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细胞计数及活力测定实验
2019/04/30 11:24
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方案摘要：
产品配置单：
台盼蓝染色液(1%)50ml/100ml
型号： 50ml,100ml
产地：
品牌： 远慕
¥1
参考报价
Trypanblue台盼蓝染液
型号： 10ml
产地：
品牌： 远慕
¥1
参考报价
台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒 100T/500T
型号： 100T/500T
产地：
品牌： 远慕
面议
参考报价
台盼蓝染色液(0.4%)50ml/100ml
型号： 50ml,100ml
产地：
品牌： 远慕
¥1
参考报价
方案详情：
一、原理
培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。
在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用。复苏后的细胞也要检查活力，了解冻存和复苏的效果。
用台盼兰染细胞，死细胞着色，活细胞不着色，从而可以区分死细胞与活细胞。利用细胞内某些酶与特定的试剂发生显色反应，也可测定细胞相对数和相对活力。
二、仪器、用品与试剂
1、仪器与用品：普通显微镜、血球计数板、试管、吸管、酶标仪（或分光光度计）
2、试剂：0.4%台盼兰，0.5%四甲基偶氮唑盐（MTT）、酸化异丙醇
3、材料：细胞悬液
三、操作步骤
（一）细胞计数
1、将血球计数板及盖片用擦试干净，并将盖片盖在计数板上。
2、将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间。
3、静置3分钟。
4、镜下观察，计算计数板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算：
细胞数/ml=4大格细胞总数/ 4×10000
注意：镜下偶见由两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团占10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。
下载本篇解决方案：
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