远慕生物：ELISA试剂盒的操作技巧

上海远慕生物科技有限公司

2017/01/06 15:20

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    ELISA试剂盒的操作技巧
    掌握了实验技巧之后，ELISA试剂盒实验入门新手学起来都会快的多。本篇文章中的小窍门包含了要求、方法等技术，以下就是一些ELISA试剂盒的小窍门：
    1.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
    2.合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。
    3.吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
    4.要尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。
    5.样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。
    6.为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。
    7.未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。
    8.ELISA试剂盒实验中，加样后及时放人孵箱，标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。
    9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
    10.人ELISA试剂盒洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
    11.每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液及2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
    12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15～30s，不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中，防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
    13.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
    14.没有去离子水或双蒸水时，可以使用娃哈哈纯净水配制溶液，切勿使用自来水。
    15.在使用微量加样器时，吸取不同瓶子中液体后要更换枪头，即使吸取标准品溶液。
    16.吸取液体时速度不易太快，以免产生气泡，ELISA试剂盒吸取的量不够准确。
    17.吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸，减少误差。