细胞详情:
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生长特性 半贴半悬
细胞形态 圆形/上皮细胞样
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
年龄(性别) 不详
组织来源 未知
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肺癌细胞
商品属性:
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产品名称 | pc-9人肺癌细胞 | 鉴定 | STR鉴定 |
种属 | 人类 | 货号 | A01X923 |
温度 | 液氮 | 细胞形态 | 圆形/上皮细胞样 |
英文名称 | pc-9:pc9 | 生长特性 | 半贴半悬 |
细胞系操作步骤:
![2.png 2.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/565fc5ad-93fe-4bb0-a2aa-0a06fcd389dc.jpg)
(1) 细胞系培养:取6cm细胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液,37℃ CO2培养密度至40%~60%,密度过大,转染后不利筛选细胞。
(2) 转染液制备:在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)
A液:用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。
B液:用不含血清培养基稀释2ul脂质体。
分别将A液与B液轻弹混匀,静置5分钟。
(3) 吸取B液加入至A液中,轻弹混匀。室温中置10-15分钟。
(4) 转染准备:用1mL不含血清培养液漂洗两次,再加入4mL不含血清培养液。
(5) 转染:把A/B复合物缓缓加入培养液中,摇匀,37℃温箱置6~24小时,吸除无血清转染液,换入正常培养液继续培养。
(6) 瞬时转染后,可在48h-72h细胞长满之后,提取细胞蛋白或者RNA,验证敲减/过表达效率。
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细胞处理:
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1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
![5.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/1d936cab-c861-4e70-9aef-f5aa54c41c7d.jpg)
![6.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/aa3174ec-40ca-4417-8694-89980f720ddc.jpg)
公司正在出售的产品:![2.png 2.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/43bca030-c1b8-492c-b8cc-901fa92e24d6.jpg)
大鼠角膜基质细胞 | 人抗su抗体(aPT1/aPT2)ELISA检测试剂盒 |
重组人白细胞介-2(冻干粉GMP级) | 人沙眼衣原体抗体(IgA)试剂盒ELISA |
人转化生长因子B3 | 大鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA检测试剂盒 |
人转化生长因子B2 | 丝状网尾线虫PCR试剂盒 |
重组人白细胞介-2(冻干粉GMP级) | 猪肠道杯状病毒RT-PCR试剂盒 |
重组小鼠白细胞介-2 | 犬新孢子虫PCR检测试剂盒 |
重组小鼠白细胞介-2 | 马皮疽组织胞浆菌PCR检测试剂盒 |
人骨形态发生蛋白受体I型beta | 肺孢子虫通用PCR试剂盒 |
人骨形态发生蛋白受体I型beta | 温和气单胞菌PCR试剂盒 |
重组人白细胞介-4 | 辛诺柏病毒PCR检测试剂盒 |
重组人白细胞介-4 | 反刍兽艾利希体(反刍兽埃立克体)PCR试剂盒 |
重组人白介-13 | 放线菌属通用PCR试剂盒 |
重组大鼠血管内皮生长因子 VEGF 164 | 小蛇菌属通用PCR试剂盒 |
人转化生长因子B3 | pc-9人肺癌细胞鄂木斯克出血热病毒PCR检测试剂盒 |
人转化生长因子B3 | 前胶原C内肽mei增强子1ELISA试剂盒 |
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