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中文名:人纤溶酶原(plg)elisa试剂盒
别名:人纤溶酶原(plg)elisa kit
货号:ym-m007
供应商:上海远慕
规格:48t/96t
保存温度:2-8℃
保存方式:置阴凉干炽避光处
有效期:6个月
人elisa检测试剂盒,人纤溶酶原(plg)elisa kit操作步骤:
方法一?用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1.?包被:用0.05m ph9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2.?加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3.?加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4.?加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的tmb底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5.?终止反应:于各反应孔中加入2m硫酸0.05ml。
6.?结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测o·d值:在人纤溶酶原(plg)检测试剂盒检测仪上,于450nm(若以abts显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔o·d值,若大于规定的阴性对照od值的2.1倍,即为阳性。
方法二?用于检测未知抗体的间接法:
?? 用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔 中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml, 37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用ddw洗涤。
人elisa检测试剂盒,人纤溶酶原(plg)elisa kit 标本的采集及保存:
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃ 后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用edta或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° c 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
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