细胞实验室建设，你必须知道的5件事!

组织细胞培养技术研究的对象不一般，它是具有完整生命力的生物单位，因此与其他一般实验工作不同，要求保持无菌操作，避免微生物及其他有害因素的影响。本文将主要针对细胞培养实验室，讲解建设使用注意事项。
 
      一、基础建设方案之墙顶地
       （1）墙体
       废物暂存间、强电间、水处理间可采用乳胶漆墙面，其他实验室区域采用玻镁板墙体。玻镁板是氧化镁、氯化镁、和水三元体系，具有防火防水、无味无毒、高强质轻、施工方便、使用寿命长等特点。
       （2）天花
       防火等级达到A级：天花选用彩钢板。实用美观，且易清洁消毒、光滑防水。
       防火等级达到B1级：天花选用铝扣板。可大幅度降低通风和机电施工及维修的难度和强度，也利于日后的正常维护和检修。
       （3）地面
       地面材料的选择通常要求抗静电、抗菌耐磨、耐腐蚀、防火、防尘、降噪音等，色泽选择和墙体统一或相似的2.2mm厚进口品牌PVC卷材，防火等级为B级以上。
 
       二、细胞实验室的设计分区

       细胞培养实验室应能进行六方面的工作：
       无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。
       无菌操作区——
       理想的无菌操作室应划为三部分：
       ●更衣室：供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
       ●缓冲间：位于更衣间与操作间之间。
       目的是为了保证操作间的无菌环境，同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。

 

       ●无菌操作间：专用于无菌操作、细胞培养。
       大小要适当，且其顶部不宜过高（不超过2.5m），以保证紫外线的有效灭菌效果；
       墙壁光滑无死角以便清洁和消毒；
       工作台安置不应靠墙壁，台面要光滑压塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。
       孵育区——本区对无菌的要求虽不比无菌区严格，但仍需清洁无尘，因此也应设置在干扰少而非来往穿行的区域。孵育可在孵箱或可控制温度的温室中进行，后者费用高，一般实验室多采用孵箱进行工作。
       储藏区——主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等，环境需要清洁无尘。
       制备区——主要进行培养液及有关培养用的液体等的制备。
       清洗和消毒灭菌区——清洁和消毒灭菌区应与其他区域分开，主要进行所有细胞培养器皿的清洗、准备、消毒及三蒸水制备等工作。
 
       三、保卫细胞，横扫污染源的7大战场
       2008年8月，《The Scientist》期刊发表了一篇题为 A case of mistaken identity 的文章，文中指出现已发表的 650 多项研究中所用的乳腺癌细胞可能并不是真正的乳腺癌细胞。
 
       对于细胞培养实验室来说，杜绝一切可能的污染源至关重要。
 
       ①细胞房入口：和缓冲间相连，缓冲间内备消毒服装和鞋，口罩等，入内换上。进入后经过洗手-消毒—戴手套-再消毒。

 ②水浴锅：对其进行定期消毒，也可以向水浴中加入适量的杀菌剂来抑制各种细菌、真菌的滋长。最好用恒温孵育器代替水浴锅，确保温控精确性和均一性的同时也减少了污染的概率。
       ③显微镜：敞口放置培养皿或培养瓶。防止造成溶液飞溅，或观察时污染物镜，并进一步造成交叉污染。
       ④CO2 培养箱：对于日常使用来说，至少每月清洁培养箱一次。尽量减少门打开次数，避免对温度、培养基中 pH 值调节的影响。

       另外要特别注意，CO2培养箱不能直接放在地板上。
       ⑤生物安全柜：在开始实验前，必须对超净台进行全面消毒，正确的做法是对整个机柜表面进行擦拭。还有一件事必不可少，那就是事先打开安全柜通风系统，流通空气，直到原有的内部浊气都被排出。
       ⑥离心机：和显微镜一样，离心机也是交叉污染的重灾区。平日里应保持离心机盖关闭，拒污染于千里之外。离心机内部的小缝隙是藏污纳垢之处，定期清洁转子和腔室至关重要。

       ⑦窗户 ：细胞房通常没有窗户，如果有窗，那么无论什么时段，窗户都不允许打开。同时拉上窗帘，做好请勿开启的警示标记。
 
       四、珍爱生命，看好那个“液氮罐”

       1992年，一艘日本放在冻存船的液氮罐外胆破裂，导致原有的罐内9.3bar的正常压力，瞬间变成了68.7bar。接着整条船炸了，方圆400米内的车和房子全部损毁，船被炸出了350米。
       另外，液氮罐的作死方式不光是爆炸，还能很温和。

       那是爆炸的8年后，在爱丁堡的MRC西城医院冻存细胞的实验人员詹姆斯，由于液氮盖子没关导致的泄露，最终窒息死亡。
 
       这并不是个例，类似的事故时有发生。因此工作人员在进行实验室相关操作的时候，一定要实时控制好液氮柜。这既是对自己生命的负责，也是对他人生命的尊重。
 
       五、找专业人，做专业事
       建设一座功能完善的实验室，要由专业的人员进行专业设计，要全面综合考虑，遵循以人为本的原则，建成正规化、标准化的实验室达到最佳的使用效果。