现代生物技术均通过细胞作为载体来进行，无论是基因治疗、干细胞、克隆技术都在细胞内进行的。细胞的生长需要一定的营养环境，用于维持细胞生长的营养基质称为培养基，即指所有用于各种目的的体外培养、保存细胞用的物质，就其本意上讲为人工模拟体内生长的营养环境，使细胞在此环境中有生长和繁殖的能力。它是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。细胞培养基其组成成分主要有：水、氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子及其他一些入核酸降解物、激素等。细胞培养基的基本要求体外培养的细胞直接生活在培养基中，因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的要求。1、营养成分。维持细胞生长的营养条件一般包括以下几个方面： 1）氨基酸：是细胞合成蛋白质的原料。所有细胞都需要12种必须氨基酸：缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精氨酸、胱氨酸。此外还需要谷氨酰胺，它在细胞代谢过程中有重要作用，所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的来源，同样也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物质。 体外培养的各种培养基内都含有必需氨基酸。 2）单糖：培养中的细胞可以进行有氧与无氧酵解，六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。细胞对葡萄糖的吸收能力，半乳糖。 体外培养动物细胞时，几乎所有的培养基或培养液中都以葡萄糖作为必含的能源物质。 3）维生素：主要扮演辅酶、辅基的角色，*。生物素、叶酸、烟酰胺、泛酸、吡哆醇、核黄素、硫胺素、维生素B12都是培养基常有的成分。 4）无机离子与微量元素：细胞生长除需要钠、钾、钙、镁、氮和磷等基本元素，还需要微量元素，如铁、锌、硒、铜、锰、钼、钒等。2、促生长因子及激素。各种激素、生长因子对于维持细胞的功能、保持细胞的状态（分化或未分化）具有十分重要的作用。有些激素对许多细胞生长有促生长作用，如胰岛素，它能促进细胞利用葡萄糖和氨基酸。有些激素对某一类细胞有明显促进作用，如可促进表皮细胞的生长，泌乳素有促进乳腺上皮细胞生长作用等。3、渗透压。细胞必须生活在等渗环境中，大多数培养细胞对渗透压有一定耐受性。人血浆渗透压290mOsm/kg, 可视为培养人体细胞的理想渗透压。鼠细胞渗透压在320mOsm/kg左右。对于大多数哺乳动物细胞，渗透压在260－320mOsm/kg的范围都适宜。4、无毒、无污染。体外生长的细胞对微生物及一些有害有毒物质没有抵抗能力，因此培养基应达到无化学物质污染、无微生物污染（如细菌、真菌、支原体、病毒等）、无其他对细胞产生损伤作用的生物活性物质污染（如抗体、补体）。对于天然培养基，污染主要来源于取材过程及生物材料本身，应当严格选材，严格操作。对于合成培养基，污染主要来源于配制过程，配制所用的水，器皿应十分洁净，配制后应严格过滤除菌。5、pH。气体也是细胞生存的必需条件之一，所需气体丰要是氧和二氧化碳。氧参与三羧酸循环，产生能量供给细胞生长、增殖和合成各种成分。一些细胞在缺氧情况下，借糖酵解也可获取能量，但多数细胞缺氧不能生存。在开放培养时，一般置细胞于95％空气加5％二氧化碳的混合气体环境中培养。二氧化碳既是细胞代谢产物，也是细胞所需成分，它主要与维持培养基的pH有直接关系。动物细胞大多数需要轻微的碱性条件，pH值约在7．2~7．4℃在细胞生长过程中，随细胞数量的增多和代谢活动的加强，二氧化碳不断被释放，培养液变酸，PH值发生变化。由于NaHCO3容易分解为二氧化碳，很不稳定，致使缓冲系统难以地控制。故这一缓冲系统适合密闭培养。HEPES结合碳酸氢钠使用，可提供更有效的缓冲体系，主要是防止pH值迅速变动，但大缺点是在开放培养或观察时难以维持正常的pH值。造成pH波动主要是代谢产生的CO2，在封闭式培养过程中CO2与水结合产生碳酸，培养基pH很快下降。为解决这一问题，合成培养基中使用了NaHCO3-CO2缓冲系统，并采用开放培养，使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养瓶，再通过稳定调节温箱中CO2浓度（5％），与培养基中的NaHCO3处于平衡状态。

核酸检测试剂是基于核酸扩增检测技术的体外诊断试剂，包括等温扩增、PCR，qPCR等。现在有些实验室自己合成引物探针，生产qPCR诊断试剂，也有些试剂生产企业在问如何保证试剂生产过程的质量控制。检测试剂的生产质控与诊断试剂的评价既有相同点，因为都是基于相同的评价指标；又有不同点，生产过程会关注原料、半成品、成品，诊断试剂评价只针对成品。核酸检测试剂原材料有如下这些：1、dNTP脱氧三磷酸核苷，核酸的组成成分，包括：dATP、dUTP、dGTP、dCTP和dTTP。应为HPLC纯、PCR级，无DNase和RNase污染。-20℃保存。2、引物由一定数量的核苷酸构成的特定序列，通常采用DNA合成仪人工合成，合成后经聚丙烯酰胺凝胶电泳或其他适宜方法纯化。冻干粉，1800D以上。序列正确。纯度应达到电泳级（PAGE）或HPLC级，不含杂带。应提供合成机构出具的合成产物的质检证明，如PAGE电泳结果或HPLC分析图谱。应作HPLC分析和紫外光吸收分析。以紫外分光光度计测定OD260nm/OD280nm的比值在1、6~2、0之间，可视为合格引物。-20℃保存。3、探针是指特定的带有示踪物（标记物）的已知核酸片段（寡聚核苷酸片段），能与互补核酸序列退火杂交，用于特定核酸序列的探测。通常采用DNA合成仪人工合成，合成后经聚丙烯酰胺凝胶电泳或其他适宜方法纯化，在5-端标记荧光素报告基团或其他发光标记物，在3-端标记荧光素淬灭基团，并经HPLC或其他适宜方法纯化。4、Taq DNA聚合酶具有DNA聚合酶活性，无核酸外切酶活性及核酸内切酶活性；具热稳定性，94℃保温1小时后仍保持50%活性。-20℃保存。5、UNG（尿嘧啶糖基化酶）具有尿嘧啶糖基化酶活性，无核酸外切酶及核酸内切酶活性，IU UNG在 37℃处理3分钟后，103拷贝以下含U模版应完全降解，不能产生扩增产物。-20℃保存。6、RT-PCR酶（反转录扩增酶）具逆转录酶活性和DNA聚合酶活性，无核酸外切酶及核酸内切酶活性；具热稳定性，94℃1小时后仍保持50%活性，-20℃保存。以上便是关于核酸检测试剂的相关内容介绍了。

我公司多次声明：产品只用于科研，不做临床。但是仍有客户来电到我司咨询订购临床使用试剂盒，而且有很多客户还很不解的询问到我们做科研的试剂盒为什么就不能用在临床上面呢，其实这两种用途的区别还是很大的，为什么那么容易被混淆呢？今天来和您说说临床试剂盒与科研试剂盒的根本区别在哪里。临床试剂所含有对人体有害物质会少许多，但并不是说纯度会高，科研试剂许多纯度都比临床试剂高，科研试剂追求得就是高纯度，临床试剂要求的是无杂无毒。我公司elisa试剂盒可测标本有血清、血浆、尿液等，种属与标本的种类很齐全。检验试剂管理和质量控制是关系到检验质量水平的重要工作。懂得检验试剂的一般性质及分类规律；具有专门的试剂储藏室；试剂实行分类存放；严格试剂的出入库验收，经常进行定期和不定期检查；做好试剂的采购和论证工作。

传统的菌种保存方式简介斜面保存法：微生物保存最基本的方法，可广泛用于细菌、真菌等，保存期限非常短，斜面容易干裂。液体石蜡保存法：可用于保存霉菌、酵母菌、放线菌及需氧菌，方法简便，可防止斜面干燥和氧气进入，但一些固氮菌、分枝杆菌、毛霉、厌氧菌等不适宜用此法。甘油冷冻保存法：用于一般细菌的保存，需使甘油终浓度为20%左右，然后-20℃或-70℃以下保存。融化时需要水浴溶化。真空冷冻保存法：具有低温、干燥、无氧的保存条件，适用于98%以上菌种的保存，但操作复杂，一般实验室难以使用。液氮保存法：基本所有微生物均可保存，并且保存时间长，但操作较为复杂而且需要设备，不适用于一般实验室保存菌种。沙土保存法半固体保存法瓷珠菌种保存法的原理瓷珠菌种保存管是实验室保存菌种的容器，管内有表面凹孔小瓷珠用于细菌的吸附和保存，放置于-20℃或-80℃下便可创造干燥、低温、缺营养的环境，使菌株处于“休眠” 状态，方可长期保存（视不同菌种与保存温度，一般可保存3-10 年）, 同时菌种保存管的取用和保存较为便利（取用复苏及保存菌种仅需1分钟）。瓷珠菌种保存管的优点用途：菌种保存、复苏和运输。优点：操作简单方便、菌种保存快速、包装物体积小、菌种保存时间长。操作简单方便：挑取细菌新鲜纯培养物，接入菌种保存管。菌种保存快速：混匀后，吸出冷冻保存液。包装物体积小：1.8ml冷冻管。菌种保存时间长：2-8℃可保存6个月；-20℃可保存12个月；-80℃可保存24个月。瓷珠菌种保存管的使用方法1.从培养18h以上的平板上刮去新鲜纯培养物于菌种保存管中，配成大约3-4麦氏比浊度的菌悬液。2.拧紧保存管，来回颠倒几次使细菌乳化，不能旋摇。3.用无菌移液器将菌种保存管内的液体吸取干净，妥善放置被吸出的液体。4.拧紧保存管，迅速将其置于-20℃或-70℃冰箱中。使用时的注意事项被保存的菌种要求是经过纯化后培养 18-24h 内的新鲜菌种（细菌18-24h，酵母菌需3 天，形成孢子的微生物保存孢子，而放线菌和丝状真菌需培养7 天后保存），不宜使用老化或未经鉴定的菌种。菌种保存浓度必须要做3-4 麦氏比浊度，如接种浓度过低将会降低复苏效果。待保存于菌种保存管中的菌种完全乳化均匀吸附在多孔小瓷珠后，要将多余的菌种保存液吸取出来并弃之，否则在复苏时的冻融过程中会损伤菌株活性。做厌氧菌保存时，应提供厌氧的环境，如厌氧箱、厌氧袋，菌种保存管中可通入氮气来驱除保存菌种时所引入的氧气。菌种复苏时，也要创造厌氧的环境。菌种复苏完成后，对使用菌株需要进行再次纯化，以保证菌株的单一性。

一、实验室安全知识在化学实验室中，经常与毒性很强、有腐蚀性、易燃烧和具有爆炸性的化学药品直接接触，常常使用易碎的玻璃和瓷质器皿以及在煤气、水、电等高温电热设备的环境下进行着紧张而细致的工作，因此，必须十分重视安全工作。1．进入实验室开始工作前应了解煤气总阀门、水阀门及电闸所在处。离开实验室时，一定要将室内检查一遍，应将水、电、煤气的开关关好，门窗锁好。2、使用煤气灯时，应先将火柴点燃，一手执火柴紧靠近灯口，一手慢开煤气门。不能先开煤气门，后燃火柴。灯焰大小和火力强弱，应根据实验的需要来调节。用火时，应做到火着人在，人走火灭。3．使用电器设备（如烘箱、恒温水浴、离心机、电炉等）时，严防触电；绝不可用湿手或在眼睛旁视时开关电闸和电器开关。应该用试电笔检查电器设备是否漏电，凡是漏电的仪器，一律不能使用。4．使用浓酸、浓碱，必须极为小心地操作，防止溅出。用移液管量取这些试剂时，必须使用橡皮球，绝对不能用口吸取。若不慎溅在实验台上或地面，必须及时用湿抹布擦洗干净。如果触及皮肤应立即治疗。5．使用可燃物，特别是易燃物（如乙醚、丙酮、乙醇、苯、金属钠等）时，应特别小心。不要大量放在桌上，更不要在靠近火焰处。只有在远离火源时，或将火焰熄灭后，才可大量倾倒易燃液体。低沸点的有机溶剂不准在火上直接加热，只能在水浴上利用回流冷凝管加热或蒸馏。6．如果不慎倾出了相当量的易燃液体，则应按下法处理：（1）立即关闭室内所有的火源和电加热器。（2）关门，开启小窗及窗户。（3）用毛巾或抹布擦拭洒出的液体，并将液体拧到大的容器中，然后再倒入带塞的玻璃瓶中。7．用油浴操作时，应小心加热，不断用温度计测量，不要使温度超过油的燃烧温度。8．易燃和易爆炸物质的残渣（如金属钠、白磷、火柴头）不得倒入污物桶或水槽中，应收集在指定的容器内。9．废液，特别是强酸和强碱不能直接倒在水槽中，应先稀释，然后倒入水槽，再用大量自来水冲洗水槽及下水道或者根据当地环保部门的要求收集后委托有资质的机构处理。10．毒物应按实验室的规定办理审批手续后领取，使用时严格操作，用后妥善处理。二、实验室灭火法实验中一旦发生了火灾切不可惊慌失措，应保持镇静。首先立即切断室内一切火源和电源。然后根据具体情况正确地进行抢救和灭火。常用的方法有：1．在可燃液体燃着时，应立即拿开着火区域内的一切可燃物质，关闭通风器，防止扩大燃烧。若着火面积较小，可用抹布、湿布、铁片或沙土覆盖，隔绝空气使之熄灭。但覆盖时要轻，避免碰坏或打翻盛有易燃溶剂的玻璃器皿，导致更多的溶剂流出而再着火。2．酒精及其他可溶于水的液体着火时，可用水灭火。3．汽油、乙醚、甲苯等有机溶剂着火时，应用石棉布或砂土扑灭。绝对不能用水，否则反而会扩大燃烧面积。4．金属钠着火时，可把砂子倒在它的上面。5．导线着火时不能用水及二氧化碳灭火器，应切断电源或用四氯化碳灭火器。6．衣服烧着时切忌奔走，可用衣服、大衣等包裹身体或躺在地上滚动，以灭火。7．发生火灾时应注意保护现场。较大的着火事故应立即报警。三、实验室急救在实验过程中不慎发生受伤事故，应立即采取适当的急救措施。1．受玻璃割伤及其他机械损伤：首先必须检查伤口内有无玻璃或金属等物碎片，然后用硼酸水洗净，再擦碘酒或紫药水，必要时用纱布包扎。若伤口较大或过深而大量出血，应迅速在伤口上部和下部扎紧血管止血，立即到医院诊治。2．烫伤：一般用浓的（90％～95％）酒精消毒后，涂上苦味酸软膏。如果伤处红痛或红肿（一级灼伤），可用橄榄油或用棉花沾酒精敷盖伤处；若皮肤起泡（二级灼伤），不要弄破水泡，防止感染；若伤处皮肤呈棕色或黑色（三级灼伤），应用干燥而无菌的消毒纱布轻轻包扎好，急送医院治疗。3．强碱（如氢氧化钠，氢氧化钾）、钠、钾等触及皮肤而引起灼伤时，要先用大量自来水冲洗，再用5％乙酸溶液或2％乙酸溶液涂洗。4．强酸、溴等触及皮肤而致灼伤时，应立即用大量自来水冲洗，再以5％碳酸氢钠溶液或5％氢氧化铵溶液洗涤。5．如酚触及皮肤引起灼伤，应该用大量的水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。6．若煤气中毒时，应到室外呼吸新鲜空气，若严重时应立即到医院诊治。7．水银容易由呼吸道进入人体，也可以经皮肤直接吸收而引起积累性中毒。严重中毒的征象是口中有金属气味，呼出气体也有气味；流唾液，牙床及嘴唇上有硫化汞的黑色；淋巴腺及唾液腺肿大。若不慎中毒时，应送医院急救。急性中毒时，通常用碳粉或呕吐剂彻底洗胃，或者食入蛋白（如1 升牛奶加3 个鸡蛋清）或蓖麻油解毒并使之呕吐。8．触电：触电时可按下述方法之一切断电路：（1）关闭电源；（2）用干木棍使导线与被害者分开；（3）使被害者和土地分离，急救时急救者必须做好防止触电的安全措施，手或脚必须绝缘。 

标准品分为哪几种？其有效期如何规定？新标准品、配成溶液的以及开封后的标准品保存方式有何不同？是否标准品也需要期间核查？是否有具体的案例帮助更好的理解与分析？您是否也曾百思不得其解？没关系，本文为您一一解答！标准品分为基准标准品、工作标准品（1）基准标准品：分为法定基准标准品和内部基准标准品两类。法定标准品包括：中国药品生物制品检定所（NICPBP）提供的国家标准品（CP标准品）、美国药典委员会（USP）提供的USP标准品、欧洲EDQM委员会提供的EP标准品、JP标准品、BP标准品及其它WHO、ISA标准品等官方渠道得到的标准品。 （2）工作标准品包括：企业内部标定的工作标准品、科研单位或合同实验室标定的工作标准品、其他厂家在认证实验室标定的标准品。 （3）杂质标准品：分为定性用杂质标准品及定量用杂质标准品，来源于法定标准品或自制杂质对照品。标准品如何命名？1.工作标准品首次标定的批号取四位数，前两位为代表标准品标定的年份，后两位为流水 号，例：2010年第一次标定批号为1001，第二次使用新制备的样品进行标定批号则为1002。  2.若同一批次重新标定则在原批号加后缀，例如，1001-1，第二次复标则为1001-2，依次类推。 3.内部基准标准品按上述原则再加P，例如，P1001。 标准品有效期（失效期）与复标期无特殊规定时，有效期及复标期如下：1．如无特殊情况，工作标准品的含量每半年复标一次或另取新生产的样品标定。当标准品暂不使用时，复标周期可能超过规定周期，在使用前进行复标，合格后可以继续使用。2.对于特定市场使用的工作标准品，复标可以按照当地药政局或者药典的规定的周期来进行。 3.标准品若在使用过程中发现异常或者较大变化，应停止使用该标准品，并考虑采用更严格的包装和保存方式或缩短其复标期等措施。 4.若老的基准标准品批号过期，则用此批基准标准品标定过的相应的工作标准品应按照新批号基准标准品进行重新标定，用此批标准品配制的储备溶液也应同时失效，应用新的批号基准标准品重新配制。5.基准标准品：按说明书要求，若标签或者化验单上没有指明有效期（失效期），可以到网站上查询，如USP，EP 标准品目录单，若无法查到，同本厂规定此种药品的有效期，若无法得知此批的标定日期，可以从收到标准品日期算起。 6.对于省药检所，兽药检所标定的工作标准品，有效期（失效期）同该产品的有效期。如何做好标准品的管理？1.标准品的接收      收到标准品后，应检查外包装是否完好、洁净、密封性、标签清晰完整性，及时填 H2-SOP1-QC-G006-R01《标准品储存记录》。该表应包括名称、储存条件、储存位置、存入日期、有效日期、规格、批号、含量、数量、瓶号、备注（可填写使用注意事项）、经手人等信息。2.过期标准品的销毁      负责检查基准标准品是否过期，及时将过期基准标准品转移至带有过期标识的容器中集中销毁。 3.标准品标定报告的管理标准品使用注意事项：      （1）新开瓶标准品要在瓶上注明开瓶日期，应根据瓶号依次来使用（整瓶使用或者送样情况除外），同一批号的标准品或工作对照品必须使用完一瓶后再开启另一瓶，标准品使用过程中，已取出的标准品严禁再放回原瓶中。（2）同一瓶工作标准品的开启使用的次数不应超过20次，使用的时间不应超过1个月，使用次数很少或具有吸湿性的工作标准品分装时应考虑一次性使用量分装。标准品的贮存不同的标准品应根据其理化性质、贮存要求的不同选择适宜的贮存环境和条件，分别置于规定的位置。贮存环境：贮存室应尽量设置空调设施，保证室内阴凉、干燥、避光、通风，温度在25±5℃，相对湿度在50～75%为宜。特殊品种要求严格按照规定的贮存条件妥善保存。标准品应放在干燥器或其它适宜容器中保存，每一个干燥器或容器外应有区别于标准品编号的特殊编码，以示存放位置。干燥器置于专用的柜中，依次排列整齐，并由专人管理。 标准品的贮存期：一般按标准品的规定贮存期限执行，没有期限的原则上化学提纯物标准品为3年，生物试剂和不稳定的以6～12个月为宜。 标准品贮存应由管理员每天上下午各检查1次温度、湿度并做记录。凡不符合规定要求的，应及时调整纠正。多雨季节时，保管员要增加检查频次。不同标准品保存方式也有不同常见的标准品的保存方法有：1.常温保存：通常用于化学性质比较稳定的标准品，建议保存于干燥阴凉的地方。2.+4度冷藏：用于常温下不是很稳定的物质，保存于冰箱冷藏室。3.-20度冷冻：用于化学性质不稳定，常温下容易分解的物质。4.-80度保存：一些具有生物活性的物质，需要保存于特定的-80度的冰箱。运输条件：相对于长期保存的条件，运输过程由于时间比较短，所以运输条件相对来说要求没有保存条件那么严格。长期保存条件为常温和+4度的标准品都可以在常温条件下运输，-20度保存的标准品在运输时可以放入冰袋来降低温度，而-80度保存的物质则需要在运输时加入干冰。但是干冰的有效时间只能维持1天左右，所以这类型的物质不适合于长途运输。对于配制成溶液的标准品在保存的时候还需要注意：除非产品标签指明放入冰箱冷藏或冷冻，否则最好放在阴凉干燥的地方室温保存即可。因为低温的时候物质确实不容易分解，但低温使得化合物的溶解度降低，因而导致常温下就难溶解的化合物在低温下长时间放置时析出晶体，而且一旦析出晶体很难再溶解。 对于已经打开使用的标准品溶液型的产品最好一次性使用完，如果不能使用完，请尽量转移到一个能够避免溶液挥发的容器中，按照产品的标签进行保存。但在保存过程中，还是有很大可能性由于溶液挥发导致成分的值与COA不符合。标准品也要期间核查？标准品存放时间，这其实在实验室认可中有明确的要求，就是所谓的标准品的期间核查。分为两种：一是所购买的标准品有无失效，一般说来标准品都会有标准证书，只要按标准品证书上的条件进行保存即可通过时间来认定其有效与否；二是所配制的标准溶液是否失效。严格说来应该通过期间核查来确认，即用新配制的标准溶液来测定前一段时间配制的标准溶液是否在误差的范围之内来认定其有效与否。（这个误差范围定在5%以内可行）

一、菌株的采集实验室用菌种一是到国家法定机构采购，二是购买商业派生菌种，三是科研中菌种交流。不管是哪种来源，均统一采集。采集中严格按照规范执行。要求包装可靠，采集迅速，不泄漏不污染。保证菌种合格和环境安全。采集中要有菌种传代标识。选择有资质的标准菌株的合格供应商，每批标准菌株必须附带有供应商的合格证或检测报告或说明书，来证明所采购的标准菌株是合格的。二、标准菌株和验收 实验室收到标准菌株，首先应进行符合性感官检查，记录菌株号和标准菌株来源途径信息，确保溯源性清楚。同时还应记录标准菌株名称和数量、生产日期、接收日期和有无破损等情况。三、冻干标准菌株的复活1.开启产品包装：先用70%酒精棉擦拭外包装，再打开使用。2.复活：选择合适的培养基和培养条件进行复活。菌种的首次活化最好是在非选择性琼脂培养基上，除非特殊情况或特别推荐，一般不用液体培养基。冻干菌株的传代次数不得超过5代，从标准菌株保藏中心购买的冻干标准菌株为第F0代。四、工作菌株确认方法及依据用无菌接种环取上述培养物，在相应的培养基平板（营养琼脂、大豆胰蛋白胨琼脂）上或相应的细菌鉴别平板（如伊红美蓝、麦康凯、BP等上划线分离单个菌落，置适宜条件下培养（若该类微生物为厌氧菌，则培养条件应为厌氧条件）。以同样方法取真菌和酵母菌至SDA（萨布罗培养基）平板上或玫瑰红钠培养基平板上，23～28℃下培养7d；培养后观察是否具有典型的菌落状态，然后挑取单一纯菌落，进行革兰染色、镜检，观察其染色特征及菌体形态以确定菌种。五、 污染处理假如在该平板上发现有其他菌落生长，则说明操作有污染或菌种不纯。要将该污染培养物做灭菌处理，寻找原因，重新分离挑选纯菌落。六、菌种保存所有菌种均由实验室专人(双人双锁)保存于专用冰箱或其它保存方式。要建立菌种登记台帐，详细记录菌种采集、保管、制备、使用、处置情况；每一种菌种一定要有检测鉴定报告（具体的的鉴定方法见菌种质量报告鉴定证书上的方法）；具体菌种保存方法一般为：将复苏后肉汤与灭菌甘油按15%甘油比例（肉汤8.5mL+甘油1.5mL）混合，-30 ℃冻存，（可用2mL冻存管冻存多管），作为保藏储备菌株F1代，也可使用商品化的菌种保存管。七、菌种的传代1.标准菌株的复苏① 菌种操作应在无菌条件下进行，防止杂菌污染。② 每次使用和复苏时只需将小珠在平板上滚动或置肉汤中培养。2.标准储备菌株每转接一次须进行确认。（确认方法一般为他们各自独有的形态，在鉴别培养基上的形态）3.工作菌株转接的方法①配制营养琼脂培养基（溶血性弧菌加3%氯化钠 ），121℃高压灭菌15分钟后分装在试管内，冷却后备用。②在无菌条件下，用接种环挑取菌苔至新鲜试管上作“米”字形划线接种，放置在36℃的培养箱内培养24小时。4.工作菌株的使用①内部质量控制：一个月一次阳性对照、培养基每批验收；②外部质量控制：能力验证、实验室比对；③工作菌株的期间核查期间核查的频率：每半年对使用标准菌株进行一次期间核查。工作菌株期间核查的方法及依据：同工作菌株的确认一样。建立标准菌株期间核查记录。八、菌种的标识菌种代数的计算为干粉菌种为第0代，转接一次加一代。具体标识为：例单增李斯特氏菌第0代，标识为DZ-0，第一代标识为DZ-01第一代有12支，则DZ-01-01、……、DZ-01-12；并标明日期.九、菌种的保藏①将试管内菌种放入冰箱中2～8℃冷藏保存。②将传代并经过培养后的菌种放入冰箱中2～8℃保存。每支保存菌种需标明菌名、标准编号、传次、传代日期。十、菌种的销毁①菌种使用后或超过贮存期的应进行销毁。②需销毁的菌种，应用高压蒸汽（121℃）灭菌30分钟。③灭菌后，再进行清洗和处理。④销毁的菌种应做好记录。销毁时由化验负责人监督销毁，保管人员负责销毁。

自GB 4789.15-2016 霉菌和酵母菌计数正式开始实施以来,正置培养容易造成环境污染，一直比较困扰大家，很多小伙伴们在后台跟小编反应国标霉菌正置培养容易污染，今天小编就来为大家分析一下这个问题。GB 4789.15-2016相比GB 4789.15-2010，最大的区别可能就在于对平皿的培养方式。2016版的国标在5.2中要求：琼脂凝固后，正置平板，置28℃±1℃培养箱中培养，观察并记录培养至第5d的结果。其实针对这一条，需要注意两点：第一，是需要对平板进行观察的，不能直接培养至第5天计数，因为霉菌的特殊性，在培养过程中会产生大量孢子，导致整个平板蔓延。因此，在培养后的第2天开始，就要对平板进行观察，并计数典型菌落，而这样的观察在之后每一天都应该进行，直至培养第5天。第二，就是正置培养。这一点是16版国标与旧版最大的区别，10版之前的国标都是倒置培养的。而进行正置培养，很多朋友可能都会遇到平板被霉菌污染的问题，这怎么解决呢？污染原因与解决措施一、培养箱环境污染很多实验室培养霉菌采用的是专用的霉菌培养箱，所以培养箱空间里会有大量的霉菌孢子。而平皿的盖和底是有一定缝隙的，尤其是玻璃平皿缝隙还是比较大的，正置培养中，孢子会向上飞扬通过缝隙落到平板的培养基上，导致污染。细心地实验猿可能发现，污染的菌落大部分都是在平皿边缘生长的。用一次性塑料平皿来培养，污染的概率就会小很多，因为一次性塑料平皿的盖和底之间的缝隙相比之下是比较小的。因此培养箱环境中的孢子可能会是主要污染源。这样一来，解决的方法就应该是对培养箱进行杀菌。可以用75%酒精和新洁尔灭两种消毒剂对培养箱进行了全面的消毒，消毒完最好不要马上用，消毒完最好放个几天在使用。应该注意的是，这样的杀菌操作也是需要经常进行的，因为霉菌的孢子是十分难清除的，而每次培养可能又会引进新的污染源，可以考虑每周进行两次，保证培养环境无污染源。二、平皿冷凝水污染正置培养过程中，若是平皿的上盖有泠凝水，在培养过程中冷凝水滴落到培养基上，也极容易造成菌落蔓延，平皿污染。因此在培养之前，一定要保证平皿干燥，可以把平皿放在37℃的环境里烘干，烘干之后再进行培养，就会避免这个原因造成的污染。三、操作环境和培养基的污染因为无菌室里可能也会因为灭菌效果不理想造成污染。小编之前工作的实验室，操作台使用紫外线灭菌，经常就会灭菌不彻底有孢子污染，尤其是在进行过霉菌的相关检测之后。所以在进行过霉菌检测之后，适当的增长灭菌时间，可能会达到比较理想的效果。另外，为了彻底解决无菌室空间孢子污染的问题，可以购买安装臭氧发生器，通过紫外线+臭氧的双重消毒模式，效果就十分理想了。大家如果还是想验证一下究竟是什么原因造成的污染，这里提供一个简单的验证试验：在正常检测的环境中倒一组空白平皿，将这些平皿分为AB两组，其中A组用封口膜将平皿封好，B组不封，均放置在培养箱中正置培养。若是A组B组均有霉菌生长，则需要考虑培养基污染或者操作环境的污染；若是A组不生长霉菌而B组生长，则需要考虑是培养箱内的环境污染。通过这个小试验，可以基本上确定污染源，然后针对污染源进行相应的处理。

 实验室管理的目的是规范实验室仪器设备的使用和维护方式及措施；规范并提高实验人员的操作技能；改善实验室的环境卫生，确保实验室人员和仪器的正常运转。跟小编一起来学习实验室管理经验吧。实验标准规程的控制交流很慢标准规程是检测、判定的依据，要采取多种渠道，及时收集新标准，确保检测工作所依据的标准版本现行有效，同时对新、旧标准应加以分析比较，并按标准规程的新要求，做好仪器设备改造、配置以及新标准的贯标等基础工作。为此有必要对所管辖区的实验室制定出基础的技术标准配备规范，明确所辖业务的各类试验应该配备的基本技术标准，确保主要业务标准配备覆盖面达到100%，实现以标科研、以标实验，最大限度地避免因实验设计缺陷而造成的质量事故。在实验室标准宣贯方面要做好落实工作，一是抓标准配备、宣贯，二是抓标准的检查、更新，确保试验工作有标可依，规范有序。样品的控制试验用样品的状态应符合标准要求。1、样品要有代表性，抽样采取随机抽取的方法进行。比如：钻井泥浆、水泥类试验检测规定，袋装水泥要从该批不少于20袋水泥中任取等量样品，总量至少12kg，那种一次性提取半袋或整袋水泥作为试验样品，不符合标准要求，也是不可取的。2、试样的数量关系到试验结果的准确性，数量过少，试验带来误差增大，故标准对材料试样的数量都有要求。在实际试验工作中，要加强试验数量的控制。标准要求做平行试验的，应等分样品分别试验，如只做一次试验，就拼凑数据出报告，是应严格禁止的。3、试样的尺寸关系到试验结果的准确性，试样的尺寸要满足标准要求。例如，在井下工具拉压扭试验采用的《金属材料室温拉伸试验方法》(GB/T228-2002)中明确了金属材料样品的尺寸(长度)，如果样品的长度不符合标准要求，仅仅靠调节万能材料试验机上下钳口位置来完成试验，显然是不符合规范要求的。仪器设备与计量器具的控制仪器设备及各种计量器具是检测工作中最基本的工具，它的完好程度和准确度将直接影响检测数据的准确性，同样影响到对工程质量的评判。1、对计量标准器具的控制，实验室计量标准器具或校准装置的建立、更换、封存与撤销，应建立内容完整的技术档案，并符合JJF1033《计量标准考核规范》的有关程序规定。计量标准器具周检率为100%，符合JJF1033的要求。2、对国家明确规定的强制性计量检定的试验仪器设备，必须全部送检并及时送检，检完后对校准的器具进行复核，检查校准数据是否符合使用要求。3、对部分不属强检范围，国家又尚未制定校准规范的试验仪器设备，应依据仪器说明书、相关技术规范、相关计量检定规程等自行制定校准规范，作为定期自行校准的依据，控制好计量数据的精度。如：水泥抗压夹具、水泥试验筛通常也必须自行进行校验，否则对检测结果同样有着很大的影响。4、除了检定(校准)之外，还应注意仪器设备及各种计量器具平时的定期保养与检查如，每月检查水泥搅拌机叶片与锅之间的间隙，发现问题，立即停用，经计量部门重新检定(校准)并符合要求后才能使用。标准物质与标准材料的控制实验室应建立相关制度，从标准物质与标准材料的选购、验收、存放、发放、使用以及废弃标准物质处理等全过程进行有效控制，保证标准物质在有效期内使用，确保其定值准确度、均匀性、稳定性等计量性能满足检测要求。目前假冒伪劣产品较多，为了购买到优质的标准物质和标准材料，应选择有资质和能力的服务方，并获得相应的资质和能力的证明性文件。对一些长期、重要供应商建立合格供方名录，以这些供应商作为固定用户，从而保证试验用材料的相对稳定性。如建筑试验用的标准砂，一般一个地区只有一家是指定销售商，在购买标准砂时，一定要向销售商索取销售授权书和合格证书，不要为便宜去买一些假的标准砂，进而影响试验的工作质量。试验室的温、湿度控制温度和湿度对一些材料的性能有一定的影响，故在标准中对材料测试时的环境条件有明确规定，必须遵守。如：热采水泥堵窜室内试验《水泥胶砂强度检验方法(ISO)法》(GB/T17671-1999)规定，试体成型时试验室温度应稳定保持在20℃±2℃，相对湿度不低于50%;试体带模养护箱温度保持在20℃±1℃，相对湿度不低于90%;试体养护池水温度应在20℃±1℃范围内。为加强试验室的温、湿度控制，试验室可根据自身条件建立一套温湿度控制系统和控制措施，有条件的单位尽可能采用自动温、湿度控制系统。试验速度的控制在材料力学性能检测试验中，加荷速度的快慢对检测结果有一定的影响。一般加荷速度较快，试件的变形滞后于加在其上的荷载，测出的强度值高于材料固有的强度。如井下工具缸体检测中加荷速度较快，屈服强度和极限强度会有所提高。但在实际试验工作中，有的检测人员忽视了加荷速度，在不了解加荷速度大小时随意加荷检测，或者不严格按照标准规定的加荷速度进行检测，致使检测结果失去可比性、真实性。例如，检测人员掌握加荷速度是通过每秒荷载增加多少牛顿(N/S)来控制的，而有的标准给出的是每秒应力的增加(MPa/S)，这就需要根据试件的实际尺寸加以换算，以便控制试验加荷速度。在实际工作中，检测人员应熟练操作万能试验机，确保试验的速度符合标准的要求，同时加荷应保持连续均匀，直至测出所需荷载值。实验室试验误差的控制试验工作中应通过重复试验、比对试验、能力验证等方法来抵消试验误差对试验结果的影响，提高试验室工作质量。1、重复性是由同一个试验室在基本相同的情况下，用同一样品试验所得试验结果的误差。例如，水泥抗压强度试验方法的重复性是由同一个试验室，在相同的操作人员，相同的标准砂，较短时间间隔内，用同一样品所得试验结果的误差来定量表达。对于28天抗压强度的测定，一个合格的试验室在上述条件下的重复性以变异系数表示，要求在1%～3%之间。2、试验室内的比对试验是试验室的不同人员，使用相同的仪器设备，用同一样品试验所得试验结果的比较。试验室内的比对试验具有易操作，且利于提高试验人员的检测能力。3、通过试验室间的比对试验可以消除试验室的系统误差，这一误差是重复试验、同一试验室由不同人员操作的比对无法消除的。通过此比对，找出发生偏差的原因，及时纠正与改进因操作、温湿度环境条件及设备因素等引起的各种偏差。4、要真正使试验室内部质量得到有效控制，检测能力上一个台阶，在通过比对改进之后，最hao参加国家实验室认证认可机构的能力验证试验，只有通过能力验证，才能了解自己在该检测项目中的真实水平，发现问题，采取措施，及早纠正和整改。

广口瓶&细口瓶 ·固体——广口瓶液体——细口瓶透明瓶&棕色瓶一般试剂——透明瓶见光易分解的物质——棕色瓶此类试剂有：氯水、HNO3、AgNO3、AgBr、Agl、H2O2、高锰酸钾等橡皮塞&玻璃塞碱性溶液——橡皮塞此类试剂有：NaOH溶液、Na2CO3溶液、氢氧钠、氢氧化钾、水玻璃等。强氧化性溶液、有机溶剂——玻璃塞此类试剂有：硝酸、高锰酸钾溶液、汽油、苯、液溴、溴水等.需要塑料瓶塑料盖保存氢氟酸氨水、浓盐酸、碘、萘及低沸点有机物，如苯、甲苯、乙醚等均应装在试剂瓶内，加塑料盖密封，放于冷暗处。 需要液封保存钠一一煤油；白磷一一冷水；液溴一一水；四氯化碳一水 注意：取用液溴时配戴乳胶手套，并用长胶头滴管吸取底层纯溴。需要密闭保存与水反应（吸水）的物质：CaCI2、碱石灰等。与CO2反应的物质：NaOH、Ca(OH)2、Na2O2等。与O2反应的物质：FeSO4、Na2SO3、C6H5OH、Na2S等。

在检测工作中，检测误差、检测准确度、检测不确定度是经常运用的术语，它直接关系到检测结果的可靠程度和量值的准确一致，在日常工作中很容易把三者混淆或误用，本文将从三者的定义和区别加以比较，以便在工作中容易区分。三者的定义检测误差是指检测结果减去被检测的真值，它是检测结果与被测真值之差。所谓真值是指在检测一个量时，该量本身所具有的真实大小，量的真值是一个理想的概念，一般是不知道的，为了使用上的需要，在实际检测中把高一等级精度的标准所测得的量值称为实际值，常用实际值代替真值。在某些特定情况下，真值又是可知的，如一个整圆的圆周角为360°，三角形的三个内角和为180°，按定义规定的国际千克基准的值可认为真值是1kg等。检测准确度是指检测结果与被检测的真值之间的一致程度。由于很多情况下无法知道真值的确切大小，因此准确度被定义为检测结果与被检测真值之间的接近程度。它是一个定性的概念，不能作为一个量进行运算的，意味着可以说：准确度高或低，准确度为0.2级，准确度为3级等以及准确度符合XX标准等，它是指符合某一等级或级别的技术指标要求或符合某技术规范的要求。检测不确定度是指表征合理地赋予被检测之值的分散性，与检测结果相联系的参数。它表示被检测之值的分散性，表示一个区间，即被检测之值可能分布的区间，按其获得方法分为A、B两类评定分量，A类评定分量是通过观测列统计分析作出的不确定度评定，B类评定分量是依据经验或洞察力进行估计，并假定存在近似的标准偏差所表征的不确定度分量。三者的区别通过对三者的定义理解，可以看出检测误差、检测准确度、检测不确定度有以下几个方面的区别。三者的影响因素不同检测误差是客观存在的，不受外界因素的影响，不以人的认识程度而改变，任何检测都有其不完善性，所以误差是随时都会产生的;检测不确定度由人们经过分析和评定得到的，因而与人们对被检测，影响量和检测过程的认识有关;检测准确度它是检测过程中所用仪器精度的高低，等级的高低有关，精度等级越高，其准确度越好，所测结果越接近真实值。三者评定的目的不同检测误差为检测结果与真值之差，为的是表明检测结果偏离真值的程度，它是一个定量的概念，具体偏离多少;检测准确度它是检测结果与被检测真值之间的一致程度，它是一个定性的概念，表明所测结果是否在标准要求范围内;检测不确定度是对影响产生误差的分散性的估计，为的是表明被检测值的分散性，表明被检测的结果在某个区间内。三者评定的结果不同检测误差是有正负符号的量值，是每次检测所得到的具体量值，只有通过检测才能得到，它在数轴上是一个点;检测不确定度表示一个区间，即被检测之值可能分布的范围，在数轴上表示一段(区间)，它是一个无符号的参数，用标准偏差或标准差的倍数或置信区间的半宽度表示，由人们根据实验资料，经验等信息进行评定，可以通过A、B两类评定方法定量确定;检测准确度是针对检测设备的精度，它不是一个量，不可能作为一个量来进行运算，它表明对检测结果的准确性。三者产生的原因不同检测误差产生的原因是检测过程的缺陷，它由多种原因引起的，包括检测装置产生的误差，环境条件产生的误差，检测方法产生的误差，人员等产生的误差，它可以分为系统误差，随机误差和粗大误差;检测准确度是由系统误差所影响的结果，如检测装置产生的误差，它确定检测结果的准确性;检测不确定度产生的原因与检测原理、检测仪器、检测环境条件、检测程序、检测人员以及数据处理方法等到有关，以及评定者的经验、知识范围和认识水评有关，它由多个分量组成，其中一些分量可用检测结果的统计分布估算，并用实验标准偏差表征，另一些分量可用基于实验或其它信息的假定概率分布估算，也可用标准偏差表征。三者之间的联系我们可以看出检测误差、检测准确度、检测不确定度有着以上种种不同，但它们仍存在着密切的联系，不确定的概念是误差理论的应用和扩展，而误差分析是检测不确定度评估的理论基础，在估计B类分量时更是离不开误差分析;检测不确定度多数是作为检测仪器的一个技术指标，它表明所测结果接近真值的响应能力。

在化学分析中，样品前处理一个常见的问题。据统计，人们常常将60%的时间花在样品前处理上。这不但不符合率的要求，而且烦琐的传统样品处理方法也直接影响到后的分析结果。样品前处理对样品的分析起着至关重要的左右，某种程度上来说，前处理决定了分析测试的结果。本文为大家介绍几种常用的消解方法。1.灰化法(又称干法)灰化法是利用高温除去样品中的有机质，剩余的灰分用酸溶解，作为样品待测溶液。大多数金属元素含量分析适用干灰化，但含脂肪、糖类多的样品需要较长时间，而含纤维素、蛋白质多的样品需要较短时间。根据样品种类和待测组分的性质不同，选用不同材料的坩埚和灰化温度。常用的有石英、铂、银、镍、铁、瓷、聚四氟乙烯等材质的坩埚。优点：不使用或少使用化学试剂，能处理较大样品量，故有利于提高测定微量元素的准确度、操作简单、安全。缺点：灰化温度一般为500～600℃，不宜处理测定易挥发组分的样品，如：在高温条件下，汞、铅、镉、锡、硒等易挥发损失，不适用该法；温度升高还会引入坩锅损失而造成的污染，样品量受限，干样一般不超过109℃，鲜样不超过509℃。样品量过大，易引起灰化困难或时间太长，这势必引入新的误差。相反，太少，也会引入样品不均匀性的误差。2.湿法消解又叫湿法消化，是用酸液或碱液并在加热条件下破坏样品中的有机物或还原性物质的方法。常用的酸解体系有：HN03一H2S04，HN03-HCl04，HF，H202等，它们可将污水和沉积物中的有机物和还原性物质如氰化物、亚硝酸盐、硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐以及热不稳定的物质如硫氰盐等全部破坏,碱解多用苛性钠溶液。消解可在坩埚(镍制、聚四氟乙烯制)中进行。优点：湿法消解具有灵活调节消解温度、消解酸类型及用量和消解时间等优点，普遍用于元素分析的样品处理上。缺点：湿法消解使用酸量大且很难使溶液变得清亮，易造成环境污染和元素损失(如：Ni)，且对于部分元素(如：zn)可能容易被污染。另外，对于含大量有机物的生物样品，特别是脂肪和纤维素含量高的样品，如肉、脂肪、面粉、稻米、秸杆等，加热消解时易产生大量泡沫，容易造成被测组分的损失。若先加HNO3，在常温下放置24h后再消解，可大大减少泡沫的产生。在某些情况下，可以加入防起泡剂。3.微波消解微波消解通常是指利用微波加热封闭容器中的消解液(各种酸、部分碱液以及盐类)和试样，从而在高温增压条件下使各种样品快速溶解的湿法消化(也有敞开容器微波消解的)。与传统的传导加热方式相反，微波是对物质内部直接加热，大大加速了试样分解作用的进行。优点：可以迅速有效地分解试样，缩短溶样时间；试剂用量少，一般只需几毫升；试样在消解过程中的损失和交叉污染的可能性大大降低；能耗降低，易于实现自动操作，同时可减少常规消解酸雾对环境的污染；可以避免易挥发痕量元素的损失。缺点：最高温度只能到2000℃，对于生物样品中的难分解物质消解不够彻底，会造成负误差，使测定结果偏低；高压(最高可达l×l-1.5×107Pa)、高温(通常180～240℃)、强酸蒸气给实验者带来了安全方面的心理压力；消化样品量小的不足。4.高压密闭罐溶样 在耐高压的厚壁不锈钢外套筒内，放置严密密封的聚四氟乙烯制坩埚容器，在坩埚内加入试样和酸类后加入套筒内。加热分解的方法，通常也叫高压闷罐法。优点：酸用量少，是一般非密封体系的十分之几;由于酸用量少，所以空白值低，且再现性好；不受实验室气氛的影响；易挥发元素损失较小；分解试样速度快、操作简便、可同时进行大批量试样的分解。缺点：外壳易受酸腐蚀;从外部看不到分解反应过程，只能等冷却后打开才能判断分解是否完全；分解试样量小，一般不超过1.09，因此，在测定超痕量元素时受到一定限制；分解有机物或者含有机质高的土壤时，特别是在有高氯酸存在下有发生爆-炸的危险。

内标物和替代物相信大家都用过，你在意过它们的区别吗？它们两者都有校正的作用，使实验结果更准确，那什么时候该用什么呢？远慕生物为小伙伴们解答！内标物和替代物定义：内标物－－是加到样品、提取物或标准溶液中已知量的纯物质，是用来测定同一溶液中其它分析物质和替代物的相对响应值。内标物质必须是分析的样品组分中所不含有的，一般是目标物的氘代物，用来体现目标物的基底效应。替代物－－是一种在任何样品中都不可能被发现的纯物质，其在样品提取和进行其它处理前被加入的等分和量是已知的。它同样品中其它组分一样被测定，它的作用是监控每个样品的方法性能。它是一种与目标物性质相近的物质，一般在前处理之前加，用来表征整个前处理过程的损失或回收率。只是用来监测萃取效率，一般认为其回收率在某一范围（不同标准要求不同）内即认为萃取结果可以定量作为检查结果。异同点首先都要在标准溶液中加入替代加标物和内标，两者最主要的区别在于加入的时间点，萃取前加入，通过最后萃取液的定量，可以确定整个过程的萃取效率及损失，而进样前加入可以修正进样误差，替代加标物如在标液中选择为内标，就可以修正全过程误差，如果视为外标，主要是监控回收效率。内标法在具体做的时候其实包括两部分吧，一个是内标标准曲线的绘制；一个是样品前处理。在绘制内标法标准曲线时，纵、横坐标中，一个是浓度，一个比值（待分析物与内标物峰面积之比，内标物的浓度是固定的），待分析物的浓度是通过把比值（待分析物与内标物的比值）代入内标标准曲线求出的，样品处理虽然会使内标物有所损失，但是由于待分析物与内标物浓度是同方向变化的，并不影响定量结果，这也是内标法的一个优势所在。环境样品应用举例1.替代物的作用替代物监控样品预处理过程中标物的损失或玷污，样品中不应含替代物，替代物也不应是目标物，但应是和目标物的物理化学性质相似的化合物，且能够被定量测定。替代物在样品预处理前定量加入样品中，随样品走完预处理和仪器分析的全过程。由于替代物不断存在于样品中，可以认为替代物的损失或者玷污的程度，即回收率，能够准确测量。又由于替代物和目标物的物理化学性质相似，在预处理过程中两者的损失或玷污的程度是一致的。因此，未知目标物在预处理过程中的回收率，可由已知的替代物的回收率来衡量。这就是替代物在环境样品的分析中的作用。鉴于对替代物的要求，样品的替代物通常是目标物的同位素化合物。例如，测定多环芳烃时，可选用萘、二氢苊、菲、屈等的氘代化合物。它们的物理化学性质与待测的目标物极其相似，萃取过程中的损失或玷污是一致的。经过气相色谱柱的分离后，氘代多环芳烃可以与待测的多环芳烃部分分离。接在色谱后的质谱检测器，可把这些质量数不同的氘代物检出。由于氘代物在天然环境样品中含量极微，替代物的回收率可视为目标物的回收率。2.内标物、替代物与回收率的关系目标物回收率的计算依靠内标物，内标物与替代物一样，不应在样品中出现，也不应是目标物。但对其的物理化学性质的要求不像替代物那么严，只要与目标物相近，在检测器上能被定量检测就行。例如，在分析多环芳烃时，内标物可以是氘代物，也可以是甲基或硝基苯类化合物。内标物在每个样品预处理后，仪器分析前加入样品中，同处理过的试样一起走完仪器分析的全过程。内标物的作用是计算替代物的回收率，美国EPA标准方法中也用来作定量分析的依据。回收率过高或过低说明操作过程有误差，应该避免。替代物的回收率在40％至120％间，分析误差在要求的范围内。这与传统的加标回收率必须达到近100％的要求有很大差别。传统的定量分析一般是利用工作 曲线来进行的， 其间的内标物可校正仪器分析的误差，对于预处理过程中误差的校正无能为力，因此希望回收率接近100％。而采用替代物后，定量分析依靠替代物进行，利用回收率对数据进行校正 。 

菌种是用于发酵过程作为活细胞催化剂的微生物，包括细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类。来源于自然界大量的微生物，从中经分离并筛选出有用菌种，再加以改良，贮存待用于生产。菌种使用注意事项：1、复苏质控菌种前应准备适于该菌种生长的培养基和培养设备，所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。2、启开质控菌种前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开塑盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞，加入复苏液(购买菌株包装中提供)，将冻干菌种(干粉)制成悬浮液，然后用无菌滴管或移液器吸取适量，移至非选择性固体培养基平板(或液体培养基)上(除特殊情况或特别推荐外)，按推荐的培养条件进行培养和传代保存(详见附表“冻干菌种的复苏培养和传代保存”)。3、有个别冻干菌种(如弧菌属、乳杆菌属等)复苏速度较慢，可按2操作后，同时将菌悬液置推荐的培养条件培养过夜，再选用适合该菌种生长的选择性培养基进行分离。4、培养后观察菌种的生长情况，并检查其纯度，如发现纯度不能满足要求时，应选用适合该菌种生长的选择性培养基进行分离，并按推荐的培养条件进行培养，培养后观察目标菌的菌落特征与生化特征，挑取典型菌落做纯培养后再使用。5、本品为一次性用品，开启之后不宜反复使用或保存，暂不使用时，建议4℃保藏。6、复苏后的菌种一般宜传代(如:斜面传代)2～3次后使用，菌种传代5次后建议弃置。7、质控菌种购买后应在保质期内使用。注)：购买后如发现菌种异常或污染等情况，请在购买之日起1个月内与卖家联系。 

 细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞菌体叫菌落（colony）。不同微生物在某种培养基上生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同一种的细菌在一定条件下，培养特征却有一定稳定性。以此可以对不同微生物加以区别鉴定。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。细菌菌落的特征描述应当包括：菌落的大小、形态、颜色、光泽度、透明度、质地、隆起状态、边缘特征等。常用的描述词汇如下：大小：菌落覆盖的范围，一般描述菌落的直径即可。形态：指菌落的外观形状，常用词汇包括圆形、卵圆形、三角形、形状不规则等。颜色：包括正反面颜色，即气生菌丝和基内菌丝颜色，常用词汇包括：白色、乳白色、红色、粉色、黑色、无色等。光泽度：指表面有无光泽，可直接描述为菌落表面有光泽、无光泽、表面光滑、粗糙等。一般有荚膜的菌落表面有光泽，无荚膜的菌落表面无光泽。透明度：描述菌落透光的性质，常用词汇包括：透明、半透明、不透明。质地：指菌落的粘性、脆性等，常用词汇包括：蜡状、干燥、易挑起、粘稠感等。隆起状态：指菌落切面的形态，常用词汇包括：隆起、凸起、扁平等。边缘特征：指菌落周边的形状，常用词汇包括：波状、完整、粉粒状、啮齿状等。一般对菌落的描述可以从以上几个方面进行，但不必包括以上所有项目，只需要根据菌落的关键特征，挑取最关键的几项进行描述即可，一般情况下挑选4-6项就可以把菌落描述清楚，但有些特殊菌落可能还需要根据具体情况加入一些其他的描述语言。常见的细菌在一些特定培养基上的形成的菌落描述见下表： 

对检验检测工作而言，样品的重要性不言而喻。那么，对于样品的接受及异常处理，大家都知道该怎么做吗？今天我们一起来分享一下~接收样品实验室接收样品时，应仔细检查，确认并记录样品的以下信息：1、名称（由客户命名）；2、类别（如土壤、自来水）；3、数量（如5袋、3瓶）；4、规格（如1kg/袋、500mL/瓶）；5、性状（如褐色粉末、黑色颗粒、无色液体）；6、运输条件（对运输条件有要求时）；7、采样日期和时间（检测有时限要求时）。除了采用文字描述，必要时实验室可通过影像（如照片）记录样品的性状。粘贴标识样品确认无误后应及时进行标识，标识内容包括：1、样品名称；2、样品的唯一性编号；3、样品状态（未检、待检、已检、留存）。确保样品在实验室期间保留样品标识及时更新样品状态。接收方式样品接收方式：若客户为送样上门，实验室收样人员尽量与客户一起清点样品，确认无误后再签订委托合同。若样品不满足检测要求，或与客户声称情况不一致，应在合同签订前向客户提出。若与客户为远程签订合同，客户通过物流传送样品，收到样品发现异常情况应第一时间联系客户。实验室有义务向客户说明运输条件要求及样品的检测时限要求。异常处理异常情况及处理：1、样品并非客户声称的类别/质量如：客户要检测大米中镉含量，寄来的样品为一袋大黄米；客户送来一个打磨成型的啤酒瓶底，说是祖母绿（实际发生过）；客户声称送来的金首饰为120.8g，实际上仅有102.65g。实验室发现后应及时告知客户，确认是否为邮寄错误或客户理解/认知有误。2、样品数量与声称不符是否为客户忘带了，快递漏发，还是多个快递部分丢失。3、样品量不够如检测需要50mL，客户样品仅20mL。要向客户询问是否可补充样品，还是直接安排检测。若不补充样品，实验室应向客户说明样品量不足对检测结果带来的影响（如方法检出限增大、无法留样、无法进行重复性测试、无法进行样品加标等），并在报告中进行声明。4、样品变质如：珠宝样品，收到的珠宝有破损；食品样品，保存期较短，或包装破损，导致样品变质，应及时通知客户。包装破损时，即便无肉眼可见的变质，也需要通知客户。5、样品运输储存条件不符合要求样品中有机物检测，要求4℃以下冷藏保存，客户常温带来或寄过来。实验室应向客户说明运输储存条件不符对检测结果带来的影响。若客户坚持继续检测，需在委托合同和检测报告中作出声明。6、样品存放时间过久如某些细菌检测，要求在采样后8小时内开始。客户样品采集至接收样品已到达或超过规定时限，应向客户说明超过时限后检测对检测结果带来的影响。若客户坚持继续检测，需在委托合同和检测报告中作出声明。

有些培养基要求煮沸2分钟。大家使用的有几种加热设备，电炉、微波炉、电磁炉。体积较多时（1500mL以上）使用电磁炉为宜，量少时选用微波炉较方便。微波炉使用操作方法三角瓶配置好培养基（以500mL瓶子装300mL培养基为例），加热溶解，搅拌均匀，放入微波炉，调节火至大火或最高档（根据加热快慢选择），设2min，开始加热，通过观察窗观察里面培养基变化（VRBA培养基开始会表面出现白沫，沸前变清。这个也不完全准，主要还是根据不同配方的培养基成分有关），一般二分钟后是没有变化的（根据培养基量的多少），然后继续设2min，如此直至有少部分冒泡，这时候盯的要求比较紧，一旦有冒泡变多上涨趋势（一般反应已在1cm高度），马上拉门（门一开，自动断电和降温），泡沫下降（记录下前面2min一次的累计时间，下一瓶设置时间可直接设置对应累积时间），调节档至低一档或低二档，然后加热，以能冒泡但又不厉害（防止沸出）为宜，反复关开门来维持煮沸状态2min，完成后，带耐热手套取出，盖上封口用无菌纱布，皮筋扎口，放入恒温用的46℃水浴锅中平衡温度后使用。这里需要注意1.瓶装培养基的量，500mL瓶最多300mL，三角瓶口小，不宜过多。2.下列东西不能放入微波炉：锡箔纸；带壳鸡蛋；铁材料；完整壳栗/榛子；蜜蜂牛奶/方便面；非微波塑料。（未知物先百度）3.操作微波炉要准备一副耐热手套（取放瓶子用）和一根玻璃棒（开始搅拌或中间拿出来轻轻搅动，不能爆搅拌）以及一些相对干净的纸（放玻璃棒）。4.微波炉拿出的培养基冷却不能太急，就丢水浴锅里慢慢平衡，不要拿水激或放超声里（实验室曾有人这么做过，结果爆沸，冲出来老高，差点没把眼睛烫瞎）。5.为了加快速度和节约时间，第一次要记录从加热至开始沸的时间，为了防止不准，可以多记录几次，然后心里有数，直接设定那个时间，这样可以适当快一些。6.关键要点：胆大心细，时刻关注，不能离人（不要分心离开去做别的事情，沸和沸出去也就五秒的时间）。

1.目的规范实验室的消毒灭菌工作，确保实验器材和废弃物品的安全处理，避免实验室污染物对实验室工作人员、环境和公众造成危害。2.适用范围适用于从事微生物实验活动的实验室，实验器材和废弃物品处理的控制。3.消毒程序及方法3.1室内空气的消毒使用洁净室/阳性菌前后用紫外线灯照射对室内空气消毒，照射时间≥30钟，并填写《洁净室/阳性菌使用记录表》 。3.2 表面的消毒3.2.1地面消毒实验室地面可用0.2%~0.5%的消毒剂喷洒，喷洒消毒剂的用量不得100ml/m2。3.2.2物体表面消毒实验室台面、桌椅、橱柜、门把手等物品的表面可用消毒剂喷洒、擦拭，并填写《洁净室/阳性菌消毒记录表》。3.3 实验器材的消毒处理3.3.1检测人员将检测过程使用的器材和实验废液作好标识，及时处理。3.3.2实验器材：使用过的玻璃器皿应立即进行高压灭菌处理。3.3.3洁净室/阳性菌室穿着的被污染衣物检测人员予以121℃ 30分钟高温高压处理后方可洗涤。3.4 报废菌株、超过保管期限的阳性样品的处理报废的菌株由生物安全员采用121℃ 30分钟高温高压处理后，填写《菌种、毒种（株）阳性标本销毁记录表》3.5 废弃物灭菌同培养基灭菌所用高压灭菌器应分开单独使用，灭完废弃物后空转一次方能进行培养基灭菌。

牛血清白蛋白是血液中的主要成分（38g/100ml），分子量68kD，等电点4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。牛血清蛋白溶液可以作为测量蛋白质含量的标准曲线用。一般买回来的牛血清蛋白是细小片状的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以铁为基本原料。1、特纯级牛血清蛋白用途：用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂，生化试验等。电场対超感牛血清白蛋白截留率的影响性状：淡黄色干燥粉末2、无脂肪酸牛血清蛋白用途：用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂，尤其适用于容易受脂肪酸影响的产品和试验。性状：淡黄色干燥粉末3、无蛋白酶牛血清蛋白用途：用于酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂，尤其适合血液脂类的诊断试验、脂类诊断试剂及对纯度要求高的产品。性状：淡黄色干燥粉末4、细胞培养级牛血清蛋白用途：无血清培养基的蛋白添加剂，供细胞培养使用。性状：淡黄色干燥粉末白蛋白

WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法，然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做！WB 磷酸化蛋白曝不出条带的时候，会特别沮丧。远慕在此给大家列出几点小建议，希望能帮助您改善一下实验结果。1、样本是否表达：查阅资料或通过预实验确定。2、对照设置：阳性和阴性对照。总蛋白抗体对照，对于特定时间的特定样品，磷酸化和非磷酸化蛋白质的总和代表该特定蛋白质的总量。在相同的 WB 检测中， 磷酸化蛋白质的量增加通常伴随着非磷酸化蛋白质的降低。3、内参设置：根据实验选择合适的内参，如Actin、GAPDH 等4、适当的提取方法：蛋白质提取的方法不仅影响提取效率，还会影响蛋白的质量。建议采用裂解液裂解和超声破碎组合的方式，可确保整个样本充分裂解。5、低温操作：室温条件下，磷酸化蛋白很容易被蛋白磷酸酶降解。请勿反复冻融，操作时一定置于冰上。6、加入抑制剂：组织或细胞裂解时会释放出大量内源性蛋白磷酸酶，它会导致磷酸化蛋白的去磷酸化，因此，必须在裂解液中加入蛋白酶抑制剂和蛋白磷酸酶抑制剂。7、最重要的一点：检测时选择近红外荧光标记抗体，一次可检测多个蛋白，无需多次曝片，方便检测。一般磷酸化和总蛋白的条带位置十分接近，传统方式不易区分。这样大家在用WB检测磷酸化水平时，是不是就方便多了，不用像传统方法那样，在压完磷酸化抗体后，将膜 strip 后再压总蛋白抗体；也不需要同时跑两块胶分别检测。使用近红外荧光标记抗体（二抗），孵育后直接放入仪器，一键成像，简单快速！

1）目的蛋白有多个修饰位点，本身可以呈现多条带，建议查阅文献或进行生物信息学分析，获得蛋白序列的修饰位点信息，通过去修饰确定蛋白实际大小2) 样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂；样本处理时在冰上操作3）杂蛋白多，建议处理目的蛋白4）抗体特异性不强，建议使用特异性强的抗体5）抗体孵育时间过久，建议减少抗体孵育时间6）二抗与抗原有交叉反应，建议选择合适的封闭物7）二聚体或多聚体存在，建议增加蛋白质变性过程及强度8）底物显色与曝光时间过长，建议缩短显色及曝光的时间

【原理】琼脂糖（agarose）是经过挑选，以质地较纯的琼脂（agar）作为原料而制成的。琼脂在化学上是由琼脂糖和琼脂胶组成的复合物。琼脂胶是一含有硫酸根和羟基的多糖，它具有离子交换性质，这种性质会给电泳及凝胶过滤以不良的影响。琼脂糖是直链多糖，它由D－半乳糖和3,6－脱水－L－半乳糖的残基交替排列组成。琼脂糖主要通过氢键而形成凝胶。电泳时因凝胶含水量大（98－99%），近似自由电泳，因为固体支持物的影响少，故电泳速度快，区带整齐。而且由于琼脂糖不含带电荷的基团，电渗影响很少，是一种较好的电泳材料，分离效果较好。血清中脂类物质与血清载脂蛋白结合成水溶性的脂蛋白（lipoprotein）形式存在。各种脂蛋白中所含载脂蛋白的种类及数量不同，各种脂蛋白颗粒大小也相差很大，因此，以琼脂糖凝胶为支持物，在电场中可使各种脂蛋白颗粒分离开来。琼脂糖凝胶电泳分离血清蛋白方法简单。将血清脂蛋白用脂类染料苏丹黑（或油红等）进行预染。再将预染过的血清加样于琼脂糖凝胶板加样槽中，通电后可以看到脂蛋白向正极移动，并分离出几个区带。正常人血清脂蛋白可出现三条区带，从阴极到阳极依次为β－脂蛋白（最深），前β－脂蛋白（最浅）及α－脂蛋白（比前β－脂蛋白略深些），在原点处应无乳糜微粒。有时前β－脂蛋白也显示不出来。琼脂糖主要通过氢键而形成凝胶。电泳时因凝胶含水量大（98－99%），近似自由电泳，因为固体支持物的影响少，故电泳速度快，区带整齐。而且由于琼脂糖不含带电荷的基团，电渗影响很少，是一种较好的电泳材料，分离效果较好。血清中脂类物质与血清载脂蛋白结合成水溶性的脂蛋白（lipoprotein）形式存在。各种脂蛋白中所含载脂蛋白的种类及数量不同，各种脂蛋白颗粒大小也相差很大，因此，以琼脂糖凝胶为支持物，在电场中可使各种脂蛋白颗粒分离开来。琼脂糖凝胶电泳分离血清蛋白方法简单。将血清脂蛋白用脂类染料苏丹黑（或油红等）进行预染。再将预染过的血清加样于琼脂糖凝胶板加样槽中，通电后可以看到脂蛋白向正极移动，并分离出几个区带。正常人血清脂蛋白可出现三条区带，从阴极到阳极依次为β－脂蛋白（最深），前β－脂蛋白（最浅）及α－脂蛋白（比前β－脂蛋白略深些），在原点处应无乳糜微粒。有时前β－脂蛋白也显示不出来。【操作】1、预染血清 血清 0.2mL中加苏丹黑染色液0.2mL，混合置37℃水浴中染色30分钟，离心（2000转/分）约5分钟。以除去悬浮于血清中染料沉渣。2、制备琼脂糖凝胶板 将已配制好的0.5%琼脂糖凝胶于沸水浴中加热融化，用吸管吸取凝胶溶液浇注在载玻片上，约3 mL。静置半小时后凝固（天热时需延长，也可放入冰箱中数分钟以加速凝固）。3、点样 将剪好的滤纸条对折，以折边在距凝胶一端2cm处切一点样口。将毛细管插入预染好的血清中，待吸入部分血清后，取毛细管使其有样品的一端靠于点样口端部，停靠3秒左右。4、电泳 将凝胶板平放入电泳槽中，使加样端接在阴极一侧，用四层滤纸或纱布做成“引桥”，敷于胶板的两端，各搭住凝胶板约1cm左右，“引桥”的另一端浸于电泳槽内的巴比妥缓冲液中。接通电源，首先调节电流为3-4mA/凝胶板，电泳10－15分钟；然后调节电流为6-7mA/凝胶板，电泳30－40分钟，即可观察到分离的区带。5、如果需要保留电泳图谱，可将电泳后的凝胶板（连同载玻片）放入清水中浸泡脱盐2小时，然后放烘箱（80℃左右）中烘干即可。【试剂】1、苏丹黑染色液 将苏丹黑B加到无水乙醇中至饱和，摇荡使乙酰化。用前过滤。2、巴比妥缓冲液 称取巴比妥钠15.4g、巴比妥2.76g及 EDTA0.29g，加水溶解后再加蒸馏水至1000mL（pH为8.6，离子强度0.075），为电极缓冲液。3、凝胶缓冲液 取三羟甲基氨基甲烷1.212g、EDTA0.29g及NaCl5.85g，用蒸馏水溶解后，稀释至1000mL，pH为8.6。4、琼脂糖凝胶 称取琼脂糖0.45 g溶于50 mL凝胶缓冲液中，再加水 50 mL。在水浴中加热至沸，待琼脂糖完全溶解后，立即停止加热。【注意事项】1、电泳样品应为新鲜的空腹血清。2、加热溶化琼脂时，须防止水份蒸发过多。琼脂糖凝胶最好随用随制，以免凝胶表面干燥，影响分离效果。3、制作凝胶板时琼脂糖浓度一般选用0.5%左右为宜，高于1%以上α－脂蛋白部分较紧密，β和前β－脂蛋白部分不够清晰；低于4.5%则凝固性较差，图谱不清。4、点样口要大小适宜，边缘整齐、光滑，否则会影响电泳图谱。5、在α－脂蛋白前若出现较浅区带，可列为前α－脂蛋白。【正常参考范围】α－脂蛋白 20~30%β－脂蛋白 20~30%前β－脂蛋白 0~28%乳糜微粒（-）

1)蛋白质沉淀原因：加入高浓度的中性盐、加入有机溶剂、加入重金属、加入生物碱或酸类、热变性少量的盐（如硫酸铵、硫酸钠等）能促进蛋白质的溶解。如果向蛋白质水溶液中加入浓的无机盐溶液，可使蛋白质的溶解度降低，而从溶液中析出，这种作用叫做盐析．这样盐析出的蛋白质仍旧可以溶解在水中，而不影响原来蛋白质的性质，因此盐析是个可逆过程．利用这个性质，采用分段盐析方法可以分离提纯蛋白质．2)蛋白质的变性在热、酸、碱、重金属盐、紫外线等作作用下，蛋白质会发生性质上的改变而凝结起来．这种凝结是不可逆的，不能再使它们恢复成原来的蛋白质．蛋白质的这种变化叫做变性．蛋白质变性后，就失去了原有的可溶性，也就失去了它们生理上的作用．因此蛋白质的变性凝固是个不可逆过程．造成蛋白质变性的原因物理因素包括：加热、加压、搅拌、振荡、紫外线照射、X射线、超声波等：化学因素包括：强酸、强碱、重金属盐、三氯乙酸、乙醇、丙酮等。

（一）实验目的：学习自制水浸片观察霉菌的形态（二）实验原理：霉菌的营养体是分枝的丝状体。其个体比细菌和放线菌大得多，分为基内菌丝和气生菌丝。气生菌丝中又可分化出繁殖丝。不同霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子。霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，且孢子容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片的特点是：细胞不变形，具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间，溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。利用培养在玻璃纸上的霉菌作为观察材料，可以得到清晰、完整、保持自然状态的霉菌形态；也可以直接挑取生长在平板中的霉菌菌体制水浸片观察。（三）实验器材1.活材料：在马铃薯琼脂平板上或用玻璃纸透析培养法培养3—4天的根霉（Rhizpus sp.）、青霉（Penicillum sp.）、曲霉（Aspergillus sp.）；2.染色液和试剂：乳酸石炭酸棉蓝染色液（附录二、（一）、10）、50%酒精（V/V）。3.器材：剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、解剖针、显微镜。（四）实验方法1.制水浸制片观察法  在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液或蒸馏水，用解剖针从生长有霉菌的平板中挑取少量带有孢子的霉菌菌丝，用50%的乙醇浸润，再用蒸馏水将浸过的菌丝洗一下，然后放入载玻片上的液滴中，仔细地用解剖针将菌丝分散开来。盖上盖玻片（勿使产生气泡，且不要再移动盖玻片），先用低倍镜，必要时转换高倍镜镜检并记录观察结果。2.玻璃纸透析培养观察法（1）玻璃纸的选择与处理  要选择能够允许营养物质透过的玻璃纸。也可收集商品包装用的玻璃纸，加水煮沸，然后用冷水冲洗。经此处理后的玻璃纸若变硬，必定是不可用的，只有那些软的可用。将那些可用的玻璃纸剪成适当大小，用水浸湿后，夹于旧报纸中，然后一起放入平皿内121℃灭菌30min备用。（2）菌种的培养    按无菌操作法，倒平板，冷凝后用灭菌的镊子夹取无菌玻璃纸贴附于平板上，再用接种环沾取少许霉菌孢子，在玻璃纸上方轻轻抖落于纸上。然后将平板置28—30℃下培养3—5天，曲霉菌和青霉菌即可在玻璃纸上长出单个菌落（根霉菌的气生性强，形成的菌落铺满整个平板）。（3）制片与观察  剪取玻璃纸透析法培养3—4天后长有菌丝和孢子的玻璃纸一小块，先放在50%乙醇中浸一下，洗掉脱落下来的孢子，并赶走菌体上的气泡，然后正面向上贴附于干净载玻片上，滴加1—2滴乳酸石炭酸棉蓝液，小心地盖上盖玻片（注意不要产生气泡），且不要移动盖玻片，以免搞乱菌丝。标本片制好后，先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜。注意观察菌丝有无隔膜，有无假根、足细胞等特殊形态的菌丝。注意其无性繁殖器官的形状和构造，孢子着生的方式和孢子的形态、大小等。（五）实验作业：给出根霉、青霉、曲霉的个体形态图，并注明各部位名称。

玻璃器皿的清洗法（1）shou先配制清洁剂（也叫洗液）：200mg 重铬酸钾，1 000ml清水，1 000ml浓硫酸（工业用）。将重铬酸钾先溶于水中，然后将浓硫酸逐滴加入重铬酸钾水溶液中去，不使硫酸溅出。配好后，盛在有玻璃塞的玻璃容器内，防止空气氧化。洗液可重复使用直至变为蓝黑色为止。（2）将待洗玻璃器皿放在肥皂水中沸浴0.5h.（3）然后用清水冲净后放入烘箱烘干（或自然晾干）。（4）干后，浸入洗液约10min.（5）再用流水冲净后烘干（或晾干）。（6）放在防尘处贮存备用。2.新盖玻片和新载玻片的清洗法市售盖玻片和载玻片的清洗较为简单，可以在2%的盐酸酒精（95%酒精100份加入浓盐酸2份）中浸泡几小时，再用流水冲洗，让水滴流干，浸入95%酒精中贮存备用。3.过的陈旧盖玻片和载玻片的清洗法（1）将不需保留的切片标本在肥皂水中沸浴5－10min.（2）在热水中洗去残留的树胶的浆糊。（3）清水冲洗后，让水滴流干。（4）浸入洗液约30min.（5）清水冲洗后用蒸馏水洗净，并让水滴流干。（6）浸入95%酒精中贮存备用。使用时从酒精中取出盖玻片和载玻片，用清洁纱布同时擦拭玻片的两面，在擦拭盖玻片时要小心，用力要均匀，避免碎裂。

标准溶液是液体标准样品的简称。标准样品的定义指出：“标准样品是具有一种或多种具有足够均匀和足够好确定了特性的材料或物质，它用于对仪器的校准、对检测(分析)方法的评定和对材料的赋值”。标准溶液的配置一般都是由专门的单位进行的，但若在特殊情况下，需要自己去配置标准溶液，这些基本条件一定要满足：1、应采用具有高纯度的溶质或基准物质(如金属、金属氧化物或金属化合物;酸、碱、金属有机化合物、适宜的盐类、有机溶剂等)。2、为确保配制标准溶液的可靠性、准确性，实验室的设备、环境设施均应满足其要求，(应有监测、控制和记录环境条件。特别对灰尘、电磁干扰、放射、温度、湿度、供电等)。3、具有符合称量要求器具、应有正确称量的电子分析天平，并通过周期性的检定，有质检部门检定的证书。4、要有配制标准溶液的纯度高的溶剂(采用双重蒸馏去离子水、高纯浓度的酸、碱或有机溶液)。5、配制所用的器皿用具，必须根据所测项目要求，分类对器皿进行洁净的处理，且符合特定洁净的要求，保证所配的标准溶液无污染，对检测不产生不良影响。6、应采用洁净的优质硬玻璃容量瓶作容器。7、根据所配标准溶液对盛放容器的要求，必须选用适当质料的洁净器皿存放标准溶液，并按规定要求(如避光、通风、阴凉、冷藏等条件)放置配制好的标准溶液。8、必须作好配制标准溶液的原始记录的登记，标准溶液标签填写完整(如标准溶液名称、浓度mg/ml或mol/ml，配制人，配制日期、有效期等)，并将标签贴在试剂瓶上。

取得国家证书的标准物质，必须经国务院计量行政部门批准、发布和批准生产，并确定其一项或者多项性能，用于校准计量器具。评估测量方法或确定材料性能的价值，并附证书。目前，我国的认证标准物质分为一级标准物质和二级标准物质，生产企业需经国务院计量行政部门批准和授权。那么如何鉴别国家认证标准物质的真假呢?下面远慕就为大家介绍一下如何鉴别国家认证标准物质的真假：如何识别真假标准物质：一、准物质编号应具有唯一性，“一瓶一号”。GBW为国家一级，GBW(E)为国家二级，GSB为标准样品。二、日期和有效期批标准物质鉴别的日期和有效性。如果已批准的标准物质批有修订值，则应给出初始估价日期和所有修订日期。如果合格证上有以上信息，而且各种标识清晰无PS痕迹，则这瓶标准物质基本可以确定是国家有证标准物质，可以放心使用啦。三、书内容齐全根据要求，证书必须包含三个方面的信息:物质的描述;正确使用所需的所有信息;建立置信度方面的信息，即测量不确定度。四、可证书标志根据《标准物质管理办法》，所有生产标准物质的企业、事业单位(无论是一级、二级)均需经行政批准取得《制造计量器具许可证》。因此，所有经过认证的标准材料将在证书的上方印有“CMC”字样，并标明审批部门和统一的审批部门编号。以上内容就是对如何识别真假国家有证标准物质的介绍了，搞清楚什么是标准物质，如何识别真假标准物质，怎样读懂标准物质证书上面的信息，这些问题对实验室来讲都是非常有必要的。

 实验室是用来做实验和测试的地方大家都知道，但当你进入实验室后要注意的安全问题有哪些实验室的注意事项又是什么你知道吗？下面就让远慕为大家讲解，希望对各位有所帮助。 1.实验前后一定要清洁洗手，如果在实验中途去休息喝水的时候也要洗手，不要以为刚才的实验药品没什么毒性而放松自己，要生命很重要，所以还是小心一些为好。另外，如果手很脏还可能沾污实验仪器和试剂、样品继而引起实验误差。在进行实验的时候不要不管手上沾了什么都往白大褂上擦。 2.在进入实验室要穿好工作服，不要想着做的实验无毒还是什么的而什么都不关心不在乎。比如一不小心碰到酸，把衣服弄破了小事，烧伤皮肤就比较麻烦了，受苦的还是自己。所以不要嫌麻烦，并记得一定要戴手套才做对身体有危害的实验，要对自己的身体负责。 3.凡是涉及到易挥发或有毒物品时一定要在通风柜操作，从而保障自己的安全。 4.夏天天气多变，而化验室大多都是一些化学品，甚至还有强酸、强碱和du品，所以下班后将窗门关好锁好。同时离开实验室之前或进入实验室之前注意实验室的水，电是否安全。 5.不要用甩移液管将里面的水甩出来，如果这个习惯一旦养成，当移液管里装的不是水而是其他的酸或碱，若甩到别人身上怎么办？所以建议在实验室中养成良好习惯很重要。 6.如果要在玻璃管和冷凝管上套胶塞，在用力的时候一定要小心，若使用猛力可能还会适得其反，千万不要因为这个导致手被划破鲜血直流。 7.实验时所穿的实验服一定要合身,袖口要收紧，否则两个大袖摆来摆去的很容易惹祸出事。 8.对于实验后所产生的废液必须要分类处理、及时清理，尤其要将有毒有害的废液做些显眼的标志，以免误伤他人。同时将废弃的试剂瓶水洗再丢弃，防止被人捡后使用而受伤，若有专门的废物回收处应将废物进行合理划分。 

自GB 4789.15-2016 霉菌和酵母菌计数正式开始实施以来,正置培养容易造成环境污染，一直比较困扰大家，很多小伙伴们在后台跟小编反应国标霉菌正置培养容易污染，今天远慕生物就来为大家分析一下这个问题。GB 4789.15-2016相比GB 4789.15-2010，最大的区别可能就在于对平皿的培养方式。2016版的国标在5.2中要求：琼脂凝固后，正置平板，置28℃±1℃培养箱中培养，观察并记录培养至第5d的结果。其实针对这一条，需要注意两点：第一，是需要对平板进行观察的，不能直接培养至第5天计数，因为霉菌的特殊性，在培养过程中会产生大量孢子，导致整个平板蔓延。因此，在培养后的第2天开始，就要对平板进行观察，并计数典型菌落，而这样的观察在之后每一天都应该进行，直至培养第5天。第二，就是正置培养。这一点是16版国标与旧版最大的区别，10版之前的国标都是倒置培养的。而进行正置培养，很多朋友可能都会遇到平板被霉菌污染的问题，这怎么解决呢？污染原因与解决措施一、培养箱环境污染很多实验室培养霉菌采用的是专用的霉菌培养箱，所以培养箱空间里会有大量的霉菌孢子。而平皿的盖和底是有一定缝隙的，尤其是玻璃平皿缝隙还是比较大的，正置培养中，孢子会向上飞扬通过缝隙落到平板的培养基上，导致污染。细心地实验猿可能发现，污染的菌落大部分都是在平皿边缘生长的。用一次性塑料平皿来培养，污染的概率就会小很多，因为一次性塑料平皿的盖和底之间的缝隙相比之下是比较小的。因此培养箱环境中的孢子可能会是主要污染源。这样一来，解决的方法就应该是对培养箱进行杀菌。可以用75%酒精和新洁尔灭两种消毒剂对培养箱进行了全面的消毒，消毒完最好不要马上用，消毒完最好放个几天在使用。应该注意的是，这样的杀菌操作也是需要经常进行的，因为霉菌的孢子是十分难清除的，而每次培养可能又会引进新的污染源，可以考虑每周进行两次，保证培养环境无污染源。二、平皿冷凝水污染正置培养过程中，若是平皿的上盖有泠凝水，在培养过程中冷凝水滴落到培养基上，也极容易造成菌落蔓延，平皿污染。因此在培养之前，一定要保证平皿干燥，可以把平皿放在37℃的环境里烘干，烘干之后再进行培养，就会避免这个原因造成的污染。三、操作环境和培养基的污染因为无菌室里可能也会因为灭菌效果不理想造成污染。有的实验室，操作台使用紫外线灭菌，经常就会灭菌不彻底有孢子污染，尤其是在进行过霉菌的相关检测之后。所以在进行过霉菌检测之后，适当的增长灭菌时间，可能会达到比较理想的效果。另外，为了彻底解决无菌室空间孢子污染的问题，可以购买安装臭氧发生器，通过紫外线+臭氧的双重消毒模式，效果就十分理想了。大家如果还是想验证一下究竟是什么原因造成的污染，这里提供一个简单的验证试验：在正常检测的环境中倒一组空白平皿，将这些平皿分为AB两组，其中A组用封口膜将平皿封好，B组不封，均放置在培养箱中正置培养。若是A组B组均有霉菌生长，则需要考虑培养基污染或者操作环境的污染；若是A组不生长霉菌而B组生长，则需要考虑是培养箱内的环境污染。通过这个小试验，可以基本上确定污染源，然后针对污染源进行相应的处理。

1、区分误差和不确定度很重要，误差定义为被测量的单个结果和真值之差，所以，误差是一个单个数值。原则上已知误差的数值可以用来修正结果。注意：误差是一个理想的概念，不可能被确切地知道。2、不确定度是以一个区间的形式表示，如果是为一个分析过程和所规定样品类型做评估时，可适用于其所描述的所有测量值，一般不能用不确定度数值来修正测量结果。 3、误差和不确定度的差别还表现在：修正后的分析结果可能非常接近于被测量的数值，因此误差可以忽略。但是，不确定度可能还是很大，因为分析人员对于测量结果的接近程度没有把握。 4、测量结果的不确定度并不可以解释为代表了误差本身或经修正后的残余误差。 5、通常认为误差含有两个分量，分别称为随机分量和系统分量。 6、随机误差通常产生于影响量的不可预测的变化。这些随机效应使得被测量的重复观察的结果产生变化。分析结果的随机误差不可消除，但是通常可以通过增加观察的次数加以减少。实际上算术平均值或一系列观察值的平均值的实验标准差不是平均值的随机误差。它是由一些随机效应产生的平均值不确定度的度量。由这些随机效应产生的平均值的随机误差的准确值是不可知的。 7、系统误差定义为在对于同一被测量的大量分析过程中保持不变或以可以预测的方式变化的误差分量。它是独立于测量次数的，因此不能在相同的测量条件下通过增加分析次数的办法使之减小。 8、恒定的系统误差，例如定量分析中没有考虑到试剂空白，或多点设备校准中的不准确性，在给定的测量值水平上是恒定的，但是也可能随着不同测量值的水平而发生变化。 9、在一系列分析中，影响因素在量上发生了系统的变化，例如由于试验条件控制得不充分所引起的，会产生不恒定的系统误差。例1、在进行化学分析时，一组样品的温度在逐渐升高，可能会导致结果的渐变。例2：在整个试验的过程中，传感器和探针可能存在老化影响，也可能引入不恒定的系统误差。 10、测量结果的所有已识别的显著的系统影响都应修正。注意测量仪器和系统通常需要使用测量标准或标准物质来调节或校准，以修正系统影响。与这些测量标准或标准物质有关的不确定度及修正过程中存在的不确定度必须加以考虑。 11、误差的另一个形式是假误差或过错误差。这种类型的误差使测量无效，它通常由人为失误或仪器失效产生。记录数据时数字进位、光谱仪流通池中存在的气泡、或试样之间偶然的交叉污染等原因是这类误差的常见例子。 12、有此类误差的测量是不可接受的，不可将此类误差合成进统计分析中。然而，因数字进位产生的误差可进行修正(准确)，特别是当这种误差发生在首位数字时。 13、假误差并不总是很明显的。当重复测量的次数足够多时，通常应采用异常值检验的方法检查这组数据中是否存在可疑的数据。所有异常值检验中的阳性结果都应该小心对待，可能时，应向实验者核实。通常情况下，不能仅根据统计结果就剔除某一数值。 14、一般实验室获得的不确定度并没有考虑出现假误差或过错误差的可能性。