细菌聚积而成的，，故又有细菌集落之称。所以菌落总数是指每g 或每m1化妆品中所含的活菌能于固体培养基上，在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。基于化妆品试样中的细菌细胞是以单个、成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在，因而在培养基平板上出现的菌落可以来源于细胞块，也可以来源于单个细胞，因此所计得需氧及兼性厌氧菌落的数字不应以细菌总数(或活菌数) “个”表示，而应以单位质量(g)或容量(m1)的菌落形成单位数，即以cfu／8(m1)表示。而一般仍是以个(m1)表示，只是在实际检测中，检得的实际上是cfu／g(m1)。   ⑵在各国关于化妆品中微生物的第二项指标是，化妆品中不得含有致病菌。关于致病菌的定义在微生物学中应是很清楚的，但其内涵所包括的细菌是很广的。而在化妆品中的微生物这项指标中，所指的致病菌应是特定的确定的细菌。特定菌(Specia microor—ganism)是化妆品中不得检出的特定微生物，包括致病菌和条件致病菌。有关特定菌的确定，目前世界尚无统一规定，各国有所不同。如美国规定的特定菌就有10种：大肠杆菌、克雷伯氏菌、沙门氏菌、变形杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜麦芽假单胞菌、多嗜假单胞菌、无硝不动杆菌、粘质沙雷氏菌；欧洲一些国家和日本规定的特定菌为3种，：绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌(日本为大肠菌群)；世界卫生组织WHO 规定的特定菌为两种：绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌；我国规定的特定菌是3种：绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和粪大肠菌群。我国与日本规定的特定菌相同。⒉化妆品中微生物的检测标准我国颁布的化妆品卫生标准，是我国化妆品的卫生法规，全国化妆品生产和销售企业等部门必须执行，卫生监督部门应进行严格监督。为了执行和监督标准的实施，对化妆品进行微生物检验是必不可少的，为了规范化妆品的微生物检验，我国颁布了一系列微生物检验标准方法，计有：化妆品微生物标准检方法——总则、细菌总数测定、粪大肠菌群、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌等5项标准(GB 7918．1—5．87)。这些标准的实施，使我国化妆品的微生物污染善有明显改善，但化妆品的微生物污染仍是影响我国化妆品产品的质量和安全性的一个重要因素。据某沿海地区卫生部门对该地区623种化妆品进行微生物检测，结果是其中细菌总数超过标准有73种，超标率为11．72％；粪大肠菌群检出有14种，检出率为2．25％；绿脓杆菌检出有14种，检出率为2．25％。由此可见我国化妆品的微生物污染状况不容乐观，还必须大大改善化妆品的卫生状况，提高化妆品的卫生和安全性水平。什么是微生物？微生物是泛指肉眼看不到或看不清楚的微小生物。它们体积微小，结构简单。它与人类关系密切，它既能造福于人类，也能给人类带来毁灭性的灾难。微生物学在解决当代重大社会问题中起着重要作用。例如微生物采油技术中，它发挥令人难以想象的巨大作用。它可降低原油的黏度,增加原油的流动性,从而大大提高了原油的采收率。此种技术成本低,设备简单,不伤害地层,不污染环境,而且效益显著。1995～2000 年,斯诺克尔石油技术公司实施该技术且获得很好的效益。而日本则把光合菌、乳酸菌、酵母菌、发酵丝状菌、放线菌等功能各异的80 多种微生物组成的一种活菌制剂。这些微生物组合在一个统一体中，互相促进，共同构成一个复杂而稳定的具有多元功能的微生态系统，可抑制有害微生物，尤其是病原菌和腐败细菌的活动，促进植物生长。该技术在自然农法中广泛应用。随着国民经济的发展，微生物的应用也越来越广泛。在生物制药、能源、环保、食品、工业等方面，微生物都扮演着重要的角色。     然而，微生物在给人类提供诸多好处的同时，也带来了许多不可忽视的负面影响。我们用的化妆品含有多种营养成分,为微生物的生长提供了适宜的环境,在生产、储藏和使用过程中极易受到微生物的污染。化妆品中常见细菌主要以芽胞杆菌属、假单胞菌属、葡萄球菌属为主,这几个属的细菌在自然界分布广泛,对环境抵抗力较强,污染机会较多。真菌主要有木霉属、曲霉属、根霉属、脉孢菌属、短梗霉属、假丝酵母属和红酵母属等,这些菌也是自然环境中常见的霉菌和酵母。受到微生物污染的化妆品不但产品腐败变质,更重要的是致病微生物污染会对人体健康产生危害。别外饮水机污染也已成为不可忽视的卫生问题,有的饮水水质量已经远远达不到合格饮用水的卫生质量,所谓的纯净水、矿泉水等已不能直接饮用,主要是被大肠杆菌等微生物污染。这种状况很可能加重夏秋季肠道病的流行。研究人员还指出，室内空气也存在着微生物污染，它可引起人体出现眼刺激感、哮喘、过敏性皮炎、过敏性肺炎和传染性疾病，重者甚至因感染而死亡。室内建筑材料和家用电器是室内空气的主要污染源，它不仅能释放出对人体有害的化学物质，同时也为微生物的孳生提供了有利的条件。    由此可见，微生物与人类的关系非常密切，它不仅造福与人类，也会伤害人类。因此我们应该正确地认识微生物，并利用它保护环境、造福人类，这是我们的期望也是我们每个人义不容辞的责任。欢迎访问中国微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

               微生物益生菌发酵鱼饲料的好处与作用！中国微生物菌种查询网：近年来随着微生物发酵工艺的发展，发酵饲料引起业界广泛的兴趣，微生物发酵饲料与传统饲料相比具有其自身独特的优越性，符合当前健康环保型渔业发展的要求。自上世纪40年代抗生素被发现以来，其在畜禽、水产饲料中被广泛应用，然而随着抗生素的频繁使用，其产生的副作用也日益凸显出来，如不加以限制将会给人类健康带来巨大的灾难。新型无抗发酵饲料很好地解决了促进动物生长和无残留、无污染之间的矛盾。微生物发酵饲料，是指在人为可控制的条件下，以植物性农副产品为主要原料，通过微生物的代谢作用，将植物性、动物性和矿物性物质中的抗营养因子分解、合成，产生更能被畜禽采食、吸收养分和无毒害作用的生物饲料或饲料原料。国外 20 世纪 60 年代就开始研究微生物发酵饲料，并逐渐形成产业化生产，我国于上世纪90年daikai始微生物发酵饲料的研究(主要是酵母蛋白饲料的生产)，由于各方面条件的限制，在近几年对微生物发酵饲料才有了真正深入的研究和发展。一、微生物发酵饲料的优越性⒈提高饲料利用率，降低养殖成本发酵饲料通过生化反应,有效的把饲料原料分解转化成葡萄糖和氨基酸，缩短了饲料在动物消化道内的转化链,进而使得饲料中各种有效的成分迅速、有效的被吸收利用,可提高饲料的利用率。发酵后粗脂肪、有机酸的增加又增加了日粮中的能量,也是提高增重和饲料转化率的因素。发酵饲料的多种微生物活菌能大量吸收动物难以利用的有机氮、无机氮，使之转化成为多种菌体蛋白质即蛋白饲料，显著增加了饲料营养成分，降低了饲料成本。⒉改善饲料的适口性饲料在发酵后，产生天然的酸香味,能刺激动物的食欲，促进消化液的分泌，提高消化酶的活性，加速饲料营养成分的分解，从而促进营养物质的吸收，使得所养鱼虾采食量和采食速度全面提高。⒊改善水体环境由于水产养殖的特殊性，多种有益菌在投放到水体中，通过氧化、氨化、硝化、反硝化以及固氮作用，快速降解水体中积累的大量有机物（如残余饵料、养殖动物的排泄物）和动植物残骸产生的有毒有害气体(如氨气、硫化氢等)，降解过程中能够产生的多种直接被水中浮游植物充分利用的无机盐，水中大量繁殖的浮游植物又能进一步降解有害物质，改善养殖水体的各项指标，从而净化水质。促进了鱼虾的生长。水产养殖动物长期生活在水中，受环境因素的影响较大，接触到有害菌的机会也多。在鱼虾肠道内建立一个良性循环的微生物系统，是抵御病原性感染的最有效方式之一。⒋发酵脱毒，饲料更安全近年来某些研究表明，某些乳酸菌可抑制霉菌的生长和产毒，嗜酸乳杆菌可抑制寄生曲霉的孢子萌发。另外，多数情况下微生物的代谢产物可以降低饲料中毒素的含量。据报道，曲霉属、霉属等 5 个菌株可以有效地降低发酵棉粕中游离棉酚的含量。可见，发酵饲料比未发酵饲料的有害物质含量更低，对于被日益关注的食品安全问题更具意义。二、微生物发酵饲料的作用机理微生物发酵饲料的作用主要体现在两个方面，一是利用廉价的农业和轻工副产物生产高质量的饲料蛋白原料，二是获得高活性的有益微生物。这些微生物制品的应用，一方面可以提高饲料的转化率,促进畜禽生长；另一方面可以调节动物的微生态平衡,提高动物的健康水平。还有一些活菌剂可以用于治疗动物疾病。在水产动物养殖中推广应用微生物发酵饲料,可以减少抗菌素的使用，有利于生产安全食品,提高产品出口的竞争力。⒈补充有益菌,调节动物的微生态平衡健康动物肠道内生长着各种各样的微生物群落，各种微生物群落之间相互依存、相互制约，构成畜禽肠道内微生态系统的平衡，建立一个正常且平衡良好的肠道微生物区系对抵御病原性微生物感染具有十分重要的意义。由于微生物之间存在着相互作用，某一生态系统中现存的微生物会阻止新的有机体在这一部位的入侵，有益菌通过竞争性抑制作用阻止有害微生物在肠粘膜附着与繁殖。因此对那些菌群形成迟缓或有障碍的动物服用微生物饲料有着十分重要的意义。而对于成年动物由于许多微生物只能在肠道内存活相当一段时间，必须连续服用活菌制剂才能保持某一微生物在肠道内的定植。⒉化学屏障作用通过有益微生物如乳酸菌类产生的有机酸(乳酸、丙酸、乙酸)使消化道内pH值降低，抑制其他病原微生物生长，环境pH值为4时大肠杆菌和沙门氏菌不能增殖，起到了维持肠道菌群平衡促生长的作用，同时消化道内的酸性环境促进了矿物质元素钙、磷、铁以及维生素D的吸收和利用。⒊产生有益代谢物,抑制和杀死有害菌有益微生物可产生肽细菌素、酶类及少量无机物，可以抑制有害菌的生长或阻止有害菌毒素在上皮细胞的粘附和侵入。如乳酸菌和链球菌产生的乳酸链球菌肽能抑制沙门氏菌、志贺氏菌、绿脓杆菌和大肠杆菌的生长；嗜乳酸杆菌和保加利亚乳杆菌可以产生少量过氧化氢抑制革兰氏阴性病原菌的生长；乳酸杆菌和双歧杆菌产生的胞外糖苷酶可以阻止细菌毒素的入侵。⒋具有营养作用,促进动物生长微生物发酵饲料中的有益菌本身即为一种高蛋白物质，同时在动物肠道内代谢可产生多种有助于动物营养消化的有益因，从而促进水产动物的生长发育和增重.如芽孢杆菌能分泌多种消化酶(蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等)促进营养物质的消化与吸收；酵母菌可以产生氨基酸、多种维生素(Ｋ、Ｃ、Ｂ1、Ｂ2、泛酸、烟酸、生物素、肌醇和叶酸等)供动物体利用，酵母菌还可以促进植酸酶的产生，提高对磷的利用率。⒌防止有害物质的产生微生物发酵饲料促进营物质的消化吸收，减少了氨和其他物质的产生。研究表明：饲喂微生物发酵饲料可减少内容物、粪便、门静脉中氨的含量以及肠道中甲酚、吲哚、3-甲基吲哚等腐败物质的含量，减少粪便的臭味，净化环境。⒍提高机体免疫功能发酵饲料中的有益微生物可以作为一种非特异免疫调节因子，通过细菌本身或细胞壁成分刺激并激活宿主免疫细胞，促进吞噬细胞活力或作为佐剂发挥作用。有益微生物还可以发挥特异性免疫功能，增强动物体内Ｂ细胞产生抗体的能力。直接饲用微生物通过促使机体发生体液免疫和细胞免疫，提高畜禽抗体水平，增强免疫功能，及时杀灭侵入机体内的致病菌，从而防止疾病的发生。实验发现乳酸杆菌能够增强机体的免疫能力,一些益生菌能够影响人体免疫系统的应答能力,其影响能力随菌体的不同而变化。三、微生物发酵饲料的展望微生物种类众多，资源丰富，开发潜力巨大，同时发酵原料来源广泛,特别是可以利用农产品废弃物，如各种农作物秸秆、糠、木屑、蔗渣、薯渣、甜菜渣及药渣等，通过微生物发酵，内能把大量的基质转化为有用产品，可以减少环境污染，同时又变废为宝，得到产品价格低廉,易于生产推广。为了生产质优价廉的发酵饲料，还需要研发一些规模较大，自动化程度较高的固体发酵设备，不断发掘新的微生物饲料菌种和改良现有的菌种，特别是纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶等酶类对发酵饲料很重要，因此筛选此类重要酶制剂的菌种是微生物发酵饲料的重点。随着当前饲料行业的蓬勃发展，饲料逐步向低药、低残留发展，水产品也渐渐迈向绿色产业，因此，生物饲料也必然成为大势所趋．随着分子生物学、微生物学、发酵工程学、仪器科学、自动化科学等学科的发展，也将使微生物发酵饲料成为一种新型动物能源并广泛应用，造福人类。

             分享|关于预防李斯特菌污染食品的风险提示！中国微生物菌种查询网：近年来，欧美国家发生了多起由单核细胞增生李斯特菌引发的食物中毒，该菌已成为威胁食品安全的一个重要因素。单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogens，简称LM）是李斯特菌属中引起人类食源性疾病z常见的种，其在自然界中广泛存在，易通过各种途径发生播散，可造成多种食品的污染。人和动物食入该菌污染的食品后可引发李斯特菌病。LM感染人和动物可引起脑膜炎、败血症、心内膜炎、流产等疾病，也可造成孕妇死胎，发病者的病死率可高达30％。鉴于我国食品中LM的广泛存在，应对LM对我国人民的健康可能带来的危害进行高度关注。为避免LM污染食品中毒事件的发生，食药总局现发出以下风险提示。一、食品生产经营企业应积极于各种食品的保鲜和储存过程中推广冷藏技术（控制在-5℃以下）。其次是建立良好的生产操作规范（GMP）和卫生操作规范（GHP），并使之得到较好的应用和执行，如设计并维护针对加工设施设备的清洁消毒方案、引入“食品栅栏技术”减少即食食品在存储期间LM存活、繁殖机会和加强食品操作者的教育和培训等方式，将LM污染食品中毒事件发生的可能性降到z低水平。二、公众应提高自我保护意识，养成良好的卫生习惯，可有效避免LM污染食品中毒事件的发生。如不断改善家庭饮食和食品储存习惯，定期对冷藏柜进行清洗消毒，同时注重在食用冰箱储存食品前进行适当加热，使食品中心温度达到70℃并持续2分钟以上，同时避免高危人群（特别是婴幼儿、孕妇、老人和免疫力低下人群）食入加热不彻底的高危食品，从而降低李斯特菌病发生的风险。中国微生物菌种查询网隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，成立于二〇一四年十月份，是一家专业提供中国微生物菌种，标准菌种，质控菌株,ATCC菌种,细胞系以及培养基等产品的查询网站！自成立至今，已提供各类微生物菌种、细胞、培养基数量达四万余份，接待咨询客户数量5万余人次，成交合同数量2万余份！是国内微生物菌种及细胞信息Z全的网站！ 我们拥有自主研发能力，提供的ATCC菌种达15000余份,ATCC各类细胞系达3000余份,保藏中心涵盖菌种资源更达数十万余份！除此之外，我们还拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到Z终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得Z优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！为更好服务社会，创造双方利益较大化，中国微生物菌种查询网提供的产品：质控菌种，标准菌种，中国微生物菌种4万多株，细胞系/株1万多株其中金黄色葡萄球菌，大肠埃希氏菌（大肠杆菌），沙门氏菌，黑曲霉，铜绿假单胞菌，枯草芽孢杆菌，链球菌，白色念珠菌，志贺氏菌等为常用菌株。欢迎您的咨询！

                    玫瑰红钠琼脂培养基的质量研究！一、概述玫瑰红钠琼脂培养基是一种选择性分离培养基，在pH酸性条件下使用，选择性抑制细菌生长，促进真菌的生长。玫瑰红钠琼脂培养基可用于霉菌和酵母菌计数。蛋白胨提供碳源和氮源；葡萄糖提供能源；磷酸二氢钾为缓冲剂；硫酸镁提供必须的微量元素；玫瑰红钠作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长，并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长。二、成分(g/L)蛋白胨5.0磷酸二氢钾1.0玫瑰红钠0.0133硫酸镁0.5葡萄糖10.0琼脂14.0pH值6.0±0.225℃三、用法称取本品31.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟备用。四、质量控制在25－28℃培养48-96小时。五、微生物灵敏度试验按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置20-25℃需氧培养48-72小时。注：回收率计算时，用SDA琼脂做对照培养基。六、质量研究谢文等人研究了中国药品检验用玫瑰红钠琼脂培养基整体质量水平,为《中国药典》等药品质量标准的修订提供技术支持。方法:使用4个质控菌对国内外7家培养基生产商的玫瑰红钠琼脂培养基进行质量评价。待评价的玫瑰红钠琼脂培养基为5家中国培养基生产商和2家国外培养基生产商的市售商品，随机编号为A、B、C、D、E、F、G，其中F和G为国外公司产品。玫瑰红钠琼脂对照培养基(批号135005-201103)来自中国食品药品检定研究院。沙氏葡萄糖琼脂培养基(批号1131295)购自OXOID(英国)公司。0．9%氯化钠注射液(批号130220403)购自石家庄四药有限公司。结果:不同培养基的pH存在差异。7个生产商的培养基对白色念珠菌和黑曲霉的生长率均大于0.7,生长率均值差异无统计学意义(P>0.05)。7个培养基和对照培养基对金黄色葡萄球菌的选择因子均大于6;8个培养基产品对大肠埃希菌的选择因子表现出差别,A、B、C、E、G和对照培养基无抑制性(选择性);D和F表现出一定选择性。结论:不同厂家的药品检验用玫瑰红钠琼脂培养基的促生长能力表现一致;不同厂家产品的pH和对大肠埃希菌的选择性存在差异。中国药品标准应对计数用玫瑰红钠琼脂培养基的pH和选择性做出具体规定。《中国药典》玫瑰红钠琼脂培养基没有规定使用的pH，受试的7个培养基产品中有3个产品在包装标签上注明使用时的pH范围，1个中国产培养基注明pH范围6．0±0．2，两进口产品分别注明pH范围:6．0±0．2，7．2±0．2。本研究结果显示5个中国产培养基pH呈现出较大差异。研究表明，pH会影响真菌的菌丝体生长和孢子的形成，玫瑰红钠琼脂培养基在pH酸性条件下使用，选择性抑制细菌生长，促进真菌的生长。也有学者研究得出，使用抗菌药的中性pH培养基比酸性pH条件有利于真菌生长，酸性条件下会导致培养后期会抑制真菌的生长，或未能抑制细菌的生长，会限制霉菌菌落的大小。所以，不同pH的培养基会影响检测结果的稳定性、可比性，《中国药典》应对玫瑰红钠琼脂培养基使用pH范围做出明确规定，培养基生产商应注明其产品的pH，让使用者了解培养基性能并根据其使用目的做出选择。《中国药典》中玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌及酵母菌的计数，配方中的玫瑰红是一种指示剂，也是具有一定抑菌作用的选择性成分，能抑制细菌的生长和限制快速生长霉菌菌落的大小和高度。玫瑰红钠琼脂培养基在pH酸性条件下使用，也会抑制细菌生长。由于配方中不加抗菌药，该培养基对细菌的抑制不彻底，在特殊情况下也会以该培养基上的细菌数作为细菌计数结果，所以，培养基选择性的强与弱会对检验结果产生不同影响，药品检验者在进行培养基适用性检查时也要测定其选择性是否与对照培养基一致。配方中不加抗菌药素的玫瑰红钠琼脂培养基的选择性可能存在不足。在《中国药典》以外的培养基标准中，玫瑰红钠琼脂培养基一般都添加抗菌药，是一种选择性强的霉菌及酵母菌计数培养基，《中国药典》微生物限度检查中该培养基也会用于细菌计数，配方中不添加抗菌药，这可能会导致该培养基对细菌生长的抑制能力不足，本研究结果也证明这一点。北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                 微生物在乳品中的污染及防治措施！百欧博伟生物：随着人们生活质量的逐渐提高，乳制品已经成为人们日常生活中的必需品，逐渐步入广大人民群众的日常生活当中。尤其是近些年来乳品加工技术得到了长足的发展，但在微生物污染与控制上，仍需要进一步的完善和改进。一、乳品中微生物的种类常见的微生物包括：细菌、酵母菌、霉菌等三大类。 ⒈细菌乳品中常见的细菌重要有沙门氏菌、大肠杆菌、蜡状芽孢杆菌、李斯特菌、乳杆菌、链球菌等。⒉酵母菌乳品种常见的酵母菌有汉氏酵母、脆壁酵母、假丝酵母、原酵母属等。⒊霉菌乳品中主要霉菌有毛霉、根霉、曲霉等，大多霉菌属有害菌。二、乳品微生物的入侵途径微生物具有极强的适应能力，尤其是生鲜牛乳中微生物会按照外部条件变化而产生相应的变化，其数量会受到一定的影响，乳品的加工和销售环节是除了贮藏和运输等基本环节外，最易受微生物污染的环节。因此也可以说微生物污染是无处不在的，也并不夸张，微生物入侵乳品的方法也是各种各样的。三、乳品微生物的防治措施 ⒈原料乳中的微生物控制 ⑴控制牛体、牛舍、周边环境的卫生，建立和实施挤奶机械、输奶管线及储奶设施的清洗消毒管理制度和卫生验证程序。保证外界环境对牛奶不会造成严重污染。⑵落实奶牛每年的两疫检疫及奶牛的日常体检，确保奶牛的健康，避免牛乳中含有微生物毒素（主要来源是牛患有化脓性乳房炎，使得细菌在牛乳中繁殖产生霉素或者是牛食用了霉变的饲料使得乳中含有黄曲霉毒素）。奶牛饲料不得腐烂，细菌总数不得过高，不含或少含致病菌，不含毒性化学物质，不含放射性物质等。 ⒉原料乳的储存和运输过程中的微生物控制 ⑴牛乳挤取后立即过滤到经消毒的容器中，并迅速冷却至4℃以下，减少牛奶后期微生物增殖及污染。⑵牛奶在储存期间可适当搅拌，杜绝激烈搅拌，减少牛奶中空气含量。⑶运输中要尽量减少颠簸、牛乳剧烈晃动而致使牛乳温度上升，牛乳zuigao温度不能超过8℃。⑷牛乳挤出后应在十二小时内运送到工厂加工。⑸运输途中，尽量避免外源性污染。 ⒊牛乳加工过程中的微生物控制 ⑴减少生鲜牛乳的存放时间，及时进行净乳、巴氏杀菌，耐热芽孢总数应控制在100 CFU/每毫升以内。⑵合理设定UHT灭菌机组的灭菌参数，既要保证灭菌效果又要保证营养成分损失最小.⑶尽量减少添加剂中的芽孢菌总数，对添加剂中芽孢含量较高的产品要进行预杀菌，如生产巧克力牛奶时，要对巧克力粉（块）进行预杀菌。⑷经常检查用于包装或管线消毒的化学消毒剂浓度是否足够（如双氧水，浓度要求在30%--50%），消毒剂对包材内表面必须涂抹均匀且侵润良好，包装材料在存放过程中应密封贮存以免微生物污染，确保CIP清洗效果良好。⑸监控和保持罐装过程中的无菌环境不受破坏。⑹包装过程中，按设备操作要求抽检包装的封口质量，避免因封合质量不合格，导致外源性微生物后期污染。 ⒋成品牛奶在运输和销售过程中的卫生要求 牛奶一般采用多层复合材料包装，该材料具有隔光隔氧及防水的功能，但机械强度较弱，因此对此产品而言，储运过程中要防止碰撞挤压，减少对包装材料的机械损伤。北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

               小鼠肺大动脉内皮细胞提取物的生理功能！一、背景小鼠肺大动脉内皮细胞提取物是从小鼠肺大动脉内皮细胞提取的，小鼠肺大动脉内皮细胞从正常小鼠肺大动脉组织制备。小鼠肺大动脉内皮细胞提取物可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。二、生理功能内皮细胞是一薄层的专门上皮细胞，由一层扁平细胞所组成，呈多边形，细胞的边缘呈锯齿状，相互嵌合。它形成血管的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。血管内皮细胞（EC）位于血浆与血管组织之间，它不仅能完成血浆和组织液的代谢交换，并且能合成和分泌多种生物活性物质，以保证血管正常的收缩和舒张，起到维持血管张力，调节血压以及凝血与抗凝平衡等特殊功能，进而保持血液的正常流动和血管的长期通畅。抗凝血材料表面内皮细胞化，可以减少血栓的形成和血小板激活。完整内皮细胞化是zuihao的抗凝血，表面血管内皮组织是天然的抗凝血组织。内皮细胞膜上有天然的抗凝血成分，比如肝素，前列腺素（PGI），一氧化氮等，内皮细胞能够合成和分泌多种内皮衍生舒张因子。内皮细胞系指血管、淋巴管的内膜上皮将内腔面覆盖的细胞。多数是单层扁平上皮属中胎叶性的上皮。血液循环和组织中大单核的游走的吞噬细胞有人认为是来自增生的血管内皮。小鼠肺大动脉内皮细胞分离自肺大动脉组织；肺大动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中，把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉，经肺门入肺。肺动脉干位于心包内，为一粗短的动脉干。起自右心室，在升主动脉前方向左后上方斜行，至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。左肺动脉较短，在左主支气管前方横行，分二支进入左肺上、下叶。三、应用用于Ⅰ.TIPE2负性调控VSMCs功能抗动脉粥样硬化的机制Ⅱ.TIPE1蛋白在小鼠组织及TIPE1、TIPE2 mRNA在细胞系的表达谱检测动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是危害人类健康的常见疾病,以血脂在大动脉内膜沉积、血管平滑肌细胞和结缔组织增生、内膜纤维性增厚及粥样斑块形成为主要特征,至今其发病机制仍不十分清楚。在AS发生发展过程中,血管组成细胞包括内皮细胞(Endothelial cells,ECs)、单核/巨噬细胞及血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)与相关细胞因子构成复杂的网络,各种因素造成的ECs损伤、单核巨噬细胞摄入脂质后活化是AS发生的始动因素,而随后引起的VSMCs功能紊乱包括表型转换、细胞因子分泌、迁移增强、异常增殖以及吞噬脂质后泡沫化,则是动脉粥样硬化斑块形成的关键步骤。此外,在晚期斑块中VSMCs凋亡对斑块稳定性具有重要影响,纤维帽变薄、斑块不稳定性增加以及最终斑块破裂都与VSMCs的大量凋亡密切相关。可以说,在AS发生发展的整个过程中,VSMCs(?)台终扮演着不可忽略的角色,其功能改变不仅影响AS斑块形成,也对AS疾病转归有着举足轻重的作用。因此,对VSMCs功能调控的研究对于揭示AS及其他血管相关疾病发生机制及防治有重要的理论意义和潜在的应用价值。以动脉粥样硬化发生中血管平滑肌细胞为切入点,利用TIP E-/-鼠、ApoE小鼠、C57BL/6鼠、细胞模型,系统地探讨了TIPE2对血管平滑肌细胞功能的调控作用。TIPE2是新型免疫负调控分子,选择性表达于淋巴组织、炎症组织、造血细胞以及具有内分泌功能的组织细胞和泌尿生殖细胞,对固有免疫及适应性免疫进行负调控,维持机体免疫稳态。,TIPE2可以通过调控巨噬细胞功能抑制炎症反应,抵抗AS发生发展,是一个新鉴定的AS保护性因子。VSMCs功能紊乱贯穿AS的整个病程,是AS发生发展的一个关键因素。那么,作为AS保护性因子,TIPE2是否对血管平滑肌细胞功能也有影响。北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网自设细胞系板块，是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                        蛋白质、氨基酸分解试验方法！⒈吲哚试验(1)原理:有些细菌具有色氨酸酶，能分解培养基中的色氨酸，生成吲哚，吲哚与试剂对二甲氨基苯甲醒作用，形成玫瑰蚓味而呈红色。(2) 方法: 将待检菌接种至蛋白脏水培养基中， 35℃孵育1~2 日，沿管壁徐徐加入柯凡克( Kovac)试剂0.5 ml，即刻观察结果。(3) 结果判断: 两液面交界处呈红色者为阳性，无红色者为阴性(图3-31)。                                  ⒉脲酶试验(1)原理: 某些细菌能产生腮酶，分解尿素形成氨，使培养基变碱，酣红指示剂随之变红色。(2) 方法: 将待检菌接种于含尿素的培养基中，35℃孵育1~4 日，观察是否产生红色。(3) 结果判断: 呈红色者为服酶试验阳性(图3 - 32) 。                              ⒊氨基酸脱呈交酶试验(1)原理: 有些细菌能产生某种氨基酸脱殷酶，使该种氨基酸脱去援基，生成胶(如赖氨酸→尸肢，鸟氨酸→腐肢，精氨酸→精胶) ，从而使培养基变碱性，指示剂变色。(2) 方法:挑取纯菌落接种于含某种氨基酸(赖氨酸、鸟氨酸或精氨酸)的培养基及不含氨基酸的对照培养基中，加元菌石蜡油覆盖，35℃孵育4 日，每日观察结果。(3) 结果判断: 若仅发酵葡萄糖显黄色为阴性，由黄色变为紫色为阳性。对照管(无氨基酸)为黄色(图3 - 33) 。                ⒋苯丙氨酸脱氨酶试验(1) 原理: 有些细菌能产生苯丙氨酸脱氨酶，使苯丙氨酸脱去氨基生成苯丙酣酸，与三氯化铁作用形成绿色化合物。(2) 方法:将待检菌接种于苯丙氨酸琼脂斜面，35℃孵育18~24 h ，在生长的菌苔上滴加三氯化铁试剂，立即观察结果。(3) 结果判断:斜面呈绿色者为阳性(图3 - 34) 。                                           北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

               细菌对于碳水化合物的代谢试验方法！细菌对于碳水化合物的代谢试验原理为：由于细菌各自具有不同的酶系统，对糖的分解能力不同，有的能分解某些糖产生酸和气体，有的虽能分解糖产生酸，但不产生气体，有的则不分解糖。据此可对分解产物进行检测从而鉴别细菌。具体试验方法有：①糖类发酵试验是鉴定细菌最常用的生化反应，特别是对肠杆菌的鉴定尤为重要；②葡萄糖代谢类型鉴别试验；③七叶苷水解试验；④淀粉水解试验；⑤甲基红试验；⑥V-P试验；⑦β-半乳糖苷酶试验（ONPG试验）。 　 1.糖（醇、苷）类发酵试验 　 （1）原理：由于各种细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶，故分解糖类的能力各不相同，有的能分解多种糖类，有的仅能分解1～2种糖类，还有的不能分解。细菌分解糖类后的终末产物亦不一致，有的产酸、产气，有的仅产酸，故可利用此特点以鉴别细菌。 　 （2）培养基：在培养基中加入0.5%～1%的糖类（单糖、双糖或多糖）、醇类（甘露醇、肌醇等）、苷类（水杨苷等）。培养基可为液体、半固体、固体或微量生化管几种类型。 　 （3）方法：将分离的纯种细菌，以无菌操作接种到糖（醇、苷）类发酵培养基中，置培养箱中培养数小时至两周后，观察结果。若用微量发酵管，或要求培养时间较长时，应保持湿度，以免培养基干燥。 　 （4）结果：接种的细菌，若能分解培养基中的糖（醇、苷）类产酸时，培养基中的指示剂呈酸性反应。若产气可使液体培养基中倒管内或半固体培养基内出现气泡，固体培养基内有裂隙等现象。若不分解，培养基中除有细菌生长外，无任何其他变化。 　 （5）应用：是鉴定细菌最主要和最基本的试验，特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。 　 2.氧化-发酵试验（O/F试验） 　 （1）原理：细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加的，称为氧化型。氧化型细菌在无氧环境中不能分解葡萄糖。细菌在分解葡萄糖的过程中，可以进行无氧降解的，称为发酵型。发酵型细菌无论在有氧或无氧的环境中都能分解葡萄糖。不分解葡萄糖的细菌称为产碱型。利用此试验可区分细菌的代谢类型。 　 （2）培养基：Hugh-Leifson培养基医学教|育网搜集整理。 　 （3）方法：将待检菌同时穿刺接种两支HL培养基，其中一支培养基滴加无菌的液体石蜡（或其他矿物油），高度不少于1cm.将培养基于35℃培养48h或更长。 　 （4）结果：两支培养基均无变化为产碱型或不分解糖型；两支培养基均产酸为发酵型；若仅不加石蜡的培养基产酸为氧化型。 　 （5）应用：主要用于肠杆菌科细菌与非发酵菌的鉴别，前者均为发酵型，而后者通常为氧化型或产碱型。也可用于葡萄球菌与微球菌间的鉴别。 　 3.β-半乳糖苷酶试验（ONPG试验） 　 （1）原理：有的细菌可产生β-半乳糖苷酶，能分解邻-硝基酚-β-D-半乳糖苷（ONPG），而生成黄色的邻-硝基酚，在很低浓度下也可检出。 　 （2）试剂：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸馏水中，在加入缓冲液（6.9g NaH2P04溶于45ml蒸馏水中，用30% NaOH调整pH为7.0，再加水至50ml）5ml，置4℃冰箱中保存。0NPG溶液为无色，如出现黄色，则不应再用。 　 （3）方法：从克氏双糖铁培养基上取菌，于0.25ml无菌生理盐水中制成菌悬液，加入一滴甲苯并充分振摇，使酶释放。将试管置37℃水浴5min，加入0.25ml ONPG试剂，水浴20min～3h观察结果。 　 （4）结果：菌悬液呈现黄色为阳性反应，一般在20～30min内显色。 　 （5）应用：迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。本实验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。 　 4.七叶苷水解试验 　 （1）原理：有的细菌可将七叶苷分解成葡萄糖和七叶素，七叶素与培养基中枸橼酸铁的二价铁离于反应，生成黑色的化合物，使培养基呈黑色。 　 （2）培养基：七叶苷培养基、胆汁七叶苷培养基。 　 （3）方法：将待检菌接种于七叶苷培养基中，培养后观察结果。 　 （4）结果：培养基变为黑色为阳性，不变色者为阴性医学教|育网搜集整理。 　 （5）应用：主要用于D群链球菌与其他链球菌的鉴别，前者阳性，后者阴性。也可用于革兰阴性杆菌及厌氧菌的鉴别。 　 5.甲基红试验 　 （1）原理：某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸可进一步分解，产生甲酸、乙酸、乳酸等，使培养基的pH降至4.5以下，当加入甲基红试剂则呈红色，为甲基红试验阳性。若细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其他物质（如醇、酮、醚、气体和水等），则培养基的酸度仍在pH6.2以上，故加入甲基红指示剂呈黄色，是为阴性。 　 （2）培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基。 　 （3）方法：将待检菌接种于上述培养基中，培养2～4d，于培养基内加入甲基红试剂，立即观察结果。 　 （4）结果：呈现红色为阳性；橘红色为弱阳性；黄色为阴性。 　 （5）应用：主要用于鉴别大肠埃希菌与产气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性。此外肠杆菌科中沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属等为阳性，而肠杆菌属、哈夫尼亚菌属则为阴性医学教|育网搜集整理。 　 6.V-P试验 　 （1）原理：某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸脱羧产生乙酰甲基甲醇，乙酰甲基甲醇在碱性环境中，被空气中的氧氧化为二乙酰，进而与培养基内蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用，生成红色化合物，则为V-P试验阳性。若培养基中胍基含量较少，则可加入少量含胍基化合物，如肌酸或肌酐等。试验时加入a-萘酚可加速此反应。 　 （2）培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基医学教|育网搜集整理。 　 （3）方法：将待检菌接种于上述培养基中，于35℃培养48h后加入甲液（6% α-萘酚酒精溶液）和乙液（40% KOH溶液），振摇。 　 （4）结果：在数分钟内出现红色为阳性；如无红色出现且于35℃4h后仍如故者即为阴性。 　 （5）应用：本试验常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的细菌，后者通常为阴性。 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得zui优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

               小鼠海马神经元细胞的培养与注意事项！一、背景及概述海马椎体神经元是海马区的主要成分，主要功能是参与近期记忆、情绪及内脏功能调节、是老年性痴呆、癫痫等疾病的主要病灶之一。小鼠海马神经元细胞培养是研究神经细胞生物学特性和外源干扰因素作用(细胞因子)的有效细胞模型，其在神经生物学，发育生物学体外实验研究中已被广泛应用。二、传代培养传代前准备--胰蛋白酶消化--吹打分散细胞--分装稀释细胞--继续培养1)将培养瓶内旧的培养液弃掉，然后用D-Hanks液洗两次，(一定要洗干净，以免影响胰酶的消化作用)。2)加入0.25%胰酶-EDTA消化，25cm培养瓶加0.4ml，37度消化5min，镜下看到细胞变圆，间隙增大。3)立即加含10%FCS的培养液终止消化，用细胞刮刀轻刮，注意，这时候用吸管吹不下来，但是刮刀却很容易刮下来，而且对细胞的损伤极小。4)离心，弃上清，加新的培养液(10%FCS)，小心吹匀，分装入新的培养瓶。三、注意事项1、不要轻易改变培养液，我曾经把MEM换成1640后，细胞传几代后莫名其妙死亡。2、如果想节省消化液，上面第2步可换成3-5mlDPBS洗，主要是去除培养瓶里会影响消化液作用的成分。3、自配消化液一定要调PH（=7.8-8）值，并且注意分装，-20度保存，避免反复冻融，用前37度预热，消化较好较快。4、严格的无菌操作。5、适度消化：消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响，消化过程中应该注意培养细胞形态的变化，一旦胞质回缩，连接变松散，或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。四、相关研究有研究观察枸杞多糖对HT22细胞缺糖缺氧再灌注损伤的影响。方法：构建HT22细胞缺糖缺氧再灌注损伤模型，设正常组、模型组、枸杞多糖100，50和25mg·L-1组，检测细胞存活率；并通过HE染色观察形态学改变；检测细胞内SOD，GSH-PX，MDA，T-AOC；利用流式细胞术检测线粒体膜电位。结果：枸杞多糖100和50mg·L-1组能明显提高细胞存活率，显著改善缺氧缺糖再灌注损伤引起的形态改变；可显著提高细胞内SOD，GSH-PX及T-AOC，减少MDA的产生；改善线粒体膜电位下降。结论：枸杞多糖能够显著减轻缺糖缺氧再灌注损伤引起的HT22细胞过氧化损伤。此外，有研究探索十溴联苯醚(PBDE-209)诱导小鼠海马神经元细胞凋亡的潜在机制。方法原代海马神经元细胞和海马神经元细胞系HT-22用0、6.25、12.5、25、50和100μg/mLPBDE-209处理24h。检测原代海马神经元细胞SOD活性，MDA、NO和GSH的含量，用AnnexinV/PI双染法检测海马神经元细胞系HT-22细胞凋亡情况，用免疫蛋白印迹Westernblot检测Bax、Bcl-2、CHOP、GRP78、PERK和Caspase-12蛋白表达水平。结果染毒组原代海马神经元细胞和HT-22细胞系细胞存活率显著降低(P北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网自设细胞系板块，是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                   铜绿假单胞菌的生物学特性！铜绿假单胞菌属于假单胞菌属，是一种非发酵革兰阴性菌，菌体细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有一根鞭毛，在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。本菌生长温度范围25~42℃，最适生长温度为35℃，特别是该菌在4℃不生长而在42℃可以生长的特点可用以鉴别。需氧生长，在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素。在血平板上会溶血。该菌含有O抗原(菌体抗原)以及H抗原(鞭毛抗原)。O抗原包含两种成分：一种是其外膜蛋白，为保护性抗原；另一种是脂多糖，有特异性。O抗原可用以分型。    细菌的实验室检查及其它检查：1. 标本采集 采自不同感染部位的各种标本，包括血液、尿液、痰标本、脓汁、穿刺液等。还包括来自医院环境中的各种标本如水、空气、物体表面采样等。2. 染色镜检 为革兰阴性菌，菌体细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有一根鞭毛。3. 分离培养 对有正常菌群存在的临床标本或采自环境中的标本应接种选择性培养基如MAC；对无正常菌群存在的临床标本如血液、脑脊液、穿刺液等可接种普通或血琼脂培养基。在普通琼脂培养基上生长18~24h可以见到扁平、湿润的菌落，该菌所产生的带荧光的水溶性青脓素与绿脓素相结合将使得培养基呈亮绿色；在血琼脂平板上生长时可以见到在菌落的周围有溶血环，菌落呈金属光泽；如果是在液体培养基中则呈浑浊状生长，在液体表面形成菌落，而在培养基底部细菌的生长不良。4. 生长实验 该菌在4℃不生长而在42℃可以生长。5. 生化鉴定 该菌能氧化分解葡萄糖但不分解甘露醇、麦芽糖和蔗糖。不产生吲哚、常不液化明胶、可分解尿素，还原硝酸盐为亚硝酸盐并产生氧气。6. 分型(1) 噬菌体分型 所应用的噬菌体现有24株，分型率达90%。(2) 血清学分型 利用O抗原进行分型，目前可分20个血清型。(3) 质粒指纹图分析：此项技术是对同种细菌的不同株进行同源性分析的一种方法。根据细菌携带质粒的情况进行分析。为了更好的服务社会，创造双方利益zuida化，我们特设了中国微生物菌种查询网（www.biobw.org）！专业为各企事业单位，科研院所，各级学校提供微生物菌种产品查询、购买服务！网站主要提供的产品：质控菌种，标准菌种，中国微生物菌种4万多株，细胞系/株1万多株其中金黄色葡萄球菌，大肠埃希氏菌（大肠杆菌），沙门氏菌，黑曲霉，铜绿假单胞菌，枯草芽孢杆菌，链球菌，白色念珠菌，志贺氏菌等为常用菌株。

                    芽胞杆菌的菌体活性与主要应用！一、背景芽胞杆菌系一类能生成芽胞的革兰阳性大杆菌。菌大，长约1.2～7μm，宽0.3～2.2μm，此类菌广泛分布于自然界，尤其在污泥、腐物较多的土壤及下水道中更为多见。其中致病菌有破伤风杆菌、炭疽杆菌、产芽胞杆菌等；非致病菌有多粘杆菌、蜡样杆菌、嗜热脂肪杆菌等。芽胞杆菌对外界环境抵抗力强，致病菌多能引起严重疾病。1996 年，van Waasbergen 等首次发现芽胞杆菌Bacillus sp. SG-1 的芽胞具漆酶样(Laccase-like)活性，次年发现球形芽胞杆菌的芽胞具有漆酶样活性，芽胞杆菌漆酶的研究由此展开。2001 年证实CotA 属于漆酶蛋白，该蛋白由cotA 基因编码(芽胞外衣蛋白)，大小约为65 kD。此后，在地衣芽胞杆菌(B.licheniformis)、Bacillus sp. HR03、短小芽胞杆菌(B. pumilus)、克劳氏芽胞杆菌(B. clausii)等菌中也发现了CotA 漆酶。近年来， 科研工作者还发现死谷芽胞杆菌(B.vallismortis)、Bacillus sp. XJT-7、坚强芽胞杆菌(B.firmus)、解淀粉芽胞杆菌(B. amyloliquefaciens)萎缩芽胞杆菌(B. atrophaeus)等菌的芽胞也都具有漆酶活性，而Bacillus sp. HR03、Bacillus sp.ADR、Bacillus sp. FOR、蜡状芽胞杆菌(B.cereus)、Bacillus sp. SHC1和特基拉芽胞杆菌B. tequilensis)等菌可产胞外漆酶，奥德赛芽胞杆菌(B. odysseyi)、B. subtilis WPI、Bacillus sp.UN2等菌可产胞内漆酶。此外，Bacillus sp.VUS、苏云金芽胞杆菌(B. thuringiensis)、Bacillus sp. CS-1 以及Bacillus sp. CS-2等菌胞内均能检测到漆酶酶活，可产漆酶而未提及漆酶位置的有耐盐芽胞杆菌(B. halodurans)和纺锤芽胞杆菌(B.fusiformis)。芽胞杆菌科于1895建立，模式属为芽胞杆菌属，该科51个属481个种，以下以地衣芽孢杆菌进行介绍。二、菌体活性⒈益生保健作用有些地衣芽胞杆菌对葡萄球菌、白色念球菌、酵母和大肠杆菌有抑制作用，特别是对某些肠道病原菌有拮抗作用，而对厌氧的有益菌如双歧杆菌、乳酸杆菌拟杆菌、消化性链球菌有促菌或共生作用，因此地衣芽胞杆菌已成功应用于医药中，如以活体菌株制成胶囊及口服液(如整肠生胶囊)，治疗肠道疾病。另外，研究发现，双歧杆菌和地衣芽胞杆菌联合的肠生态制剂与化疗药物同时使用，不仅对H22腹水癌细胞具有杀伤和促进凋亡作用，还可延长荷瘤小鼠生命周期，提高化疗的效果，为临床试验奠定了基础。⒉在动植物上的抑菌活性作用有些地衣芽胞杆菌对有害菌有明显的抑制作用，可增强动、植物及人体的抗病力及免疫应答能力。因此，地衣芽胞杆菌被广泛应用于饲料及生物农业领域。在奶牛饲料中添加地衣芽胞杆菌制剂，具有增强奶牛抵抗热应激的能力，可抑制有害菌生长，起到防病、抗病的作用。研究表明，地衣芽胞杆菌对棉花枯萎病、黄萎病的病原菌有拮抗作用。地衣芽胞杆菌DNN6 对西瓜枯萎病、棉花枯萎病、玉米早疫病、瓜类枯萎病、苹果粉红病、番茄灰霉病、辣椒青枯病的病原菌和禾古镰刀菌等有很强的抑制活性。因此，地衣芽胞杆菌在植物及采后水果病害防治方面具有较大应用潜力。⒊固氮作用从毛竹根际分离出固氮菌，初步镜检其为芽胞杆菌，进一步鉴定确定其主要为多粘芽胞杆菌和地衣芽胞杆菌，表明地衣芽胞杆菌可能具有与固氮作用相关的功能。三、应用地衣芽胞杆菌：地衣芽胞杆菌( Bacillus licheniformis) 属厚壁菌门(Firmicutes) 芽胞杆菌科( Bacillaceae)，是一种常见的革兰氏阳性( G + ) 细菌，广泛分布在土壤、空气和腐败有机物上。细胞形态和排列呈杆状、单生，长2.5 ～ 3.5 μm； 宽0.8～1.5 μm。产生近中生的椭圆状芽胞，包囊稍膨大。细胞染色均匀，很少成链。无荚膜，无鞭毛，能运动。zuijia生长环境为35 ± 1℃、pH 7.0 左右。地衣芽胞杆菌具有耐热、酶系丰富、产酶量高和安全等诸多优良特性，被认为是较理想的工业生产菌株，主要用来生产淀粉酶及蛋白酶。近年国内外对地衣芽胞杆菌的研究报道逐渐增多。研究表明，地衣芽胞杆菌能够产生多种生物活性物质，包括多糖、蛋白质、非肽类质，和一些小分子活性物质。⒈多糖类物质地衣芽胞杆菌TS-01 是一种益生菌，在发酵过程中的主要代谢产物之一为多糖。地衣芽胞杆菌TS-01 生产的胞外多糖可清除胞内DPPH 自由基，且多糖浓度越高作用越强，此外还对T 淋巴细胞和B 淋巴细胞转化有增强作用。由于地衣芽胞杆菌TS-01 繁殖速度快，胞外多糖易与菌体分离，其应用前景非常乐观。⒉酶类活性物质地衣芽胞杆菌可产生丰富的胞外酶系，可以有效地降解各种大分子物质。地衣芽胞杆菌突变菌株ZJUEL31410 所产生的弹性蛋白酶具有较强的耐酸性能和较好的溶酶活性。由于微生物易扩大培养，可以大规模生产，且成本低，设备利用率高，不受原料来源的限制，在生产过程中可以解决许多实际问题。采用易错聚合酶链反应( errorprone PCR) ，通过体外分子定向进化的方法优化改进了地衣芽胞杆菌产生的α-淀粉酶( BLA) 的酸稳定性，使其更适于应用到工业生产过程中，而且通过微生物的大规模发酵生产还可以克服传统提取对原料来源的依赖性。对于优良的地衣芽胞杆菌菌株产生的α-淀粉酶的新功能及新特性还有待进一步探索，以进一步提高其工业应用价值。⒊脂肽类生物表面活性剂脂肽类生物表面活性剂具有抗病毒的作用，尤其对疱疹病毒和逆转录病毒的灭活效率更高，在医药行业应用广泛。脂肽类生物表面活性剂还具降解有害农药的作用。研究表明地衣菌素是比枯草菌表面活性剂更有效的阳离子螯合剂，在土壤金属污染治理及原油增采和输送方面也具有开发应用前景。⒋杆菌肽杆菌肽又叫枯草菌肽，具有高效抗菌、不产生交叉耐药性及抗药性等优点，在动物养殖业中常作为抗生素饲料添加剂。由地衣芽胞杆菌产生的杆菌肽类物质，是一种短肽类新型广谱抗生素，对许多G + 和G － 细菌如肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌及螺旋体都有较强的抑菌效果，因此，对其进行开发可为医药、生物饲料等领域提供更多选择。⒌小分子活性物质地衣芽胞杆菌除了产生多糖和酶等大分子之外，还可形成许多小分子次生代谢产物。1）细胞分裂素：地衣芽胞杆菌能产生细胞分裂素。如利用地衣芽胞杆菌发酵生产细胞分裂素，并在黄瓜上进行了田间应用试验，结果表明该物质对黄瓜的产量和抗病性均有促进作用，为细胞分裂素的应用及地衣芽胞杆菌的功能研究奠定了基础。2）苯乙酸：地衣芽胞杆菌可以产生苯乙酸一类的抗菌物质，具有抑制多种植物病原菌的功能。从发酵的大豆中分离到一株拮抗地衣芽胞杆菌B65-1，通过分离纯化得到该菌株产生的拮抗物质，经EI-MS 和NMR 分析确定为苯乙酸，研究发现其对酵母和多种细菌有拮抗作用。3）生长调节类物质：研究表明，地衣芽胞杆菌可产生玉米素、异戊烯基腺嘌呤和玉米素核苷，这些活性物质可作为生长调节剂促进作物生长。神州汉邦生物技术有限公司2004 年公布了一项关于地衣芽胞杆菌生产玉米素、异戊烯基腺嘌呤和玉米素核苷的植物生长调节剂专利，进一步开发可应用于大田生产中。4）特征风味化合物：微生物在生长代谢活动与发酵过程中，通过物理化学反应的相互作用可产生许多特殊的风味物质，为酿造奠定了坚实的基础。地衣芽胞杆菌也可形成风味物质，在地衣芽胞杆菌的发酵液中检测到乙偶姻、四甲基吡嗪和呋喃扭尔，是产酱香细菌发酵产生的特征性产物。欢迎访问中国微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                   小鼠组织直接PCR试剂盒的应用！一、背景小鼠组织直接PCR试剂盒是一款可快速对小鼠鼠尾、鼠耳、肌肉等组织样本进行PCR扩增的试剂盒。本试剂盒采用独特的裂解缓冲液体系，可以快速的裂解样品并释放出基因组DNA，不需要除去蛋白、RNA等，即可将释放出的基因组DNA作为模板直接用于PCR反应。此外，样品使用量少，低至5mg小鼠组织或2-5mm鼠尾即可进行实验。小鼠组织直接PCR试剂盒包含了快速制备小鼠组织基因组DNA和后续PCR扩增的所有试剂，适用于从小鼠尾巴、耳朵以及脚趾等组织中一步法提取基因组DNA并用于后续的PCR扩增和检测。整个提取过程不包含匀浆、破碎、过夜消化、酚氯仿抽提、DNA沉淀或柱式纯化等操作，实验操作简便、快捷，而且结果稳定可靠。小鼠组织直接PCR试剂盒提供的2 x Dir PCR MasterMix是一种高扩增兼容性的PCR试剂，无需彻底去除蛋白等杂质，便能进行高效特异扩增。该预混Mix包含抗体修饰的Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂和稳定剂，操作时只需加入粗提模板和引物即可进行后续检测，具有操作简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点，特别适合于高通量的检测筛选。Mix中预混有电泳染料，可在反应结束后直接进行电泳检测，使用方便快捷。PCR产物的3’端带A，可进行TA克隆。二、操作方法样品基因组DNA释放⒈在离心管中加入100μL Buffer MP，4μL Protease Plus，轻轻涡旋混匀。⒉取5-10mg动物组织或2-5mm鼠尾，置于上述离心管中，轻轻涡旋混匀。⒊65℃孵育10-30min，然后95℃处理5min。⒋12000rpm离心5min。⒌将上清转移至新的离心管，4℃或-20℃保存或直接用于PCR扩增。三、应用用于FAM76B在小鼠各组织中的表达分布和FAM76B基因敲除对小鼠肝脏脂代谢影响的初步研究FAM76B是由339个氨基酸组成的细胞核蛋白,分子量约为39kDa。人源的FAM76B基因定位于11q21染色体上,全长21468bp,生物学功能尚不明确。通过氨基酸序列比对,发现人的FAM76B氨基酸序列与大鼠、小鼠以及斑马鱼的FAM76B氨基酸序列相似度极高,说明FAM76B氨基酸序列高度保守,也暗示了FAM76B蛋白可能存在重要的生物学功能。目前已知FAM76B氨基酸序列中存在组氨酸重复序列(poly-His domain)和Lys-225的泛素化(ubiquitination)位点。通过基因本体(Gene Ontology,GO)分析表明,含有组氨酸重复序列的蛋白大多数为核蛋白,其生物学功能与基因转录和神经发育密切相关。FAM76B蛋白定位在细胞核的核散斑体(Nuclear speckles)中,而核散斑体属于细胞核亚结构,可对RNA剪切复合体进行保存和组装。1.FAM76B单克隆抗体的制备及鉴定:用纯化的原核人FAM76B-6His融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合;以纯化的人FAM76B-6His作为包被抗原,采用间接ELISA方法筛选出阳性克隆的杂交瘤细胞。通过有限稀释法对阳性克隆进行亚克隆,将最终阳性克隆扩大培养,制备针对人FAM76B的单克隆抗体6株,分别命名为FAM76B McAb No.1-6。采用Western blot、免疫沉淀以及免疫细胞化学染色等手段,对所获得的单克隆抗体进行一系列的检测。FAM76B蛋白在正常小鼠组织中的表达和分布:将人FAM76B蛋白的氨基酸序列与小鼠FAM76B蛋白的氨基酸序列进行比对,发现两者氨基酸序列相似度可达到98%,说明FAM76B蛋白高度保守。用上述所获的针对人FAM76B的单克隆抗体对鼠源FAM76B蛋白进行检测,同时通过Real-time PCR、Western blot及免疫组化的方法检测FAM76B在正常小鼠心、肝、脾、肺、肾、肌肉以及脑组织的表达和分布。通过PCR、Real-time PCR以及Western blot方法对本实验室繁育的FAM76B基因敲除小鼠后代,在基因组水平、RNA水平以及蛋白水平进行鉴定。FAM76B基因敲除小鼠肝脏脂代谢相关基因表达的分析:利用Real-time PCR方法,检测1,3,6,9,12,15月龄FAM76B+/-小鼠肝脏组织脂代谢相关基因的表达水平:de novo lipogenesis环节中FASN、SCD、ACC、Dgat 1和Dgat 2;脂肪酸氧化途径中Cptl、Acox和Mcad;TG分泌过程中Mtp和Vldlr。同时检测lipin1、SREBP-1、PPARα和PGC-1α的mRNA相对表达量。通过上述研究结果,分析FAM76B基因敲除小鼠肝脏脂代谢异常的主要因素和途径。北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                  继代培养——植物组培的操作技术！⒈继代培养在初代培养的基础上所获得的芽、苗、胚状体和原球茎等,数量都还不多，它们需要进一步增殖，使之越来越多，从而发挥快速繁殖的优势。继代培养是继初代培养之后的连续数代的扩繁培养过程。旨在繁殖出相当数量的无根苗，zuihou能达到边繁边生根的目的。继代培养的后代是按几何级数增加的过程。如果以2株苗为基础，那么经10代将生成210株苗。继代培养中扩繁的方法包括：切割茎段、分离芽丛、分离胚状体、分离原球茎等。切割茎段常用于有伸长的茎梢、茎节较明显的培养物。这种方法简便易行，能保持母种特性。培养基常是MS0基本培养基；分离芽丛适于由愈伤组织生出的芽丛。培养基常是分化培养基。若芽丛的芽较小。可先切成芽丛小块，放入MS0培养基中，待到稍大时，再分离开来继续培养。增殖使用的培养基对于一种植物来说每次几乎完全相同，由于培养物在接近最良好的环境条件，营养供应和激素调控下，排除了其它生物的竞争，所以能够按几何级数增殖。在快速繁殖中初代培养只是一个必经的过程，而继代培养则是经常性不停的进行过程。但在达到相当的数量之后，则应考虑使其中一部分转入生根阶段。从某种意义上讲，增殖只是贮备母株，而生根才是增殖材料的分流，生产出成品。⒉继代培养时材料的玻璃化实践表明，当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明状，呈水迹状，这种现象通常称为玻璃化。它的出现会使试管苗生长缓慢、繁殖系数有所下降。玻璃化为试管苗的生理失调症。出现玻璃化的嫩茎不宜诱导生根，因此使繁殖系数大为降低。在不同的种类、品种间，试管苗的玻璃化程度也有所差异，当培养基上细胞分裂素水平较高时，容易出现玻璃化现象。在培养基中添加少量聚乙烯醇、脱落酸等物质，能够在一定程度上减轻玻璃化的现象发生。呈现玻璃化的试管苗，其茎、叶表面无蜡质，体内的极性化合物水平较高，细胞持水力差，植株蒸腾作用强，无法进行正常移栽。这种情况主要是由于培养容器中空气湿度过高，透气性较差造成的，其具体解决的方法为：（1）增加培养基中的溶质水平，以降低培养基的水势；（2）减少培养基中含氮化合物的用量；（3）增加光照；（4）增加容器通风，zuihao进行CO2施肥，这对减轻试管苗玻璃化的现象有明显的作用；（5）降低培养温度，进行变温培养，有助于减轻试管苗玻璃化的现象发生；（6）降低培养基中细胞分裂素含量，可以考虑加入适量脱落酸。北京百欧博伟生物技术有限公司拥有Biolog微生物鉴定系统，超低温冰箱，生物安全柜等仪器设备可进行对微生物分离、鉴定等常规的分子实验研究。对我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展的需求进行积极的面对社会乃至国外收集保藏提供微生物菌种资源。在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供微生物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。除此之外，我们还拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得z优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

                 重组人酸性成纤维细胞生长因子的功能！一、背景中国微生物菌种查询网：1974 年，Gospodarwicz 等首次从牛脑垂体中分离纯化出一种促进卵巢细胞系分裂增殖的富含赖氨酸和精氨酸的碱性多肽，并将其命名为成纤维细胞生长因子。成纤维细胞生长因子是一个大的蛋白质家族，到目前为止已发现了不少于23 个成员。酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）是由Thomas 等于1984 年从牛脑中分离纯化得到的，它的等电点为5-7，呈酸性，故以之命名，是第二个被分离纯化的成纤维细胞生长因子家族成员，因此相对应的命名diyi个碱性多肽为碱性成纤维细胞生长因子bFGF）。aFGF 是哺乳动物组织中存在的一种正常而微量的物质，主要分布于脑、肾脏等器官或组织中，对来源于中胚层及神经外胚层的多种细胞均具有促分裂作用。因其在促进胚胎发育、器官形成、血管再生、溃疡愈合及创面修复等临床应用多方面作用明显而成为国内外研究的热点。aFGF 具有广泛的生物学效应，在临床上有重要的作用，既可用于治疗烧烫伤、溃疡、切口等创面愈合，又可治疗机体缺血损伤、心脑血管疾病、神经系统疾病、骨骼修复及眼晶状体再生等多种疾病，越来越受到人们的重视。nhaFGF 改构体的研究大大拓宽了aFGF 的应用范围，使aFGF 更加广泛地应用于临床。aFGF 广泛的临床应用价值使其与其他多种药物相比展现出独特的优势，但由于受到活体试验和伦理学的限制，人们对aFGF 多种活性的作用机制并不是十分清楚，还需要研究者通过大量的动物验作进一步完善。今后还应继续对aFGF 的结构组成、功能活性和信号转导等基础领域进行深入研究，为aFGF 的实际应用提供理论基础和试验依据，以期在临床应用中使aFGF 的作用得到更大的发挥，使aFGF 具有更为广阔的应用前景。二、生物学功能haFGF 具有广泛的生物学活性，能够通过和受体结合实现对中胚层及神经外胚层来源的多种细胞的生长、分化及功能产生影响。其生物学活性分为两大类型：（1）促有丝分裂活性，可促进组织细胞分裂、增殖，包括胚胎发育、形态发生、血管生成及组织损伤修复等；（2）非促有丝分裂活性，包括舒张血管、心肌保护、局部缺血保护和神经保护等。1）胚胎发育研究大鼠胚胎发现，aFGF 广泛分布于大鼠胚胎的中胚层和神经外胚层组织中，在胚胎发育过程中随着细胞的生长、迁移和分化而不断变化。aFGF 能增加胚胎早期转录因子的表达，诱导背侧中胚层的形成，因此被视为胚胎早期背侧发育的营养因子。在对爪蟾的研究发现，aFGF 及FGFR 作为中胚层的诱导因子集中分布在半球，低水平刺激酪氨酸蛋白激酶信号转导途径，持中胚层基因的表达，诱导中胚层的形成。2）血管生成haFGF 可以直接参与新生血管的形成过程。向内皮细胞的培养液中加入一定量的aFGF，结果发现，其对血管内皮细胞的生长有非常明显的促进作用，而血管内皮细胞的增殖和分化是血管新生的重要环节。aFGF 发挥促血管生成作用尚需有组织缺血、缺氧的因素存在，在正常组织内，aFGF 无促进血管生长的作用，在缺血或缺氧的状态下，组织对aFGF 的表达上调，刺激毛细血管内皮细胞产生胶原酶和纤维蛋白水解酶，促进胶原的水解和血管内皮细胞管腔样结构的形成。3）损伤修复皮肤的创伤修复是一个复杂的动态的生物学过程，aFGF 在这个过程中发挥着重要作用：趋化炎细胞浸润创面，促进血管内皮细胞和成纤维细胞分裂增殖，加速肉芽组织形成和创面的再上皮化，抑制胶原纤维的过量形成，避免瘢痕的产生。通过大鼠创伤模型观察重组人酸性成纤维细胞生长因子在创面愈合中的作用发现，aFGF 在创面愈合的前期可以促进肉芽组织生长，加快伤面愈合；后期又可直接或间接的促进成纤维细胞的凋亡，维持细胞增殖与凋亡的平衡，避免瘢痕组织的形成。aFGF能促进血管内皮细胞、平滑肌细胞和肌纤维母细胞等多种细胞的分裂增殖并能诱导血管新生，因此其对内脏的缺血性损伤亦有保护作用。研究发现，肠缺血- 再灌注损伤后注射aFGF，一段时间后测得肝肾功能指标：丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、血尿素氮和血肌酐均有升高，明aFGF 对肠缺血-再灌注损伤后的肝、肾功能均有保护作用。转基因小鼠心肌特异性过表达人类aFGF，其微动脉和主冠状动脉分支的数目明显增多，从而使冠状动脉的血流量增多，延缓心肌梗塞面积的扩大，降低心肌缺失损伤，保护心肌。因此，将aFGF 同时用于促进皮肤组织损伤的修复与内脏缺血性损伤的修复，显示出aFGF 在临床应用的极大优越性。有实验研究重组人酸性成纤维细胞生长因子( rh-aFGF)对兔创伤的促愈合作用。采用兔背部刀割伤模型，将重组人酸性成纤维细胞生长因子( rh-aFGF)溶液隔日一次滴注于创面，用创面照像、透明膜描记称量法记录伤后第4、8、12、16天创面面积，用注水法测量伤腔容积，伤后第8、16天取创面组织，观察创面的病理学变化，包括肉芽组织生长与再上皮化情况。结果rh-aFGF可明显加速兔皮肤创伤的愈合，使创面面积明显缩小，使伤腔容积明显减少。组织学检查：重组人酸性成纤维细胞生长因子( rh-aFGF)组创面伤后8天成纤维细胞生长活跃、数量多，其毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组；伤后16天，创面收缩与再上皮化明显，新生上皮向创面中心爬行较快。重组人酸性成纤维细胞生长因子( rh-aFGF)对兔背部刀伤创面有明显的促修复作用。4）神经营养在体外培养条件下，aFGF 能对多种神经元如海马、下丘脑、脊髓等中枢性神经元及睫状体、视网膜等外周性神经元有神经营养作用。aFGF 能促进神经元的存活和轴突的生长。研究发现，向大鼠腹膜腔或侧脑室注射葡萄糖能够有效的改善大鼠的记忆功能。这是因为注射葡萄糖后大鼠脑室的室管膜细胞会产生aFGF，经过2 h 扩散到下丘脑、海马等大脑软组织，aFGF 通过作用于海马从而促进记忆功能的改善。aFGF 对视神经元同样具有营养作用，在对新生大鼠的视网膜神经节细胞的培养发现，结合肝素的aFGF 具有促进轴突的起始和延伸的作用。此外，aFGF 还能够促进中枢神经和外周神经损伤后的修复和再生，研究证实aFGF 能够促进成年大鼠切断脊神经根的功能性复原。5）骨骼生长aFGF 通过影响软骨细胞和成骨细胞的活动从而促进骨骼生长。aFGF 在体外培养中可促进分化中的软骨细胞发生迁移和集落形成，促进离体的软骨细胞前质的分化、软骨细胞的增殖和成熟。向关节腔注射重组人酸性成纤维细胞生长因子可以较好地延缓兔膝骨关节炎软骨退行性变和预防骨关节炎的发展。研究发现，向试验侧管内注入aFGF，2 周后即在骨断端髓腔、骨内膜及皮质断面处有新骨形成，并长入管内血肿，8 周后血肿已基本被骨组织代替，达到骨愈合，说明aFGF 可有效促进大鼠引导性骨再生，增强其修复骨缺损的能力。这一作用是因为骨基质中的由成骨细胞分泌的aFGF具有有丝分裂活性，在骨损伤修复过程中，可刺激骨生成细胞增殖和毛细血管生成，促进骨再生。6）其他功能此外，aFGF 还有摄食的调节、抗辐射、影响人体免疫系统、激素调控、细胞抗凋亡、细胞迁移、止疼和催眠等多种功能。三、药代动力学有研究观察重组人酸性成纤维细胞生长因子皮肤用药的药代动力学，在兔健康及破损皮肤上均匀涂抹125 I-rhaFGF 180 U·cm -2 后，在不同的时间测血浆及组织中的放射性计数，结合纸层析的方法测定组织和血浆中的125 IrhaFGF的含量。结果　破损皮肤用药后，血中rhaFGF 原型物浓度呈快速上升状态，0.5 h 达zuida值(73.03 pg·mL-1)，其后迅速下降，3 h 后接近0.125 I-rhaFGF 给药后96 h，放射性主要浓集于皮肤，其次是肾，大脑最少。结论　rhaFGF不能通过健康皮肤进入体内，可通过破损皮肤进入血循环，但吸收量少，原形物半衰期短，无蓄积作用；吸收后的rhaFGF 对皮肤有较大亲和力，可分布于远处皮肤，且含量较高。

                   鲜乳贮藏过程中的微生物学变化！一、牛乳在室温下贮存时微生物的变化新鲜牛乳放置在室温(10 ～21 ℃ )下，微生物的生长过程可分为以下几个阶段 1、抑制期特征：在最初阶段牛乳中的微生物反而减少。  原因：乳中含有一种名为“乳烃素”的细菌抑制物。在含菌少的鲜乳中，其作用可持续36h (13 一14 ℃ )；在污染严重的乳液中，可持续18h 左右。乳烃素的杀菌或抑菌作用随温度升高而增强，但持续时间会缩短。因此，鲜乳放置在室温环境中，在一定时间内并不会出现变质现象。 2、乳链球菌期生鲜牛乳过了抑菌期后，抗菌物质减少或消失，其内的微生物迅速繁殖，尤其是细菌的繁殖占juedui优势，致使牛乳凝块出现。细菌主要是乳链球菌、乳酸杆菌、大肠杆菌和一些蛋白分解菌等，特别是乳链球菌生长繁殖特别旺盛。乳链球菌分解牛乳中的乳糖产生乳酸，牛乳酸度不断升高。如大肠菌增殖，将会有产气现象出现。由于酸度升高，其它腐败细菌的活动就受抑制。当酸度升高至一定限度时(pH4.5) ，乳链球菌本身受到抑制不再继续繁殖，相反会逐渐减少，这时就有牛乳凝块出现。 3、乳酸杆菌期乳链球菌在牛乳中繁殖，使牛乳pH 下降至6 左右，这时乳酸杆菌的活动力逐渐增强。当继续下降至4.5以下时，由于乳酸杆菌耐酸力较强，尚能继续繁殖并产酸。此时还有非常耐酸的丙酸菌、孢子形成菌等出现，它们会消耗部分乳酸而形成一些优势菌。    特征：乳液中出现大量乳凝块，并有大量乳清析出。 4、真菌期当酸度下降至pH3.5～3 时，绝大多数微生物被抑制甚至死亡，仅酵母和霉菌尚能适应高酸性的环境，并能利用乳酸及其他一些有机酸，于是形成优势菌。  特征：由于酸的被利用，乳液的酸度会逐渐降低，使乳液的PH不断上升接近中性。 5、胨化菌期特征：乳凝块被消化(液化)、乳液的pH 逐步提高向碱性方向转化，并有腐败的臭味产生的现象。此时，适宜于分解蛋白质和脂肪的细菌在其中生长繁殖。这时的腐败菌大部分是属于芽抱杆菌属、假单胞菌属以及变形杆菌属的一些细菌。 二、牛乳在冷藏中微生物的变化若生鲜乳未消毒即冷藏，一般的嗜温微生物被抑制；而低温微生物能增殖，但生长非常慢。 低温中，牛乳中较多见的细菌：假单胞菌、醋酸杆菌、产碱杆菌、无色杆菌、黄杆菌属等，部分乳酸菌、微球菌、酵母菌和霉菌等。 冷藏乳的变质：主要指乳脂肪的分解。假单胞菌属的多数细菌，均能产生脂肪酶，活性非常强并具有耐热性，加热消毒后，残留脂肪酶还有活性。 冷藏乳的蛋白分解现象：产碱杆菌属和假单胞菌属的细菌，它们可使牛乳胨化。北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！