如何获得正确的支原体检测结果？

上海远慕生物科技有限公司

2020/09/23 09:18

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可以说，到目前为止，针对体外细胞培养的支原体检测的方法还没有一种单独使用就可以保证100%正确，既不会漏检（假阴性），也不会多检（假阳性）。

（1）支原体固体培养法。通过固体培养法无法检测污染细胞的一种最常见的支原体，即猪鼻支原体（M.Hyorhinis）。这是因为猪鼻支原体无法在支原体固体培养基上形成可见的菌落，而猪鼻支原体约占所有支原体污染的20-50%。这就意味支原体固体培养法漏检率高达20-50%。

（2）PCR法。PCR法导致的假阳性大家比较熟悉，无需多说。值得注意的是，由于细胞培养液中，经常会含有强烈抑制PCR扩增的代谢产物，如果不进行样品的前处理而直接使用细胞培养原液进行PCR检测，产生假阴性的概率是非常大的。

（3）荧光染色法。由于该方法本身的灵敏度较低，轻度的支原体污染往往无法检测出来。该方法漏检率也不会低。

（4）检测支原体特异性酶的方法，比如Lonza公司的MycoAlert Plus Mycoplas Detection Kit和上海远慕生产的《发光法支原体检测试剂盒》。主要缺点是发光值有一定的波动，处于检测下限边缘的读值可能会造成误判。

（5）《一步法恒温支原体检测试剂盒》该方法尽管有许多优点，但是目前为止，我们只能保证该试剂盒能检测出说明书上列举的13种支原体，虽然这13种支原体大约占了所有污染细胞的支原体种类的99%左右，但是该方法也不能保证100%的支原体检出率。

综上所述，单独使用目前市面上的任何一种支原体检测试剂盒，都无法做到100%正确，既不会漏检（假阴性），也不会多检（假阳性）。严格的支原体检测，至少需要使用两种，最好使用三种不同原理的支原体检测方法同时进行检测，才能使检测结果接近100%正确。

如果您想得到100%正确的支原体检测结果（比如，开展细胞治疗的客户，进行干细胞培养的客户，生产血清、胰酶、培养液的客户，出售各种原代培养细胞系和肿瘤细胞系的客户等），任选本公司生产的《一步法恒温支原体检测试剂盒》、《PCR法支原体检测试剂盒》、《发光法支原体检测试剂盒》和《探针法支原体检测试剂盒》中的两种进行检测，将会得到比较满意的结果。如果几种不同支原体检测方法的检测结果一致，正确率几乎就是100%