小鼠sRANKL试剂盒

小鼠sRANKL试剂盒为什么实验过程中孵育、洗涤需要振荡？如何振荡？

振荡孵育使反应更充分，振荡洗涤使背景更干净。建议使用酶标专用96孔微孔板振荡器。

孵育过程振荡，可以加快、加强抗原抗体分子间的相互碰撞接触，使得反应过程更加完全，OD值通常会比未振荡孵育的结果要高；洗涤过程振荡，可以使洗板更干净，在很大程度上能降低背景值，同时可以提高试剂盒检测的灵敏度，具体操作请参见说明书。

小鼠sRANKL试剂盒何时终止ELISA反应？

ELISA实验最终需要酶催化底物显色反应来完成，在最佳时间终止反应是ELISA实验成功的重要因素。在HRP-TMB酶促反应系统中，当最高浓度标准品颜色不再变深，倒数2-3个浓度标准品颜色开始有浅蓝色时，便需要终止反应；或者也可以根据最高浓度标准品孔在620nm的OD值来决定，OD620=0.9-0.95之间时即可终止。

小鼠sRANKL试剂盒为什么酶标仪读数时必须选用双波长？

首先，酶标仪使用前务必预热10-15min，使测读结果更稳定。其次，ELISA实验采用双波长测定吸光度，可以排除单波长检测时的测定干扰（标本的浓度，干扰色等）。一般采用最大波长作为参照波长，在参照波长下，检测物的吸光值最小，检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收；因此，双波长测定，可最大限度的消除指纹、杂质及不透光的物质对酶标仪读数带来的误差，以保证实验数据的准确度。

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