远慕教您如何正确选择生化试剂盒

    生化试剂分为很多，主要有电泳试剂、色谱试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂、透变剂和致癌物质、杀虫剂、培养基、缓冲剂、电镜试剂、蛋白质和核酸沉淀剂、缩合剂、超滤膜、临床诊断试剂、染色剂、抗氧化剂、防霉剂、去垢剂和表面活性剂、生化标准品试剂、生化质控品试剂、分离材料等等。随着新技术、新项目的快速发展，在开展新实验前，面对多种试剂盒，我们该如何选择合格有效、适合本实验室的试剂盒呢？远慕今天就给您做个小总结，希望对您能有所帮助！
   

    通常生化试剂盒可分为液体单试剂和液体双试剂，前者特别适用于半自动生化分析仪和小型自动生化分析仪，使用方便，缺点是稳定性较差。与单试剂相比，双试剂提高了抗干扰能力，具有稳定性能较好，可消除样品自身空白等特点。此外还有多项同测组合试剂、浓缩试剂等。

一、试剂空白吸光度

    用蒸馏水做空白，用指定的空白液加入试剂作为样品测试，在测试主波长下，记录测试启动时的吸光度（A1）和约5分钟后的吸光度（A2），A2测试结果即为试剂空白吸光度测定值，应符合生产企业给定范围。这是判定试剂质量的一个有效指标。

二、试剂空白变化速率

    对于速率法试剂盒，用指定的空白液加入试剂作为样品测试时，在测试主波长下，记录测试启动时的吸光度（A1）和约5分钟(T)后的吸光度（A2），计算试剂空白吸光度变化率（DA/min），应不超过生产企业给定值。测定试剂空白吸光度变化（ΔA/min），用来检查试剂在工作状态下的稳定性。但事实上，试剂空白吸光度变化速率无法反映试剂盒的稳定性，试剂空白吸光度变化速率主要反映干扰程度和仪器的稳定性。

三、分析灵敏度

    用吸光度差值（ΔA）或吸光度变化（ΔA/min）来表示单位浓度的被测物反应所引起的信号变化，其含义类似摩尔消光系数，应符合生产企业给定范围。需要注意的是，分析灵敏度不是越高越好，以适合待测物检测范围为原则。分析灵敏度一般用于批间比较，较能反映制造商的配方、原料的一致性。

四、线性范围 

    取高浓度样品和低浓度样品按不同比例混合成5个浓度做线性试验。线性范围内的分析性能应符合如下要求：①线性性相关系数r应≥0.990；②线性偏差应不超过生产企业给定值。试剂（盒）的线性范围越宽，临床复测几率越小，但与样品/试剂比例成反比。

五、重复性

 
    1.批内重复性：在重复性条件下，用高、中、低三个水平浓度（高、低浓度应超过参考区间20%～30%，中浓度水平在参考区间之内）的控制血清或新鲜人血清测试试剂，重复测试至少10次。 

    2.批间重复性：用质量控制血清测试3×3（3个批号，每个批号取3瓶）批间差，较能反映制造商的配方、原料的一致性。干粉或冻干试剂还需测定批内瓶间差，测定同一批号的试剂20瓶，用变异系数（CV）来表示。变异系数（CV）不超过生产企业给定值。

六、准确度

 
    1.相对偏差：直接用试剂盒测定参考物质（平行3次），评价测定均值与靶值的偏离程度。也可用由参考方法定值的高、中、低三个浓度的人混合血清，用试剂盒平行测定3次，计算均值与定值的相对偏差。

 
    2.比对试验：既无参考物质、参考血清，也无标准品，也可用比对试验来验证准确度。

 
七、校准品溯源、质控品赋值

 
    1.校准品溯源性：根据GB/T21415及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，明确溯源途径。

 
    2.质控品赋值有效性：质控品的测定结果应在试剂盒规定的范围内。 

八、稳定性

 
    1.效期稳定性：取已到效期的试剂盒按以上评价方法对试剂盒性能指标进行评价。

 
    2.热稳定性试验：生化试剂盒一般置2-8℃保存，为了快速有效地评价试剂盒的稳定性，可以用加速试验来估计。

 
    3.开瓶稳定性：干粉试剂开瓶后（复溶后）在规定的储存条件下保存至预期时间内，产品的性能至少应符合线性和准确度的要求。