在电泳实验或其他核酸分离实验中,常用EB来识别和显示核酸条带。EB被紫外线照射时能发出红褐色的荧光。尽管EB是一种高效的显色剂,但它的高危险性要求特殊的安全管理和回收流程。
EB是一种强诱变剂(可能造成遗传性危害),直接接触有中等毒性。EB可以通过皮肤吸收,因此应当避免一切与EB的直接接触。
致力于凝胶电泳实验的安全性,我公司*新研发的核酸荧光染料—GenGreen和蓝光切胶仪,解决了电泳实验染料毒性和紫外线对人体和核酸的伤害困扰。
GenGreen染料使用过程简单,稳定性好,同时因为其跑胶带型好,灵敏度高,背景低,而深受广大用户喜爱。
GenGreen核酸染料特点:
1.安全无毒
独特的油性和大分子特点,使其热稳定性好,不易挥发,不能穿透细胞膜,安全无毒。是新一代替代EB的*佳核酸荧光染料。
2.与蓝色可见光激发装置完美结合
蓝光切胶,双重安全。GenGreen核酸染料既适用于 254 nm紫外凝胶成像系统(与EB相同光谱特性),又与蓝色可见光激发装置完美结合,使用蓝光切胶仪切胶,既避免了紫外切胶对操作人员眼睛和皮肤造成的伤害,又避免了紫外对核酸产物的损伤。
3.高灵敏度,低背景
GenGreen核酸染料荧光信号强,背景信号低,具有高信噪比,在紫外成像下灵敏度与EB相当,但在蓝光下灵敏度比EB更高,使用也更加灵活方便。
4.稳定性极好
适用于微波或其他方法加热,可以在室温下保存。
5.广泛的适应性
适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色,可用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳; dsDNA、ssDNA或
RNA染色。
6.操作简单:使用方法同EB
GenGreen激发光谱
Ex(nm):254 Em(nm):504
GenGreen核酸染料是为了攻克核酸染料毒性问题,而研发设计的一款油性及大分子物质,因为它的这种特性使其难以穿透细胞膜进入细胞内,正是这一特性降低了染料的细胞毒性。
相反, 由于SYBR Green I 能快速的被细胞吞入,而广泛地用于活细胞线粒体和核 DNA 染色。已知 SYBR Green I 对紫外线导致的突变有强烈的增强作用( Ohta et al. Mutat. Res. 492 , 91(2001) ),SYBRGreenI 其高细胞膜透性,使它成为凝胶染色的有害物质。
分别用SYBR GreenI、GenGreen做细胞毒性试验测试。
目的:通过试验测试GenGreen是否能够穿透活细胞膜进入细胞核内。
一:安全性测试
(A)5min
GenGreen SYBR Green I
(B)30min
GenGreen SYBR Green I
在37°C下,分别使用1× SYBR Green I, GenGreen 对HeLa 细胞进行孵化,并分别在5分钟(A)和30分钟(B)后观察。实验显示SYBR Green I染料迅速进入细胞并将细胞内的核酸染成亮绿色,而GenGreen 则因为不能穿透细胞膜而完全没有进入细胞内, 足以证明GenGreen是安全的。
结论:
GenGreen因为不能穿透细胞膜而完全没有进入细胞(Hela细胞)内, 证明GenGreen是安全的。
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