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巨噬细胞长程传递信号,揭示斑马鱼条纹形成机制

巨噬细胞长程传递信号,揭示斑马鱼条纹形成机制在一项新的研究中,来自美国华盛顿大学的研究人员发现脊椎动物免疫系统中的一种常见的细胞类型在其他细胞之间的通信中发挥着一种独特的作用。他们证实这种被称作巨噬细胞的细胞能够传递非免疫细胞之间的信息。相关研究结果于2017年2月16日在线发表在Science期刊上,论文标题为“A macrophage relay for long-distance signaling during postembryonic tissue remodeling”。这项研究描述了斑马鱼中的色素细胞如何指派巨噬细胞传递在它的皮肤色素图案形成中发挥重要作用的信息。这是首次报道巨噬细胞长程地接力传递非免疫细胞之间的信息。不过,鉴于巨噬细胞在所有脊椎动物中都是常见的,这些研究人员认为他们的发现并不只是水生生物的怪癖。巨噬细胞可能是常见的细胞间长程信息的传递者。论文通信作者、华盛顿大学生物学教授David Parichy说,“如果色素细胞知道如何利用巨噬细胞传递信号,那么有理由认为其他细胞也会如此。这可能在多种细胞和动物中发生。”Parichy和论文第一作者、华盛顿大学博士后研究员Dae Seok Eom是在研究斑马鱼时发现巨噬细胞的这种新作用的。他们想要理解斑马鱼如何获得它的银黄色条带和黑色条带。每种颜色---黑色、黄色和银色---起源自一种不同类型的色素细胞。当斑马鱼幼小时,这些色素细胞迁移到合适的位点,形成这些条带。Parichy说,“当迁移时,这三种色素细胞群体之间的通信对形成我们在成年斑马鱼中观察到的这些条带是至关重要的。”Eom和Parichy利用实验室遗传工具让斑马鱼色素细胞发出荧光,从而使得在显微镜下更容易追踪这些细胞。在这一过程中,他们发现在色素图案形成的高峰期间,作为黄色素细胞的前体细胞,xanthoblast产生独特的精致的凸起(projection)。他们根据数学家、天文学家Sir George Airy和希腊信使女神Iris的名字,将这种凸起命名为airineme。Parichy说,“xanthoblast以迂回的几乎随机的方向长出这些薄的凸起。这些凸起最终遇到另一种色素细胞,即黑色素细胞,这时它们的长出才会停止下来。”Eom和Parichy发现这些凸起含有微小的膜包围的蛋白囊泡,囊泡中的蛋白给黑色素细胞提供分子信号。他们证实当来自xanthoblast的凸起遇到黑色素细胞时,来自这种凸起中的提供分子信号的蛋白导致这种黑色素细胞迁移到条带中。但是他们之前一直都不能够理解这些凸起如何找到黑色素细胞,或者为何它们采取这样一种看似随机的路线,直到Eom取得一项至关重要的观察结果。Eom说,“我观察到一个巨噬细胞与一个凸起相互作用,然后与另一个凸起相互作用,然后再与另一个凸起相互作用。在一项实验中,我观察到来自xanthoblast的178个凸起,它们当中的94%明显地与巨噬细胞相互作用。”巨噬细胞不断地在迁移。在鱼、人类和在进化树上位于这两者之间的任何一种生物中,它们在身体的组织中游荡,像变形虫那样匍匐而行。在行进途中,它们抽样检查它们的环境,拾起和吞噬碎片。它们吞噬的战利品经常是无害的细胞碎片。但是如果巨噬细胞吞噬一种病原体,或者接收到表明附近的细胞遭受到入侵者攻击的信号,那么它们能够给免疫系统中的其他细胞发送警报。在了解到这种知识后,Eom测试了巨噬细胞是否真正地促进黄色素细胞和黑色素细胞之间的对话。利用遗传工具,他培育出缺乏巨噬细胞的斑马鱼,结果观察到xanthoblast产生少得多的凸起。在这种情形下,黑色素细胞不能正确地迁移形成条带。当巨噬细胞随机地遇到凸起时,Eom利用显微镜捕获到它们如何作出表现的图片和影片。一个巨噬细胞似乎吞噬一个凸起表面上的球形蛋白囊泡的一端,拖着它移动,从而将这个凸起拉伸。Eom说,“如今,我们知道为何凸起似乎采取这种迂回的随机路线。它们被随机移动的巨噬细胞拖着。”但是,当这个巨噬细胞遇到一个黑色素细胞时,它似乎从这个凸起切换到这个黑色素细胞,迁移走,很可能通过这个凸起将信息传递到这个黑色素细胞。Eom证实来自xanthoblast的凸起中的蛋白囊泡膜含有一种脂质,这种脂质对巨噬细胞而言是一种“吃我”信号,这可能解释了为何巨噬细胞附着和拖着这种凸起。他和Parichy计划研究为何巨噬细胞不吞噬凸起,以及如何特异性地从凸起切换到黑色素细胞。不过鉴于巨噬细胞喜欢四处游荡和拾起物体,Parichy认为这不可能是唯一的例子表明巨噬细胞能够被免疫系统之外的细胞指派。Parichy说,“我们在这项研究中观察到的巨噬细胞行为很可能也在它们发挥重要作用的其他环境(如组织发育和再生,癌症等等)中发生着。我们能够轻松地观察到在多种情形下,巨噬细胞如何可能促进细胞间信号传递。”

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2017.02.22

你造吗?女性要比男性更加擅长一脑多用

你造吗?女性要比男性更加擅长一脑多用相比男性而言,在完成多项任务时,女性或许并不容易受到影响,而激素或许产生了男性和女性之间的这种差异,近来有研究表明,当边步行边进行一项困难的语言任务时,机体中雌二醇水平较低男性的行走模式往往会发生改变。相比较而言,对于未达到更年期的女性而言,其机体中雌二醇水平较高,这就会帮助其不受干扰。发表在国际杂志Royal Society Open Science上的一项研究报告中,研究人员通过研究想证明一种假设,即受左大脑控制的右臂的摆动能力是否会因同时利用左大脑进行另一项任务而受到抑制。结果表明在60岁以上的男性和女性机体中的确会出现这种的抑制现象,但在60岁以下的个体中却不会出现这种现象。Stroop测试斯楚普测验(stroop test)是一种研究言语过程的一种实验方法。很多人很少会注意到当我们行走时机体四肢是如何运动的,相反,行走也会为我们提供一种简单的目的,帮助我们从一个地方移动到另一个地方,换句话说,行走和相关的手臂摆动都是半自动化且是一种目标导向行为。但当我们被问及在行走过程中完成特定认知行为时,机体摆臂的协调方式就会以微妙的方式发生改变。随着研究人员对脊髓损伤的深入研究,研究人员如今非常感兴趣描述机体在进行困难任务时步行所引发的效应,从而研究人员就能够确定是否这些附加的状况会导致机体出现不同的适应性协调。当我们将机体的反应模式同早期神经病患者观察到的行为进行对比时就显得尤为重要了。用来是研究中参与者分心的一个经典试验就是斯楚普测验,其是研究人员20世纪30年代时候开发出来的,在该测验中使用一系列颜色词,例如,“红”字用绿色写,“黄”字用红色写等。实验中当要求被试尽快说出字的颜色时,被试常常自动地首先把字读出来了,这就是颜色命名的过程与读字过程的竞争。由于阅读是一种自动化过程,因此人们倾向于先读字,这样,字义的自动加工过程就干扰了有意的颜色命名的过程。在任务进行期间大脑网络和结构就会被激活,而研究人员对此进行了广泛的研究,而且有迹象显示通常这些情况会出现在大脑的左半球中。在跑步机上进行Stroop测试研究人员让83名不同年龄段的男性和女性在跑步机上运动,并对他们的跑步模式进行测定,参与者不得不在跑步机上进行数分钟的步行,同时完成Stroop测试或者仅仅正常步行。当在步行时,很多参与者会匀称地挥舞其左右臂,然而任何年龄段的男性步行并且进行Stroop测试时,其右臂的摆动会明显下降,而且这种现象在60岁以上的女性中也比较明显。然而研究者发现,60岁以下的女性在进行Stroop测试时其摆臂的对称性并不会发生明显改变;就像之前所提到的,大脑的左脑会控制右臂,同时在Stroop测试期间大脑中加工和处理的区域也会被激活。在男性和女性中,Stroop测试似乎能够明显抑制左脑延伸手臂的运动的模式。或许是激素在作怪男性和女性之间有着很多重要的生理学差异,我们机体神经系统的结构和功能似乎是非常相似的,因此我们往往会非常感兴趣寻找一致性的性别差异来阐明两种相对简单的行为如何相互作用。虽然乍一看很多研究似乎能够证明女性要比男性更加善于多任务处理(一脑多用),但更为重要的是,我们需要记住两种高度特异性的行为,即口头干预的任务以及在步行期间维持摆臂。然而研究者认为,对干扰非常耐受的绝经前女性这种抗干扰的行为似乎和大脑中特殊区域有直接关联,而该区域通常能够用作Stroop测试和摆臂运动,也就是大脑前部的前额皮质区域;这是大脑中最为复杂,也是最近进化的一种大脑结构,能够参与机体认知控制以及对步行的控制。大量的研究证据都表明大脑前额皮质区域中存在雌二醇受体,当雌二醇存在时,这些受体的激活就能够为大脑神经网络重新塑形,或许还会改善前额皮质的功能。这或许就能够解释为何相比男性和老年女性而言,年轻女性能够在不干扰摆臂的情况下,能够更好地处理其左前额皮质区域中进行的Stroop测试,因为年轻女性机体中含有高水平的雌二醇。当然目前研究人员还对此存在争议,但结果很好被解释,研究者推测,雌激素受体或许存在于男性大脑中的前额皮质区域中,而雌二醇在两性大脑中所扮演的角色或许远比我们想象之中要复杂地多。

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2017.02.22

锻炼或许并不是控制体重的关键

锻炼或许并不是控制体重的关键近日,来自罗耀拉大学等多个研究机构的研究人员通过研究提供了令人信服的新证据来表明锻炼并不是控制机体体重的关键,研究人员对来自美国及其它四个国家中具有非洲血统的年轻人进行研究发现,体力活动和久坐不动两者与机体体重增长并无关联,相关研究刊登于国际杂志PeerJ上。研究者Lara R. Dugas博士表示,我们的研究表明体力活动或许并不能保护机体免于体重增加,体力活动被认为能带来多项益处,比如降低个体患多种疾病的风险,包括心脏病、糖尿病以及癌症等,同时其还能够改善个体的心理健康和情绪表现。经常进行体力活动的人更易于变得健康和长寿,但当体力活动燃烧卡路里的同时,其也会增加个体机体的食欲,而且很多人往往还会通过多吃动物或者在一天的其它时间里减少活动量来对身体进行补偿。有些专家就认为,体力活动水平的降低是诱发肥胖流行的主要促进因素,尤其是在工作场所中,但比如在这项最新研究中,研究人员客观地测定了个体机体的体力活动水平,并且根据时间追踪参与者的机体活动,但他们并未发现体重增加和个体体力活动之间深层次的关系。本文中研究结果是流行病学模型过渡研究(Modeling the Epidemiologic Transition Study,METS)中的一个主要研究结果,研究人员对来自美国、加纳、南非、牙买加和东非塞舌尔群岛5个国家中年龄在25至40岁的1944名成年个体进行追踪研究,来自美国的参与者居住在伊利诺伊市的郊区,这些人群具有非洲血统,而且代表了广泛的社会和经济阶层。此前研究中,研究人员通过研究发现,当人们被问及关于他们体力活动的情况时,他们往往更易于夸大他们的做法,为了提供客观性地衡量方法,参与者会在腰上戴上名为加速度传感器的追踪设备来被研究者进行为期一周的追踪研究,这种设备能够测定参与者机体的能量消耗和步数,同时研究者还会测定参与者的体重、身高以及体脂,当进行首次检测后,参与者会被要求在一年和两年后返回继续进行研究。当进行首次随访调查后,研究者发现,加纳的参与者具有最低的平均体重(男性和女性平均139磅),而美国的参与者则具有最高的平均体重(女性为202磅、男性平均为206磅),相比美国人而言,加纳人同时也比较健康;76%的加纳男性和44%的加纳女性都达到了美国公共卫生局的体力活动指导准则,而在美国仅有44%的男性和20%的女性能够达此标准,该指导准则推荐个体每周至少进行2.5小时适度强度的有氧运动,比如健步走等。让研究人员意外的是,来自每个国家的参与者总的体重增加往往是在达到体力活动指导准则的参与者中表现比较明显,比如达到该准则的美国男性平均每年体重会增加半磅,而未达到标准的美国男性体重则会降低0.6磅。研究人员并未发现个体首次随访静坐时间和随后机体体重增加或减少之间存在任何明显的关联,和体重增加明显相关的唯一因素就是首次随访时个体机体的体重、年龄以及性别。这项研究由美国国立卫生研究院提供资助,文章题目为“Accelerometer-measured physical activity is not associated with two-year weight change in African-origin adults from five diverse populations”。

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2017.02.22

科学家阐明驱动肠道菌群失衡及炎症发生的分子机制

科学家阐明驱动肠道菌群失衡及炎症发生的分子机制日前,一项刊登在国际杂志Cell Host & Microbe上的研究报告中,来自德州大学西南医学中心(UT Southwestern Medical Center)的科学家通过研究揭开了在炎性疾病发病过程中干扰肠道细菌平衡背后的分子途径。研究者Sebastian Winter教授指出,深入理解这些途径或许能够帮助我们开发预防或治疗多种疾病的新型策略,比如炎性肠病(IBD)、特定的胃肠道感染以及结直肠癌等。目前在美国有超过100万人都患有炎性肠病,炎性肠病是一种慢性、长期的肠道炎性疾病,目前并没有有效的治疗和预防措施。本文研究中研究人员就解释了肠道炎性发生期间肠道改变背后存在的关键机制,研究者表示,肠道炎症和肠道从细菌中获取的营养物质的改变直接相关,健康人的肠道中聚集着多种微生物群落,肠道细菌细胞的数量大约是人体细胞数量的10倍,在一个人一生的大部分时间里,机体的微生物群落都会帮助促进消化,保护机体免于感染或者调节机体健康免疫系统的发育。在炎性肠病、胃肠道感染以及癌症发过程中会伴随肠道炎性的发作,同时肠道微生物群落的组分也会被完全干扰,有益细菌的数量会开始慢慢减少,有些甚至会变成有害细菌,因此肠道微生物群落的失衡被认为会加速肠道炎性的过程。健康的肠道通常是缺乏氧气的,而有益细菌也会非常适应这些低氧的环境,并且通过发酵来破碎食物中的纤维,而有害细菌,比如大肠杆菌,并不会像有益细菌那样,其往往会在高水平氧气的环境中“茁壮生长”。研究者Winter解释道,炎性会改变环境,进而就会干扰肠道中栖息的厌氧菌的生长,但大肠杆菌往往偏爱这种环境,其往往会等待一次“偶然事件”发生来开始发起攻势,比如机体炎症发生等。在炎症发生过程中,氧气可用性的增加会帮助大肠杆菌在炎性肠道中生存。通过进行呼吸作用,有益细菌所产生的大量废弃物会被肠道中的大肠杆菌再度循环利用,而大肠杆菌会将这些代谢废物变废为宝,并且促进大肠杆菌群体快速生长扩张。阐明肠道菌群失衡的分子机制或为后期科学家们开发新型疗法和诊断策略非常重要,当然研究人员也希望能够开发出更加有效的策略来治疗炎性肠病以及炎性相关的结直肠癌,比如开发一种新型药物来抑制大肠杆菌的特殊代谢功能。最后研究者Winter说道,如果我们通过有益的共生细菌来干扰废弃物的产生,这样我们就能阻碍有害细菌(比如大肠杆菌)的代谢,进而就会影响有害细菌的生长,从而就能保护整个肠道微生物群落系统的平衡。目前最有效的策略或许就是抑制肠道中共生的大肠杆菌的特殊代谢作用来避免其快速繁殖以及对机体肠道产生副作用。

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2017.02.10

干细胞衍生细胞或有望治疗先天性再生障碍性贫血

干细胞衍生细胞或有望治疗先天性再生障碍性贫血近日,一项刊登在国际杂志Science Translational Medicine上的研究报告中,来自波士顿儿童医院干细胞研究项目的研究人员首次利用患者自身的细胞开发出了类似于骨髓细胞的细胞类型,随后研究人员利用这些新型细胞进行研究鉴别出了治疗罕见血液疾病的潜在疗法。文章中,研究人员对来自两名先天性再生障碍性贫血(DBA)患者机体的血液祖细胞进行研究,DBA事一种罕见的严重血液障碍,主要表现为患者机体骨髓无法制造足量的能够携带氧气的红细胞。首先研究人员将患者机体的部分皮肤细胞转化成为诱导多能干细胞(iPSCs),随后利用iPSCs来制造血液足细胞,并且在这种祖细胞中装载高通量的药物筛选系统,通过对含有1440种化合物文库进行筛选,研究人员在培养皿中发现了多种具有潜力的化合物,其中一种名为SMER28的化合物就能够帮助活的小鼠和斑马鱼开始大量制造红细胞。研究者Sergei Doulatov博士表示,当iPS细胞开始制造血液时就很难对其进行操作了,本文研究中我们首次发现利用iPS细胞就能够帮助鉴别出治疗罕见血液障碍的药物。目前研究人员利用类固醇(Steroids)类药物来治疗DBA,但这些药物仅能够帮助大约一半的患者,其中有些患者最终会停止产生反应,当类固醇药物失效时,患者就必须终生进行输血,因此很多患者的生活质量并不理想,研究人员认为,这种名为SMER28的化合物或者类似的化合物或许就能够为患者的治疗提供另外一种可行的选择。就DBA自身而言,在培养皿中对来自患者的血液祖细胞进行研究似乎并不能够产生红细胞前体细胞(红系细胞),而且当细胞被移植到小鼠机体中也是相同的结果,但进行化学筛选似乎就能够提供线索,在装载有化学物质的小孔中红系细胞就会开始出现。由于具有较强的效应,SMER28往往会被推向附加试验,当用于治疗患DBA的斑马鱼和小鼠时,动物机体中就会制造产生红系祖细胞,随后就能够制造红细胞,从而就能逆转机体的贫血表现,研究者发现,化合物SMER28的剂量越高,就会有越多的红细胞产生,而且并不会出现副作用。此前研究中,研究人员花费了很多年时间来尝试从患者机体中分离血液干细胞,有时候他们会成功,但这些血液干细胞非常罕见,而且其并不能产生足够的拷贝来用作研究,且科学家利用iPS细胞制造血液干细胞的尝试也失败了。因此研究人员就希望利用五种重编程因子的组合将iPS细胞转化成为血液祖细胞来解决上述问题,血液祖细胞能够和血液干细胞分享很多特性,而且还能够在培养皿中进行稳定增殖。研究者Doulatov表示,药物筛选通常会在成千上万个孔中进行(重复一次),因此我们就需要更多的细胞来进行研究,尽管血液祖细胞并不是真正的干细胞,但其仍然具有多能性而且还能够制造红细胞。目前研究人员已经利用化合物SMER28对部分神经变性疾病进行了临床前的试验,SMER28能够激活机体的自噬途径,从而对损伤的细胞组分进行再循环;在DBA中,SMER28能够开启红系祖细胞的自噬途径,下一步研究人员计划通过更为深入的研究来探索化合物SMER28是如何干扰红细胞的产生的。

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2017.02.10

黑科技!阿兹海默病治疗仪显著改善患者认知能力

黑科技!阿兹海默病治疗仪显著改善患者认知能力 近日,以色列生物技术公司neuronix公布了其针对阿兹海默病的治疗系统neuroad在关键性临床试验中的积极结果,在中度阿兹海默病患者中,neuroad治疗仪显著地改善了患者的认知能力。阿兹海默病是导致中老年人记忆和认知能力下降的最常见神经疾病之一,全球范围内有超过4000万名患者,在中国有将近1000万名患者。而目前对于该病并没有有效的治疗手段,仅有有限的几种药物可以缓解症状。由于阿兹海默病发病率高,病程时间长,往往会给患者的家庭和社会带来很大的经济负担。由neuronix公司开发的neuroad治疗系统是一种新型的非侵入性的治疗仪。它结合了两种现有的治疗手段,即认知训练和经颅磁刺激(transcranial magnetic stimulation,tms),根据每位患者的实际情况设计针对性的认知训练方案,同时刺激受疾病影响的大脑区域,以改善病情。该治疗仪还可以与现有药物同时使用,以达到最佳治疗效果。 ▲neuroad治疗仪(图片来源:medscape)在此次进行随机、双盲、对照临床试验中,共有131位来自美国和以色列的阿兹海默病患者参与。每位患者都接受为期6周的治疗,治疗结束后6周再进行随访,通过adas-cog和cgi-c两种测试评估患者的认知能力。在12周时,占到整个试验参与者85%的中度患者中,接受了neuroad治疗的患者与对照组相比,在adas-cog测试中有1.8分的进步,达到了统计学的显著性。在cgi-c测试中,所有接受治疗的患者与对照组相比有0.4分的进步,其中中度患者有0.45分的进步。接受治疗的患者中仅有16%出现的认知能力退步的情况,相比之下对照组中有42%的患者出现退步。此外,患者中并没有出现严重的副反应,绝大部分患者都完成了整个疗程。neuronix首席执行官eyal baror先生说:“我们非常自豪地展示了来自这项关键性临床试验的数据。这项试验是在美国一些最有经验的阿兹海默病研究中心完成的,我们感谢所有参与试验的相关人员,尤其是患者和他们的家属们。为了他们,我们将尽最大努力使neuroad治疗仪在美国和全球获得批准。” ▲neuronix首席执行官eyal baror先生(图片来源:reuters)基于这项试验和之前进行的其它试验中的积极数据,neuronix已经向美国fda递交了新型医疗设备的申请,并获得了快速审批通道的资格。这套系统已经在早些时候获批在欧洲使用。 我们希望neuroad治疗仪能够早日造福全世界的更多患者。 

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2017.01.17

激光把老鼠变“杀手”

激光把老鼠变“杀手”曾几何时,一只老鼠漫不经心地与一只蟋蟀待在笼子里;但是转瞬之间,这只啮齿动物便跳到了这只昆虫的身上并把后者的脑袋撕了下来,而这一切都是因为科学家转换了一个开关。这是第一次,研究人员潜入了负责动物狩猎行为的一部分大脑,利用激光处理了特定的神经细胞。更重要的是,他们发现这个狩猎中心是一个奇怪的地方——该大脑区域还是造成恐惧的原因所在。并未参与该项研究的美国剑桥市麻省理工学院神经学家Kay Tye表示:“这是真正令人兴奋的东西。”他说:“这如何与恐惧或回避有关呢?这几乎是狩猎的对立面。”Ivan de Araujo最初并没有打算把老鼠变成“疯子”。作为一名耶鲁大学的神经生物学家,他通常会在自己的实验室中研究啮齿动物的进食行为。但是几年前,De Araujo看到了一项2005年的研究成果。该研究显示,杏仁核——大脑中与恐惧和焦虑相关的一个小型杏仁状区域——在小鼠的狩猎与进食过程中非常活跃。这似乎很奇怪,因为关于杏仁核的大多数研究都聚焦于防御或顺从的情绪。为了进一步探索这种关系,De Araujo及其团队转向了光遗传学研究,这种技术能够用激光刺激神经细胞。之前,研究人员曾使用这项技术在小鼠中进行了从改变记忆到使它们感到口渴的一系列尝试。如今,De Araujo和同事们想知道能否用它来使小鼠模仿特定的狩猎和饮食行为。研究人员并不期望啮齿动物能够从头到尾执行一套完整的狩猎序列:耸着它的脖子,发现它的猎物,追捕猎物,抓住猎物,把牙齿嵌入猎物体内,最后进行致命一咬。然而这恰好是此项研究最终看到的结果。研究人员发现,两种途径相互交织完成了一次狩猎。一个是控制对猎物的追击(PAG),另一个是控制咬合的精度(PCRt)。把PAG作为目标的激光使得小鼠移动得更加迅速或缓慢;而以PCRt为靶点的激光使得小鼠的撕咬更有力或更羸弱。当研究人员在同一时间刺激这两种途径时,小鼠会停下来追捕并且撕咬几乎它能够找到的任何东西——蟋蟀、木片,甚至瓶盖。研究人员在1月12日出版的《细胞》杂志上报告了这一研究成果。De Araujo表示:“中央杏仁核似乎是一个组织运动行为的中心……然而之前科学家还没有这样的概念。”但是,激活PAG和PCRt并不会把小鼠变成肆无忌惮的杀手。这些啮齿动物只追逐小东西,而不是其他老鼠。这表明,大脑的其他部分可以保持杏仁核处于抑制当中,De Araujo说道。至于为什么恐惧和狩猎中心位于大脑的相同区域中,Tye推测,这或许是因为这两种行为在野外是彼此关联的。他说,当老鼠离开自己的洞穴外出捕猎时,它也要当心自己不要被捕食者吃掉。Tye说:“像每一个好的科学发现一样,这个发现提出了更多的问题。它提出了很多关于杏仁核的问题,但同时也表明了大脑是如何真正工作的。”杏仁核附着在大脑海马的末端,呈杏仁状,是边缘系统的一部分。杏仁核是产生情绪、识别情绪和调节情绪、控制学习和记忆的脑部组织,而且研究发现,幼儿自闭症似乎也与扩大的杏仁核有关。杏仁核主要通过外侧嗅纹、终纹和腹侧杏仁传出通路,与额叶内侧、眶额回、隔区、无名质、视前区、海马体、下丘脑、丘脑、纹状体、颞盖皮质、岛盖皮质、顶盖皮质、颞极、运动皮质及脑干网状结构等有双向交互联系。”

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2017.01.17

沪震实业2017年春节放假通知

沪震实业2017年春节放假通知 尊敬的新老客户及全体员工:  新春佳节渐近,为欢度中华民族的传统佳节,使全体人员能够开开心心地过上一个欢乐、祥和的2017年春节,尽可能的与家人一起享受节日的欢乐和喜悦;结合公司情况,经公司研究决定:公司定于2017年春节放假安排为:1月22日至2月4日(初八)放假,2月4日(初八)正式上班。由于放假给大家带来的不便,敬请谅解! .再次感谢大家一直以来对我司的关注及支持! 衷心祝愿大家度过一个欢乐、祥和的春节!又是一年新来到!惜别2016,我们迎来了充满希望、机遇和挑战的2017年! 在此,感谢大家在过去一年里对沪震实业的支持与信任。同时也希望在新的一年里,沪震实业能继续得到大家的关注及支持,并且沪震实业也会一如既往地为大家提供更优质的服务! 正值中国的传统节日"春节"来临,在此向各位新老客户和广大朋友们拜个早年!预祝大家新春愉快!财源广进!全家欢乐!                              上海沪震实业有限公司                                  2017年1月17

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2017.01.17

如何来应对节假日?健康饮食指南帮你保持健康!

如何来应对节假日?健康饮食指南帮你保持健康! 现在很多澳大利亚人已经完成了学业或者已经处于下班休息时间,而他们也在为圣诞节和新年的到来准备丰盛的美食和饮料。当宴请和特殊场合的食物增加我们饮食多样性和愉悦感时,但很不幸的是我们很多人已经将这种不佳的饮食习惯作为一种习惯性的做法;澳大利亚成年人每周都会摄入17种,甚至更多的酒精饮料、巧克力、含糖饮料、蛋糕、饼干、加工肉类以及诸如炸薯片等休闲食品。科学家们推荐成年人每周应当摄入35种/份蔬菜,但在澳大利亚成年人中,男性最多摄入25份,女性最多摄入29份。 圣诞节怎么吃最健康?不管我们怎么吃比较健康,制定一项计划有效预防饮食过量都是非常必要的,基于典型的澳大利亚人的饮食习惯,这里有10条饮食建议来帮助我们维持机体健康。1、有计划的饮食酒精中含有大量的热量(1卡路里=4.2千焦),因此在聚会或公共集会之前尽可能地降低酒精的摄入;另外一个好办法就是用水、苏打水或者无糖饮料来代替酒精;为了降低糖类的摄入量,尽量选择一些加糖饮料,或者最好选择水。2、聚会之前的饮食很多美食放在嘴边我们常常难以拒绝,最理想的选择就是事先摄入健康的饮食,比如追求大量的沙拉和蔬菜,某些精益蛋白质(肉类或鱼类)以及全麦碳水化合物(半杯熟糙米),膳食蛋白质会让机体长时间感觉不到饿。但并不是所有的西式点心都是一样的,如果我们在聚会上饮食的话,首先要寻找基于瘦肉蛋白质的食物,比如肉丸、对虾、瘦肉串、寿司或蛋饼。尽可能避免摄入油炸和糕点类的食物。3、应制定“盘子”策略当我们享受小点心时,往往很难记得我们吃了多少,因此在选择食物时选择蔬菜条优于饼干,或者选择鹰嘴豆泥和蔬菜。如果奶酪是你的钟爱的话,重点关注质量而不是数量,同时应当有意识地切成薄片,因为奶酪富含热量。4、两个过程的饮食已经足够了当我们在餐馆吃饭时并没有必要错过一些美味;抑制热量过载的一个简单方法就是限制自己进行1-2个过程的饮食,比如开胃菜和正餐,正餐和蔬菜沙拉,或者正餐和餐后点心。5、重点关注瘦肉蛋白质和蔬菜替换掉含有大量碳水化合物的面食、披萨以及自己喜欢的食物,选择包含瘦肉蛋白质的食物、沙拉和蔬菜作为正餐。通常情况下牛肉就是一个很好的蛋白质来源,如果份数过大的话,我们可以摄入一半牛肉。为了避免不健康的脂肪以及过多的热量,我们应当尽量偏离油炸的产品,比如薯片、酥鱼、炸鱿鱼和炸小牛肉片等,很多咖喱中都含有隐藏的脂肪和热量。 6、选择一些生的和清蒸的菜肴点菜时最好选择清蒸的蔬菜或沙拉,蔬菜中包含有必要的维生素、矿物质、植物素、以及大量的纤维素,其能够让我们吃饱同时几乎不摄入任何热量;有规律地摄入蔬菜往往能够降低个体患心血管疾病及特定癌症的风险,因此给我们吃饭的碟子里放上一半五颜六色的蔬菜或色拉或许对于机体的健康非常有益。7、知道自己的弱点很多人都偏爱甜食或咸食,适当地摄入这些食物对于机体健康非常关键,无论我们的弱点是什么,都要控制对自己喜好食物的摄入量。8、避免摄入香肠香肠和其它加工肉制品含有大量的饱和脂肪酸、盐分以及防腐剂,大量摄入这类食物会增加个体患肠癌的风险;如果烧烤的话,尽量选择一些绞碎的肉或瘦肉串为原料制成的香肠来制作汉堡。 9、点心虽好,但要理性如果我们酷爱点心的话,要多与他人分享,或者寻找以水果为基础的饮食,在食物中添加糖或许也是“空的热量”的来源,它们能够给机体带来能量,但在维持机体健康的营养物中含量却较少,频繁的糖分摄入往往引发蛀牙的发生。10、零食:需要警惕,但不必担心在吃饭时应当有意识地注意零食的摄入水平和种类,但我们常常会忽视这点;相反我们会制作最美味和季节性的核果、樱桃和草莓;远离朗姆球(rum balls)、肉馅饼、加姜面包和布丁,不要让其成为圣诞节放纵的食物。最简法则如果我们不能面对上面这10条准则的话,那么就遵循最简法则,随便想想三种垃圾食品或喝一喝自己最喜欢的饮料,要么就减少一半的摄入量;当我们深入其中时,增加蔬菜的摄入量,并且养成健康饮食的习惯。在圣诞节期间,我们通常需要采用重要的战术来应对难缠的亲戚朋友以及一些尴尬的礼物时刻,采用相同的方法并且将其应用到饮食习惯中,那么我们或许将会以一种全新健康的面貌来在未来的一年中工作生活。 

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2016.12.28

千分之四的人可能携心脏病或中风变异基因

千分之四的人可能携心脏病或中风变异基因美国《科学》杂志官网日前报道了一项研究成果,将5万人基因组数据与电子健康记录结合后发现,每250个人中就有1人可能携带导致心脏病发作或中风的变异基因。欧洲和美国的几个项目积累了大量人群的DNA(脱氧核糖核酸),将这些数据与临床信息相结合,可发现基因突变与疾病之间的联系。为了找到罕见的疾病变异体并将患者DNA结果整合到保健档案中,美国宾夕法尼亚州丹维尔的盖辛格保健系统与纽约的一家生物制药公司,共同对50726名宾州患者进行了外显子组(遗传代码中蛋白质编码的组分,占整个基因组的1%)测序。患者平均年龄为61岁,大多数人来自宾州乡村,98%的人有欧洲血统,他们同意分享电子病历用于研究。此次参与者中的3.5%具有明显的与疾病相关的76种基因突变,比此前预期的2%要多。这些人被告知相关调查结果,以便根据需要调整保健措施。研究人员进一步深入研究了已知的导致异常高胆固醇水平的3种基因的临床影响。高胆固醇水平容易诱发心脏病和中风。正如预期的那样,具有这些家族性高胆固醇基因变异的229人,比一般人患冠状动脉疾病的可能性更大。这些研究迄今为止寻找到的是共同遗传标记,而非对疾病产生更大风险的罕见变异。田纳西州心血管疾病遗传学家丹尼尔·诺登说,筛选人群中的胆固醇升高变异很有意义。但研究具有局限性,毕竟5万个样本对于罕见基因变异来说,基数仍然较小。若在进一步的研究中寻找导致新疾病的基因变体,需要采取诸如奥巴马总统倡导的招募100万志愿者的精准医学研究计划,或从退伍军人事务部召集百万退伍军人的大规模采样方法,这样的项目将有助于弄清基因突变在引发少数民族罕见疾病中的作用。

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2016.12.28

科学家成功“复位”人类胚胎干细胞的生物钟

科学家成功“复位”人类胚胎干细胞的生物钟近日,一项刊登在国际杂志Development上的研究报告中,来自约翰霍普金斯大学的研究人员通过研究利用细胞信号化合物的混合制剂成功逆转了人类胚胎干细胞(ESCs)的生物钟,从而就能赋予细胞相同的灵活性;研究者表示,促进干细胞的发育生物钟回归至早期阶段或许就能够为我们提供机会来诱导人类干细胞成为任何一种类型的细胞,从而用作器官移植和遗传性疾病模型的开发中,最终这些细胞或许就能够被用来开发出嵌合体动物。研究者指出,这种名为3i混合制剂(三种化合物抑制剂)能够促进干细胞产生具有标准小鼠ESCs细胞的所有相同特性,这些细胞很容易生长,能够进行操控并且分化成为多种类型的细胞,同时并不含有来自转化的人类干细胞中的一些遗传不稳定性。研究者Elias Zambidis博士指出,当首批人类ESCs在1998年被分离时,对这些细胞进行研究的科学家们很快就注意到了这些细胞和20年前从小鼠机体中分离出的细胞间的差异性,小鼠的ESCs在培养皿中能够很快地生长起来,并且能够产生几乎所有类型的细胞或组织,同时还能够被遗传性修饰以及制造出嵌合体模型。然而研究者们发现将常规的人类ESCs诱导成为类似行使相同任务的细胞非常困难,人类细胞很难在实验室培养基中保持活性,其使得科学家们对组织类型的选择非常有限,而且插入或移除基因往往会产生实质性的影响;2007年时,科学家们发现了一类名为外胚层干细胞的原始小鼠干细胞,2015年多名研究人员通过研究发现,携带特定化学混合物的人类ESCs能够产生出和小鼠ESCs一样的“基态”,但随后的研究结果表明,这些细胞或许具有一些不稳定的遗传特性,这或许和开发细胞所使用的化合物有一定关系。研究者表示,这项研究中使用的3i混合制剂中的两种,即WNT和MEK/ERK信号通路的抑制剂此前能够帮助小鼠胚胎干细胞维持原始的状态,而第三种化和物质则是研究者添加的一种名为端锚聚合酶(Tankyrase)抑制剂的抗癌制剂。如今研究者利用这种新型制剂能够对超过25种人类干细胞系进行“复位”,而且这些“复位”后的人类ESCs能够表达出在很多可塑的小鼠ESCs中常见的基因和蛋白质,同时研究者还发现,这些“复位”干细胞的DNA中并不含有异常化的改变,新生的人类ESCs能够分化成为可移植的血管和神经细胞类型。目前研究人员利用这种新型的人类ESCs产生了血管、血液以及视网膜组织,相比常规人类ESCs衍生的细胞而言,这些细胞更加适合进行移植;研究者Zambidis表示,这种新型的ESCs还能够帮助开发出新型的嵌合体,以供人类器官来生长,同时也提供了可移植器官的潜在无限来源,研究者希望通过研究来阐明这种新型3i混合制剂的作用机制,从而更好地理解混合制剂如何促进干细胞“复位”。

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2016.12.21

肿瘤基因检测技术在相同患者机体中或会出现不同结果

肿瘤基因检测技术在相同患者机体中或会出现不同结果近日,一项刊登在国际杂志JAMA Oncology上的研究报告中,来自华盛顿大学医学院的研究人员进行了一项初步研究,对在相同癌症患者中进行的两项新一代遗传测序试验进行对比,结果发现两项测试结果可能存在明显的不同。每年遗传检测用于对数千名癌症患者进行测试;对癌症相关的遗传改变进行临床测试目前正处于不断发展之中,因为研究者需要更好地将患者同有效的疗法进行匹配,研究者解释道,这些测试目前用来针对肿瘤的特性开发靶向作用的药物,当然有些测试报告有时候也会告诉科学家们停止试验。然而研究者表示,目前针对个体而言并没有阐明不同测试检测结果的相似性如何;本文研究中我们就进行了这项研究,首先我们对接收来自两个检测平台报告的癌症护理实践社区的9名患者进行研究,两个研究平台分别为:FoundationOne和The Guardant360,第一个检测平台能够对肿瘤样本进行检测来对315个癌症相关基因以及28个其它的易于重排的基因进行特性分析;而第二个平台能够通过对患者的血液进行分析来检测释放到癌症患者血液中游离DNA的水平,该平台能够对70个基因进行检测。在其中一名患者中,两种测试方法均未发现任何遗传改变,剩下的患者则存在45个遗传改变,而两种平台仅仅发现了10个(22%)遗传改变,对于两名患者而言,两个平台出具的报告并无匹配的结果;在8名携带鉴别出的遗传改变患者的检测报告中共提到了36种可能的疗法药物,其中两种检测方法仅能够对9种药物在相同患者机体中进行研究;而在其中5名患者中,所推荐的药物中并没有重叠现象。研究者指出,本文研究表明,遗传测试结果或许因测试的应用方式而明显不同,由于两种类型的测试方法每年均对很多癌症患者进行了检测,因此研究结果在临床上是具有相关性的。相比The Guardant360平台而言,FoundationOne平台或许能够对更多的遗传改变进行检测,但研究者将两种检测方法的不一致性归结为其它原因。研究者认为,至少有其它两项研究结果相似,其中一项基于肿瘤组织取样,另一项研究对比了血液和肿瘤的检测方法。为了改善新一代测序检测在癌症疗法的临床可用性,研究者表示,他们后期还需要通过更为深入的研究来对比在更多患者机体中进行的测试结果。

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2016.12.21

由于化疗引起的心脏损伤在糖尿病患者中更严重

由于化疗引起的心脏损伤在糖尿病患者中更严重根据今天在2016年EuroEcho-Imaging 上提出的一项研究,化疗引起的心脏损伤在患有糖尿病的癌症患者中更加严重。首席作者Ana Catarina Gomes博士说,“葡萄牙阿尔马达医院Garcia de Orta的心脏病学家Ana Catarina Gomes博士说,”用蒽环类药物化疗诱发的心脏毒性正在越来越多地被报道,主要是因为现在有一部分较小比例的患者死于癌症。 “在未来几年,这种心脏毒性会增加癌症幸存者心力衰竭的负担。”她继续说:“好消息是,心脏毒性在早期阶段可以逆转,在明显的心力衰竭发展之前,特别是在治疗的第一年,当收缩功能障碍发展到80%时进行监测计划是非常有益的。”医院Garcia de Orta有一个由心脏病学,肿瘤学和血液学运行的监测程序,以监测接受基于蒽环类化疗的癌症患者。无论患者是否具有症状,在化疗之前、期间和之后均进行临床和超声心动图评估。这么做的目的是在早期检测心脏毒性,从而可以预防心力衰竭。在她的研究中,Gomes博士调查了患者在服用了蒽环类药物进行治疗后可能影响心脏损伤的可能性因素。目前的研究评估了心血管危险因素和癌症类型对心脏毒性发展的影响,以帮助识别更大风险的患者。该研究包括所有83名患者的监测计划,其中54人有乳腺癌,20人有淋巴瘤,9人有胃癌。对于每个患者,收集关于人口统计学,心血管风险因素(高血压,糖尿病,血脂异常,吸烟),以前的心血管和非心血管疾病病史的类型和蒽环类药物累积剂量的数据。超声心动图评估包括心室尺寸,收缩和舒张功能,射血分数和总纵向应变。在化疗开始前,治疗期间和化疗结束后进行测量。研究人员测试了每个危险因素对从基线到随访的超声心动图数据变化的影响。在不同类型的癌症患者之间比较超声心动图数据。共有39名患者接受多柔比星治疗,44名接受表柔比星。累积剂量在推荐的范围内,患者平均年龄为52岁(39?65岁),其中78%为女性。约31%患有高血压,7%患有糖尿病,16%患有血脂异常,16%为吸烟者。总体而言,全球纵向应变和左心室射血分数逐渐降低,化疗后与基线相比明显降低。高血压患者显示射血分数减少的趋势。尽管糖尿病患者的基线水平与非糖尿病患者相似,但在治疗期间患有全身纵向应变的患者有明显更大的下降。Gomes博士说:“全球纵向应变的亚临床减少是心力衰竭的早期预测因素,在糖尿病患者中尤其明显。在更大的研究中,统计学显示,高血压患者可能会有更大减少的趋势。与那些胃癌或淋巴瘤相比,乳腺癌患者具有较轻的心脏毒性作用。在化疗的第一个周期后,他们有更小的射血分数减少和更好的舒张功能,而在治疗中间,他们有更好的收缩功能。这些差异与所有癌症类型中相似的蒽环类药物的累积剂量无关。“我们假设癌症本身可以具有细胞因子诱导的直接心脏毒性作用,”Gomes博士说。 “这些心脏毒性作用可能随癌症的类型而变化。她的结论是:“癌症患者应严格控制心血管危险因素与生活方式的变化,如果必要的话,再进行药物治疗。但当然,心血管预防不应推迟化疗开始的时间,因为治疗癌症是要优先考虑的。”

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2016.12.13

你可以睁着眼睛打喷嚏么?

你可以睁着眼睛打喷嚏么?天气变化带来了许多事情:让人兴奋的假期、不同的服装或者也可能是让人烦恼的寒冷和流感季节。因此你周围的小伙伴们很可能更频繁地打喷嚏,这也许会让你思考在涂睫毛膏或者在闹市开车的时候,是否可能睁开眼睛打喷嚏呢?德克萨斯A&M大学医学院休斯敦医学院副院长和休斯顿卫理公会医院的过敏反应专家David Huston医生说,睁着眼睛打喷嚏是“绝对可能的”,但大多数人在打喷嚏时往往会自动闭上眼睛。这是一种自主反射,是对刺激(即打喷嚏)的一种无意识的动作响应。“事实上,睁着眼睛也能打喷嚏表明闭眼睛不是必须的。”Huston说。尽管目前没有关于为什么打喷嚏会引起眨眼响应的确切数据,但Huston和其他人推测,它反映了一种保护机制。“当检测到鼻子中的刺激性颗粒,我们的身体会努力通过打喷嚏以清除呼吸道中的颗粒物,”Huston说道。 “打喷嚏时自动闭眼,可以防止更多的刺激物进入眼睛。”有些人可能会紧张地回忆起这个古老的神话:警告不要睁开眼睛打喷嚏,否则眼球可能被弹出去。许多人指出了一个1882年4月30日发表在《纽约时报》上的事件:一个女人由于打喷嚏太猛导致眼球脱落。文章这样描述的:“一个女人昨天遇到一个奇怪的事故,在一辆小汽车上,她突然开始打喷嚏和并导致她的一个眼球脱落,让她遭受了生命中最严重的疼痛。”然而,这个谣言主要是基于眼球脱落与打喷嚏同时发生。事实上,Huston把这些故事称为“牵强的故事”。 “没有什么证据可以证实这种说法,”他说。 “打喷嚏释放的压力不可能导致眼球弹出,即使你睁着眼睛。”打喷嚏会导致血管压力增加,但不会导致眼睛或眼睛周围的肌肉压力增加。这种血管压力可导致破裂的毛细血管是人体内最小的血管,通常在眼球或面部可见。“例如,在分娩过程中,过度紧张可能会导致一些静脉出血,使母亲的眼睛或脸部出现红色或明显瘀伤,”Huston解释道。“但是,声称这种压力可能使眼睛从眼眶脱落是不负责任的。”在病菌充满活力的寒冷和流感季节,有一些方法可以保护他人免受喷嚏喷出的细菌感染。 “虽然你可以努力睁着眼睛打喷嚏,但是你身体的眨眼反应可能是在保护自己免受细菌感染。”Huston解释道。

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2016.12.13

ELISA实验代测之——质控血清的使用

ELISA实验代测之——质控血清的使用ELISA实验代测并不是任何人都可以进行检测的,一直以来都必须是专业的人员来进行的,而且该检测过程中必须要严谨、认真才能得出准确的结论。我相信很多朋友都想了解这个检测工作是怎么进行的,今天小编就满足大家,跟大家介绍下质控血清的使用。  质控血清的使用,如下所示:  卫生部临床检验中心制备的乙肝标志物质控血清,可以在-20℃保持半年定值不变。冰冻状态融化使用时,应先混匀,未用完部分可在4℃保存5天。不宜反复冰融或自行分装。开展某项检验的室内质控工作需要的质控血清,一般按3-6个月用量准备。自制的不定值质控血清,在一批质控血清将用完之前,需准备下一批质控血清。质控血清要求性能稳定,较长期内效价不变,其理化性质应与病人样本相近,这样才能有效地起到监测作用。  在此还要提醒大家的是如果大家需要找免费代测的地方,请一定找正规的场所,这样得出的结论不仅准确而且还有一定的保障。就算是有些地方需要付费才可以检查,也请一定不要因为那点钱而选择非正规场所,因为难保他们不会给大家造成损失,不过到那时候就为时已晚了。

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2016.11.24

ELISA检测试剂盒免疫测定夹心法

ELISA检测试剂盒免疫测定夹心法一般均采用水浴,可将ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA检测试剂盒板应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,最后将ELISA检测试剂盒板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。    无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指20-25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时,ELISA检测试剂盒板只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。ELISA检测试剂盒属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA检测试剂盒反应总是需要一定时间的温育。      温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时,产物的生成可达顶峰。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,在放射中多使反应在冰箱中过夜,以形成最多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA检测试剂盒中一般不予采用。

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2016.11.24

ELISA检测试剂盒的操作秘诀

ELISA检测试剂盒的操作秘诀有2种方法来检验试验的精确度:通常用变异系数来表示,①几个样品用ELISA法同时进行多次测定求出CV%;②不同时间对不同操作者对某几个样进行多次测定求出变异系数。CV是个体参数标准差与平均数的比率。        不论目测或分光光度计测定,均可作一个稀释度或一系列稀释度测定,一般常规诊断只用一个稀释度判断阳性或阴性就可以了,这样比较方便,现在推荐传染病的血清诊断用1:200一个稀释度。有些需要精确定量的,可作一系列稀释度测定。记录结果有下列几种方法:        1.“+"或“-":所有超过规定的OD值(如OD,0.4)的标本均属阳性,此规定OD值是根据事先测定大量阴性标本所取得的,此规定值是阴性标本的上限。ELISA检测试剂盒或者以一组阴性标本OD平均值加2~3个标准差作为阳性阈值。        2.直接以OD值来表示,如0.4、0.7、1.2,OD值越大,阳性反应越强,但此数值是在固定实验条件下得到的结果,而且每次实验都要有参考标本作对照。        3.以终点滴度表示:将标本作连续稀释,最高稀释度能出现阳性反应者(即OD值仍大于阳性阈值),即为该标本的滴度。        4.以“比值"表示:求出被检标本的OD值与一组阴性标本OD值的比值,例如为阴性标本的2倍或3倍,即为阳性,比值小于2.1而大于1.5为可疑,        5.以“单位"来表示:在测定被检标本的同时,再测定一个含已知单位数的阳性参考血清,用不同稀释度作ELISA检测试剂盒后,以OD值为纵坐标,单位数为横坐标,画出标准曲线。以后可根据被检标本的OD值,从曲线上找出相应的单位数,再乘于血清的稀释倍数,即可得出被检标本的单位数。        作试验时的阴性参考血清最好不要显色,否则会对结果判断带来困难,特别在目测时,当阳性标本OD值>2.0时,应作适当稀释后再作测定。

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2016.11.24

什么是传代细胞培养?

什么是传代细胞培养?原代细胞或细胞株或细胞系需在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的原代细胞或细胞株或细胞系或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续,这个过程体外培养称为传代细胞培养。一般认为,细胞培养形成单层汇合,细胞密度与生存空间有密切的关系,将培养细胞分散,以1:2或l:3或1:4以上的比率转移分散进行培养,即为传代细胞培养。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%。细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力最好时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。

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2016.11.17

肿瘤细胞体外传代培养及保种

肿瘤细胞体外传代培养及保种一. 细胞复苏与培养将液氮或- 80℃ 保存的肿瘤细胞于 37℃ 水浴,快速溶化,用 8.0ml 培养基混匀已融化的肿瘤细胞悬液,于 1500 转/ 分,离心 3 分钟。 弃上清,再吸取 8.0ml 培养基质混匀细胞沉淀,再 1500 转/ 分,离心 3 分钟,弃上清,细胞沉淀用 1.0ml 培养基混匀,备用。 另取一个 75cm2 方瓶,加入 14.0ml 培养基质,将上述制备的含 肿瘤细胞悬液(1.0ml)加入此方瓶中,于 37℃,5%CO2 孵育箱中培养。若此肿瘤细胞悬浮生长,大约 3-4 天细胞基质会变黄,5.0ml 细胞悬液可传代一个方瓶培养,可用 3-4 个方瓶培养,一个方瓶中呈对数生长的肿瘤细胞可达 1-1.5×107 个,根据试验所需,可决定传代的次数。 若此肿瘤细胞呈贴壁生 长,经过 3-4 天,肿瘤细胞生长至 80%-95% 单层时,弃上清,用 0.5mM 的EDTA(难消化的肿瘤细胞用0.25%胰酶1.0ml),处理肿瘤细胞大约 3-5 分钟,用倒置显微镜观察,当 90% 的肿瘤细胞变圆时,即可用弯管吹打并将消化的细胞转移到 15ml 离心管中,于 1500 转/ 分下,离心 3 分钟,弃上清,加少许培养基混匀,可传代 3 个 75cm2 方瓶扩大培养。二. 细胞冻存将对数生长的肿瘤细胞用 1 个 75cm2  方瓶按上述方法收集,于 1500 转/分离心 3 分钟,弃上清,用保种液( 含 10% DMSO 的小牛血清)3.0ml 混匀,分别加入到 2-3 只保种管中,写上肿瘤细胞名称、时间、保种者姓名,放- 80℃ 保存,次日将它们转移到液氮中保存( 注: -80℃  下可保存细胞半年至一年,液氮可保存细 胞 5-10 年,甚至更长的时间)。以上所有物品均需经过高温灭菌 ( 121℃,30 分钟) ,培养基质则经过过滤(0.22uM)除菌,所有操作均必须遵守无菌操作技术,避免细菌、真菌、病原体、衣原体等污染。

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2016.11.17

间接法测抗体

间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法(见图2-3)。操作步骤如下:1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。2)加稀释的受检血清,保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,血清中的其他成份在洗涤过程中被洗去。3)加酶标抗抗体。可用酶标抗人Ig以检测总抗体,但一般多用酶标抗人IgG检测IgG抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗体抗体结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与标本中受检抗体的量正相关。4)加底物显色本法主要用于对病原体抗体的检测而进行传染病的诊断。间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测相应抗体的方法。间接法成功的关键在于抗原的纯度。虽然有时用粗提抗原包被也能取得实际有效的结果,但应尽可能予以纯化,以提高试验的特异性。特别应注意除去能与一般健康人血清发生反应的杂质,例如以E.Coli为工程酶的重组抗原,如其中含有E.Coli成份,很可能与受过E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗体发生反应。抗原中也不能含有与酶标抗人Ig反应的物质,例如来自人血浆或人体组织的抗原,如不将其中的Ig去除,试验中也发生假阳性反应。另外如抗原中含有无关蛋白,也会因竟争吸附而影响包被效果。间接法中另一种干扰因素为正常血清中所含的高浓度的非特异性。病人血清中受检的特异性IgG只占总IgG中的一小部分。IgG的吸附性很强,非特异IgG可直接吸附到固相载体上,有时也可吸附到包被抗原的表面。因此在间接法中,抗原包被后一般用无关蛋白质(例如牛血清蛋白)再包被一次,以封闭(blocking)固相上的空余间隙。另外,在检测过程中标本须先行稀释(1:40~1:200),以避免过高的阴性本底影响结果的判断。 

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2016.11.10

双抗原夹心法测抗体

双抗原夹心法测抗体反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。此法中受检标本不需稀释,可直接用于测定,因此其敏感度相对高于间接法。乙肝标志物中抗HBs的检测常采用本法。本法关键在于酶标抗原的制备,应根据抗原结构的不同,寻找合适的标记方法。

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2016.11.10

免疫组化实验注意事项

免疫组化实验注意事项当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。那么在做免疫组化实验注意事项有哪些呢?下面我们来详细了解一下:    对照/标本无染色    ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。    ② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。    ③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,这一点是非常重要的。比如,如果一抗是兔来源的抗体,二抗一定要用抗兔的二抗来匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必须是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。    ④ 检查抗体所使用的稀释度及稀释溶液。    ⑤ 检查抗体的有效期和保存条件,尤其是标记了酶或荧光素的抗体,现在大多数试剂公司的抗体均要求在4~8℃条件下保存,应避免反复冻融,试剂保存时一定要避免与挥发性有机溶剂同放一室,以免降低抗体的效价。    ⑥ 检查标本的储存条件,最好用已知阳性的标本来同时做阳性对照。    ⑦ 检查色原/底物溶液,最简单的检测方法是将一滴标记有酶的抗体加入到制备好的底物溶液中,如果底物发生预期的颜色变化,则可排除底物的因素。需要注意的是,有些底物在制成工作液后应在一定时间内用完,否则会失效。    ⑧ 检查冲洗液是否和反应试剂匹配,溶液的pH值很重要,与过氧化物酶底物匹配的溶液中不应含有叠氮钠。    ⑨ 检查复染剂和封片剂是否和所使用的色原匹配。    弱阳性    如果阴性对照没有染色而阳性对照标本弱阳性,除了考虑上述因素外,还应考虑:    ① 标本的固定方式,不当的固定方式或固定时温度过高,都会影响到所检测的抗原的数量和质量。    ② 不适当的抗原修复方式,由于石蜡切片在制作的过程中固定剂对抗原的封闭作用,必须用抗原热修复或酶消化或两种同时使用的抗原双暴露法,至于使用哪一种方法,应参照生产厂家的说明,同时结合标本的具体情况而定。    ③ 抗体的稀释度是否过高或者孵育的温度/时间是否正确。一般试剂生产厂家都会对试剂给出一定的使用范围,但是由于使用者的标本来自各种组织,处理过程也不尽相同,所以应参照使用范围,对所使用的一抗进行梯度测试,找出最佳的使用浓度。    ④ 切片上遗留了过多的冲洗液,当抗体加至切片上时,等于人为地对抗体进行了进一步的稀释。    ⑤ 孵育时切片是否放置水平,否则会导致抗体流失。    如果阴性对照没有反应,阳性对照反应良好,而标本弱阳性,则可能是由于阳性对照不是同一种组织、或固定方式不同等原因所致。    非特异性染色    ① 是否有效地去除了内源性酶和生物素。应注意的是,并不是每一种组织均需要进行此步骤,但对于内源性酶或生物素丰富的组织,如肝脏、肾脏等,需考虑此原因。处理的方法为: 灭活碱性磷酸酶:最常用的方法是将左旋咪唑(24mg/m1)加入底物液中,并保持pH值在7.6~8.2,即能除去大部分内源性碱性磷酸酶,对于仍能干扰染色的酸性磷酸酶,可用50mmol/L的酒石酸抑制。    饱和处理内源性生物素:消除内源性生物素的方法是事先滴加亲和素,以饱和内源性生物素,使之不再有剩余的结合位点。具体方法是在ABC法或SP法染色前将切片浸于25ug/ml亲和素溶液中处理15分钟,PBS清洗15分钟后即可染色。    ② 是否选择使用了正确的封闭血清。电荷吸附所造成的非特异性背景染色消除方法是以二抗动物的非免疫血清,用PBS稀释为3%-10%溶液孵育切片,以封闭吸附位点。有时其它无关蛋白,如牛血清白蛋白也常应用。另外,取材时避开出血、坏死区亦极重要。最近有些国内的实验室应用5%脱脂奶粉替代血清进行抗原封闭,效果也不错。    ③ 所选择的抗体是否符合试验要求。因抗原不纯、标本片中含有与靶抗原相似的抗原决定簇等原因造成的非特异性染色只能通过采用高纯度、高效价的抗体、或针对更具特异性抗原决定簇的单克隆抗体来解决。    ④ 一抗的使用浓度是否过高。    ⑤ 清洗是否充分。应严格操作规程。因在缓冲液中含有一定量的盐,这亦有利于减低背景着色,通常0.05mol/l Tris-HCl,0.15mol/l NaCl已适用于多数染色方法,溶液内加入吐温20,效果更佳。特殊标记时,试剂公司一般都提供缓冲液的配方。    ⑥ DBA的使用是否正确。DAB的孵育时间和配制方式可以产生某些背景颜色,使用浓缩型DAB试剂盒时,请严格按照说明书标明的滴加顺序操作,注意校正蒸馏水的pH值,以确保实验结果的正确性;粉剂DAB溶解时,常有一些不溶性颗粒,这些颗粒须经过滤除去,否则可能沉积于切片组织上,产生斑点状着色。另外,DAB保存不妥产生氧化物亦可沉积于切片上,因此需将DAB保存于避光干燥处,现用现配,临用前加H2O2.孵育时间过长也会造成背景染色。    ⑦ 标本染色过程中是否曾经干涸,否则会造成边缘部的非特异性染色。    ⑧ 检查二抗与标本的内源性组织蛋白是否有交叉反应。

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2016.11.03

免疫组化染色具体操作步骤

免疫组化染色具体操作步骤1、石蜡切片脱蜡至水。    2、3%H2O2室温孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。    4、蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。    5、 5~10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭,室温孵育10分钟。倾去血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。    6、PBS冲洗,5分钟×3次。    7、滴加适当比例稀释的生物素标记二抗(1%BSA-PBS稀释),37℃孵育10~30分钟;或滴加第二代生物素标记二抗工作液,37℃或室温孵育10~30分钟。    8、PBS冲洗,5分钟×3次。    9、滴加适当比例稀释的辣根酶标记链霉卵白素(PBS稀释),37℃孵育10~30分钟;或第二代辣根酶标记链霉卵白素工作液,37℃或室温孵育10~30分钟。    10、PBS冲洗,5分钟×3次。    11、显色剂显色(DAB或AEC)。    12、自来水充分冲洗,复染,封片。    13、冰冻切片免疫组化染色步骤    14、冰冻切片4~8mm,室温放置30分钟后,入4℃丙酮固定10分钟,PBS洗,5分钟×3.用3%过氧化氢孵育5~10分钟,消除内源性过氧化物酶的活性。PBS洗,5分钟×2。

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2016.11.03

影响免疫组化的因素及对策

(一)免疫组化染色假阳性及其对策    1、消除内源酶的影响在涉及免疫过氧化酶的各种染色中,均用过氧化物酶来标记抗体,酶的作用是催化底物,使显色剂显色,正常组织中也含有一定量的过氧化物酶,其同样也能催化底物显色,而影响免疫组化染色的特异性,因此在加入标记酶前应设法将其灭活,以保证染色反应的特异性。    通常情况下,去除内源酶的方法是先用3%的过氧化氢溶液作用,但在含有丰富血细胞的标本中,由于血细胞中存在大量具有活性的过氧化物酶,能与过氧化氢产生强烈的反应,产生气泡而破坏组织结构和细胞形态。在OCT包埋的冰冻切片中,使用3%的过氧化氢化溶液亦会产生类似现象。此时可用3%的过氧化氢甲醇溶液孵育20分钟的方法灭活内源性酶。    灭活内源酶对正确判断含血细胞较多的标本,如骨髓、胎盘、脾等的染色结果十分重要。同样,正常细胞也含生物素,尤以肝、脾、肾组织含量为多。在应用亲和素试剂的染色中,内源性生物素易结合后继抗体,形成亲和素(或链亲合素)-生物素复合物,导致假阳性发生。消除这种非特异性着色的方法,是在采用生物素方法染色前,对标本进行亲和素处理,使其结合位点饱和。    2、抗体导致的非特异性着色高纯度、高效价的抗体是免疫组化染色的关键。出现下列情况时,可能发生非特异性着色。    (1)因抗原不纯而导致制备的抗体不纯,常见于多克隆抗体。可用亲和层析的方法除去非特异性抗体或应用高纯度的抗原制备抗体,采用单克隆抗体能避免非特异着色。    (2)标本片中含有与靶抗原相似的抗原决定簇,解决的方法只有采用针对更具特异性抗原决定簇的单克隆抗体。    3、消除非特异性背景着色    非特异性着色最常见的情况是蛋白质(抗体)吸附到组织切片中高度荷电的胶原及结缔组织成分上,防止非特异性背景着色的方法之一是在滴加一抗前在标本上加一种无关的蛋白质溶液,封闭荷电点不给一抗留有吸附余地,以保证一抗不会吸附到胶原纤维及结缔组织成分上。最常用的无关蛋白质溶液是所用二抗的同种动物非免疫血清。用产生二抗的同种动物血清,是为了避免二抗与预先加入的蛋白质结合引起假阳性染色。    用来阻断非特异性结合的血清不能有任何溶血现象。红细胞破裂会使其中的过氧化酶与底物作用,产生非抗原特异性的阳性着色。多克隆抗体因其成分复杂,更易造成背景染色。稀释液采用含1%BASpH7.4的PBS,同时在洗液中加入0.05%的吐温20(Tween20)有助于消除背景染色。    4、消除病理性色素的影响    当所检动物由于出血等原因造成吞噬含铁血黄素细胞增多时,为防止其与DAB显色呈现的黄褐色发生混淆,最好选用AEC显色剂。组织固定时间过长时,切片中容易产生福尔马林色素颗粒,影响结果观察,取材时应充分用流水冲洗,以消除影响。    5、切片制作不当引起的非特异性着色在严重变性、坏死及炎性病灶处,在胶原纤维和结缔组织部位,在切片裱贴不平、折皱处以及组织边缘部位常会出现非特异性着色。其中有的是因组织荷电状态改变而吸附抗体;有的机理不明;有的可能与组织边缘或皱折深部的槽形构型有关,解决的办法是在滴加一抗前,以二抗动物的正常血清(5%~10%)封闭、饱和电荷吸附位点和改善取材与制片技术。    6、清洗不充分而造成的非特异性着色应严格操作规程。缓冲液中含一定量的盐,其有利于减低背景着色,通常使用0.05mlo/LPBS,溶液内加入吐温20,效果更佳。特殊标记时,试剂公司一般都提供缓冲液的配方。另外,在清洗后至加入下一步试剂前,不能干片,干片的部位会出现非特异着色。    7、DBA显色产生的某些背景颜色使用浓缩型DAB试剂盒时,请严格按照说明书标明的滴加顺序操作,注意校正蒸镏水的pH值,以确保实验结果的正确性。粉剂DBA溶解时,常有一些不溶性颗粒,这些颗粒须经过滤除去。否则可能沉积于切片组织上,产生斑点状着色。另外,DAB保存不妥产生氧化物亦可沉积于切片上,因此需将DAB保存于避光干燥处,现用现配,临用前加H2O2.(二)免疫组化染色的假阴性及其对策    通常可因标本抗原保存,试剂质量及染色操作等因素引起假阴性。    1、组织处理不当固定不及时或固定时间过长常导致抗原丢失。浸蜡温度过高,时间过长将破坏抗原的抗原性。应改善技术条件,重新取材。    2、抗原修复由于目前所进行的常规石蜡切片标本均用甲醛固定,所形成的醛健、羧甲键等封闭了部分抗原决定簇,或由于蛋白之间发交联而使抗原决定簇隐蔽,因此在染色时,有些抗原需要先进行抗原修复或暴露。至于哪种抗原需要进行修复,需在建立染色程序时经实验确定。抗原修复分为化学方法和物理/化学方法。    (1)化学方法:主要是通过一些酶的作用,使抗原决定簇暴露。常用的酶有:胰蛋白酶、胃蛋白酶、尿素、皂素等。需根据需要使用。(2)物理/化学方法:主要有以下几种    ①单纯加热方法:将片子放入装有柠檬酸盐缓冲液的容器中,加热至沸腾,并持续10~15分钟,此方法操作简单、经济,适用于所有实验室,但对封闭牢固的抗原决定簇暴露不理想。②高压加热方法:将片子放入装有柠檬酸盐缓冲液的高压锅中,加热至喷气,并持续1~2分钟。    ③微波方法:将片子放入装有柠檬酸盐缓冲液的容器中,置微波炉加热至95℃以上,并持续10~15分钟,室温20~30分钟自然晾凉,使蛋白复性。此方法不仅利用热效应,且可通过微波的直接作用,打开蛋白之间的交联键,将已被封闭的抗原决定簇暴露和修复。    3、一抗的选用、稀释度及孵育时间第一抗体是免疫组化染色中最重要的试剂。应用何种一抗,应根据具体目的和要求决定。临床病原诊断,要求较高的敏感性和较广的识别谱时,可选用多克隆抗体或几株混合的单克隆抗体,来避免抗体反应谱过窄造成的假阴性。某些研究工作需要检测单一抗原决定簇的存在,此时必须选用单克隆抗体。一抗的参考稀释度常由“方格滴定”和相关检测结果推测得出,但因实验条件不同,对抗原活性的影响不同,最佳稀释度仍需经过摸索。任何一个抗体,其工作稀释度取决于如下因素:    (1)抗体的滴度即特异性抗体浓度;    (2)抗体的纯度,即抗体中杂蛋白的浓度。杂蛋白较高时,需要较高的稀释度;(3)孵育的时间,时间越长,所用的抗体稀释倍数越高;    (4)组织中抗原含量对抗体的应用浓度有不同的要求。在免疫反应中,过多的抗体将导致阴性结果,这种现象类似于凝集反应中的前带现象。因此需用“方格滴定”的方法找出适当的稀释度,    并得到最大强度的抗原染色和最低的背景着色。一般认为,某一稀释度下特异性染色较强且无背景着色,是较理想的稀释度,加长孵育时间可有效地降低所用抗体的浓度,有利于提高染色质量,节省抗体,可用37℃0.5h或4℃过夜的方法。只要控制好温度、抗体稀释度和孵育时间,一般都能得到理想的染色效果。    4、选择适宜的二抗二抗应用中常出现的总是是抗体本身与一抗不匹配,如抗兔的二抗,匹配鼠来源的一抗;或以抗鼠的二抗匹配兔来源的一抗,都会出现假阴性结果。    5、试剂造成的影响酶的活性降低,缓冲液内加有叠氮钠抑制了酶活性,底物中所加H2O2量少或失效,操作中漏加了某种试剂等,都会造成假阴性结果。如阳性对照不成立,则需认真检查操作程序,查找可能的原因。

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2016.11.03

HA-VSMC细胞培养注意事项

HA-VSMC细胞培养注意事项细胞特性1)来源:血管平滑肌2)形态:上皮细胞样,贴壁生长3)含量:>1x106 个/mL4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 细胞接受后的处理:1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 细胞用途:仅供科研使用。                       本公司的细胞培养操作规程,供参考一.培养基及培养冻存条件准备:1)准备F-12K 培养基(F-12K :GIBCO,货号:21127-022);添加0.05 mg/ml抗坏血酸,0.01 mg/ml胰岛素,0.01 mg/ml转铁蛋白,10 ng / ml亚硒酸钠, 0.03 mg/ml ECGS,10 mM HEPES,10 mM TES,1%P/S;北美胎牛血清(United States,GIBCO,货号16000-044),10%。2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。二.细胞处理:1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。3.轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行,最后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心,用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

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2016.10.24

PUMC-HUVEC-T1细胞培养注意事项

PUMC-HUVEC-T1细胞培养注意事项SV40T转化人脐静脉内皮细胞货号 HZ-006简称 PUMC-HUVEC-T1细胞数 1×106规格 1ml/T25价格 询价注意事项:1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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2016.10.24

近期线粒体疾病突破性进展一览

近期线粒体疾病突破性进展一览我们都知道,线粒体是为细胞功能的能量工厂,除了红血细胞外,其存在于机体中的每个细胞中,当然,线粒体的主要功能是提供细胞所需要的能量-三磷酸核苷酸 (ATP)。而线粒体疾病的发生则是由于线粒体功能不完整引发的一些疾病,线粒体疾病往往是由于线粒体DNA的突变造成的,从而影响线粒体的功能。近年来,科学家们在线粒体相关疾病的研究上取得了质的飞越,研究者们不断开发出诊断以及治疗线粒体疾病的新方法,比如最近一项刊登于American Journal of Human Genetics杂志上的研究报告中,来自英国纽卡斯尔大学的研究人员就开发出了一种新型的基因测试方法,该方法能够快速诊断线粒体疾病。

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2016.10.24

仅需加入水就可按需产生生物药物

仅需加入水就可按需产生生物药物在一项新的研究中,来自美国麻省理工学院和其他研究机构的研究人员构建出微小的包含将DNA翻译为蛋白所需的所有分子复合体的冻干颗粒(freeze-dried pellets),这可能成为按需生产药物和疫苗的基础。相关研究结果近期发表在Cell期刊上,论文标题为“Portable, On-Demand Biomolecular Manufacturing”。论文第一作者为加拿大多伦多大学助理教授Keith Pardee、麻省理工学院医学工程与科学研究所博士后Shimyn Slomovic、美国哈佛大学怀斯生物启发工程研究所(Wyss Institute for Biologically Inspired Engineering)研究员Jeong Wook Lee和哈佛大学怀斯生物启发工程研究所技术研究员Peter Nguyen。这些颗粒含有从细胞中提取出的几十种酶和其他分子,能够在室温下更长时间地保存。一旦加入水和冻存的DNA,这些颗粒开始产生这种DNA编码的蛋白。论文通信作者、麻省理工学院医学工程与科学研究所生物工程系医学工程与科学教授James Collins说,“它是一种模块化系统,能够经编程后在现场制造你需要的什么。你可能有上百个不同的DNA颗粒供你在现场添加。”Collins说,这些直径在几微米的颗粒可能轻松地被士兵、航天员或前往偏远地区的卫生保健工作者携带。无细胞的蛋白合成Collins和合成生物学领域的很多其他人之前设计出细胞来执行它们正常时不会拥有的很多功能,如产生药物或生物燃料。在过去几年,Collins已证实这种设计也能够在细胞外通过提取必需的细胞组分并且在纸张或其他材料上冻干它们来开展。Collins说,“这些不含细胞的提取物由几十种酶、DNA和RNA以及核糖体和其他导致转录和翻译发生的分子复合体组成。”在这项新的研究中,研究人员将这种纸张拿走:仅仅将这些细胞提取物冻干成至少在一年时间内保持稳定的颗粒。为了激活蛋白产生,他们加入水以便让这些颗粒复水,同时加入冻干的DNA编码来所需的蛋白。这种方法可能被用来产生一系列产物,包括药物和可能被用来诊断疾病的分子。在这项新的研究中,研究人员产生能够被用作一种白喉疫苗的小分子蛋白,以及有潜力抵抗细菌感染的抗菌肽。研究人员也对这些颗粒进行编程来产生形成一种多步骤代谢通路中的酶,其中这种通路合成一种复杂的被称作紫色杆菌素(violacein)的药物。紫色杆菌素具有抗癌活性和抗生素活性。就诊断应用而言,研究人员使用这些颗粒产生几种不同的抗体,包括一种能够检测艰难梭菌的抗体,其中艰难梭菌能够导致结肠产生炎症。容易储存这种方法可能比使用活的细胞更容易产生生物药品,这是因为这些冻存的组分容易储存和运输,因而它们不需在冰箱中冷藏。美国西北大学化学与生物工程副教授Michael Jewett(未参与这项研究)说,“Collins和同事们描绘出冻存的不含细胞的生物制造平台能够被用来按需合成治疗试剂、疫苗、生物化学试剂同时不需要一种冷供应链的未来。通过将工厂生产移动到第一线,我们可能能够提供如今不可能获得的药物。”

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2016.10.11

两篇研究揭示EBV病毒抑制人B细胞发出的免疫警报信号机制

两篇研究揭示EBV病毒抑制人B细胞发出的免疫警报信号机制爱泼斯坦-巴尔病毒(Epstein-Barr virus, EBV)阻止被感染的细胞遭受免疫系统攻击。这种病毒促进被称作微核糖核酸(microRNA,miRNA)的小分子产生,而这些小分子抑制被感染的细胞发出的警报信号。来自德国亥姆霍兹慕尼黑中心的研究人员阐明了这一之前未知的机制。相关研究结果近期发表在Proceedings of the National Academy of Sciences期刊和Journal of Experimental Medicine期刊上,论文标题分别为“Epstein–Barr virus microRNAs reduce immune surveillance by virus-specific CD8T cells”和“Epstein-Barr viral miRNAs inhibit antiviral CD4T cell responses targeting IL-12 and peptide processing”。由英国病毒学家Michael Epstein和Yvonne M. Barr首先描述的EBV在全世界绝大多数人体内发现到,但是它通常受到免疫系统的抑制。然而,人体不能够完全清除这种病原体。在德国亥姆霍兹慕尼黑中心基因载体研究部门主任Wolfgang Hammerschmidt教授的领导下,研究人员正在努力发现这种现象背后的原因。做迷藏:EBV让它自己隐身在总结这些发现时,Hammerschmidt说道,“我们的新研究证实利用miRNA,这种病毒阻止被感染的细胞给免疫系统发出警报。”EBV通常躲藏在B细胞中。如果这些细胞被EBV感染,那么这种病毒诱导它们增殖,因而扩大病毒库。这些B细胞通常以给免疫系统发出警报信号的方式作出反应:它们将这种病毒的分子呈递到它们的表面上,并分泌炎性细胞因子来吸引免疫细胞。德国亥姆霍兹慕尼黑中心基因载体研究部门科学家Manuel Albanese说道,“正是这种警报信号被EBV病毒制造的miRNA所抑制。”他的同事Takanobu Tagawa补充道,“这些miRNA阻断拉响这种警报的蛋白的产生。”可能有望开发出新的癌症疗法鉴于EBV病毒促进B细胞分裂,因而特定类型的癌症,研究人员正在考虑如何将这些发现应用于癌症疗法中。Hammerschmidt说,“我们发现的这个机制使得杀伤性T细胞和辅助性T细胞失活,即便当它们直接遇到被感染的细胞。如果破坏这种阻断是可能的话,那么这可能是治疗癌症的一种有趣的方法:免疫系统可能更好地抵抗由EBV触发的肿瘤。”研究人员说,对其他疾病而言,针对利用关于阻止特异性miRNA产生的活性物质的临床研究已开始展开了。

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2016.10.11

沪震生物2016年国庆节放假通知

 2016年国庆节放假通知   各位同事:   2016年国庆节将至,根据国务院办公厅相关通知精神,并结合上海沪震生物实际情况,经研究决定,现将有关事宜通知如下:   一、放假时间:10月1日至7日放假调休,共7天。10月8日(星期六)、10月9日(星期日)上班。   二、放假前请妥善安排好相应工作,离开前请整理好自己的办公区,关好门、窗及公司办公设备;   三、请大家在放假期间注意出行安全,假期结束之后请大家按时返回公司上班。   祝全体同仁国庆节快乐!                                                                          上海沪震实业有限公司                                  2016年09月30日 

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2016.09.30

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