有些培养基要求煮沸2分钟。大家使用的有几种加热设备,电炉、微波炉、电磁炉。体积较多时(1500mL以上)使用电磁炉为宜,量少时选用微波炉较方便。
微波炉使用操作方法
三角瓶配置好培养基(以500mL瓶子装300mL培养基为例),加热溶解,搅拌均匀,放入微波炉,调节火至大火或最高档(根据加热快慢选择),设2min,开始加热,通过观察窗观察里面培养基变化(VRBA培养基开始会表面出现白沫,沸前变清。这个也不完全准,主要还是根据不同配方的培养基成分有关),一般二分钟后是没有变化的(根据培养基量的多少),然后继续设2min,如此直至有少部分冒泡,这时候盯的要求比较紧,一旦有冒泡变多上涨趋势(一般反应已在1cm高度),马上拉门(门一开,自动断电和降温),泡沫下降(记录下前面2min一次的累计时间,下一瓶设置时间可直接设置对应累积时间),调节档至低一档或低二档,然后加热,以能冒泡但又不厉害(防止沸出)为宜,反复关开门来维持煮沸状态2min,完成后,带耐热手套取出,盖上封口用无菌纱布,皮筋扎口,放入恒温用的46℃水浴锅中平衡温度后使用。
这里需要注意
1.瓶装培养基的量,500mL瓶最多300mL,三角瓶口小,不宜过多。
2.下列东西不能放入微波炉:
锡箔纸;带壳鸡蛋;铁材料;完整壳栗/榛子;蜜蜂牛奶/方便面;非微波塑料。(未知物先百度)
3.操作微波炉要准备一副耐热手套(取放瓶子用)和一根玻璃棒(开始搅拌或中间拿出来轻轻搅动,不能爆搅拌)以及一些相对干净的纸(放玻璃棒)。
4.微波炉拿出的培养基冷却不能太急,就丢水浴锅里慢慢平衡,不要拿水激或放超声里(实验室曾有人这么做过,结果爆沸,冲出来老高,差点没把眼睛烫瞎)。
5.为了加快速度和节约时间,第一次要记录从加热至开始沸的时间,为了防止不准,可以多记录几次,然后心里有数,直接设定那个时间,这样可以适当快一些。
6.关键要点:胆大心细,时刻关注,不能离人(不要分心离开去做别的事情,沸和沸出去也就五秒的时间)。
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