【应用分享】枸杞子好不好？检测少不了，枸杞子中甜菜碱的检测。

纳谱分析

2020/08/19 17:15

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枸杞子，为茄科植物枸杞的成熟果实。枸杞子具有多种保健功效，是卫生部批准的药食两用食物。适量食用有益健康，配合菊杞茶有清肝明目的效果。其质量标准在历版中国药典中以测定枸杞多糖和甜菜碱成分。甜菜碱的学名为三甲基甘氨酸，具有强烈的吸湿性能，此外还可以抗肿瘤、降血压、抗消化性溃疡及胃肠功能障碍，并且可以治疗肝脏疾病。

甜菜碱结构式

由于甜菜碱极性大，反相C18分析柱不能对其有较好的保留效果，因此2015版中国药典一直以薄层扫描测定为主，直到2020版中国药典才开始采用HILIC体系的氨基柱进行分析。本实验采用纳谱分析SelectCore Alumina B固相萃取柱（2000mg /12mL）对枸杞子进行前处理，并用纳谱分析ChromCore NH2 5μm，4.6×250 mm色谱柱进行分析，甜菜碱保留效果好，峰形良好，干扰杂质少，能有效保证实验顺利进行。

适用范围

本方法（参考中国药典2020版方法），适用于枸杞子中甜菜碱含量的测定。

实验步骤

1· 试剂

无水乙醇、超纯水

2· 对照品配制

称取8 mg甜菜碱对照品置于50 mL容量瓶中，用水定容至刻度线，即浓度为160 μg /mL。

3· 提取

称取1 g枸杞子样品（精确到0.01 g）于50 mL离心管中，加入50 mL甲醇溶液，涡旋震荡1 min，超声20 min， 4000 r/min离心3 min后，取上清液待净化。

4· 净化

SPE柱：SelectCore Alumina B固相萃取柱（2000mg/12mL）
活化：用10mL无水乙醇活化；
上样：加入2 mL上清液，弃去；
洗脱：用30 mL无水乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，水浴蒸至近干，用超纯水溶液复溶并定容至2 mL后过0.22μm MCE针式滤器，上机检测。

5· 液相色谱仪器条件

Column: ChromCore NH2, 5 μm
Dimension: 4.6 × 250 mm
Mobile Phase: 85/15 v/v 乙腈/水
Flow Rate: 1.0 mL/min
Temperature: 30 ℃
Injection: 10 μL
Detection: UV 195 nm

6 · 检测谱图

图1：甜菜碱标准品色谱图

图2：枸杞子提取原液色谱图

图3：枸杞子提取液过固相萃取柱色谱图

图4：枸杞子提取液加标（100%水平加标）过固相萃取柱色谱图

7 · 样品加标回收率

样品名称	加标回收率%
甜菜碱	96.35%

8 · 实验结论

由结果得出，选择纳谱分析SelectCore Alumina B固相萃取柱（2000mg/12mL），枸杞子中甜菜碱的回收率大于90%，并且可以有效去除杂质干扰，使得样品图谱更加干净。选择ChromCore NH2 5μm，4.6×250 mm色谱柱，乙腈/水=85/15做流动相，甜菜碱对照品和实际样品中甜菜碱的理论塔板数分别为8769和10135，均超过药典规定的3000，符合检测标准。

应用相关产品信息，欢迎选购：

产品描述	货号
SelectCore Alumina B 2000mg/12mL; 20/pkg	ALB060-122000-1
NanoChrom Filter MCE, 13mm×0.22μm; 100/pkg	F-1322MCE
ChromCore NH2 5μm, 4.6×250mm	A008-050012-04625S