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上海远慕生物科技有限公司

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公司动态

某医大学生通过仪器信息网平台订购远慕科研用作甲硝唑

    上海远慕是国内elisa试剂盒优质供应商,本司代理销售不同elisa试剂盒品牌的进口/国产elisa试剂盒,专业供应科研实验所需的培养基,抗体,动物血清血浆,标准品对照品,化学试剂,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,金标检测试剂盒,微生物,蛋白质,ELISA种属涵盖广,凭借多年行业经验,完善的售后服务,高质量的产品,赢得客户一致好评,欢迎来电咨询!    某医大学生通过仪信通平台订购远慕科研用作甲硝唑    我们给这位客户介绍了该产品并报完价格发去产品说明书,客户和我们沟通的非常顺畅,了解我们的产品后,客户对我们非常有信心,当即就下了订单,下面是和客户的沟通记录:    远慕生物,专业供应科研实验所需的培养基,抗体,动物血清血浆,标准品对照品,化学试剂,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,金标检测试剂盒,微生物,蛋白质,ELISA种属涵盖广,凭借多年行业经验,完善的售后服务,高质量的产品,赢得客户一致好评,欢迎来电咨询与订购!

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2017.06.02

缓冲液订购来仪信通找远慕!

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2017.05.31

2017年远慕生物端午节放假通知!

    根据《国务院办公厅关于2017年部分节假日安排的通知》节日安排,结合公司实际,现将端午节放假的有关事宜通知如下:    2017年“端午节”放假时间为:2017年5月28日-5月30日,共3天。5月30日(星期二)为法定假日,5月31日正常上班。    放假期间如有紧急情况或订货事宜,可直接留言或邮件通知,我们将在上班后时间进行处理和回复。    请各部门负责人做好本部门的节前工作安排,并检查相关设施、设备,做好防火、防盗工作,确保办公场所的安全、有序。全体员工在节假日期间,注意人身财产安全、交通安全,度过一个愉快的假期。    温馨提示:节假日期间,本公司暂停一切发货工作(不包含节假日前订购产品),如有延迟产品节后统一安排出库!感谢您对我们的支持和关注!    远慕生物预祝全体员工,新老用户,端午节快乐!   特此通知!

厂商

2017.05.27

欢迎老客户通过仪信通再一次订购远慕试剂盒!

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厂商

2017.05.26

购买小鼠elias试剂盒上仪信通找远慕!

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厂商

2017.05.24

买姜黄素标准品就上仪信通找远慕生物

姜黄素标准品由上海远慕生物科技详细介绍,全程提供免费技术支持与指导,提供ELISA试剂盒代测服务,远慕是家专业ELISA试剂盒优质供应商,和国内众多高校,科研院,医院都达成了长期合作关系, 提供了ELISA试剂盒的使用说明书,价格,品牌等,种属更是之多,欢迎订购!   下面是客户的聊天信息,客户都觉得我们卖的好!如果您觉得“姜黄素标准品”描述资料不够齐全,请联系我们获取详细资料。(联系时请告诉我从仪器信息网看到的,我们将给您最大优惠!)

厂商

2017.05.22

人ELISA检测试剂盒,人纤溶酶原(Plg)ELISA Kit

上海远慕生物科技是国内elisa试剂盒优质供应商,专业销售人elisa检测试剂盒,人纤溶酶原(plg)elisa kit ,小鼠elisa试剂盒,大鼠elisa试剂盒,鸡elisa试剂盒,牛elisa试剂盒,其他动物试剂盒,为客户提供免费代测服务,elisa试剂盒说明书,价格等,更多产品请来电咨询!中文名:人纤溶酶原(plg)elisa试剂盒别名:人纤溶酶原(plg)elisa kit货号:ym-m007供应商:上海远慕规格:48t/96t保存温度:2-8℃保存方式:置阴凉干炽避光处有效期:6个月人elisa检测试剂盒,人纤溶酶原(plg)elisa kit操作步骤:方法一?用于检测未知抗原的双抗体夹心法:1.?包被:用0.05m ph9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。2.?加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。3.?加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。4.?加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的tmb底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。5.?终止反应:于各反应孔中加入2m硫酸0.05ml。6.?结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测o·d值:在人纤溶酶原(plg)检测试剂盒检测仪上,于450nm(若以abts显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔o·d值,若大于规定的阴性对照od值的2.1倍,即为阳性。方法二?用于检测未知抗体的间接法:?? 用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔 中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml, 37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用ddw洗涤。人elisa检测试剂盒,人纤溶酶原(plg)elisa kit 标本的采集及保存:1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃ 后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2. 血浆:可用edta或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° c 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。人elisa检测试剂盒,人纤溶酶原(plg)elisa kit相关产品: YM-0412 17245-25-9,月橘香豆精,coumurrayin 保存条件:常温,避光YM-0413 1990-77-8,二乙酸丁香树脂醇酯,syringaresinoldiacetate 保存条件:常温,避光YM-0414 56795-51-8,乙酸东莨菪素酯 保存条件:常温,避光pacap elisa检测试剂盒,elisa试剂盒parc/ccl18 elisa检测试剂盒,elisa试剂盒ang-4 elisa检测试剂盒,elisa试剂盒ace elisa检测试剂盒,elisa试剂盒lzm elisa检测试剂盒,elisa试剂盒bmpr-ⅱ elisa检测试剂盒,elisa试剂盒ang-ⅱ elisa检测试剂盒,elisa试剂盒scd30 elisa检测试剂盒,elisa试剂盒mhc-ⅲ/h-2ⅲ elisa检测试剂盒,elisa试剂盒ar elisa检测试剂盒,elisa试剂盒smhc-2 elisa检测试剂盒,elisa试剂盒e-cad elisa检测试剂盒,elisa试剂盒acv-a elisa检测试剂盒,elisa试剂盒muc5ac elisa检测试剂盒,elisa试剂盒cd30 elisa检测试剂盒,elisa试剂盒bdnf elisa检测试剂盒,elisa试剂盒smhc-1 elisa检测试剂盒,elisa试剂盒sepcr elisa检测试剂盒,elisa试剂盒bmp-2 elisa检测试剂盒,elisa试剂盒tpo-ab elisa检测试剂盒,elisa试剂盒ecf elisa检测试剂盒,elisa试剂盒eotaxin1/ccl11 elisa检测试剂盒,elisa试剂盒il-7 elisa检测试剂盒,elisa试剂盒hbcab elisa检测试剂盒,elisa试剂盒epo elisa检测试剂盒,elisa试剂盒mt elisa检测试剂盒,elisa试剂盒hbeab elisa检测试剂盒,elisa试剂盒e-selectin/cd62e elisa检测试剂盒如果您觉得“人elisa检测试剂盒,人纤溶酶原(plg)elisa kit”描述资料不够齐全,请联系我们获取详细资料。(联系时请告诉我从仪器信息网看到的,我们将给您最大优惠!)

新品

2017.05.19

我要让所有人都知道,您的试剂被Epicentre承包了

如果说,安迪是小包总的,那Epicentre一定是您的!如果说,人与人之间的邂逅是一种缘份,那Epicentre与您一定是命中注定的缘份!Epicentre,一个来自于美国的品牌,是一家专注于核酸样品制备试剂以及酶的供应商,成立于1987年,是分子生物学产品的制造商和销售商,其产品广泛应用于RNA扩增及基因表达分析,基于转座子的遗传分析,核酸纯化,DNA序列分析,PCR及RT-PCR扩增,DNA及RNA修饰酶,基因组克隆,体外转录,以及蛋白质研究和纯化等领域。   远慕生物,一个来自于中国的企业,是一家专注于生化试剂的代理供应商,是进口/国产ELISA试剂盒,抗体,培养基,血清血浆,染色液,标准品对照品,化学试剂,实验耗材,其他科研试剂的销售商,凭借多年行业经验,高质量产品,完善的售前售后技术指导,赢得客户一致好评,已和国内多所科研院,医学院,学校等达成了长期合作关系,旗下代理多种试剂品牌,为答谢新老客户对我们的支持,我们特推出Epicentre旗下所有产品促销大优惠活动!只有你想不到的“底”价,没有我们给不了的“底”价! 活动时间:2017.05.15~2017.06.31  有关Epicentre产品更多产品信息,具体促销细节请来电咨询! 上海远慕生物科技有限公司联系人:安桐电话:021-51829242 手机:18001933641传真:021-50760790QQ:183118024 地址:上海市嘉定区曹安公路5588号

厂商

2017.05.15

ELISA检测结果准确可靠的必要条件

    ELISA检测结果准确可靠的必要条件    优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。    可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。    血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。    血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂(见3.2.4)。    按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。    在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。    加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。     相关标签:ELISA检测试剂盒,远慕生物试剂盒,ELISA试剂盒代测,ELISA试剂盒

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2017.05.11

人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒说明书

国内权威的科研试剂供应商,专业经营进口分装和原装、国产的Elisa试剂盒,品质保证,技术严格, 无效果退款退货。 人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒说明书 Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置 标准品稀释液:1.5ml×1瓶 酶标试剂:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96) 【人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒】本试剂仅供研究使用 计算: 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查 出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样 品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 试剂盒组成: 封板膜:2片(48)/2片(96) 说明书:1份 密封袋:1个 标准品:   2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶  2-8℃保存 酶标包被板:  1×48     1×96         2-8℃保存 样品稀释液: 3ml×1瓶  6 ml×1瓶     2-8℃保存 显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶     2-8℃保存 显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶     2-8℃保存 终止液:     3ml×1瓶 6ml×1瓶     2-8℃保存 浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶   2-8℃保存 【人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒】实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人铁蛋白(FE) 水平。用纯化的人铁蛋白(FE) 抗体包被微孔板 ,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入铁蛋白(FE) ,再与HRP标记的铁蛋白(FE) 抗体结合, 形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色, 并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的铁蛋白(FE) 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人铁蛋白(FE) 浓度。 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中铁蛋白(FE) 的含量。 服务承诺: 供货期:款到发货。工作时间内免费的技术咨询和指导 。请来电咨询为客户提供来样检测服务,最大限度实验结果的有效性(免费代测)。 保存条件及有效期: 试剂盒保存:2-8℃| 有效期:6个月 【人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒】样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存 过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右 (2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀 形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细 收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。 通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融 化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分 钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验, 可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤     标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl ,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到 第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各 取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul ,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标 准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别 加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度 分别为1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。    加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在 酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍) 。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。    温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。    配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。    洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍 干。    加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。    温育:操作同3。    洗涤:操作同5。    显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.    终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。    测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟 以内进行。 【人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒】注意事项:     试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条 应装入密封袋中保存。    浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。    各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分 钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。    请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品 孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数 (×n×5)。    封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。    底物请避光保存。    严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.    所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。    本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 试剂盒性能: 1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。 2.批内与批见应分别小于9%和11% 检测范围: 0.2IU/L - 6IU/L 

新品

2017.04.19

牛鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)ELISA检测试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。牛鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)ELISA检测试剂盒使用说明书【试剂盒名称】牛鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)ELISA检测试剂盒【试剂盒用途】定量牛血清、血浆及相关液体样本中鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)的含量【试剂盒检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)含量。【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7底物夜A6mL2标准品:200ng/ml0.6mL8底物夜B6mL320倍浓缩洗涤液20mL9终止液6mL4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜1张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml【牛鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)ELISA检测试剂盒需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、 标准规格酶标仪3、 精密移液器及一次性吸头4、 蒸馏水5、 一次性试管6、 吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(0.1-200ng/ml范围内),乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。【牛鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)ELISA检测试剂盒操作程序总结】准备试剂,样品和标准品 加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算

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2017.01.09

远慕生物:ELISA试剂盒的操作技巧

    ELISA试剂盒的操作技巧    掌握了实验技巧之后,ELISA试剂盒实验入门新手学起来都会快的多。本篇文章中的小窍门包含了要求、方法等技术,以下就是一些ELISA试剂盒的小窍门:    1.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。    2.合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。    3.吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。    4.要尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。    5.样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。    6.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。    7.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。    8.ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。    9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。    10.人ELISA试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。    11.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。    12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。    13.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。    14.没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。    15.在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。    16.吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,ELISA试剂盒吸取的量不够准确。    17.吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。

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2017.01.06

ELISA试剂标本的收集和保存方法

    ELISA试剂标本的收集和保存方法    一、尿液标本    ELISA试剂同血标本一样,尿液标本受饮食、运动、药物量等因素的影响也较大,特别是饮食的影响,故一般来说晨尿优于随机尿。晨尿是指清晨起床后的第一次尿标本,较浓缩和酸化,有形成分(如血细胞,上皮细胞,管形)相对集中便于观察。随机尿即随意一次尿,留取方便,但受饮食、运动、药物影响较甚,易于出现假阳性和假阴性结果,如饮食性蛋白尿,饮食性糖尿,维生素C干扰潜血结果等。餐后尿(午餐后2小时收集的患者尿液)适用于尿糖,尿蛋白和尿胆原的检查,此时的尿标本可增加试验敏感性,检出较轻微的病变。12小时尿细胞计数即Addis计数(前晚8时排空膀胱后留取至次日晨8时的所有尿液),因时间较长,细菌易繁殖,须加入防腐剂甲醛。24小时尿(第一天晨8时排空膀胱后留取至次日晨8时的所有尿液)中化学物质的定量,包括蛋白,糖,尿17-酮、17-羟类固醇,儿茶酚胺,Ca2+等,检测不同的物质,选择不同的防腐剂防腐。清洁中段尿多用于尿细菌培养,要求无菌,冲洗外阴后留取标本。所有尿标本的收集都应足量,最少12ml,最好50ml,定时尿须全部收集,对女性患者应避免阴道分泌物、经血污染尿标本。    二、血液标本    有些生理因素,如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化,有些甚至还有昼夜变化。因此血液标本的采集应尽量避免生理因素干扰,以条件一致为宜,如无法避免,应在标本上注明该因素。    1.外周血    一般选取左手无名指内侧采血,该部位应无冻疮,炎症,水肿,破损。如该部位不符合要求,以其他手指部位代替。对烧伤病人,可选择皮肤完整处采血。由于部分血液常规检测(如白细胞计数、分类等)受生理因素影响波动过大,比较时宜使条件尽量一致。涉及到体内出、凝血功能的检测项目(如血小板计数,出血时间或凝血时间等)的检测,一定要注意了解患者是否用过抗凝、促凝药物,以便在减少或避免干扰因素的影响。    2.静脉血    除涉及各种止血和血栓检测等项目需采用抗凝静脉血血浆外,目前绝大多数检测项目的分析检测可直接采用静脉血的血清。在血清检测项目中,ELISA试剂有些(如血糖,血脂等)受饮食及昼夜因素影响较大,一般以清晨空腹血标本为宜;有些在血中衰变较快(血清酶活性测定如ACP活性等),0~4℃贮存活性减弱也不一,这些项目的检测必须及时而快速;有些(如肌酸激酶等)受运动等因素影响较大。抽血时避免溶血的发生也十分重要,尤其涉及血钾,LDH等的测定。    三、粪便标本    粪便标本的检测对判断消化系统疾病有重要参考价值。采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便,对外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材。找寄生虫虫体及作虫卵计数应收集24小时粪便。查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即检查,从有脓血和稀软处取材,保温送检。查日本血吸虫虫卵时应取粘液、脓血部分,孵化毛蚴时至少留取30g粪便,且需尽快处理。检查蛲虫卵须用透明薄膜拭子于晚12时或清晨排便前自肛门周围皱襞处拭取并立即镜检。隐血试验(化学法),试验前3日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂,维生素C等。所有粪便标本采集后1小时内应检查完毕,以防止有形成分受消化酶及pH的破坏。    四、脑脊液标本    脑脊液标本采集后立即送检,放置过久将影响检验结果:如细胞变性,破坏,导致计数和分类不准;有些化学物质如葡萄糖等将分解含量减少;细菌发生自溶影响细菌的检出率。脑脊液抽取后一般分装三个无菌管,第一管作细菌培养,第二管作化学分析和免疫学检查,第三管作一般性状及显微镜检查,三管的顺序不宜颠倒。因标本采集较难,全部送检和检测过程应注意安全。    五、胸腹水标本    ELISA试剂与脑脊液标本一样,采集后的标本注意安全,及时送检。一般也分装三管,一管作常规细胞学检查,一管生化检查,一管细菌培养,顺序以与脑脊液相同为宜。

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2017.01.03

上海远慕2017年元旦放假通知

                   通知尊敬的客户:    您好!根据《国务院办公厅关于2017年部分节假日安排的通知》并结合公司实际,现将上海远慕生物2017年元旦放假安排通知如下:    2017年元旦放假时间为:2016年12月31日-2017年1月2日,共3天。1月3日(星期二)照常上班,相关一切服务恢复正常,给您造成不便请谅解!感谢您对我们网站的支持和关注!祝您假期愉快!                    

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2016.12.30

L-甘-甘-缬三肽|甘氨酰-甘氨酰-L-缬氨酸

L-甘-甘-缬三肽|甘氨酰-甘氨酰-L-缬氨酸英文名称:Gly-Gly-Lal其他名称:甘氨酰-甘氨酰-L-缬氨酸CAS号:20274-89-9C7H14N2O3 = 174.20含量:≥98.0%性状:白色结晶粉末用途:科研、实验!供应商:上海远慕生物保存:RT储存条件:避光、干燥阴凉处封闭贮存,严禁与有毒、有害物品混放、混运。本品为非危险品,可按一般化学品运输,轻搬动轻放,防止日晒、雨淋。注:本公司产品仅用于科研实验!

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2016.12.28

N-乙酰-L-半胱氨酸|蛋乙酰半胱

                   N-乙酰-L-半胱氨酸|蛋乙酰半胱详解英文名称:N-Acetyl-L-Cysteine中文名称:N-乙酰-L-半胱氨酸中文同义词:易咳净;蛋乙酰半胱;乙醯半胱胺酸;乙醯浮氨基酸;乙酰半胱氨酸;N-乙酰半胱氨酸;乙酰半胱氨酸杂质;乙酰基-半胱氨酸;N-乙酰-L-半胱氨酸;N-乙酰基-L-半胱氨酸其他名称: 蛋乙酰半胱;N-乙酰-L-β-巯基丙氨酸;L-α-乙酰氨基-β-巯基丙酸;N-乙酰-3-巯基丙氨酸CAS号:616-91-1C5H9NO3S = 163.19含量:≥99.0%比旋光度:+21.3o~+27.3oPH:2.0~2.8性状:白色结晶体或结晶粉末。熔点109~111℃。易溶于水和乙醇。有类似蒜的臭气,味酸,有吸湿性。半数致死量(大鼠,经口)5050mG/kG用途:用于生化试剂,本品仅供科研使用!保存:RT供应商:上海远慕生物化学性质 :白色结晶性粉末,有类似蒜的气味,味酸。有吸湿性,易溶于水或乙醇,不溶于乙醚、氯仿。在水溶液中呈酸性 (10g/L H2O中pH2-2.75),mp101-107℃。                    

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2016.12.28

上海远慕:细胞培养常用试剂使用问答

    细胞培养常用试剂使用问答    ——供参考!详情来电!    1.谷氨酰胺使用方法是什么?    答:谷氨酰胺在溶液中很不稳定,故4℃下放置1周可分解50%,使用中单独配制,置-20℃冰箱中保存,用前加入培养液中。    2.碳酸氢钠在室温条件存放是否稳定?    答:碳酸氢钠白色粉末,或不透明单斜晶系细微结晶。比重2.159。无臭、味咸,可溶于水,微溶于乙醇。其水溶液因水解而呈微碱性,受热易分解,在65℃以上迅速分解,在270℃时完全失去二氧化碳,在干燥空气中无变化,在潮湿空气中缓慢分解。    3.培养细胞生长减慢的原因有哪些?其解决办法有哪些?    答:可能得原因有:更换了不同的培养液或血清;培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子等耗尽或缺乏或已被破坏;培养物中有少量细菌或真菌污染;试剂保存不当;比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清支持细胞生长实验找出可能的原因。    解决办法:增加起始培养细胞浓度;让细胞逐渐适应新培养液;换入新鲜配制培养液;补加谷氨酰胺或生长因子等;用无抗生素培养液培养,如发现污染,丢弃培养物,或用抗生素除菌;血清需保存在-5℃到-20℃;培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完;分离培养物,检测支原体。    4.L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗?它在溶液中不稳定吗?    答:L-谷氨酰胺在细胞培养时非常重要的。脱掉氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解,降解率随保存温度而变。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成,而氨对于一些细胞具有毒性。    5.细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?    答:不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++,Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH8.0,温度37oC其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。通常使用的消化液浓度为:    (1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;    (2)0.25%胰蛋白酶    多数细胞传代消化可使用0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA这种消化液。    6.二价离子抑制胰蛋白酶活性吗?使用胰蛋白酶时加入EDTA的目的是什么?    答:二价离子的确抑制胰蛋白酶活性。EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建议胰蛋白酶处理细胞前,用EDTA清洗细胞,以消除来自培养基中所有的二价离子。    7.GlutaMAX-I是什么?培养细胞如何利用GlutaMAX-I?这个二肽有多稳定?    答:GlutaMAX-I即谷丙氨酸二肽,是一个L-谷氨酰胺的衍生物,其不稳定的alpha-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽,释放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常稳定,即使在121磅灭菌20分钟,GlutaMAX-I二肽溶液有最小的降解,如果在相同条件下,L-谷氨酰胺几乎完全降解    8.培养基中丙酮酸钠的作用是什么?    答:丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是,如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。    9.Hank′s平衡盐溶液(HBS)和Earle′s平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能差别?    答:HBS和EBS的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Eagle′s(2.2g/L)中比在Hanks′(0.35g/L)中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡,以维持溶液的PH值。Eagle′s液在空气水平的CO2中,溶液会变碱,Hanks′液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织,需要用Eagle′s液。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织,用Hanks′液就可以了。    上海远慕主营产品:ELISA定量检测试剂盒价格,生化试剂,标准品对照品,试剂耗材,抗体,培养基,动物血清等,欢迎致电!

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2016.12.26

牛B淋巴细胞激活抗原B72(LAB72)ELISA试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。牛B淋巴细胞激活抗原B72(LAB72)ELISA试剂盒说明书【试剂盒用途】定量牛血清、血浆及相关液体样本中B淋巴细胞激活抗原B72(LAB72)的含量【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被B淋巴细胞激活抗原B72(LAB72)透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中B淋巴细胞激活抗原B72(LAB72)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中B淋巴细胞激活抗原B72(LAB72)含量。【试剂盒组成】  1酶标包被板12孔×8条7底物夜A6mL2标准品:200ng/ml0.6mL8底物夜B6mL320倍浓缩洗涤液20mL9终止液6mL4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜1张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml牛B淋巴细胞激活抗原B72(LAB72)ELISA试剂盒【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、 标准规格酶标仪3、 精密移液器及一次性吸头4、 蒸馏水5、 一次性试管6、 吸水纸【试剂盒操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(0.1-200ng/ml范围内),乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。【操作程序总结】准备试剂,样品和标准品 加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值【ELISA试剂盒检测范围】0.1-200ng/ml【试剂盒规格】96T/盒、48T/盒【试剂盒贮藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6个月

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2016.12.23

黄曲霉素ELISA试剂盒检测原理

    黄曲霉素ELISA试剂盒检测原理   ELISA试剂盒 注:本公司产品仅用于科研实验!    黄曲霉毒素是一组结构相关的毒性化合物,由真菌黄曲霉菌和寄生曲霉菌在受到象干旱这样的外界环境压力下产生的,主要有B1,B2,GI和G2四种,可以在各种食品和饲料,各个部分中发现它们,其中B1的量,并且毒性最强。黄曲霉毒素可以导致很多种动物肝的急性坏疽,硬化和癌症,没有动物能够对它的强毒性有抵抗作用,人类同样也会受到影响。ELISA试剂盒    黄曲霉毒素是具有强毒性,是严重的致癌物。欧盟已经规定了在所有的饲料原料,饲料,饲料添加剂,辅助性饲料里面的黄曲霉毒素不能超过20ppb(牛,羊,猪,禽等)。对于产奶动物饲料则是不能超过5ppb,而对于小牛和羊羔饲料是不能超过10ppb。ELISA试剂盒    检测原理:Beacon黄曲霉毒素检测试剂盒是基于竞争性酶联免疫吸附检测法。用甲醇/水震荡萃取粉碎样品中的黄曲霉毒素,过滤水相萃取物,然后进行免疫学检测。加黄曲霉毒素的酶标记物到已加有标准或样品的测试孔中,抗体被加入后反应开始,样品及酶标记物竞争结合连接在微孔上的抗体,10分钟培养后,倒掉孔中的溶液,洗掉微孔中未的结合黄曲霉毒素和酶标记物。加入无色的底物溶液,培养10分钟,所有结合的酶标记物使底物转化成蓝色物质。加入停止液然后读取吸光度值,未知浓度样品与标准吸光度值进行比较,就可以得到样品的黄曲霉毒素浓度。

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2016.12.21

抗原抗体反应影响因素有哪些?

    抗原抗体反应影响因素有哪些?    抗原抗体反应是ELISA实验中最常见的一个实验,上海远慕生物科技有限公司主营:elisa试剂盒,生物试剂,标准品对照品,微生物培养基等科研产品,拥有独立的实验室,试剂盒可免费代测,欢迎致电。    抗原抗体反应的影响因素主要有三个,具体总结如下:    1温度:温度影响分子的活动速度,20-40度是温度越高,结合越快,超过56度抗原抗体就会失活。    2抗原抗体的相对浓度:比例合适结合越好。否则会出现前、后带现象。    3金属离子;许多抗原抗体的反映需要金属离子参加。

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2016.12.16

猪Bcl-2相关X蛋白ELISA试剂盒检测原理及操作

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。【试剂盒名称】猪Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒【试剂盒用途】定量猪血清、血浆及相关液体样本中Bcl-2相关X蛋白(BAX)的含量【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被Bcl-2相关X蛋白(BAX)透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中Bcl-2相关X蛋白(BAX)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中Bcl-2相关X蛋白(BAX)含量。【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

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2016.12.14

ELSIA试剂盒的操作步骤

     ELSIA试剂盒的操作步骤    影响反应因素较多,特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致,因此在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。测定大分子量物质的夹心法ELSIA试剂盒,标准曲线的范围一般较宽,曲线点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数纸,以检测物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线一般呈S形,其头、尾部曲线趋于平坦,中央较呈直线的部分是最理想的检测区域。    测定小分子量物质常用竞争法,其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。注意图中横坐标为对数关系,这更有利于测定系统的表达。    1、血清    血清是最常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。    用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜,使血清析出。(将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃1000×g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。    采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。    2、血浆    用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后30min内4℃1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。    常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检测时还应仔细阅读试剂盒说明书,检查试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。    3、细胞培养上清    取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。    4、细胞裂解液    1)吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。    2)收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,ELSIA试剂盒用预冷的PBS润洗3次。    3)加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μLPBS重悬。ELSIA试剂盒

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2016.12.12

远慕生物:elisa测定法测定抗体

    elisa测定法测定抗体    一、原理    其基本原理可概括为:将特异的抗原-抗体免疫学反应和酶学催化反应相结合,以酶促反应的放大作用来显示初级免疫学反应。因此,酶免疫技术一般均有两部分组成,即一次或数次免疫学反应和一次酶促反应。抗原、抗体发生特异结合过程中,设法引入酶结合物,如酶标记的抗抗体,然后加入酶的底物,在酶催化下生成有色产物,反映出被测定抗原或抗体的量。    二、操作流程、类型及特点    1、操作流程:    检测抗体多用间接型elisa。以纯化抗原包被载体,经4℃隔夜,以无关蛋白封闭至少2小时以上,加入待测样品,室温孵育1小时,洗涤干净后加酶标抗体,再经室温孵育、洗涤后,以底物显色,显色到一定程度终止反应,在酶标仪上读结果或以肉眼判断。    2、类型:elisa具体方法的类型繁多,试剂的标准化问题还未最后解决,温育的时间、温度、洗涤液的种类及洗涤次数等都是影响测定的因素。但参考以上基本过程,无论怎样变化,均离不开抗原-抗体反应、酶标抗体的免疫学反应及酶催化作用。    3、特点:(1)、敏感性高,可检出浓度在ug~mg/ml水平;(2)、特异性强;(3)、重复性好;(4)、快速、简便、廉价。    三、实验条件    1、固相载体:可作为固相载体的物质很多,如:纤维素、聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、聚丙烯、交联葡聚糖、玻璃、硅橡胶、琼脂糖凝胶等。可以各种形式出现;试管、微量反应板凹孔、小珠等。最常用的是聚苯乙烯制品,其吸附性。固相包被的机制一般不外乎物理吸附和共价交联,    2、封闭:以无关蛋白占据载体上未被包被的空隙,常用的封闭液是1%牛血清白蛋白或10%小牛血清。    3、待测样品:稀释度要合适,浓度太大会发生非特异性吸附造成假阳性,过分稀释会影响抗原-抗体之间的免疫学反应。选择最适稀释度,在实验体系中取光密度在1.0左右的稀释度为宜。    4、酶结合物:使用高质量的酶结合物是elisa成功的关键。四、注意事项    酶联免疫技术的试剂标准化问题尚未完全解决,温育过程的时间、温度、洗涤液的种类及洗涤次数都是影响最后测定的因素。为使实验得到满意的结果,在操作过程中应作到    1、每次试验都必须设阳性和阴性对照。    2、封闭要完全。    3、洗涤要测定。    相关标签:ELISA试剂盒 ELISA检测试剂盒 ELISA测定试剂盒

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2016.12.09

Masson三色染色液

关键词:Masson\三色染色液\染色液\上海远慕生物产品简介: 结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维,而胶原纤维(collagenfiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量都很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝),主要用于区分胶原纤维和肌纤维。Masson三色染色的特点:①染色稳定;②分化时间短,1~2s;③色彩清晰鲜艳;④适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;⑤所染切片保存时间长且不易褪色。产品组成: 名称          规格         7x50ml         7x100ml         Storage    试剂(A):Weigert铁苏木素染色液        A1:Weigert染液A         25ml        50ml        RT避光    A2:Weigert染液B         25ml        50ml        RT    临用前,取A1、A2等量混合即为Weigert铁苏木素染色液,不宜提前配制。    试剂(B):酸性乙醇分化液        50ml        100ml        RT    试剂(C):Masson蓝化液        50ml        100ml        RT    试剂(D):丽春红品红染色液        50ml        100ml        RT避光    试剂(E):弱酸溶液        50ml        100ml        RT    试剂(F):磷钼酸溶液        50ml        100ml        RT避光    试剂(G):苯胺蓝染色液        50ml        100ml        RT避光    使用说明书        1份     自备材料: 1、固定液:选用甲醛或甲醛盐溶液2、系列乙醇3、蒸馏水                         操作步骤(仅供参考): 1、切片常规脱蜡至水。2、用配制好的Weigert铁苏木素染色5~10min。3、用酸性乙醇分化液分化,水洗。4、用Masson蓝化液返蓝,水洗。                       5、蒸馏水洗1min。6、丽春红品红染色液染色5~10min。7、在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗1min。8、磷钼酸溶液洗1~2min。9、用配制好的弱酸工作液洗1min。10、直接入苯胺蓝染色液中染色1~2min。11、用配制好的弱酸工作液洗1min。12、95%乙醇快速脱水。13、无水乙醇脱水3次,每次5~10s。14、二甲苯透明3次,每次1~2min。15、中性树胶封固。染色结果: 细胞核,胶原纤维/蛋白:  蓝色 胞浆、肌肉、红细胞  :   红色 注意事项: 1、 切片脱蜡应尽量干净。2、 取A1、A2等量混合即为Weigert铁苏木素染液,一般24h失去染色力。3、 组织固定起着非常重要的作用,使用不同的固定液可延或缩短染色时间。4、 经典masson三色染色中用Harris苏木精染核,但Harris苏木精染核后切片颜色不够鲜艳,本染液采用Weigert染细胞核,因为染色目的主要在于区分胶原纤维和肌纤维,    一般也可以省略该染色步骤。5、 酸性乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。6、 弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳,如使用量大可自行配制0.1~0.3%乙酸溶液予以替代。7、 磷钼酸分化时要在镜下控制,分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定,一般1~2min。8、 Masson蓝化液亦可自行配制Scott促蓝液或0.1~1%碳酸锂水溶液予以替代。9、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期:12个月有效。

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2016.12.07

上海远慕教您如何选购Elisa试剂盒?

    如何选购Elisa试剂盒?    ELISA试剂盒虽然有多种类型,不过它们都有一个共同特点,就是进行抗原捕获。ELISA试剂盒以其敏感性高、特异性强、重复性好的优点,在科研中深受广大科研工作者的喜爱。而市面上各种试剂盒数不胜数。让大家都产生了选择性综合症,也挑不出最适合自已的那个试剂盒。现在我们公司列出一些选购Elisa试剂盒的常识,希望能为大家选购时提供参考。    一、特异性    ELISA试剂盒的特异性与试剂盒的关键组分,抗体对有关,若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,建议使用双单抗。    二、灵敏度    灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的最低量的能力,用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒,如果待检指标量很低,一般的试剂盒不能满足要求,可选择高敏的ELISA试剂盒。    三、重复性    科学实验讲求重复性,一般ELISA试剂盒,其板内和板间变异系数应该控制在15%以内。    四、简便性    试剂盒在保证高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利,越容易受到用户欢迎!这也不妨作为选择试剂盒的一个指标。    五、经济性    进口分装试剂盒因为省去不少物流和报关费用,与国外原装进口试剂相比价格上有比较大的优惠,而且能提供比较灵活的包装规格,特别是48T等小包装,目前很多客户因为对品牌的信任度问题,主要还是选择国外原装进口,但是国内进口分装比较成熟的公司仍然是一个非常好的选择。    六、美誉度    一个品牌不光要有知名度,更重要的是美誉度。通过行业调查公司以及网络,相关宣传资料等可以找到美誉度高的ELISA试剂盒供应商,这个反映的不仅是产品质量的问题,对供应商的售前售后服务也是一个非常严格的检验。    七、文献引用    产品的文献引用特别是高质量的SCI文章的引用是很多用户都关心的问题,这是业界对产品认可的一个非常重要指标,而且对相关用户的科研有一定的借鉴作用。    远慕生物这一品牌从成立之初一直关注试剂盒,酶联免疫领域,经过了几年的发展,已成为这一领域的品牌供应商,并得到了科研用户的一致认可。

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2016.12.05

远慕生物:ELISA试剂盒实验加样要求

    ELISA试剂盒实验加样要求    ELISA试剂盒具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此在生物医学各领域的应用范围日益扩大。    在ELISA试剂盒中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。    有此测定(如间接法ELISA试剂盒)需用稀释的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器,在ELISA试剂盒中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA试剂盒中似不恰当。    按ELISA试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA试剂盒中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。

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2016.12.01

ELISA检测样品采取及注意事项

    ELISA检测样品采取及注意事项    检测试剂盒,检测的动物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey,Pig……)种类和检测指标(介素类、因子类)及标本数量(48T/96T)!    ◇注意事项:    收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。    ◇液体类标本:    标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积=100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。    ◇血清:    室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。    ◇血浆:    应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10%(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。    ◇尿液、胸腹水、脑脊液:    用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。    ◇细胞培养上清:    检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。    ◇组织标本:    切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置于-20度或-70度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。    远慕生物主营产品:ELISA试剂盒,生化试剂,标准品对照品,试剂耗材,抗体,培养基,动物血清等等,欢迎致电!

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2016.11.28

牛甘油磷酸胆碱(GPC)ELISA试剂盒使用说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。牛甘油磷酸胆碱(GPC)ELISA试剂盒使用说明书【试剂盒名称】牛甘油磷酸胆碱(GPC)ELISA试剂盒上海远慕ELISA试剂盒供应商!【试剂盒用途】定量牛血清、血浆及相关液体样本中甘油磷酸胆碱(GPC)的含量【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被甘油磷酸胆碱(GPC)透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中甘油磷酸胆碱(GPC)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中甘油磷酸胆碱(GPC)含量。【牛甘油磷酸胆碱(GPC)ELISA试剂盒 试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7底物夜A6mL2标准品:200ng/ml0.6mL8底物夜B6mL320倍浓缩洗涤液20mL9终止液6mL4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜1张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、 标准规格酶标仪3、 精密移液器及一次性吸头4、 蒸馏水5、 一次性试管6、 吸水纸【牛甘油磷酸胆碱(GPC)ELISA试剂盒操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【ELISA试剂盒注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(0.1-200ng/ml范围内),乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。【操作程序总结】准备试剂,样品和标准品 加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值计算【检测范围】0.1-200ng/ml【规格】96T/盒、48T/盒【试剂盒贮藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6个月远慕生物主营产品:ELISA试剂盒,生化试剂,标准品对照品,试剂耗材,抗体,培养基,动物血清等等,欢迎致电:手机:18001933641  QQ:183118024 。

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2016.11.28

远慕生物:一抗的选择要点和技巧

    一抗的选择要点和技巧:    (1)单克隆和多克隆抗体的选择。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合,就像dao弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中,一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对就低;而多克隆抗体特异性稍弱,但抗体的亲和力强,灵敏度高,但易出现非特异性染色(可以通过封闭等避免)。    (2)应用范围的选择。有的一抗只能用于Westernblotting,或免疫组化、免疫荧光、免疫沉淀等;甚至表明石蜡切片或冰冻切片。    (3)种属反应性的选择。这一点很重要,表明这种抗体可能存在种属差异,且这种抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原。    (4)种属来源,一般兔来源的多是多克隆;而小鼠来源的多是单克隆,但也有另外。根据此来源来选择相应的二抗。    (5)生产厂家的选择。不同厂家的同一种抗体它的实际效价,稳定是不同的。    上海远慕主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发及销售。主要产品有进口RD,BIM品牌ELISA试剂盒、放免试剂盒、血清、抗体、生物科研试剂、实验耗材等。如果您对我们的产品感兴趣,欢迎来电洽谈。

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2016.11.25

人次级淋巴组织趋化因子6Ckine(CCL21)ELISA试剂盒使用说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。人次级淋巴组织趋化因子6Ckine(CCL21)ELISA试剂盒使用说明书【 试剂盒名称】人次级淋巴组织趋化因子6Ckine(CCL21)ELISA试剂盒【试剂盒用途】定量人血清、血浆及相关液体样本中次级淋巴组织趋化因子6Ckine(CCL21)的含量【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被次级淋巴组织趋化因子6Ckine(CCL21)透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中次级淋巴组织趋化因子6Ckine(CCL21)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中次级淋巴组织趋化因子6Ckine(CCL21)含量。【试剂盒组成】 1酶标包被板12孔×8条7底物夜A6mL2标准品:200ng/ml0.6mL8底物夜B6mL320倍浓缩洗涤液20mL9终止液6mL4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜1张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、 标准规格酶标仪3、 精密移液器及一次性吸头4、 蒸馏水5、 一次性试管6、 吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。人次级淋巴组织趋化因子6Ckine(CCL21)ELISA试剂盒【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(0.1-200ng/ml范围内),乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。 人次级淋巴组织趋化因子6Ckine(CCL21)ELISA试剂盒【操作程序总结】准备试剂,样品和标准品 加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟之内读OD值【检测范围】0.1-200ng/ml【规格】96T/盒、48T/盒【贮藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6个月

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2016.11.21

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