大多数细胞因子是免疫应答的产物，在动物和人体内可发挥免疫学效应，终会通过上调免疫细胞对抗原物质的免疫应答，介导炎症反应而清除抗原物质。抗原刺激和病原微生物感染均可诱导体内产生细胞因子，因此细胞因子与疾病的发生、发展有着密切的关系，它们可参与疾病的发生、发展。另一方面，细胞株的培养、冻存和复苏分为以下三点：细胞株的培养、冻存和复苏1）细胞株的培养和传代 培养： 用于检测细胞因子的细胞株通常培养于含10％小牛血清和抗生素的培养液中，培养细胞因子依赖细胞株还有加入适量细胞因子。在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养，3～4天传代一次。★ 悬浮生长细胞的传代： 直接直接吸去或离心后吸去培养上清液，用新鲜培养液悬浮细胞，1：3或1：5稀释细胞后，分瓶继续培养。★ 帖壁生长细胞的传代： 吸去培养液，用PBS洗涤细胞一次，加入消化液，在37℃中消化约3～10分钟，待细胞开始脱落时，倒去消化液，加入新鲜培养液，悬浮和吹打分散细胞。也可以待细胞完全消化脱落，500×g离心5分钟，去除消化液，用新鲜培养液悬浮细胞。1：3或1：5稀释细胞后，分瓶继续培养。2）细胞株的冻存： 1． 取培养2～3天生长旺盛的细胞，用细胞培养液将细胞配成2×106～2×107/ml。 在1ml细胞冻存管中加入0.5ml细胞悬液，0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亚砜（或甘油），混匀后密封。置4℃ 1小时，－20℃ 2小时，然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上过夜后浸入液氮中。3）细胞株的复苏： 复苏时，从液氮中取出冻存管，立即置37℃水浴中融化细胞。将细胞直接加入10ml含15％小牛血清的RPMI-1640培养液中，置37℃ 5％CO2饱和水汽二氧化碳培养箱中培养。悬浮细胞待细胞全部沉降后小心吸去上清液，更换新鲜的上述培养液，继续培养；帖壁细胞则培养2～3小时，待细胞帖壁后，倒去培养液，更换新鲜的上述培养液，继续培养。也可以在加入新鲜培养液以后，500×g离心5分钟，去上清液，加入新鲜培养液，继续培养。 

      近年来随着对外交流的不断深入，计量认证和实验室审查认可工作的持续开展，实验室的质量管理工作越来越受到重视。实验中的质量控制主要指的是为完善实验室内质量水平达到要求而进行的一项技术活动。对实验室的检测过程进行监测，从而对检验结果进行评价，确定其是否可靠，并针对质量环节中不满意因素进行调查与分析。微生物实验室由于人为和非人为影响因素较多，一直是实验室质量管理中的弱项。　　　　一、几个质量控制相关的定义　　　　质量控制：满足质量要求的操作技术和活动。　　　　质量保证：为了满足实验室质量要求 ，制定相应的计划，实施证明（记录）所进行的一系列的系统活动　　　　外部质量控制：通过互相校准和/或检验对实验室的操作和结果所进行的控制　　　　内部质量控制：实验室内部采取的以对比分析、跟踪以及相关方法，对实验室工作的连续性控制计划。　　　　质量手册：是描述质量系统元素的文件或文件的集合。　　　　二、实验室要求　　　　按国家实验室认可的概念，是指一个能够承担法律责任的实体。这里所指的是实验室（微检室）内建立的质量管理的保证体系。人员、房屋 设备满足检测工作需要。　　　　1、人员要求　　　　实验室人员的分类：管理人员、技术人员、技术支持人员等。　　　　相应岗位的人员，应具备相应的技术能力，相应的技术能力证明（证书及证件）。　　　　微生物检验室因有相应技术能力的人负责室内的技术工作。并设立质量监督员。　　　　2、房屋条件要求　　　　房屋要求：具有适宜、足够宽敞、通风有良好的照明。　　　　房屋内墙面及地等应采用易于清洁的材料，保持房间清洁。　　　　房间的设置，以其开展的工作内容加以分用，设立专用房间。　　　　房间的大小还应根据从事实验人员的进入数量上加以考虑。　　　　3、环境设施要求　　　　专用房间的温湿度控制与记录（样品存放室）　　　　特殊环境的微生物指标控制与记录（无菌室等）　　　　专用工作室的标准操作规程和定期的检测校准程序。（洁净室等）　　　　特殊环境中的专用设施质量控制应符合有关要求（净化工作台）　　　　三、设备控制和程序　　　　微生物检验常用需监控的设备和仪器：　　　　1、培养箱（生化培养箱或CO2培养箱等）、干燥箱、高压灭菌锅、净化工作台、pH计、 冰箱，（低温冰箱或冷柜）温度计、紫外灯、显微镜、离心机、天平、。　　　　2、小计量容器　　　　3、微生物测定仪器、微生物检定仪器、空气采样器、酶标仪专用等。　　　　1、高压灭菌锅的温度控制　　　　高压灭菌锅；生物指示菌法（常用）、化学变色纸片及高压灭菌锅温度计等方法进行检测。　　　　生物指示菌法是一种高压灭菌锅的效果显示法。　　　　高压灭菌锅由专人按作业指导书操作，并做好每一次的作业记录。　　　　高压灭菌锅使用时，内置物品不能太多，单位体积内的内容物（每瓶内的培养基）不能太多。同时应注意内容物不同耐受温度。总的暴露时间最好不要超过45min。　　　　高压灭菌锅日常工作记录应包含以下信息：高压灭菌的材料、开始时间、压力/温度、取出时间、高压灭菌胶带的颜色变化（日常常用无菌培养代替）　　　　高压灭菌锅温度波动范围：110，115和121±2℃。　　　　高压灭菌锅校准周期一般在半年。　　　　2、干燥灭菌箱温度控制　　　　干燥灭菌箱日常工作记录中应包括以下信息：开始的时间、到达灭菌温度时的时间、取出的时间（或关闭时间）。　　　　干燥灭菌箱的温度校准；用参考温度计进行温度测试。　　　　干燥灭菌箱温度要求与精确度：160±5 ℃或180 ±5 ℃。前者为灭菌2h，后者为30min。　　　　干燥灭菌箱校准时间一般为一年。　　　　3、培养基配制用蒸馏水的控制　　　　对于蒸馏水器来说：按设备说明，定期清洁离子交换器和更换离子交换材料。　　　　检测要求：西欧标准为微生物检验用蒸馏水的特定电导率＜0.5ms/m；细菌数＜50cfu/ml。我们日常用的标准为 ＜10ms/m，未见有细菌指标。　　　　检测频率：1次/每月。　　　　蒸馏水定点供应，并做好相应的质量控制，记录检测结果。　　　　4、天平的管理　　　　天平放置要求：无振动、无气流影响及水平台面上。　　　　天平要有使用及运行检查记录。　　　　天平作为计量仪器是列入国家强制检定的范围，一般1次/年进行检定。　　　　运行检查频率按运行计划或按产品（天平生产厂家）给出的标准重量单位进行对照　　　　5、pH计　　　　pH计使用前应用标准液进行校准。　　　　缓冲液使用有效期：PH4.00 约1年　　　　PH7.00 约6个月　　　　pH9.00 约6个月　　　　电极敏感性检测及极性恢复。　　　　6、净化工作台的控制　　　　水平流净化工作台工作区域，要求洁净度为100级。空气沉降30min，细菌数＜1个/皿。垂直流净化工作台，细菌数＜0.49个/皿。　　　　净化工作台运行检查频次：1次/月主要是细菌沉降检测。　　　　净化工作台高效过滤膜一般为一年更换一次，并同时进行粒子与细菌沉降检测。　　　　7、紫外线灯的控制　　　　检测方法：仪器测试法和生物测试法。前者是通过专用仪器检测紫外灯管发射的紫外光强度。国家消毒技术规范中表明在距离照射无1米处，要求其强度为90。　　　　生物测试法：采用一定的菌培养物，经一定比例稀释，菌量控制在200-250个/0.5ml，涂布平板在紫外灯光下照射，2min，同时设置普通光源的对照组，后置37℃48h，计算其杀灭率。要求杀灭率达99%。　　　　8、显微镜的控制　　　　显微镜应制定作业指导书，日常维护记录及自校记录。　　　　显微镜应置于无振动，避免灰尘，防潮等要求的环境。　　　　9、其它微生物检测专用仪器的控制　　　　细菌鉴定仪、酶标仪等设备，工作中常用阳性对照检测其功能正常性。　　　　仪器的检定则按有关的部门检定或按自校作业指导书进行。　　　　仪器的使用登记、校准计划、校准记录等文件存档。　　　　仪器专人使用、操作者应取得相应的岗位培训合格，持证上岗。　　　　四、培养基质量控制　　　　正确进行培养基质量控制，并作为一项经常性的工作，建立完整的检验资料，是实验室今后通过相应级别的认证，在整个检验质量控制体系中所必须具备的文件资料。　　　　现有的依据：卫生部1993年发布的食品检验用干燥培养基生产质量控制。但这个标准不完善。　　　　1、常用培养基的质量控制　　　　检验项目与方法：对新批号的干燥培养基物理、化学及生物学指标鉴定　　　　A：感官（外观）研细程度和颜色（溶解前后），透明度，杂质等；　　　　B：PH测定，按各种培养基要求的PH±0.2，蒸馏水的PH应在6.4-7.0之间。　　　　C：生物学指标检定，被检培养基相应细菌生长率测试；菌落大小及特征的检测。　　　　生长率测试：适用与液体和固体培养基：将菌培养液，用生理盐水做倍比稀释，取合适稀释度进行平板计数或接种被检的培养基试管，同时以按相关的培养基国标配方新鲜配制的培养基进行对照。不低与10%。　　　　菌落大小测试：划线分离测试菌，取10个菌落测量直径大小，其直径均值与新鲜配制的培养基无统计学差异。　　　　2、常用培养基质量标准　　　　外观和理化标准：　　　　干粉颜色：淡黄色粉末或呈现本培养基特有的颜色　　　　溶解后培养基色泽：清晰透明（含琼脂除外）淡黄色或特有的色泽；　　　　灭菌后的培养基PH：7.2±2℃为多；个别弧菌检验用培养基pH值偏高为：8.0 ±2℃　　　　生物学指标：菌落特征及菌落大小 。　　　　3、培养基保存环境　　　　制成的培养基保存环境为4℃冰箱，如制成平板则用塑料袋包装置冰箱保存，干燥培养基干粉含有活性物质、遇热易分解的物质应仔细查看存放条件，多数也须放在2-8 ℃条件保存。　　　　有的培养基则以存放于10-15 ℃条件为易。如含有高浓度胆盐的培养基。　　　　4、培养基制备控制程序　　　　培养基配制所用的仪器设备培养基配制所用的仪器设备必须经过相应的鉴定 。　　　　配制培养基所用的用具及容器配制培养基所用的用具及容器必须是清洁或是灭菌的，一些特殊不易洗刷清洁的玻璃器皿，必要时可用重铬酸钾硫酸清洁浸泡后，取出置5%氢氧化钠溶液浸泡数分钟，再用3%盐酸溶液进行中和，然后用清水冲洗，烘干后备用。　　　　5、培养基配制原料，试剂质量控制　　　　配制好的培养基（尤其是糖发酵管）不宜久放，因为培养培养基吸收空气中的二氧化碳，会使培养基变酸，从而影响细菌的生长。　　　　培养基中的抑制剂及指示剂一定要精确称量，抑制剂要注意合理配伍。　　　　6、培养基主要原料的质量控制　　　　配制培养基的主要原料有蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏、胆盐、无机盐和琼脂等，这些主要原料的有劣，直接影响到培养基的质量，由此也将影响检验质量。　　　　指标有感官、理化、物理、生物学。　　　　五、检测质量保证　　　　定期使用有证标准物质和次级标准物质（参考物质）进行内部质量控制。实验室间的比对或能力验证，利用相同或不同方法进行重复检测，对留存的样品进行在检测。　　　　六、微生物检验质控方法　　　　1、菌落计数精密度控制直接计数　　　　选择同一标本，要求检验人员进行菌落计数。　　　　将大肠菌（25922）或经检定标化的菌片，通过合适的梯度稀释，选择合适的稀释度进行菌落计数实验操作。36±1℃培养24h进行菌落计数。　　　　菌落计数精密度控制重复计数法　　　　2、重复计数要求　　　　自身同一平皿重复计数误差 小于7.7%　　　　实验人员之间同一平皿重复计数误差 ±18 .2%　　　　自身同一梯度平行加样两皿间相对误 小于7.7%　　　　实验人员之间同一梯度计数误差X±18 .2%范围　　　　不同梯度间菌落计数最终误差 小于7.7%　　　　3、菌种鉴定质控　　　　菌种鉴定质控要求，对所给的微生物菌种，按有关的方法及指标进行生化、血清等方面的鉴定。　　　　鉴定质量评价：鉴定程序是否正确；鉴定方法是否正确；具体操作技术是否熟练，结果报告是否正确。每一项设立分值为25分。总分为100分。　　　　4、内部质量控制的推荐频率　　　　菌落计数精密度控制： 1次/3月；　　　　菌种鉴定控制： 1次/半年或1年　　　　盲样测定丢失的对照 1次/半年　　　　六、实验室安全防护　　　　1、培训与告之　　　　实验室管理人员及实验人员必须了解相关工作有关的危险。对招收新职工、工作开始发生变化或使用新方法，启用新的设备时，这点尤为重要。所有工作人员，包括清洁和服务人员都要知道。需要进行口头和书面两种方式的通知。有关仪器必须要有字迹清楚其安全使用的书面说明。　　　　2、标志　　　　在进行致病性微生物工作的房间人口处必须要有警示标志。　　　　实验室的房间必须以使与微生物有关的危险得以过免的方式装置，以使微生物的传播得到限制，房间还应便于清洁和消除污染．工作台必须由光滑的、耐消毒剂的材料制成。难以清洁的角落、弯头及管道应尽可能地避免污染。　　　　3、防止空气污染　　　　加热培养蒙或其它化学物质时，粉尘可扩做到空气中．这可给工作人员带来过敏反应或出现其它问题．因此，设计排风装置很重要，以至包括天平附近的抽风点。通常称量应按正确的安全规程进行。　　　　4、有毒有害物防护　　　　浓酸和碱及其它腐蚀性化学物质和毒性物质必须专门保存，尽可能锁存，以使它们引起的损害减至最低．　　　　对实验室所用的所有化学物质，实验室必须有记述其危险及操作中可能的限制的产品表．　　　　在所需的范围内工作人员必须使用人体防护装置，防护服、手套筹．使用安全设施是实验人员的职责污染了的防护员应尽快地更换，离开工作室时，必须脱去。　　　　5、消除污染和废物的处理　　　　实验室必须要有关于应如何消除溅出的微生物污染的书面说明。另外，对废物的处理，如用过的培养皿和打碎的玻璃器皿，应有固定的程序。所有被洗的物品在洗刷前均经高压灭菌，洗涤工受微生物感染的危险就可以尽可能避免。

存放试剂时，如何正确归类是考验试剂管理员的头号难题：温、湿度是否适宜、有机无机是否分开、固体液体是否分开、是否根据化学品性质选择恰当的容器，有毒或有害药品存放环境是否恰当，易燃或易爆药品存放环境是否恰当等，下面就跟随小编的脚步，来看一看一些试剂存放的小窍门吧~乙酸（浓）必须非常小心地操作。可能由于吸入或皮肤吸收而受到伤害。要戴合适的手套和护目镜。在化学通风橱或者生物安全柜里使用。 乙腈（jing）是非常易挥发和特别易燃的，它是一种刺激物和化学窒息剂，可因吸入、咽下或皮肤吸收而发挥其效应。严重中毒的病人可按氰化物中毒方式处理。操作时，要戴合适的手套和安全眼镜。只能在通风橱生物安全柜里使用，远离热、火花和明火。氯化铵（NH4Cl）可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。操作时要戴合适的手套和安全眼镜并在通风橱或生物安全柜里进行。氢氧化铵（NH4OH）是氨的水溶液，是腐蚀剂。操作时应极为谨慎。氨会从溶液中散发出来，它是腐蚀性的和有毒的，并易引起爆炸。操作时戴合适的手套并只能在通风橱、生物安全柜里进行。硫酸胺（NH4）2SO4可因吸入、咽下或皮肤吸收而受到伤害。戴合适的手套和安全眼镜。在化学通风橱生物安全柜里使用。硼酸（H3BO3）可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。操作时戴合适的手套和护目镜。 溴酚蓝可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。操作时要戴合适的手套和安全眼镜并在化学通风橱生物安全柜内操作。 亚硝酸钠（NaNO2）对眼睛、黏膜、上呼吸道和皮肤有刺激作用。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适的手套和安全眼镜并始终在化学通风橱生物安全柜内使用，切勿近酸。氯仿（CHCl3）对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有刺激作用。它是一种致癌剂，可损害肝和肾。它也易挥发，避免吸入挥发的气体。操作时戴合适的手套和安全眼镜并始终在化学通风橱生物安全柜里进行。柠檬酸是一种兴奋剂，可因吸入、咽下或皮肤吸收而受危害健康。它对眼睛可形成严重损伤的危险。操作时戴合适的手套和安全护目镜，勿吸入其粉末。氯化钴（COCl2）可因吸入、咽下或皮肤吸收而受到危害。操作时戴合适的手套和安全眼镜。硫酸铜（CuSO4）可因吸入、咽下或皮肤吸收而受到危害，操作时戴合适的手套和安全眼镜。二乙胺NH（C2H5）2是腐蚀剂，有毒并极易燃。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受到危害。操作时要戴合适的手套和安全眼镜。仅在化学通风橱或生物安全柜内操作，远离热、火花和明火。N，N-二甲基甲酰胺对眼睛、皮肤和黏膜有刺激作用。可通过吸入、咽下或皮肤吸收发挥其毒性效应。经常吸入可引起肝脾损伤。操作时要戴合适的手套和安全眼镜并在化学通风橱/生物安全柜内进行。乙醇CH3CH2OH可因吸入、咽下或皮肤吸收而受到危害。操作时戴合适的手套和安全眼镜。乙酸乙酯咽下可致命，可因吸入或皮肤吸收而受害。操作时戴合适的手套和安全护目镜。切勿吸入其粉末。在通风良好的地方使用。氯化铁（FeCl3）在这里输入你的内容，注意不要用退格键把所有文字删除，请保留一个或者用鼠标选取后直接输入，防止格式错乱。甲醛（HCOH）有很大的毒性并易挥发，也是一种致癌剂。很容易通过皮肤吸收，对眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激和损伤作用。避免吸入其挥发的汽雾。要戴合适的手套和安全眼镜。始终在化学通风橱或生物安全柜内进行操作。远离热、火花及明火。甲酸（HCOOH）毒性强，对黏膜组织、上呼吸道、眼睛和皮肤非常有害。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。戴合适的手套和安全眼镜（或面具）并在化学通风橱、生物安全柜内使用。硝酸钠（NaNO3）可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安全眼镜。在化学通风橱生物安全柜里使用。 玻璃棉可因吸入而受害并引起皮肤过敏，戴合适的手套和面具。硫酸（H2SO4）毒性非常强，对黏膜、上呼吸道、眼睛和皮肤的组织有极大的破坏作用。可引起灼伤，与其他物质如纸，接触可引起失火。戴合适的手套、安全眼镜和实验工作服，在化学通风橱。盐酸（HCl）易挥发并因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。对黏膜、上呼吸道和皮肤有很大的伤害作用。戴合适的手套和安全眼镜。在化学通风橱、生物安全柜里使用并格外小心。当大量操作时要戴护目镜。过氧化氢（H2O2）具有腐蚀性、毒性，对皮肤有非常严重的损伤作用。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。戴合适的手套和安全眼镜并只能在化学通风橱生物安全柜里进行操作。硫化氢（H2S）是非常强的毒性气体，能引起呼吸中枢麻痹。对皮肤有刺激和腐蚀性，能引起嗅觉疲劳。不要靠气味去检测其是否存在。操作时要格外小心。盛硫化氢的容器要放置在化学通风橱生物安全柜里或放在装有通风设备的房间里。戴合适的手套和安全眼镜。它也非常易燃，要远离热、火花和明火。氯化镁（MgCl2）可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适的手套和安全眼镜。在化学通风橱生物安全柜里使用。硫酸镁（MgSO4）可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适的手套和安全眼镜。在化学通风橱、生物安全柜里使用。甲醇（CH3OH）是有毒的，能引起眼睛失明。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。适当的通风是必要的，以便减少与其挥发气体的接触。避免吸入这些挥发的气体。戴合适的手套和安全护目镜。只能在化学通风橱、生物安全柜里使用。硫酸镍（NiSO4）是致癌剂，可引起可遗传的遗传损伤。它是一种皮肤刺激物，可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适的手套和安全眼镜。在化学通风橱生物安全柜里使用，切勿吸入其粉末。硝酸（HNO3）易挥发，操作要格外小心。通过吸入、咽下或皮肤吸收而产生毒性作用。戴合适的手套和安全护目镜。在化学通风橱生物安全柜里操作。切勿吸入其挥发的气雾。远离热、火花和明火。高氯酸可因吸入、咽下或皮肤吸收而致病。戴合适的手套和安全眼镜，只能在化学通风橱或生物安全柜里使用。酚具有很强的毒性和高度腐蚀性并能引起严重的灼伤。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受到危害。戴合适的手套、防目镜和防护服。始终在化学通风橱、生物安全柜里使用。如果，皮肤接触到酚，要用大量的水冲洗接触酚的部位并用肥皂和水洗，切记勿用乙醇洗！磷酸（H3PO4）具有高度腐蚀性，可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适的手套和安全眼镜。哌啶毒性高，对眼睛、皮肤、呼吸道和胃肠道有腐蚀性。它与酸和氧化剂剧烈反应，可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。切勿吸入其挥发的气体。远离热、火花和明火。戴合适的手套和安全眼镜。在化学通风橱、生物安全柜里使用。氯化钾（KCl）可因吸入、咽下或皮肤吸收而受到危害，戴合适的手套和安全眼镜。氢氧化钾（KOH）毒性可能是很高的，可因吸入、咽下或皮肤吸收而受到危害，其溶液有腐蚀性，操作要非常小心，要戴合适的手套。高锰酸钾（KMnO4）是一种刺激剂和很强的氧化物，当与有机物混合时可形成爆炸性的混合物，所有溶液要在化学通风橱或生物安全柜里使用，不要与盐酸混合。磷酸钾（K3PO4）可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害，戴合适的手套和安全眼镜，勿吸入其粉末。硝酸银（AgNO3）是一种很强的氧化剂，要谨慎操作，它可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。避免接触皮肤，戴合适的手套和安全眼镜并与其他物质接触可引起爆炸。磷酸氢二钠（Na2HPO4）可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适的手套和安全眼镜。在化学通风橱生物安全柜里使用。氢氧化钠（NaOH）和含有NaOH的溶液有很强的毒性和苛性，操作时要格外小心，戴合适的手套和防护面具。

     提到化学试剂,你会想到那些那?还记得那些不堪回首的实验室趣事吗?那些让你看到 闻到就觉得恶xin的化学试剂你还记得那些?     实验室里那些不堪回首的日子......     初中时的噩梦是氨气     高中时的噩梦是cl2     大学时的噩梦是乙硫醇     研究生的噩梦是呋喃吡啶     C12硫醇是一股熟肉味（闻着有点饿）。     C10硫醇是烤焦的死鱼皮味，闻着头疼，洗不掉。     C8硫醇比C10硫醇的味道更精彩，基本一开瓶，实验室的人都得跑出去。     C6硫醇就清新很多了，像是泡过无数次之后，再发酵的绿茶叶。 ?     做了几年实验，接触了无数种化合物。大大小小的气味也都习惯了。但是这两种的反应简直让我生不如死。     硫代苯甲酸    叔丁基异腈    对，就是这两个东西。可能用过其中任意一个的同学会默默点赞吧。形容一下吧，只要我手套上不小心粘上了一点，全实验室就会一脸嫌弃的样子，然后逃出去...唉，我能怎么办，我也很无奈呀......每天感觉自己在掏粪一样……     zui后，和大家分享一个冷知识。    乙硫醇（分子式：CH3CH2SH），它是2000年版吉尼斯世界纪录中收录的zui臭的物质，以具有强烈、持久且具刺激性的蒜臭味而闻名。空气中仅含五百亿分的乙硫醇时其臭味就可嗅到。通常被加入家用煤气（含一氧化碳）做臭味指示剂，便于人们及时发现煤气泄漏。 

   研究人员发现了关于“细菌如何生长和繁殖”的重要新信息，可能有助于发现极为需要的新抗生素药物。   所有细胞都有一个外层，在重要的遗传信息周围形成一个保护屏障。   对于一些细菌来说，当它们在体内传播时，一个牢固的外层有助于入侵细胞幸免于攻击；这种保护层是许多常用抗生素的靶标。然而，当细菌细胞分裂并在体内传播时，这些保护层是如何发展的，关于这方面的知识还存在很多漏洞。   细菌通过细胞分裂进行传播；一旦细菌细胞长到其完整尺寸，它就开始收紧围绕其中部的一条带子，条带变得比以往任何时候都紧，直到它zui终将旧的细胞分裂成两个单独的细胞。   当这一过程发生时，细胞必须精确复制它的基因组，以便每一个新的细菌细胞都包含跟其他细胞相同的遗传信息。以这种方式，细菌确保它们在体内传播时，在每个新的细胞中保持强大的防御机制。   但是现在，来自纽卡斯尔大学的一个研究小组利用Diamond 的I04-1光束的强大X射线光，来确定帮助驱动这个分而治之系统的蛋白质的原子结构。EzrA是调节细胞分裂过程的一种重要蛋白质。   它有助于控制另外一个蛋白质FtsZ，该蛋白管理引起细菌细胞分裂为二的条带的紧缩。然而，FtsZ的原子构造已经弄清，现在，先进的同步加速器技术，可让科学家们进一步揭示支持这一过程的蛋白质EzrA。   EzrA结构的发现特别有意义，因为它可以帮助确定未来抗生素的新靶点。理解EzrA的原子结构，可以帮助科学家开发出禁用它的方法，从而防止细菌正确地分裂。   没有这些至关重要的蛋白质，细菌在其分裂和传播时，就无法为每一个新细胞产生一个保护性细胞壁，从而使新的细胞暴露于攻击之下。   研究表明EzrA蛋白的原子结构既美丽又复杂。EzrA的形状是一种不寻常的构象，就像一个圈，它的中间能够容纳条带紧缩蛋白FtsZ。EzrA的圈形构造，可以防止FtsZ蛋白逃逸，直到它已经完成其目的：致使细胞条带收缩和将细胞分裂为二，同时亲本细胞的基因组被复制和传递给子代。   因为科学技术的进步，深入研究生物的原子结构，正变得越来越可行。强大的科学机器可让科学家们看到太小、用标准显微镜无法看到的东西。自成立以来，我司一直都支持解析2000多种这样的蛋白质结构。

溶血试验是国标中规定的一种对细菌进行筛选鉴定的方法。常用于链球菌、弧菌、白喉杆菌等的区分鉴定。基本原理不少细菌都能产生溶血素，可以溶血平板，因此在这些细菌周围会出现溶血环。不同细菌产生的溶血素不同，比如：溶血素类型产气荚膜梭菌葡萄球菌α、β、γ、δ、ε溶血素破伤风杆菌破伤风溶素李斯特菌卵磷脂酶肺炎球菌肺炎溶素溶血性链球菌链球菌溶血素 O/S溶血素 O其中α溶血：又称草绿色溶血，菌落周围培养基出现 1～2 mm 的草绿色环，为高铁血红蛋白所致，α溶血环中的红细胞未完全溶解。可形成α-溶血环的细菌如甲型溶血性链球菌、肺炎链球菌。β溶血是细菌在血平板上培养时，菌落周围形成的宽大（2～4 mm）、界限分明、完全透明的溶血环。β溶血环中的红细胞完全溶解，是细菌产生的溶血素使红细胞完全溶解所致，又称完全溶血。可形成β溶血环的细菌如乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌等。γ溶血：又称不溶血。菌落周围培养基出现灰白色细小菌落，在菌落周围无溶血环。可形成的细菌为丙型链球菌。试验方法：由于不同细菌所产的溶血素不同，因此做溶血试验时对应的实验条件和试验方法也不一样，下面就简单的介绍一下：1.白喉杆菌：用含兔血成分的培养，需隔夜培养。2.链球菌溶血试验：用羊血悬液，37 摄氏度下培养较短时间即可观察到溶血现象。3.弧菌溶血试验：用无菌脱纤维山羊血培养基，37 摄氏度下培养 1 天，全部或大部分红血球被溶解方可判定为阳性。

   上海远慕生物科技有限公司在广大科研用户的帮助和支持下，经过多年不懈的努力，已成为国内生命科学试剂（Elisa试剂盒）的国际运营商之一。   上海远慕生物Elisa试剂盒“双十二”热销，所有Elisa试剂盒均提供免费代测服务，全程提供实验技术指导。“双十二” 期间,我司所有Elisa试剂盒全部五折起,优惠多多快快抢购吧! 活动时间:即日起至12月12日24时结束活动产品:全场Elisa试剂盒活动力度:全场五折起本活动最终解释权归远慕生物!  远慕生物Elisa试剂盒订购说明：1、绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。2、每日订单截止时间为16点整，部分城市可到17点整，因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。3、部分非常用产品，需提前1－2日预订，海外期货则需要提前3-6周预订。4、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日zui新价格为准。5、请办理完货款后，将shou据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以chuan真、、短信、等形式通知我们。 

    生化试剂分为很多，主要有电泳试剂、色谱试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂、透变剂和致癌物质、杀虫剂、培养基、缓冲剂、电镜试剂、蛋白质和核酸沉淀剂、缩合剂、超滤膜、临床诊断试剂、染色剂、抗氧化剂、防霉剂、去垢剂和表面活性剂、生化标准品试剂、生化质控品试剂、分离材料等等。随着新技术、新项目的快速发展，在开展新实验前，面对多种试剂盒，我们该如何选择合格有效、适合本实验室的试剂盒呢？远慕今天就给您做个小总结，希望对您能有所帮助！        通常生化试剂盒可分为液体单试剂和液体双试剂，前者特别适用于半自动生化分析仪和小型自动生化分析仪，使用方便，缺点是稳定性较差。与单试剂相比，双试剂提高了抗干扰能力，具有稳定性能较好，可消除样品自身空白等特点。此外还有多项同测组合试剂、浓缩试剂等。 一、试剂空白吸光度    用蒸馏水做空白，用指定的空白液加入试剂作为样品测试，在测试主波长下，记录测试启动时的吸光度（A1）和约5分钟后的吸光度（A2），A2测试结果即为试剂空白吸光度测定值，应符合生产企业给定范围。这是判定试剂质量的一个有效指标。 二、试剂空白变化速率    对于速率法试剂盒，用指定的空白液加入试剂作为样品测试时，在测试主波长下，记录测试启动时的吸光度（A1）和约5分钟(T)后的吸光度（A2），计算试剂空白吸光度变化率（DA/min），应不超过生产企业给定值。测定试剂空白吸光度变化（ΔA/min），用来检查试剂在工作状态下的稳定性。但事实上，试剂空白吸光度变化速率无法反映试剂盒的稳定性，试剂空白吸光度变化速率主要反映干扰程度和仪器的稳定性。 三、分析灵敏度    用吸光度差值（ΔA）或吸光度变化（ΔA/min）来表示单位浓度的被测物反应所引起的信号变化，其含义类似摩尔消光系数，应符合生产企业给定范围。需要注意的是，分析灵敏度不是越高越好，以适合待测物检测范围为原则。分析灵敏度一般用于批间比较，较能反映制造商的配方、原料的一致性。 四、线性范围     取高浓度样品和低浓度样品按不同比例混合成5个浓度做线性试验。线性范围内的分析性能应符合如下要求：①线性性相关系数r应≥0.990；②线性偏差应不超过生产企业给定值。试剂（盒）的线性范围越宽，临床复测几率越小，但与样品/试剂比例成反比。 五、重复性     1.批内重复性：在重复性条件下，用高、中、低三个水平浓度（高、低浓度应超过参考区间20%～30%，中浓度水平在参考区间之内）的控制血清或新鲜人血清测试试剂，重复测试至少10次。     2.批间重复性：用质量控制血清测试3×3（3个批号，每个批号取3瓶）批间差，较能反映制造商的配方、原料的一致性。干粉或冻干试剂还需测定批内瓶间差，测定同一批号的试剂20瓶，用变异系数（CV）来表示。变异系数（CV）不超过生产企业给定值。 六、准确度     1.相对偏差：直接用试剂盒测定参考物质（平行3次），评价测定均值与靶值的偏离程度。也可用由参考方法定值的高、中、低三个浓度的人混合血清，用试剂盒平行测定3次，计算均值与定值的相对偏差。     2.比对试验：既无参考物质、参考血清，也无标准品，也可用比对试验来验证准确度。 七、校准品溯源、质控品赋值     1.校准品溯源性：根据GB/T21415及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，明确溯源途径。     2.质控品赋值有效性：质控品的测定结果应在试剂盒规定的范围内。 八、稳定性     1.效期稳定性：取已到效期的试剂盒按以上评价方法对试剂盒性能指标进行评价。     2.热稳定性试验：生化试剂盒一般置2-8℃保存，为了快速有效地评价试剂盒的稳定性，可以用加速试验来估计。     3.开瓶稳定性：干粉试剂开瓶后（复溶后）在规定的储存条件下保存至预期时间内，产品的性能至少应符合线性和准确度的要求。     

对于养细胞的人来说，可谓是谈 「污」色变，任何时候听见细胞污染晴空万里立马暴风雨，而细胞污染又是养细胞过程中，尤其是新手经常遇到的问题。细胞污染是一个很广的范围，微生物的种类更是各种各样，不同的污染的原因不同处理也不同，因此掌握对常见细胞污染的识别至关重要。自己也是从刚开始养细胞 3 天一个小污染 7 天一个大污染过来，也积累了些经验，自己整理归纳了一下，希望对养细胞的同学有所帮助。讲细胞污染之前需要说明一点，就是对待细胞大家一定要给予极大的重视，因为细胞相关的实验细胞的状态是很重要的。对于确定污染的细胞zui好的办法就是及时丢弃，积极排查细胞污染的原因，除非是特别重要的细胞才会去抢救，而且抢救污染的细胞本来就有一定的风险，搞不好还可能会污染别的细胞。下面进入正题，一般细胞污染大概分为细菌污染、真菌污染、支原体污染还有说法不一的黑胶虫污染等。每种污染的特征都很明显，因为微生物种类实在太多，所以我就选取比较典型和常见的污染讲下。识别细胞污染的第1步就是从培养箱拿出细胞后观察细胞培养液的颜色，以常用的 DMEM 基础培养液为例，一般使用 DMEM 配制的培养液的颜色为鲜红色，而且是澄清透亮的，注意透亮不代表没有颜色。但是大多数情况下会看到以下几种颜色，1 号管颜色偏紫一般原因是培养基 ph 升高置 ph 升高因有两个一个是培养液在冰箱放置太久，培养液中的二氧化碳逸出，第二个是培养箱没二氧化碳了，而且整个培养箱的细胞都会出现一样的颜色。  2 号管颜色有点偏红，一般是细胞生长消耗营养物质导致液 ph 稍微降低。 3 号和 4 号管颜色发黄，导致培养液颜色发黄的原因是培养液中的营养被大量消耗，培养液 ph 降低导致，导致 ph 降低的原因一般是细胞生长太快太满，提醒自己需要给细胞换液或者传代，但是有时细胞密度低生长速度缓慢也会出现这种情况，这时候就要怀疑是不是细胞污染了，除了细胞以外有其他东西在消耗着培养液的营养。5 号管培养液呈肉眼可见的浑浊，这种情况一般就是细菌污染，具体判断还需要结合镜下的特征。第二步就是去导致显微镜下结合镜下特征判断：细菌污染特征：培液会变黄，而且是浑浊的黄色，镜下观察不到正常细胞形态，镜下遍布细沙样的黑点。细菌污染一定要及时查找原因，如果换液的细胞全部污染，就要怀疑是不是培养液污染，或者使用的器械污染。如果传代的细胞全部污染，也要怀疑培养液的问题，但是不要忽略了胰酶的问题。如果个别皿污染，有可能是一不小心蹭到或者枪头碰到非无菌区域。怀疑是胰酶或者是培养液的问题，可以空培养，取空皿只加入怀疑的胰酶或者培养液培养，第二天观察。  霉菌污染特征：培液不变浑浊但是会变黄，一般肉眼可见培养液中有团块的霉菌菌落，镜下呈细丝竹节管状，有菌丝结构。霉菌梅雨季节多见，一般霉菌污染及时扔掉，彻底清洁培养箱白色念珠菌污染特征：培液颜色没有明显改变，污染严重会变黄，但是是澄清的黄不变浑浊，镜下观察到好多像球形的亮点，多的话会聚集成葡萄串样。白色念珠菌污染不要抢救立马扔了，救也救不好，而且白色念珠菌会互相通过孢子传染。杆菌污染特征：镜下看到许多杆状的细菌，培液颜色没有明显改变。 支原体污染特征：支原体污染很隐蔽，主要表现为细胞在生长速度变慢，细胞状态形态改变，而且不断死亡，镜下没啥改变，有时可见许多黑色的细胞碎片。检测支原体污染可以使用支原体检测试剂盒进行检测，现在市面上抗支原体的药很多，效果也都可以。不确定是不是支原体污染可以使用支原体药试一下，如果细胞状态明显改善，有可能就是支原体污染。  黑胶虫污染 特征：很邪乎，各种说法都有，一般认为是镜下许多黑点在不断布朗运动，刚开始对细胞没啥明显影响，多时会影响细胞的生长。一般也治不好，就扔了吧。现在主流认为黑胶虫是血清的问题，可以从新换一批次血清试一下。其实污染也没有想象中的那么可怕，在做好消毒灭菌工作的基础上，提高自己的无菌意识和操作技术才是最为重要的。从进入细胞培养室的穿着到超净台里物品的摆放都大有学问，对于刚养细胞的新手跟着师兄师姐养细胞是个很好的方式，刚开始不要着急上手，看师兄师姐操作时重点看他们的物品摆放、培养皿培养板开盖的方式和放置、吹打细胞的手法等小细节。 

木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法 ，石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ；伊红为酸性染料 ，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。去氧核糖核酸（DNA）两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中称蓝色，所以细胞核被染成蓝色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia )；而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性（neutrophilia)。组织内的蛋白质构成蛋白质的氨基酸的种类很多，它们有不同的等电点。在普通染色法中，染色液的酸碱度为pH6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内膜质及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度，pH值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性；pH值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。脱氧核糖核酸（DNA）两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。HE染色结果细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。[1]?着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。

亲爱的客户朋友们：      时光如梭，2020年即将到来。桌上的台历不知不觉已经翻到了十一月了，看着台历上划掉的每天，翻过的每页，似乎是对于走过的2019年最hao的证明。上海远慕生物感恩新老客户的一路陪伴,因为有你们的信任,我们才能越来越进步. 远慕生物携全体员工祝您:感恩节快乐! ?     为感谢客户朋友们长期以来对远慕生物的支持与信任，远慕生物为大家特别定制了”感恩回馈钜惠活动”!我司全部商品5折起,福利多多,不要错过哦!     远慕生物产品涵盖有机试剂、无机试剂和生 化试剂，标准物质、天然植物提取物及中药标准品，核酸、酶、缓冲剂、显色底物，医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。 品种类超过2万种，广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。       远慕一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司始终秉承信誉为生存之本的宗旨，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。远慕！您Z信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

 ELISA加样时的防错小经验：     实验*常见问题解答：    问：做直接Elisa法检验小鼠血清中的IgE抗体，设空白对照、和阴性对照、阳性血清稀释倍数为5千、1万、10万、20万不等，用的是生物素符号的羊抗鼠IgE抗体，和亲和素的辣根过氧化物酶。可是效果除了空白对照孔没有颜色外，其他各孔全有颜色，而且OD值都相差不大，为什么？       答复：或许原因如下：    （1）水质被金属离子等污染；防止办法尽量运用新鲜水或蒸馏水。    （2）洗刷不充分，样品中其它成分残留或酶残留；防止办法洗刷液应注满微孔，充分洗刷。    （3）移液头重复运用，未洗净或消毒不完全； 防止办法移液头zui好一次性运用。    （4）酶标板灵敏度过高。    （5）一抗显色时间的操控等等，关于ELISA的每一步都要留心才行。     我司主营：elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,生物试剂,血清,抗体,培养基,标准品,国产血清、GIBCO胎牛血清等。种属齐全，价格优惠。期待您的来电咨询与合作！     96T  检测84个样本，12孔用于制造标准曲线    48T  检测42个样本，6孔用于制造标准曲线     （1）用一张写满字的纸，字越多越好，比如报纸，垫在下面，这样，加过标本的小孔看过去下面的字会变小，没加的字正常，非常简略差异。    （2）可以使用液面反光与没有加的孔加以差异    （3）在标本加完后，再把加样枪全压下，使液面发作小气泡，也可以加以差异     我们对客户的许诺：    1.供应免费代测的效力。（你只需把标本寄过来，咱们为你节省时间，帮你出效果，原始数据，分析数据均可供应，一般时间是5天左右）     2.客户有任何问题，咱们都是在一个工作日之内给出解决方案。售后和技术这一块都是诚挚为客户效力     3.有质量问题免费包换.（质量问题包括运送不妥，客户在运用过程中测不出效果，等等！）     4.全程技术辅导。（包括售前的标本收集，运用过程中不明白的当地，实验结束后的数据分析，有任何疑问，咱们技术都会即时给你去电）? 

     人类生活在复杂多变的环境中，每时每刻都会接触到各种各样的微生物，受到一些类似抗原物质的侵扰，从而使机体致病。为了抵御这些外来侵扰，使自身得以继续生存，人体必须形成几十万、几百万甚至更多种相应的特异性抗体以抵抗外界的抗原物质，才能免遭其害，保护自己。我们会从抗体的产生及多样性进行其原因的阐述与分析。      1.抗原的呈递     抗原呈递细胞（antigen presenting cell, APC）的抗原呈递作用是一个涉及抗原摄取、处理与呈递的复杂过程。zui主要的抗原呈递分子是主要组织相容性复合物（majorhistocompatibility complex, MHC）。MHC分为两个大类：MHC-I和MHC-II,它们呈递的抗原蛋白来源不同，降解抗原的方式不同，结合肽段长度也不同，可以分别将抗原呈递给细胞毒性T细胞 (CD8 T cell) 和辅助型T细胞 (CD4 T cell)[3,4] 。结合现以MHC-II呈递外源性蛋白为例简述抗原提成过程。      外源性抗原经APC吞噬或吞饮作用，被摄入胞内形成吞噬体，后者与溶酶体融合形成吞噬溶酶体。抗原在吞噬溶酶体内酸性环境中被蛋白水解酶降解为小分子多肽，其中具有免疫原性的称为抗原肽[3,5]。内质网中合成的MHC-II类分子进入高尔基体后，由分泌小泡携带，通过与吞噬溶酶体融合，使抗原肽与小泡内MHC-Ⅱ类分子结合形成抗原肽-MHCⅡ类分子复合物。所形成的复合物可能在高尔基复合体参与下被转运到细胞膜表面，被T细胞受体（TCR）识别并呈递给TH细胞[6]。供TCR识别的先决条件是两种细胞的直接接触并相互作用。这种细胞间的相互作用涉及APC与TH表面多种分子。除了TCR特异性地同时识别多肽-MHC-Ⅱ分子的复合物外，某些粘附分子也参与抗原呈递过程。活化的TH细胞可分泌各种细胞因子，用于B细胞、Tc细胞等的激活过程，产生可清除抗原的特异性抗体。      2.B细胞分化及抗体的产生    哺乳类动物B细胞的分化过程主要可分为前B细胞、不成熟B细胞、成熟B细胞、活化B细胞和浆细胞五个阶段。其中前B细胞和不成熟B细胞的分化是抗原非依赖的，其分化过程在骨髓中进行，不成熟B细胞开始表达膜结合型IgM（mIgM）。抗原依赖阶段是指成熟B细胞（膜表面同时表达mIgM和mIgD）在抗原刺激后，在APC和TH细胞的辅助下成为活化B细胞（mIg水平逐渐降低，分泌型Ig逐渐增加，并可发生Ig基因重链的类别转换），并继续分化为合成和分泌抗体的浆细胞，发挥体液免疫的功能，这个阶段的分化主要是在外周免疫器官中进行的。     因此，抗体存在于脊椎动物的血液等体液中，及其B细胞的细胞膜表面，其主要功能是与抗原结合后，有效地清除侵入机体内的微生物、寄生虫等异物。     抗体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链（H链）；2条较短、相对分子量较小的相同的轻链（L链）。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。轻链有κ和λ两种，重链有γ、μ、α、ε和δ五种[7]，依据重链分型不同Ig分为IgM、IgG、IgA、IgD和IgE 五类。     整个抗体分子可分为恒定区和可变区两部分。在给定的物种中，不同抗体分子的恒定区都具有相同的或几乎相同的氨基酸序列。可变区位于"Y"的两臂末端，也称抗原结合片段（antigen-binding fragment, Fab），一个抗体分子上的两个抗原结合部位是相同的；"Y"的柄部称结晶片段（crystalline fragment, FC）。     3.免疫球蛋白多样性     抗体的组成极为复杂，是由成千上万、多种多样的Ig分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上，既相似，又有差别。     3.1可变区异质性     恒定区的基因可以决定Ig分子的类别和亚类，为造成Ig分子多样性的原因，但造成免疫球蛋白分子多样性的主要原因在于可变区的异质性。      在可变区内有一小部分氨基酸残基变化特别强烈，这些氨基酸的残基组成和排列顺序更易发生变异，称高变区。高变区位于分子表面，zui多由17个氨基酸残基构成，少则只有2~3个。高变区是抗原结合位，与抗原表位互补，又称为互补决定区（complement-determiningregions，CDRs）[8]，其氨基酸序列决定了该抗体结合抗原抗原的特异性[9,10]。重链及轻链各含有三个CDR，在三维空间结构中呈现为环状，分布在抗体分子表面与抗原特异性结合。     3.2 V(D)J重组     抗体的L链由C、V、J三个基因簇编码    H链由C、V、D、J四个基因簇编码     人类控制免疫球蛋白H链的基因位点在第14号染色体长臂上，由编码可变区的V基因片段（VH）、D基因片段（DH）、J基因片段（JH）、C基因片段（CH）4类基因片段组成，其中VH有45种、DH有23种、JH有6种、CH有9种[18]。H链上的恒定区由C基因片段控制，一般是恒定不变的；H链上的可变区由VH、DH、JH 3种基因片段控制。在浆细胞成熟过程中重链基因的VH、JH、DH 3种基因片段间可以发生随机重组，不同的组合导至产生不同结构的重链基因。     根据体细胞基因重排学说，B细胞在完成重链可变区基因的重排后，开始轻链（Lλ链和Lκ链）可变区基因的重排。人类控制Lλ链的基因位点在第22号染色体长臂上，有Vλ、Jλ和Cλ 3类基因片段，其中Vλ有30种、Jλ有4种、Cλ有4种。Lλ链上的恒定区由Cλ基因片段控制，一般是恒定不变；Lλ链上的可变区由Vλ和Jλ 2种基因片段控制。在浆细胞成熟过程中，Lλ链基因的Vλ和Jλ 2种基因片段间可以发生随机重组，不同的组合产生不同结构的Lλ链基因。人类控制Lκ链的基因位点在第2号染色体短臂上，有Vκ、Jκ、Cκ 3类基因片段，其中Vκ有40种、Jκ有5种、Cκ仅1种。     这些外显子在重组酶（RE）的作用下，通过多种多样的重排，所合成出的肽链，还要再进一步进行L和H链组合，这样zui后生成的抗体种类就非常多了 

抗原修复就是利用虎穴试剂盒热的作用将抗原重新暴露出现或修正过来的过程。常用抗原修复法介绍：1. 真空负压抗原修复法：① 切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇真空负压处理5分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④0.01M柠檬酸盐缓冲液（PH6.0），真空负压干燥箱预先调至95℃，真空负压处理10分钟。⑤待修复注降至室温的一，PBS洗3次，随后按选好的年免疫组化染色方法进行染色。这是一种操作简单，效果特佳，温度恒定，能一次性处理大量切片的方法。2.微波辐射抗原修复法：①切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇处理10分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④ 0.01M柠檬酸盐缓冲液（PH6.0），于微波炉内微波辐射10分钟，如检测Er和Pr则需要20辐射分钟左右。⑤待修复液降至室温后，PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学的染色方法进行染色。3.高压抗原修复法：①切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④切片放入抗原修复液中，边同容器放入高压锅中加热至沸腾。盖上压力阀至喷汽后持续1－4分钟。⑤待修复液恢复至室温后，PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。4.隔水热抗原修复法：①切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④切片放入0.01M柠檬酸盐缓冲液（PH6.0）中，边同容器一起放入水溶锅中加热，其间应不断用温度计测其温度，待抗原修复液的温度达到有效温度后（92℃↑）。即开始计时，持续40分钟。⑤待抗原修复液恢复至室温后，PBS洗3次，随后按选定好的免疫组化染色方法进行染色。5.电炉加热抗原修复法：①切片脱蜡至水。②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。③自来水洗，蒸馏水洗。④ 将切片放入抗原修复液中于电炉上加热，不时用温度计测量温度，当达92℃后，即可拔离电源，当温度低于92℃时，再插上电源，如此反复持续至10分钟左右。⑤待抗原修复液降至室温后，PBS洗3次，随后按选定的免疫组化染色方法进行染色。对各种抗原修复方法的评价。抗原修复的方法选择：抗原修复关系到组织抗原能否暴露充分，这对免疫组化染色效果有很大影响。不适当的抗原修复方式会导致染色弱阳性。因此应当根据不同的抗原特点，采用不同的修复方法。不适当的抗原修复方式会导致染色弱阳性。因此应当根据不同的抗原特点，采用不同的修复方法。对某些细胞内抗原（如Fas、Bax、FⅧ等）和细胞间质抗原（如Laminin、CoIV等）则需要用酶消化法处理切片。用于IHC消化的酶很多，所选酶的种类，使用的浓度，PH值，消化时间及温度等均要视组织固定的不同，所检测抗原的性质、组织类型的不同而异，应通过预实验摸索定。使用酶消化的原则：胰蛋白酶和蛋白酶K一般用于细胞内抗原，如Keratin，CEA，GFAP等。一般说来，胰蛋白酶消化能力较胃蛋白酶弱，主要用于细胞内抗原的消化，胃蛋白酶主要用于细胞间抗原的消化，如fibronectin，Laminin，各型胶原等。消化时间和组织固定的长短呈正比。在用酶消化，热修复后均不能获得结果的前提下使用抗原修复与酶消化结合的方法，有时会取得较为满意的结果。一般蛋白酶K和微波相结合，但应注意，可能检测的抗原无论何种性质均会在核内出现假阳性反应。以高压加热方法、微波加热方法较为稳定,?高压加热方法效果优于微波加热方法和单纯加热方法。溶液的浓度对修复效果无任何影响，而PH值则影响较大。缓冲液以柠檬酸缓冲液和Tris-HCL较常用。免疫组化抗原修复法的注意事项：1、pH的应用范围及选择抗原修复液的pH非常重要，有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要，同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强，但最jia pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效，而对固定很长时间旧的存档组织，酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。2、抗原修复时应选择最jia温度70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性，但经福尔马林固定的蛋白质，温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示，温度为92-98℃是合适的，95℃效果最好。3、抗原修复液必须遵循自然降温规律，否则效果不好或达不到抗原修复的目的抗原修复持续时间过后，取出放于室温中让其慢慢地降温，绝对不能为了争取时间，强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结，要有一个自然环境让其自然放松下来，随着温度的降低，它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。4、尽量使用足量的抗原修复液应用于抗原修复的液体，一定要充足，防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时，由于它的量较大，可延缓液体的沸腾时间，增加切片受微波辐射的量，对抗原修复将达到彻底。

亲爱的科研工作者，感谢您信任上海远慕生物，我们致力于为大家分享质优价适的质粒产品以及生化试剂 标准品对照品等，远慕生物双十一预热继续,此次优惠主要针对我司质粒产品!!!我们的各批次质粒干粉在发货前均经过严格的多重验证，您收到后请先转化，再挑取单克隆扩增，万一存在质量问题，请及时通知我们退换。如本页面质粒信息不全，请及时联系所在区域负责人QQ加急上传。 活动产品明细: pLVX-IRES-Puro 货号P0249           原价 580元       促销价 464元pGEX-4T-1      货号P0001          原价 520元       促销价416元pCDNA3.1(+)     货号 P0157        原价 520元        促销价416元pEnCMV-MCS-3×FLAG  货号P8196   原价 580元        促销价 464元 活动说明：       活动对象：针对新老客户      本活动最终解释权归远慕生物      活动起止日期：2019.11.19-2019.11.30除以上产品外还有更多质粒相关产品的钜惠活动！！！具体折扣详情,请咨询我司销售人员!    上海远慕生物一直本着“一心做产品，一心为顾客，一心求发展”的企业宗旨，为科研实验贡献仅有的力量。在不断努力奋斗的过程中，已经成为各大科研院校科研领域方面的重要供应商之一，产品质量被全国各大院校科研机构认可，并指定为Elisa试剂盒长期供应商兼战略合作伙伴。

      蛋白质担负着复杂的生化反应，在行使生物功能时，必须具有特定的三维空间结构。在生物合成以后，蛋白质本身也经历着繁杂的生理过程。在生化试验中，常需要对蛋白质进行变复性研究，盐酸胍和尿素就是蛋白质变复性中最常使用的试剂。 盐酸胍和尿素尿素和盐酸胍在高浓度(4~8mol/L)水溶液时能断裂氢键，从而使蛋白质发生不同程度的变性。同时，还可以通过增大疏水基酸性残基在水相中的溶解度，降低疏水相互作用。在室温下4~6mol/L尿素和3~4mol/L盐酸胍，可使球状蛋白质从天然状态转变至变性状态的中点，通常增加变性剂浓度可提高变性程度，通常8mol/L尿素的变性能力强。一些球状蛋白质，甚至在8mol/L尿素溶液中也不能完全变性，然而在8mol/L盐酸胍溶液中，他们一般以无规则卷曲（完全变性）构象状态存在。 尿素和盐酸胍引起的变性机制：1）变性蛋白质能与尿素和盐酸胍优先结合，形成变性蛋白质-变性剂复合物，当复合物被除去，从而引起N→D反应平衡向右移动。随着变性剂浓度的增加，天然状态的蛋白质不断转变为复合物，最终导致蛋白质完全变性。然而，由于变性剂与变性蛋白的结合是非常弱的。因此，只有高浓度的变性剂才能引起蛋白质完全变性；2）尿素与盐酸胍对疏水氨基酸残基的增溶作用。因为尿素和盐酸胍都具有形成氢键的能力，当他们在高浓度时，可以破坏水的氢键结构，结果尿素和盐酸胍就成为非极性残基的较好溶剂，使之蛋白质分子内部的疏水残基伸展和溶解性增加。尿素和盐酸胍引起的变性通常是可逆的。但是，在某些情况下，由于一部分尿素可以转变为氰酸盐和氨，而蛋白质的氨基能够与氰酸盐反应，引起蛋白质电荷分布的改变。因此，尿素引起的蛋白质变性有时很难完全复性。一些还原剂(半胱氨酸、抗坏血酸、β-巯基乙醇和DTT)的使用，可以还原二硫键，能有助于变性后蛋白的复性。      总体而言，作为蛋白质变性过程中常用的试剂，盐酸胍和尿素的优缺点分别为：盐酸胍溶解能力和变性能力相对较强，不会造成重组蛋白质的共价修饰，但有成本高、在酸性条件下易产生沉淀、对蛋白质离子交换色谱有干扰等缺点；而尿素溶解能力相对较弱，但具有不电离、呈中性、成本低、蛋白质复性后不会造成大量蛋白质沉淀等优点。在实际实验中，研究人员可以根据条件及目的进行选择，以获得最you的实验结果。

无血清细胞培养基与血清细胞培养基哪个好？很难一句话来说。但可以从几个方面分别比较。1. 产品性能方面无血清培养基更好。血清并不是生来就为养细胞而来的。血清是全血的一部分，组分很复杂，有150多种已知组分组分，多种未知组分。这些组分中，有些对细胞生长是有利的，有些对细胞生长是无作用的，有些对细胞生长反而是有害的。另外，不同的牛，由于其体质不同，其血清中各种组分的差异很大。比如血清中的EGF，有的含量为10ug/ml，有的仅为2ug/ml，相差了5倍。有时你用的血清不好用，不是你的运气差，很多时候也不是厂家骗你。仅仅是因为，牛生来不是为了给人抽血养细胞的。这是没法子的事情。而无血清培养基，绝大多数都是面向某一种细胞而设计的。比如CHO细胞、293细胞、昆虫细胞、杂交瘤细胞、T淋巴细胞、间充质干细胞（MSC）等。产品设计是基于对该细胞的认识去单独设计的配方，仅添加有正面作用的组分，不会去添加作用不明或有害的物质（没来由的增加成本的事情很难发生）。所以，无血清培养基的性能从根子上讲要好于血清培养基，并且会随着人们对该细胞认识程度的增进而进一步提升。2. 产品安全性方面这个就非常明显了。无血清培养基，其配方的各种物质都是明确的。没有任何未知的组分。如果全部选择非动物来源的组分，那么从根子上就不会有含有任何的病毒、以及任何未知的蛋白组分。安全性是明确的。3. 产品价格方面一般来说，价格是无血清培养基最da的劣势。但就目前来看确实也不能一概而论。事实上，已经大规模工业化应用的无血清培养基，其价格已经跟血清培养基相当，有的甚至低于血清培养基。比如T淋巴细胞培养基（免疫细胞无血清培养基），价格已经达到了400元/L的水平。已经低于血清培养基了。这当然是好事了，现在市场上基本上培养T淋巴细胞的已经没有人用血清了。价格下降的原因也比较简单。就是大规模的生产带来了原料成本的大幅下降。无血清培养基中成本最gao部分为各种基因重组蛋白。随着生物反应器的规模从几十升扩大到上千生，作为产物的重组蛋白的成本也大幅下降。实际上，无血清培养基的成本下降空间要远大于血清培养基。当然，这也是很多蛋白药物生产企业及病毒疫苗企业选用无血清培养基的一个非常重要的原因。当然，对与某些科研用途的无血清培养基，价格确实非常昂贵。500ml/瓶的培养基，价格介于2000-8000。核心原因也在于添加的重组蛋白种类较稀少、产量极低、难以商业化大规模生产，造成了生产成本的居高不下。好多科研客户抱怨生产企业不为他们开发专用无血清培养基，其实生产企业也是很无奈。4. 使用随意性方面一般来说，血清培养基要强一些。使用随意性，一般是指接种密度、细胞消化方式、细胞培养瓶的选择、大规模培养时的反应器转速等方面。由于无血清培养基是专门设计用于大规模细胞培养的。而大规模培养的客户对价格都是非常敏感的。因此，无血清培养基在设计之初就在成本与使用随意性之间取得了平衡。无血清培养基更适合在确定条件下使用。血清培养基由于血清中有各种蛋白，对操作误差的容错性更好，所以对操作人员的要求相对就更少一些。

麦吉尔大学医学院的研究人员在理解酶的功能方面取得了重要的进步，这些酶在抗生素和其他治疗剂的生产中起着不可或缺的作用。他们的发现发表在《科学》杂志上。我们今天所依赖的许多药物都是由地球植物区系制成的天然产物。这包括由称为非核糖体肽合成酶或NRPS的大规模酶在微生物中产生的化合物。NRPS可以合成各种抗生素，这些抗生素可以杀死危险的真菌和细菌，以及可以帮助我们抵抗病毒感染和癌症的化合物。例如，这些化合物包括维霉素，一种用于治疗耐多药结核病的抗生素;环孢菌素，已广泛用作器官移植的免疫抑制剂;和熟悉的抗生素青霉素。”麦吉尔(McGill)生物化学系副教授Martin Schmeing博士，该研究的资shen作者为了合成这些药物，NRPS的运作类似于由一系列工作站组成的工厂组装线。每个工作站都称为“模块”，具有多步工作流程和移动部件，可将其添加一个基本成分到正在生长的药物中。了解组装线的内部运作Schmeing博士和其他人的先前工作使人们对一个模块的工作原理有了深刻的了解。现在，该团队在萨斯喀彻温省的加拿大光源和伊利诺伊州的先进光子源使用了一种称为X射线晶体学的技术，从而能够拍摄NRPS的超高分辨率3D照片。他们第1次能够通过可视化NRPS的两个模块部分(使之成为抗生素线性短杆菌肽)(在多孢菌素治疗中发现)，对单个模块与更大的组装线之间的关系进行高质量的观察。这项研究发现，除了模块必须协调才能将中间件从一个工作站传递到下一个工作站之外，其他所有模块之间都缺乏令人惊讶的同步性。此外，他们发现模块不是以直线或其他有组织的方式排列，而是可以在许多不同的相对位置排列。麦吉尔结构生物学中心主任施梅因博士说：“这种高度的灵活性是出乎意料的。”“这些酶在表演体操。”对治疗设计的未来影响因为蛋白质被困在晶体中，所以要小心确认结果是否代表现实生活中发生的事情。Schmeing博士与他的同事McGill生物化学系教授AlbaGuarné博士合作，使用在伯克利Advanced Light Source收集的补充溶液数据来验证观察结果。Schmeing博士说：“结构生物学界在McGill方面非常强大。我们共同合作，互相帮助，获得jian端实验所需的生物物理设备，并对学生进行培训。”论文中，珍妮丝·赖默(Janice Reimer)，马克斯·埃文斯卡尼(Max Eivanskhani)和英格丽·哈布(Ingrid Harb)都是麦吉尔有才华的研究生。”从长远来看，这些结果可能对新抗生素和治疗药物的生产产生影响。自从首次发现以来，科学家们对通过混合和匹配工作站来生产设计化合物的生物工程化NRPS的可能性感到兴奋。Schmeing博士解释说：“我们的研究表明，应该可以混合和匹配这些模块，但是必须在将化合物从一个模块传递到另一个模块的过程中，对生物工程化的NRPS进行修改。” 。“这是我们与索邦大学的马丁·魏格特(Martin Weigt)合作完成的，作为本文的原理证明，但需要针对设计疗法的生产进行优化。” 

     人体内的细胞注定是要死亡的，有些死亡是生理性的，有些死亡则是病理性的，有关细胞死亡过程的研究，已成为生物学、医学研究的一个热点，身为一位科研工作者，对细胞凋亡的几种检测方法都应该有所了解！今天上海远慕为大家整理了相关内容，希望能够帮到大家。     一、形态学观察方法     1.HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。     2.丫啶橙（AO）染色，荧光显微镜观察：医学教/育网搜集整理活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。     3.台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。如果细胞膜完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有一定的帮助。     4.透射电镜观察：可见凋亡细胞表面微绒毛消失，核染色质固缩、边集，常呈新月形，核膜皱褶，胞质紧实，细胞器集中，胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和凋亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。      二、DNA凝胶电泳     1.检测原理     细胞发生凋亡或坏死，其细胞DNA均发生断裂，细胞内小分子量DNA的片断增加，高分子DNA减少，胞质内出现DNA的片断。但凋亡细胞DNA断裂点均有规律的发生在核小体之间，出现180－200bpDNA的片断，而坏死细胞的DNA断裂点为无特征的杂乱片断，利用此特征可以确定群体细胞的死亡，并可与坏死细胞区别。     2.结果判断     正常活细胞DNA 电泳出现阶梯状（LADDER）条带；坏死细胞DNA电泳类似血抹片时的连续性条带。     三、酶联免疫吸附法（ELISA）核小体测定     凋亡细胞的DNA断裂使细胞质内出现核小体。核小体由组蛋白及其伴随的DNA的片断组成，可由ELISA法检测。     1.检测步骤     1.1.将凋亡细胞裂解后高速离心，其上清液中含有核小体；     1.2.在微定量板上吸附组蛋白体；     1.3.加上清夜使抗组蛋白抗体与核小体上的组蛋白结合；     1.4.加辣过氧化物酶标记的抗DNA抗体使之与核小体上的DNA结合；     1.5.加酶的底物，测光吸收制。     2、用途     该法敏感性高，可检测5*100/ml凋亡细胞。可用于人、大鼠、小鼠的凋亡检测。该法不需要特殊仪器，适合基层工作，但是不能测定凋亡细胞发生的绝多对量。 

　　自然界尚未发现天然存在的荧光RNA。科学家们一直试图发展人工合成的荧光RNA，用于细胞内低丰度RNA的示踪。但迄今为止，RNA研究领域还没有出现类似于荧光蛋白这样简单有效的活细胞荧光标记工具。       生物大分子标记技术是生物分子成像的关键。在科学历史上，人们利用荧光蛋白“点亮”细胞内蛋白质, 实现了生命动态过程中蛋白质分子的可视化。荧光蛋白技术是当代生物科学研究中最重要的研究工具之一；在短短十余年内，其研究即被授予诺贝尔奖。RNA同样具有独特的结构、种类繁多的生物学功能以及复杂的时间空间分布。       与蛋白质相比，RNA种类更多，大部分种类结构功能尚未鉴定，被称为基因组中的“暗物质”。不同种类的RNA及其修饰形式的鉴定、功能与调控研究现已经成为了国际前沿。RNA研究也迫切需要一种类似于荧光蛋白这样的颠覆性标记技术，这是深入研究RNA功能机制极为有用的工具。      国际权威学术期刊《Nature Biotechnology》杂志以“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fluorescent RNAs”为题，在线报道了华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室、光遗传学与合成生物学交叉学科研究中心杨弋课题组与朱麟勇课题组为主组成的联合攻关团队在荧光RNA及活细胞RNA成像领域取得的突破性进展。      自然界尚未发现天然存在的荧光RNA。科学家们一直试图发展人工合成的荧光RNA，用于细胞内低丰度RNA的示踪。但迄今为止，RNA研究领域还没有出现类似于荧光蛋白这样简单有效的活细胞荧光标记工具。针对这一亟需解决的技术挑战，华东理工大学药学院杨弋教授与化学与分子工程学院朱麟勇教授等组成了交叉学科联合攻关团队，历经七年紧密合作，最终在荧光RNA研发领域取得了突破性进展。基于合成生物学及化学生物学原理，他们成功构建了系列高性能荧光RNA，在国际上首次实现了动物细胞内不同种类RNA的标记与无背景成像。      研究团队发展了全新的分子设计理念及分子共同定向进化的方法新思路，首次获得了系列高亮、稳定、低背景的荧光RNA。这些荧光RNA是仅含40余个核苷酸的RNA分子片段，可以特异结合不发光的创新染料分子，进而产生强烈荧光。其与辣椒类似，它们具有蓝绿色、黄色、橙、红等不同颜色，与五颜六色的辣椒相似，因此被命名为Pepper。通过基因编辑等手段，Pepper可以插入到不同的天然非编码RNA与编码RNA分子序列中，进而在活细胞内对各种RNA进行荧光标记和实时成像，而不影响它们的转录、定位、翻译、降解等正常代谢。由于Pepper与染料分子的结合是非共价的，因此可以通过加入不同染料的方法，随意改变细胞内荧光RNA的颜色，这种灵活性对于荧光标记稳定细胞株和转基因动物的构建十分有利。      受益于Pepper的高亮度和强稳定性，研究团队首次实现了活细胞RNA的超分辨成像。研究团队还利用Pepper对单细胞中mRNA的翻译过程进行定量研究，结果显示癌细胞中mRNA量与其编码蛋白质量之间存在较低相关性，这表明癌细胞的翻译调控显著失调，这为癌症的诊疗提供一种全新的思路。      与现有技术相比，这项研究研发的荧光RNA在亲和力、稳定性、信噪比、活细胞荧光亮度等方面提升了一到三个数量级，体现了荧光RNA从概念到实用的突破，为活细胞中RNA的功能研究提供极具价值的工具。此外，这些荧光RNA与适配体技术相结合，原则上可以针对任意信号分子、代谢物、蛋白质等靶标发展从蓝色到红外的高响应度荧光探针，其性能将有望大幅超过现有基于荧光蛋白的遗传编码荧光探针，为活细胞与活体生物传感、即时诊断甚至实时诊断技术的发展提供新的机遇。    论文的第1作者为华东理工大学陈显军副研究员、张大生博士与苏倪博士，通讯作者为朱麟勇和杨弋。该研究得到了华东理工信息科学与工程学院杜文莉教授与生物工程学院张立新教授，以及哈佛大学医学院的Loscalzo教授的协助。该项研究得到了国家重点研发计划、国家自然科学基金、上海市科委项目、“111”计划、生物反应器工程国家重点实验室基金、教育部基本科研业务费、中国博士后科学基金等经费资助。

不同品牌的胎牛血清可能会出现好几种不同的颜色，胎牛血清颜色的不同主要是由于里面血红蛋白的含量，我们可以就胎牛血清的颜色对所购买的胎牛血清做一个简单的鉴别。 根据血红蛋白含量的不同，胎牛血清可表现出黄色或红色，我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl，实际上，血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响，这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度，良好的操作能降低血清的溶血。  ? 国产血清的基本上是采血后马上离心收集，所以很少会有溶血，表现出明亮的蜡黄色。进口胎牛血清或多或少总有点溶血，因为胎牛血清凝血功能差，红细胞容易破裂。 总的来说，品质差的血清呈现出蜡黄。质量zui好的呈现出谈黄、微红色，差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然，热灭活血清或保存不当的血清，由于血红蛋白的破坏氧化，会呈现出暗红，甚至咖啡色。我们可以就胎牛血清的这一特点对其进行简单的鉴别。

ELISA试剂盒的影响因素应选用质量靠得住的产品，不能图便宜，忽视质量保证。试剂应妥善保存于4℃冰箱内，在使用时先平衡至室温，不同批号的试剂组分不宜交叉使用。试剂开启后要在一周内用完，剩余的试剂下次用时应先检查是否变质，显色剂如被污染变色将造成全部显色，导致错误结果。 1. 操作前应对实验的物理参数有充分的了解，如环境温度(保持在18C～25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等，要先查看水育箱温度，ELISA试剂盒是否符合要求。 2. 正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂，避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅，血清残留在反应孔壁上，加样器吸头要清洗干净，避免污染，加样次序要与说明书一致，否则可导致结果错误，实验重复性差。 3. 要保证加液量一致ELISA试剂盒我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好，滴瓶不易控制加液量不准，造成显色不统一，判断错误。 4. 手工洗板加洗液时冲击力不要太大，洗涤次数不要超过说明书推荐的洗涤次数，洗液在反应孑L内滞留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流，造成孔问污染，导致假阴性或假阳性。 5. 显色液量不可过多加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下，加显色系统后要避光反应，显色液量不能过多，以免显色过强。 科研ELISA试剂盒实验看似简单，其实不然。记得以前一个同学*次做ELISA实验，跟我说，ELISA实验简直太简单了，到第2次在次做ELISA实验的时候，他惊讶了，说结果差别怎么这么大（同一份标本），第三次的时候，他决定认真的做一次，争取做到同一份标本，这次让他感受到ELISA并不是那么简单，发觉其实挺难的。今天的文章中为大家讲述一些ELISA实验中的小技巧，希望对大家有所帮助！

日本筑波-关于控制血压的机制(尤其是与高血压有关的机制)仍有许多疑问。在调节血管行为的相关因素中，推测apelin受体(APJ)在血管收缩中起着重要作用。但是，这直到现在还没有在体内得到证实。在《生物化学杂志》上发表的一项新研究中，由筑波大学专家领导的研究小组研究了APJ的活性，APJ是一种在心血管组织(例如血管和心脏)中普遍表达的膜受体，发现通过影响实验小鼠的血管平滑肌细胞，APJ与高血压(血压升高)密切相关。尽管先前的实验表明APJ可能与低血压(血压降低)有关，但这些实验并未使用血管平滑肌细胞，后者是表达APJ的主要细胞。在这项研究中，研究人员在血管平滑肌细胞中过度表达了APJ，因此其水平比生理上正常的小鼠高得多。这使研究人员能够具体评估激活APJ在这些小鼠的血管平滑肌细胞中的作用。该研究的通讯作者Akiyoshi Fukamizu说：“在血管平滑肌细胞中过表达APJ的转基因小鼠由于通过注射Apelin而激活APJ而显示出短暂而强烈的血压升高。”“这与某些类型的内皮功能障碍中存在的血管收缩-血管收缩是一致的。”在这项研究中，研究人员发现，在已知的血管收缩介导物去甲肾上腺素或去氧肾上腺素的存在下，APJ的激活会导致进一步的血管收缩。这表明与去甲肾上腺素和去氧肾上腺素(α1A-肾上腺素受体)的靶标有潜在的协同作用。“我们的分析表明，在激活了APJ的转基因小鼠中血管收缩作用显着，因此我们测试了通过从这些小鼠中去除α1A-肾上腺素能受体是否可以降低血管收缩作用，”研究的作者石田准司说。“我们发现，尽管这些小鼠中活化的APJ水平很高，但α1A-肾上腺素能受体的丧失极大地减少了血管收缩。”此外，研究人员表明，在实验室测定中，APJ和α1A-肾上腺素能受体在细胞内发生物理相互作用，这表明这种直接相互作用可能是小鼠中观察到的血管收缩的原因。这项研究的结果可能有助于了解控制血压并支持针对血管狭窄和血管痉挛等病症的治疗方法的机制。 

ELISA加样时的防错小经验：     实验*常见问题解答：    问：做直接Elisa法检验小鼠血清中的IgE抗体，设空白对照、和阴性对照、阳性血清稀释倍数为5千、1万、10万、20万不等，用的是生物素符号的羊抗鼠IgE抗体，和亲和素的辣根过氧化物酶。可是效果除了空白对照孔没有颜色外，其他各孔全有颜色，而且OD值都相差不大，为什么？       答复：或许原因如下：    （1）水质被金属离子等污染；防止办法尽量运用新鲜水或蒸馏水。    （2）洗刷不充分，样品中其它成分残留或酶残留；防止办法洗刷液应注满微孔，充分洗刷。    （3）移液头重复运用，未洗净或消毒不完全； 防止办法移液头zui好一次性运用。    （4）酶标板灵敏度过高。    （5）一抗显色时间的操控等等，关于ELISA的每一步都要留心才行。     我司主营：elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,生物试剂,血清,抗体,培养基,标准品,国产血清、GIBCO胎牛血清等。种属齐全，价格优惠。期待您的来电咨询与合作！     96T  检测84个样本，12孔用于制造标准曲线    48T  检测42个样本，6孔用于制造标准曲线     （1）用一张写满字的纸，字越多越好，比如报纸，垫在下面，这样，加过标本的小孔看过去下面的字会变小，没加的字正常，非常简略差异。    （2）可以使用液面反光与没有加的孔加以差异    （3）在标本加完后，再把加样枪全压下，使液面发作小气泡，也可以加以差异     我们对客户的许诺：    1.供应免费代测的效力。（你只需把标本寄过来，咱们为你节省时间，帮你出效果，原始数据，分析数据均可供应，一般时间是5天左右）    2.客户有任何问题，咱们都是在一个工作日之内给出解决方案。售后和技术这一块都是诚挚为客户效力    3.有质量问题免费包换.（质量问题包括运送不妥，客户在运用过程中测不出效果，等等！）    4.全程技术辅导。（包括售前的标本收集，运用过程中不明白的当地，实验结束后的数据分析，有任何疑问，咱们技术都会即时给你去电）? 

    糖尿病是一种以血糖升高为特征的代谢性疾病。当机体无法生产足够的胰岛素或者对胰岛素产生抵抗的时候，就会出现二型糖尿病。家族病史和不健康的生活方式，会提高二型糖尿病的患病风险。近年来全球二型糖尿病患者的人数急剧攀升，我国的糖尿病发病自2000年以来也进入了快速增长期。    研究人员发现，组蛋白乙酰转移酶（HAT）在糖尿病相关基因TXNIP的调控中起到了关键作用。他们通过CRISPR/Cas9技术“关闭”这种酶，成功减少了细胞死亡，增加了胰岛β细胞的胰岛素生产。?   细菌一直在与病毒或入侵核酸进行斗争，为此它们演化出了多种防御机制，CRISPR–Cas9适应性免疫系统就是其中之一。规律成簇的间隔短回文重复CRISPR与内切酶Cas9的组合，可以在引导RNA的指引下，靶标并切割入侵者的遗传物质。2012年研究者们利用这一特点，将CRISPR系统制成了强大的基因组编辑工具。    研究人员发现，在血糖水平高的情况下HAT会导致β细胞死亡，减少胰岛素的生产。他们比较了二型糖尿病患者与健康人的胰岛。研究显示，糖尿病细胞的HAT活性比健康细胞高两倍。于是，研究人员想去除这种酶的功能，分析它对糖尿病有何影响。   他们在大鼠的胰岛素生产细胞中用CRISPR/Cas9去除HAT基因的活性。这样的操作成功使TXNIP基因活性降低，减少了细胞死亡，增加了胰岛素生产。这项研究表明，HAT在TXNIP调控中起关键作用，靶标这一机制可以改善胰岛素分泌和避免细胞死亡。    在基因组编辑技术的帮助下，科学家们现在向治愈镰状细胞病迈进了关键一步。他们用CRISPR-Cas9对患者造血干细胞进行基因组编辑，校正了较高比例的造血干细胞，足以在患者体内产生实质性的益处。   胰腺导管腺癌（PDA）是胰腺癌的一个主要类型，它拥有抵御化疗的物理屏障，能诱导多种免疫抑制。多伦多大学的研究人员zui近通过全基因组CRISPR–Cas9筛选找到了PDAC细胞的弱点。    白血病是一种造血系统的恶性肿瘤，俗称“血癌”。急性髓性白血病AML是比较常见的一种白血病，现有治疗药物在临床上的效果并不理想。研究所改良了CRISPR基因编辑技术，并用该技术找到了大量治疗AML的新靶标。

       植物生长受到环境条件的强烈影响，例如光照，湿度，干旱和盐碱度等。但是植物如何整合环境信号以及其基因编码的发育过程仍然是一个谜。       特拉维夫大学的一项新研究发现，涉及钙，植物激素生长素和钙结合蛋白的独特机制负责调节植物的生长。研究人员说，一种与钙结合的蛋白质可以调节植物生长素的反应和钙的水平，从而形成决定植物如何生长的界面。       该研究由TAU的乔治·怀斯生命科学学院的Shaul Yalovsky教授领导，并于7月11日发表在PLOS Biology中。该研究的研究由TAU研究生Ora Hazak和Elad Mamon及其同事进行。它是与TAU生物化学和分子生物学系的Joel Hirsch教授，Münster大学的J?rgKudla教授和加利福尼亚大学圣地亚哥分校的Mark Estelle教授合作的结果。      Yalovsky教授解释说：“确定植物发育可塑性的基础机制对于农业创新至关重要。”“几十年来，人们一直认为钙和植物生长素在植物的发育过程中会相互作用，但这种“串扰”的确切机制尚不清楚。     “我们发现生长素通过称为CMI1的结合蛋白与钙进行通讯。我们相信我们的研究将对农民和农业专家具有长期应用，他们将能够利用这些信息使子孙后代适应极端的环境条件例如高温，干旱和土壤中的高盐分。”      植物激素生长素的水平决定了植物上叶片的生长位置，植物有多少分支以及根系如何发育。植物中的钙水平会根据环境信号(例如高温或低温，接触和土壤盐分)以及生长素水平的变化而变化。      Yalovsky教授补充说：“在我们的研究之前，尚不清楚钙和生长素之间是如何发生相互作用的。”“现在我们知道，当生长素水平很高时，新发现的结合蛋白CMI1的水平就会很高。我们发现该蛋白调节生长素反应和钙水平，并与钙结合。”      植物对生长素的反应是缓慢或快速的。慢反应在数小时和数天的过程中发生，并取决于基因表达途径，而快速反应在数分钟内发生。CMI1的特性使得能够快速响应植物生长素水平，这取决于钙的存在。       Yalovsky教授总结说：“我们使用了非常广泛的工具和方法，使我们能够从整个植物的水平到组织和细胞的水平，再到分子的水平进行分析。” 。“下一步将是确定与我们发现的蛋白质相互作用的细胞成分。” 

   2019年已经接近年末，一年一度的双十一购物狂欢盛典已经拉开序幕。各位淘宝达人们已经展开”会计”之路,我们科研事业的小伙伴们你们准备好了吗? 面对各路生物公司摆下的的PK擂台,上海远慕生物有限公司在今年”双十一”也送出钜惠活动啦!生化试剂、染色液、培养基等各类科研试剂，惊喜绝dui超乎你的想象，只为 让你“赚”到，推出诸多优惠，还有你想不到的，惊喜再升级哦！绝dui给科研君们带来满满的福利哦！  促销产品：甲基丙烯酸异癸酯/甲基丙烯酸异癸酯 吴茱萸次碱84-26-4标准胎牛血清（碳吸附过滤）酵母粉琼脂醛品红染色液辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG牛肉膏蛋白胨琼脂培养基  CAS:65039-10-3,氯化1-烯丙基-3-甲基咪唑CAS:920-66-1,六氟异丙醇价格CAS:63700-19-6,尿苷二磷酸葡糖醛酸现货供应pUC18gelgreen核酸染料抗A抗B血型定型试剂（单克隆抗体）乙肝表面抗原/HBSAg价格 活动时间：即日起至2019年11月11日结束 除以上产品外更有生化试剂、标准品/对照品、质粒相关产品的钜惠活动！！！具体折扣详情,请咨询我司销售人员!        上海远慕生物科技有限公司，产品涵盖有机试剂、无机试剂和生化试剂，标准物质、天然植物提取物及中药标准品，核酸、酶、缓冲剂、显色底物，医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。品种类超过2万种，广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。   远慕！您最信任的合作伙伴。我们愿与您精诚合作，共创美好的未来。

   培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多，根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基；根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，通常有高温灭菌和过滤灭菌。培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。配好后不宜久置，zui好现配现用。     1.低血清培养基能用肉眼判断其pH值吗？    答：低血清培养基中酚红的含量与普通培养基中的酚红含量不同，不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值，建议使用pH计进行测定。?    2.低血清培养基的缓冲系统是什么？    答：平衡盐一般是由无机盐及葡萄糖组成的。平衡盐有Hanks′系统、Earle′s系统、Dulbecco′s磷酸缓冲盐系统等。199系列培养基、MEM系列培养基均有Hanks′系统的培养基及Earle′s系统的培养基。但是有些培养基均不是以上常规的平衡盐系统，例如RPMI 1640培养基、F12培养基。MEM(SLM)低血清培养基的平衡盐系统也不是常规的平衡盐系统，该平衡盐系统的缓冲能力强于常规平衡盐系统的缓冲能力。     3.谷氨酰胺溶液和碳酸氢钠的配制方法是什么？    答：以0.2mol/L的 L-谷氨酰胺配制为例：称取L-谷氨酰胺2.92g，加注射用水100ml，充分搅拌混匀。用0.2μm滤膜正压过滤除菌。溶液应在4℃下避光保存，2周内使用。    以7.5% NaHCO3的配制为例：称取NaHCO37.5g溶于100ml蒸馏水中过滤除菌。     4.什么培养基中可以省去加酚红？    答：酚红在培养基中用作pH值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。酚红本身对生物制品质量并不会产生影响，可以通过纯化技术去除，但酚红在无血清培养基可能带来胞内钠/钾失衡，影响细胞生长，当然这种作用能被血清所中和或减轻。 酚红并不是培养基中必需的一种成分，很多国外的疫苗或抗体生产企业在生产过程中都使用无酚红培养基。     5.放置在冰箱中的培养基颜色会发生变化，为什么？    答：培养基保存于4℃冰箱中，培养基内CO2 会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱后再用于细胞培养将造成细胞生长停滞或死亡。培养基偏碱时，可以通入无菌过滤的CO2，以调整pH值。    6.无血清培养与有血清培养使用的抗生素量一样吗？    答：当在无血清培养基中添加抗生素时，降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。因为血清中的蛋白会结合和灭活一些抗生素。而在无血清培养条件下，抗生素不被灭活。?

      RNA酶抑制剂具有广谱的RNA酶抑制作用，包括中性的真核生物的RNA的抑制作用。?分子量是50kDa的蛋白质通过非共价键与RNA酶以1：1的比例结合发挥它的抑制作用。RNA酶抑制剂与RNA酶结合的有效浓度时10-14M。而且，RNA酶抑制剂的动力学结合是非常迅速的，确保与RNA酶的迅速络合，并对其产生迅速的抑制作用。常见的RNA酶抑制剂1、焦碳酸二乙酯（DEPC）：是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂，他通过和RNA酶的活性基因团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。2、异硫氰酸胍：目前认为是最有效的RNA酶抑制剂，它在裂解组织的同时也使RNA酶失活，它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中解离出来，又对RNA酶有强烈的变性作用。3、氧钒核糖核苷复合物：由氧化钒离子和核苷形成的复合物，它和RNA酶结合形式过渡类物质，几乎能完全抑制RNA酶的活性。4、RNA酶的蛋白质抑制剂（RNasin）：从大鼠肝或人胚盘中提取得来的酸性糖蛋白.Rnasin是RNA酶的一种非竞争性抑制剂，可以和多种RNA酶结合，使其失活。5、其他：SDS、尿素、硅藻土等对RNA酶也有一定的抑制作用。       RNA酶抑制剂产品是从人胎盘中提取的一种广谱的核糖核酸酶抑制剂，分子量约50KDa。它在分子生物学的实验中有着十分 广泛的应用。例如：RT-PCR，cDNA合成中mRNA的保护，体外转录和体外翻译，制备RNase-free的抗体，原位杂交和mRNA定位等，它是一个在任何应用中对付潜在RNase污染的十分有用处的试剂。

SDS PAGE又称聚丙烯酰胺凝胶电泳（英语： polyacrylamide gel electrophoresis，简称PAGE） 作用：用于分离蛋白质和寡核苷酸。SDS PAGE的配制方法将29克丙烯酰胺和1克N,N’-亚甲丙烯酰胺溶于总体积为60ml温热（37℃左右）的去离子水中，充分搅拌溶解，补加水至终体积为100ml。0.45μm微孔滤膜过滤除菌和杂质，储于棕色瓶，4℃避光（用铝箔纸包扎起来）保存。严格核实PH不得超过7.0，因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月，隔几个月须重新配制。如有沉淀，可以过滤。10%（W/V, g/ml）过硫酸铵（APs）的配制：（100 ml）1. 称取10g过硫酸铵；2. 加入100 ml的去离子水，将固体粉末彻底溶解；3. 贮存于4℃。注意：10%过硫酸铵最hao现配现用，配好的溶液在4℃保存可使用2周左右，过期会失去催化效果。5×Tris-Glycine电泳缓冲液的配制：（1 L）1. 称取Tris粉末15.1 g、Glycine（甘氨酸）94 g、SDS 5.0 g；2. 加入约800 ml的去离子水，搅拌溶解；3. 加去离子水定容至1 L，室温保存。注意：加水时应让水延着壁缓缓流下，以避免由于SDS的原因产生很多泡沫。5×SDS-PAGE Loading Buffer的配制（方案一）：（5 ml）（本方案摘自Takara网站）组分：Tris-HCl? pH6.8（250 mM）；SDS （10%）；溴酚兰（0.5%）；甘油（50%）；β-巯基乙醇（5%）配制过程：1. 量取1M Tris-HCl （pH6.8） 1.25 ml；甘油2.5 ml；称取SDS固体粉末0.5 g；溴酚兰25 mg；2. 加入去离子水溶解后定容至5 ml；3. 小份（500 μl）分装后，于室温保存。4. 使用前将25 μl的β-巯基乙醇加入到每小份中去。5. 加入β-巯基乙醇的上样Buffer可以在室温下保存一个月左右。5×SDS-PAGE Loading Buffer的配制（方案二）：（10 ml）（本方案摘自《蛋白质技术手册》汪家政、范明）组分：Tris-HCl? pH6.8（60 mM）；SDS （2%）；溴酚兰（0.1%）；甘油（25%）；β-巯基乙醇（14.4 mM）配制过程：1. 量取1M Tris-HCl （pH6.8） 0.6 ml；50%的甘油5 ml；10%的SDS溶液2 ml；1%的溴酚兰1 ml；2. 加入去离子水定容至10 ml；3. 分装；4. 在4℃可保存数周，-20℃可保存数月之久。以上两种上样Buffer的配方不太一样，你还可以参考下面这个配方2×SDS凝胶加样缓冲液 组分（摘自《分子克隆》第三版）Tris-HCl? pH6.8（100 mM）；SDS （4%）；溴酚兰（0.2%）；甘油（20%）；β-巯基乙醇或二硫苏糖醇（200 mM）不含硫代试剂的加样Buffer可在室温保存。β-巯基乙醇或二硫苏糖醇临用前加入。