牛血清白蛋白是牛血清中的一种球蛋白,又称第五组分。血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生物和机械保护作用和载体作用。
牛血清白蛋白的作用
牛血清白蛋白一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入牛血清白蛋白后,它可能起到保护或载体作用,不少酶类添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。对多数底物牛血清白蛋白而言,牛血清白蛋白可以使酶切更完全,并可实现重复切割。在37℃,酶切反应超过1h时,牛血清白蛋白可以使酶更加稳定,因为在不含牛血清白蛋白的反应缓冲液中,许多限制性内切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。
牛血清白蛋白,英文名称为Bovine Serum Albumin,也称Bovine albumin,或Cohn Fraction V,简称BSA。BSA有着极其广泛的实验室应用,在免疫实验中常用作封闭剂,包括ELISA、WB(Western Blot)。作为载体蛋白,将其交联于半抗原和其他弱抗原可以使它们在抗体生产中具有更强的免疫原性。在限制性内切酶消化反应中,BSA常常被用作一些酶的反应稳定剂,并且能防止它粘附到管壁和枪头上。BSA也常用于生物制药的生产过程或者作为营养物用于细胞和微生物培养。除此之外,还作为蛋白定量检测的标准品使用。我们提供的BSA产品,使用优质牛血浆,利用热休克法(Heat Shock)法制备而成。
牛血清白蛋白的成分
血清组成成分虽大部分已为人所知,但还有部分不清楚。在牛血清白蛋白中我们已知的成分大概有以下几种。
1、蛋白质:是牛血清中主要成份。除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外主要还有白蛋白,球蛋白。纤维粘连素细胞促进细胞附着;α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用;胎牛血清中含胎球蛋白促细胞附着;转铁蛋白能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用。
2、多肽:血小板促生长因子能促细胞分裂,是多肽家庭的主要成员之一,是主要的促细胞增殖因子;成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,血清中含量虽很少,但对细胞生长也有一定作用。
3、激素:胰岛素:促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关。类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用。促生长激素:促细胞增殖效应。
4、其他成份:氨基酸、葡萄糖、酮酸等对多种营养成分的合成培养基意义不大。与蛋白相结合状态的微量元素对细胞培养有意义。
关于牛血清白蛋白的常见问题
1、标准牛血清白蛋白在应用时浓度要适宜,不可太高。牛血清白蛋白组分V最-好现配现用,已经配好的溶液即使是-20度保存一段时间后也会造成你的结果偏高。
2、牛血清白蛋白由热容易凝固,当加热到50°C或以上时,白蛋白相当迅速形成疏水性聚集体,不恢复到冷却后的单体,在某种程度上低温聚合预计也将会发生的,但是在相对较低的利率。
3、天然牛血清白蛋白(BSA)的等电点为4.6~5.8,经无水乙二胺(EDA)和碳化二亚胺(EDC)反应,改性后的牛血清白蛋白等电点为8.6。
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