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上海远慕生物科技有限公司

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公司动态

氨基酸代谢中的意义有哪些?

       谷氨酸是构成蛋白质的20种常见α氨基酸之一。谷氨酸盐在自然界普遍存在的。多种食品以及人体内都含有谷氨酸盐,它即是蛋白质或肽的结构氨基酸之一,又是游离氨基酸,L型氨基酸美味较浓。      谷氨酸是里索逊1856年发现的,为无色晶体,有鲜味,微溶于水,而溶于盐酸溶液,等电点3.22。大量存在于谷类蛋白质中,动物脑中含量也较多。谷氨酸在生物体内的蛋白质代谢过程中占重要地位,参与动物、植物和微生物中的许多重要化学反应。那么,氨基酸代谢中的意义有哪些?下面由远慕生物为您详细讲解:1.谷氨酸参与谷氨酸脱氢酶为中心的联合脱氨基作用(谷氨酸被脱去氨基)。2.在血氨转运中,谷氨酰胺合成酶催化谷氨酸与氨结合生成谷氨酰胺。谷氨酰胺中性无毒,易透过细胞膜,是氨的主要运输形式。3.在葡萄糖-丙氨酸循环途径中,肌肉中的谷氨酸脱氢酶催化α-酮戊二酸与氨结合形成谷氨酸,接着在丙氨酸转氨酶的催化作用下谷氨酸再与丙酮酸形成α-酮戊二酸和丙氨酸。4.在生物活性物质代谢途径中,谷氨酸本身就是兴奋神经递质,在脑、脊髓中广泛存在,谷氨酸脱羧形成的γ-氨基丁酸是一种抑制性神经递质,在生物体中广泛存在。5.在氨基酸合成途径中,谷氨酸是合成谷氨酰胺、脯氨酸、精氨酸、赖氨酸的重要前体。6.在鸟氨酸循环(尿素合成)途径中,线粒体中的谷氨酸脱氢酶将谷氨酸的氨基脱下,为氨甲酰磷酸的合成提供游离的氨;细胞质中的谷草转氨酶把谷氨酸的氨基转移给草酰乙酸,草酰乙酸再形成天冬氨酸进入鸟氨酸循环,谷氨酸为循环间接提供第二个氨基。

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2018.08.01

丙三醇水溶液56-81-5的主要作用

中文名称:甘油标准溶液;丙三醇水溶液标准物质 ;甘油,1,2,3-丙三醇英文名称:Glycerol solutionCAS:56-81-5纯度:Standard for GC, >=99.7%(GC)包装信息:2ml分子式: C3H8O3分子量: 92.09EINECS号:200-289-5储存条件:2-8°C化学性质:   无色、透明、无臭、粘稠液体,味甜,具有吸湿性。 与水和乙醇混溶,水溶液为中性。溶于11倍的乙酸乙酯,约500倍的yi醚。不溶于苯、氯fang、四氯化碳、二硫化碳、石油醚、油类。主要用途:1、是制造硝hua甘油、醋酸甘油、表面活性剂、香精、醇酸树脂和酯胶等的原料,可直接用于防冻液、化妆品、油墨等2、用作基本有机化工原料,广泛用于医药、食品、日用化学、纺织、造纸、油漆等行业3、保水剂(用于面包、蛋糕类);载体溶剂(用于香料、色素、非水溶性防腐剂等);稠化剂(用于饮料、配制酒等);增塑剂(糖果、甜点、肉类制品);甜味剂。EEC规定可用于含醇饮料、糖果、蛋糕、涂层上光、肉和干酪涂层、无醇饮料、焙烤制品、胶姆糖、明胶甜食等。4、甘油是重要的基本有机原料,在工业、医药及日常生活中用途十分广泛,目前大约有1700多种用途,主要用于医药、化妆品、醇酸树脂、烟草、食品、饮酸树脂、赛璐咯和炸yao、纺织印染等方面5、用作溶剂、润滑剂、化妆品、医药及抗冻剂,也用于有机合成6、广泛用于制造醇酸树脂、聚氨酯等,也用于医药、化妆品、纺织印染和炸药等行业7、在机体内水解后可形成营养源。同时还广泛用于纺织、食品、造纸、金属加工、油漆、日化、石油化工、医药、烟草、军工等企业。8、炸药、油漆、皮革、纺织、造纸、电子、印刷等行业。

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2018.08.01

无水葡萄糖有哪些鉴别方法?

       无水葡萄糖,有机化合物,即不含结晶水的葡萄糖。为无色结晶或白色结晶性粉末;无臭、味甜。 水中易溶,在乙醇中微溶。 无水葡萄糖是营养药。可以用于制作葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液、复方乳酸钠葡萄糖注射液等药品。       医药上可配成口服液或静脉注射液作为营养补给,食品工业用作甜味料 用于生物培养基制备及制药工业,也用作还原剂 用作还原剂、食糖,也用于生物培养.那么,我们如何鉴别无糖葡萄糖呢?下面由远慕生物为您详细讲解一下吧!鉴别方法:(1)取该品0.2g,加水5ml溶解后,缓缓滴入温热的(1)取该品0.2g,加水5ml溶解后,缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中,即生成氧化亚铜的红色沉淀。(2)该品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。【检查】 酸度 取该品2.0g,加水20ml溶解后,加酚酞指示液3 滴与0.02mol/L氢氧化钠溶液0.2ml,应显粉红色。溶液的澄清度与颜色 取该品5g,加热水溶解后,放冷,用水稀释至10ml,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液比较,不得更浓;如显色,与对照液(取比色用氯化钴液3ml ,比色用重铬酸钾液3ml 与比色用硫酸铜液6ml 加水稀释成50ml)1.0ml 加水稀释至10ml比较,不得更深。乙醇溶液的澄清度 取该品1.0g,加乙醇20ml,置水浴上加热回流约40分钟,溶液应澄清。       氯化物 取该品0.60g ,依法检查,与标准氯化钠溶液6.0ml 制成的对照液比较,不得更浓(0.01%)。       硫酸盐 取该品2.0g,依法检查,与标准硫酸钾溶液2.0ml 制成的对照液比较,不得更浓(0.01%)。       亚硫酸盐与可溶性淀粉 取该品1.0g,加水10ml溶解后,加碘试液1 滴。应即显黄色。       干燥失重 取该品,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过1.0%。       炽灼残渣 不得过0.1%。       蛋白质 取该品1.0g,加水10ml溶解后,加磺基水杨酸溶液(1→5)3ml ,不得发生浑浊或沉淀。       钡盐 取该品2.0g,加水20ml溶解后,溶液分成2 等份,1 份中加稀硫酸1ml ,另1份中加水1ml ,摇匀,放置15分钟,两液均应澄清。       钙盐 取该品1.0g,加水10ml溶解后,加氨试液1ml与草酸铵试液5ml ,摇匀,放置1小时,如发生浑浊,与标准钙溶液[精密称取碳酸钙0.1250g ,置500ml 量瓶中,加水5ml与盐酸0.5ml使溶解,加水至刻度,摇匀。每1ml相当于0.1mg的钙(Ca)]1.0ml制成的对照液比较,不得更浓(0.01%)。       铁盐 取该品2.0g,加水20ml溶解后,加硝酸3滴,缓缓煮沸5分钟,放冷,加水稀释使成45ml,加硫氰酸铵溶液(30 →100)3.0ml ,摇匀,如显色,与标准铁溶液2.0ml,用同一方法制成的对照液比较,不得更深(0.001%)。       重金属 取该品5.0g,加水23ml溶解后,加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml,依法检查,含重金属不得过百万分之四。       砷盐 取该品2.0g,加水5ml 溶解后,加稀硫酸5ml与溴化钾溴试液0.5ml ,置水浴上加热约20分钟,使保持稍过量的溴存在,必要时,再补加溴化钾试液适量,并随时补充蒸散的水分,放冷,加盐酸5ml ,与水适量使成28ml,依法检查,应符合规定(0.0001%)。

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2018.08.01

CAS:90-05-1愈创木酚标准品的主要作用

中文名称:愈创木酚英文名称:GuaiacolCAS:90-05-1纯度:>99.0%(GC)包装信息:95.2RMB/500G分子式: C7H8O2分子量: 124.14EINECS号:201-964-7储存条件:-15°C化学性质:白色或微黄色结晶或无色至淡黄色透明油状液体。主要用途:1、用于医药、染料及香料中间体2、GB 2760—96规定为暂时允许使用的食用香料。主要用于配制咖啡、香草、熏烟和烟草等型香精。3、用于染料的合成,也用作分析试剂4、在医药上用以制造愈创木酚磺酸钙,在香料工业上用以制造香兰素和人造麝香等。检验铜、氢氰suan和亚硝酸盐5、用于检验铜、氢氰suan和亚硝酸盐生产方法:1、由邻氨基苯甲醚经重氮化和水解而得。由木馏油分馏而得。2、在自然界中愈创木酚存在于愈创树脂或松油中,在木材干馏所得的杂酚油中,愈创木酚是主要的成分,将杂酚油分馏可得该品。日本大阪精化公司以邻硝基氯苯为原料,制成邻硝基苯甲醚,进而还原为邻氨基苯甲醚,最后制得该品。我国生产方法与此大致相同。原料消耗定额:含氨基苯甲醚1250kg/t、硫酸(93%)1500kg/t、亚硝酸钠700kg/t、硫酸铜400kg/t。

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2018.07.31

常见ELISA试剂盒操作过程中的问题有哪些?

       ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:①标本因素;②试剂因素;③操作因素。下面就一些常见ELISA操作过程中的问题一一分析。    1.样品稀释       酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性。因此,国外检测血清抗体的试剂盒,均规定将血清稀释至适当的倍数,以降低非特异性反应,使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性。但是,有些用户未能严格按使用说明书操作,如某些产品应取10μl样品进行稀释,个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释,由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够,因此造成样品稀释倍数不准确,检测结果出现问题。    2.试剂盒平衡       试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分。冬季室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟。    3.样品和试剂的混匀    稀释前、后的样品必须充分混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性。    4.加样    在现在的ELISA商品试剂盒中,必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。    5.温育    温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。一些操作者,擅自改变说明书操作,使用自己喜欢的温育时间和温育温度,这样造成一些不必要的麻烦。因为,不同试剂盒有不同的温育时间和温育温度的选择,随意更改温育时间或者温育温度将导致试验结果出现偏差。    6.洗板    固相免疫测定技术是一种非均相免疫测定技术,需以洗涤操作将特异结合于固相的抗原或抗体与反应温育过程中吸附的非特异成份分离开来,以保证ELISA测定的特异性。洗板对于ELISA测定来说,也是极其关键的一步。洗液尽量不要溢出孔外;加洗液后要静置1分钟,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干;及时更换吸水纸,尤其是拍过酶标记物的吸水纸一定要弃去,否则可能影响试验结果。    7.边缘效应    使用96孔板的ELISA测定中,常发现有“边缘效应”,即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应”,并且可提高测定的重复性。    8.显色    显色一定要控制时间,根据试剂盒说明操作即可。一般来说,显色时间过短,结果偏低;显色时间过长,空白增高或者非特异性显色增加。    9.比色    比色要注意波长的选择。以TMB为底物和以OPD为底物的试剂盒均有使用,而前者比色波长为450nm,后者为492nm,滤光片需根据要求随时更换。因此,容易出现滤光片错用的问题。

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2018.07.31

人谷氨酸脱羧酶自身抗体操作步骤

         人谷氨酸脱羧酶自身抗体酶联免疫分析试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)水平。用纯化的人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab),再与HRP标记的谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)浓度。 操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟8.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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2018.07.31

鲁哥氏染色液(Lugol's碘液,5%) 使用说明书

产品名称:鲁哥氏染色液(Lugol's碘液,5%) 规格:500ml 分类 :微生物染色 储存条件:室温,避光,无菌,12个月 用途: 阴道镜检测,特别适合作为媒染剂对子宫颈进行涂抹染色,进而判断宫颈癌的可能,本试剂不可用于临床诊断。 产品简介:鲁哥氏碘液也称Lugol's碘液或鲁哥氏溶液或鲁哥试剂,是碘和碘化钾的水溶液,是 Lugol在1829年发明,并以其姓名命名。Lugol's碘液过去经常被用作消毒剂和杀菌剂,用于饮用水的应急消毒,实验室中用于检测淀粉等多种物质。 操作步骤: 1、 根据实验具体要求操作或参考如下步骤。 2、 使用盐水棉球或干棉签轻轻插拭子宫颈,注意不应太用力,避免子宫颈上皮破损。 3、 使用Lugol's碘液(5%)浸泡的棉球涂抹子宫颈,棉球应足够大,全部覆盖子宫颈。轻轻用棉球上下左右按压子宫颈(包括子宫颈外口),使Lugol's碘液充分渗透子宫颈上皮。一分钟后,用普通光源照明,直接观察子宫颈上皮对Lugol's碘液的反应。 4、 根据未着色的程度、表面形态、边界状况、大小、与鳞柱交界的距离等,做出初步诊断。正常子宫颈上皮在涂碘后为赤褐色或黑色,未着色区或仅部分碘染为可疑病变区。CIN病变或浸润癌区域呈现厚重的芥末黄或桔黄色白斑。在阴道镜检查中应用碘溶液有助于识别醋酸方法遗漏的病变区域,并将更清晰地显示异常范围。该检测结果分为VILI 阴性、VILI 阳性、可疑癌。结果应记入临床检查表。 注意事项: 1、 Leagene Lugol's碘液(5%,无菌)经无菌处理,注意避免污染。 2、本试剂仅用于科研用途,不可用于临床诊断 3、为了您的安全和健康,请穿戴实验服并带一次性手套操作。

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2018.07.30

如何解冻血清才不会使产品质量受损?

      将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。避免产生沉淀物1、解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃,实验显示非常容易产生沉淀物。2、解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。5、若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理? 欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。何谓热灭活一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时候注意询问厂家是否是已灭活血清。

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2018.07.30

鸡转录因子AP-1(AP-1)ELISA试剂盒的特点

      Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。特点:1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置.

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2018.07.30

人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒实验原理

中文名:人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒使用说明英文简称:Human α1-microglobulin,α1-MG ELISA kit供应商:上海远慕规格:48T , 96T存储条件: 频繁使用时(2-8摄氏度),较长时间储存时(-20摄氏度)有效期:2-8摄氏度最2周,-20摄氏度 存放6个月使用范围:本产品仅科研实验,严禁用于临床使用检测中样品的处理:1.细胞培养物上清:细胞培养物于室温1000g,离心10分钟后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。2.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g,4℃离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后30分钟内于2-8℃,1000g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。4.尿液:无菌收集取初尿,离心除去沉淀物,即可用于检测,要长期保存尿样,可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿样冰冻保护液放入-20℃冰箱长期保存。5.组织匀浆:将组织标本先用PBS洗涤,除去多余血液,匀浆化后放在PBS于-20℃放置过夜,再经过二次反复冻融破膜,5000g,4℃离心5分钟,取上清即可检测。注:取样和样品处理过程中,防止有毒物质对操作人员的危害,要采取相应的保护措施。使用原理:1,ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。2,结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。3,在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。4,用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。5,此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。6,由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

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2018.07.27

小鼠elisa试剂盒的操作步骤

     ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是 ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。     ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,得到全世界科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。     Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。操作步骤:1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40?l,然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂 50?l,空白孔除外。7.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。8.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。9.显色:每孔先加入显色剂 A50,再加入显色剂 B50?l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.10.终止:每孔加终止液 50,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

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2018.07.27

远慕生物为您详解:血清兽药

      根据注入细菌或病毒的不同,以及注射到不同种类的动物体内,得到不同免疫性能的抗毒血清。根据河南顺鑫动物血液制品有限公司的市场调研,当前市场上动物抗毒血清大致分为以下几类抗毒血清:1、猪抗毒血清:猪瘟抗毒血清,猪蓝耳抗毒血清,猪圆环病毒抗毒血清,猪伪狂犬抗毒血清,猪细小病毒抗毒血清,猪口蹄疫抗毒血清,猪流感抗毒血清等。2、禽抗毒血清:小鹅瘟抗毒血清,鸭肝抗体抗毒血清,鸭浆膜炎抗毒血清,禽流感抗毒血清,新城疫血抗毒清等3、牛抗毒血清:牛口蹄疫抗毒血清,奶牛乳房炎抗毒血清,牛流行热抗毒血清,牛病毒性腹泻抗毒血清,牛出血性败血症抗毒血清等4、羊抗毒血清:羊痘抗毒血清,羊口蹄疫抗毒血清,羊小反刍兽疫抗毒血清,羊快疫抗毒血清,羊肠毒血症抗毒血清,羊猝疽抗毒血清,羊黑疫抗毒血清等5、犬抗毒血清:犬狂犬病抗毒血清、犬瘟热抗毒血清、犬副流感抗毒血清、犬腺病毒抗毒血清与犬细小病毒病抗毒高免血清,狐貉水貂的伪狂犬抗毒血清、细小病毒抗毒血清、乙脑抗毒血清等血清主要成份:蒙古黄芪提取液、抗病毒药、ALR、混感血清。性状:本品为黄棕色澄明液体。功能:本品能诱导机体产生干扰素,调节机体免疫功能,促进抗体形成,刺激巨噬细胞吞噬作用,增强机体对病原微生物的吞噬作用,具有抗炎、抗病毒、抗毒素和提高机体免疫功能等作用。主治:1、由猪瘟、伪狂犬病引起的体温升高,精神沉郁,磨牙,流涎,呕吐,肌肉痉挛,食欲减退;便秘、腹泻,拉恶臭粪便或便秘腹泻交替;体表局部出现紫红色出血点,指压不退色;呼吸困难,胸式呼吸等。2、由传染性胃肠炎、流行性腹泻引起的呕吐、腹泻或水样腹泻、下痢、脱水;母猪母乳停止剧烈腹泻等症。3、由猪细小病毒病、蓝耳病引起的母猪多次发情而不受孕,早产、后期流产、产死胎、木乃伊胎、产弱仔猪或产少数仔猪;新生仔猪呼吸困难,运动失调;有时表现耳部发绀等。4、对以上疾病混合感染或与细菌病混合感染都有很好的治疗效果;对鸡传染性法氏囊等病毒性疾病疗效确切。用法用量:肌肉或静脉注射:一次量,每1kg体重,猪0.1-0.2ml, 鸡0.2-0.3ml,一日一次连用2-3天。规格:10ml:黄芪多糖2g,抗病素药1g,其它适量。包装:10ml×10支/盒

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2018.07.27

氨苄青霉素69-53-4的制配方法

中文名称:氨苄青霉素/氨苄西林 英文名称:AMpicillin CAS:69-53-4 包装信息:100Mg,1g,25g,5g分子式: C16H19N3O4S分子量: 349.41EINECS号: 200-709-7 化学性质:白色晶体或粉末。熔点199-202℃,微溶于水和甲醇。几乎不溶于氯仿、乙醚、丙酮和四氯化碳。无臭、味苦。其钠盐易溶于水。 制备方法:先将D(-)-苯甘氨酸的侧链羧酸用氯化剂PCI5。做成酰氯,再与6-APA进行缩合反应而得。在反应罐中加入丙酮和水,降温到-5--10℃时加入6-APA,再加盐酸苯甘氨酰氯,反应0.5h后用10%氢氧化钠调节pH至3.5。反应物用甲苯萃取。取水层,用10%氨水调节pH值约3.0。用活性炭脱色,并过滤。滤液再用氨水调节使pH为4.8。静置,然后过滤,用丙酮洗涤,在40℃以下进行真空干燥得产品。 主要用途:用途:可以半合成广谱青霉素。该品不耐酶,对酸稳定,毒性低。对革兰氏阴性菌和阳性菌都有抑制作用,对大肠肝菌、流感杆菌,沙门氏菌、志贺氏菌和一些变形杆菌的作用较强。 用途: 用于治疗敏感的肠球菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、李斯特菌、产气杆菌、流感杆菌和奇异变形杆菌等 生产方法:先将D(-)-苯甘氨酸的侧链羧酸用氯化剂PCI5。做成酰氯,再与6-APA进行缩合反应而得。在反应罐中加入丙酮和水,降温到-5--10℃时加入6-APA,再加盐酸苯甘氨酰氯,反应0.5h后用10%氢氧化钠调节pH至3.5。反应物用甲苯萃取。取水层,用10%氨水调节pH值约3.0。用活性炭脱色,并过滤。滤液再用氨水调节使pH为4.8。静置,然后过滤,用丙酮洗涤,在40℃以下进行真空干燥得产品。

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2018.07.26

ELISA试剂盒组成及配制

ELISA试剂盒组成及配制1.        酶联板:一块(96孔)2.        标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,600 pg/ml,将其稀释为400 pg/ml后,再做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别稀释成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。如配制200 pg/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。3.        样品稀释液:1×20ml。4.        检测稀释液A:1×10ml。5.        检测稀释液B:1×10ml。6.        检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加 990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。7.        检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。8.        底物溶液:1×10ml/瓶。9.        浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。10.    终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。11.    覆膜:5张12.    使用说明书:1份

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2018.07.26

THBD ELISA试剂盒的操作注意事项

THBD 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知THBD 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将THBD 和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中THBD 的浓度呈比例关系。 操作注意事项1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 操作步骤1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作四次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作四次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育15分钟。避免光照。8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。 

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2018.07.26

CAS:56425-91-3呋嘧醇的使用说明书

中文名称:呋嘧醇英文名称:FlurpriMidolCAS:56425-91-3纯度:98%包装信息:10;100;1kg分子式:C15H15F3N2O2分子量:   312.29 主要用途:呋嘧醇(56425-91-3)的用途:通过根、茎吸收传输到植物顶部,其最大抑制作用在性繁殖阶段。本品属嘧啶醇类植物生长调节剂,赤霉素合成抑制剂。 呋嘧醇(56425-91-3)的制备方法:将对溴苯基三氟甲基醚转化为格氏试剂,与丁腈反应,生成异丙苯基对三氟甲氧基苯基酮,再与5-溴代嘧啶在四氢呋喃-乙醚溶液中,氮气保护下冷却至-70℃,并加丁基锂反应即得。剂型:Cutless,可湿性粉剂(500mg/kg);CutlessTP,原药。 使用方法:1.以0.5~1.5kg/hm2施用,可改善冷季和暖季草皮的质量,也可注射树干,减缓生长和减少观赏植物的修剪次数。以0.4kg/hm2喷于土壤,可抑制大豆、禾本科、菊科的生长,以0.84kg本品+0.07kg伏草胺/hm2桶混施药,可减少早熟禾混合草皮的生长,与未处理对照相比,效果达72%。2.本品用于2年生火炬松、湿地松的叶面表皮部,能降低高度,而且无毒性。3.当以水剂作叶面喷洒时,或以油剂涂于树皮上时,均能使1年的生长量降低到对照树的一半左右。对水稻具有生根和抗倒作用,在分蘖期施药,主要通过根吸收,然后转移至水稻植株顶部,使植株高度降低,诱发分蘖,增进根的生长,在抽穗前40天施药,提高水稻的抗倒能力,不会延迟抽穗或影响产量。 注意事项:(1)本品对眼睛和皮肤有刺激性,应注意防护。(2)贮存于干燥阴凉处。(3)无专用解毒药,对症治疗。分析方法:产品分析和土壤中残留量均可采用带火焰离子化检测它的气相色谱的测定。降解代谢:水溶液遇光水解,水解半衰期天,土壤中Kd1.7(砂壤土)。

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2018.07.25

培养基的分类有哪些?

  培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。那么,培养基根据不同性质又可以分为哪几类呢?一、化学分类1、天然培养基  天然培养基是指一类利用动物、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。例如。牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基和LB培养基等。常用的天然有机营养物质包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培养基成本较低,除在实验室经常使用外,也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。2、组合培养基  合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计而配制的培养基。例如。高氏1号培养基和查氏培养基等。合成培养基有一定的配方,配制合成培养基时重复性强,但与天然培养基相比其成本较高,微生物在其中生长速度较慢,一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。  3、半组合培养基  指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如,马铃薯蔗糖培养基。二、物理分类1、液体培养基  80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。2、固体培养基  一类配制成的固体状态的基质。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。3、半固体培养基  指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。4、脱水培养基  又称预制干燥培养基,指含有除水分外的一切成分的商品培养基。三、微生物分类1、选择性培养基  一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基,具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能,广泛用于菌种筛选等领域。2、鉴别培养基  一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。例如,伊红美蓝乳糖培养基(EMB)。

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2018.07.25

CAS:110-17-8富马酸使用注意事项以及使用范围

       富马酸是一种重要有机化工原料,也是精细化工产品的中间体,同时也是顺酐重要衍生物,广泛用于食品、涂料、树脂、增塑剂领域。在食品行业中,富马酸用作酸味剂,可用于清凉饮料、西式酒、冷饮、浓缩果汁、水果罐头、腌菜、冰淇淋中。用作固体饮料产气剂的酸性物质,气泡持久性好,产品组织细腻。        使用:富马酸是我国GB2760—1996规定允许使用的食品用酸度调节剂、酸化剂、抗氧化助剂、腌制促进剂及食用香料。1. 使用注意事项(1) 本品有强缓冲作用,以保持水溶液在pH 3.0左右,并对抑菌、防腐有重要作用。(2) 本品有涩味,是酸味最强化的固体酸之一。因其在水中的溶解度低,应用较少。但其吸水率低,有助于延长粉末制品等的保存期。(3) 本品成为富马酸钠后,水溶性及风味均更好。2. 使用范围及使用量(1) 我国 《食品添加剂使用卫生标准》 (GB2760—1996) 规定:用于碳酸饮料,最大使用量为0.3g/kg;果汁饮料、生面湿制品为0.6g/kg。(2) 实际使用参考:①用于面条、面包、馒头,在和面时加入,其用量,面条为3g/kg;面包、馒头约1g/kg。②用于果酱和果冻,最大用量3g/kg。单独或与酒石酸及其盐类合用,使pH保持2.8~3.5。③用于清凉饮料、冷饮、浓缩果汁、水果罐头(桃、橘) 等,多与其他有机酸合用。与柠檬酸合用时,其用量为柠檬酸的20%~30%。④用于配制酒及腌菜为2~5 g/kg(与琥珀酸合用)。⑤本品用作固体饮料产气剂的酸性物质时,产品气泡持久、细腻。

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2018.07.25

CAS:1934-21-0酸性黄 23,有哪些生产方法吗?

  上海远慕生物科技有限公司,致力于为生命科学研究领域提供优质产品,为广大科研工作者提供最优质服务。既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生化试剂,标准物质、天然植物提取物及中药标准品,核酸、酶、缓冲剂、显色底物,医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。品种类超过2万种,广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。与客户的共赢,是我们的发展目标。以下是远慕生物为您详细介绍CAS:1934-21-0酸性黄 23的生产方法:1、 由对氨基苯磺酸经重氮化后与1-(4'-磺基苯)-3-羟基-5-吡唑酮偶合制得;也可将双羟基酒石酸钠与苯肼对磺酸缩合,碱化后将生成的色素用食盐盐析,精制而得。 2、双羟基酒石酸钠的制备。在20℃左右时将酒石酸缓缓加入硝酸、硫酸和发烟硫酸的混合物中,搅拌,加完后恒温反应0.5h,然后加水并继续恒温搅拌48h。反应结束后,加入碳酸钠中和(温度不超过20℃),过滤、水洗、烘干得双羟基酒石酸钠。(2)苯肼对磺酸的制。将碳酸钠溶解于13倍量(质量)的热水中,然后加入对氨基苯磺酸,并搅拌,冷却后徐徐加入浓硫酸,并冷却至5℃以下。在3-5℃下缓慢加入1:2(质量比)的亚硝酸钠溶液进行重氮化。反应结束后,物料对刚果红试纸呈强酸性(显蓝色),离心分离,并用洁净水淋洗重氮盐。注意:重氮化合物不能干燥,也不能置于高温处,否则将会爆炸。将结晶亚硫酸钠溶液1.5倍量(质量)的水中,在0-5℃和强烈搅拌下,慢慢加入重氮盐,当物料显亮橘红色并对酚酞试液呈弱碱性时,再继续搅拌保温反应1h。然后将料液加热至沸,慢慢加入盐酸(约0.5h),料液逐渐变为微黄色,继续搅拌,并慢慢加入锌粉直至料液无色为止,并有白色片状结晶析出。冷却过夜、分离、干燥得苯肼对磺酸。(3)柠檬黄的生产。将双羟基酒石酸于1.5倍量(质量)的水中,慢慢加入盐酸,并加热至30℃;然后将苯肼对磺酸加入3倍量(质量)的水中,并加入氢氧化钠溶液搅拌;再将其加入双羟基酒石酸溶液中,在80℃下反应1h。冷却至室温,静置12h,析出黄色沉淀,过滤得粗品。可将粗品溶于60℃的水中,加入适量的碳酸钠使其显弱碱性,再加入精制盐,冷却结晶、分离、干燥得成品。也可由对氨基苯磺酸经重氮化后与1-对磺苯基-3-羧基-5-吡唑酮偶合制得。(4)柠檬黄铝色淀的制备。由氯化铝、硫酸铝等铝盐与碳酸钠等碱类制取氢氧化铝,并添加柠檬黄水溶液,沉淀而得产品。3、由双羟基酒石酸与苯肼对磺酸缩合,或对氨基苯磺酸经重氮化后与1-(4’-磺基苯)-3-羧基-5-吡唑酮偶合,经氯化钠盐析后精制而得。4、双羟基酒石酸钠的制备在20℃左右时将酒石酸缓缓加入硝酸、硫酸和发烟硫酸的混合物中,搅拌,加完后恒温反应0.5h,然后加水并继续恒温搅拌48h。反应结束后,加入碳酸钠中和(温度不超过20℃),过滤、水洗、烘干得双羟基酒石酸钠。苯肼对磺酸的制备将碳酸钠溶解于13倍量(质量)的热水中,然后加入对氨基苯磺酸,并搅拌,冷却后徐徐加入浓硫酸,并冷却至5℃以下;在3~5℃下缓慢加入1:2(质量比)的亚硝酸钠溶液进行重氮化。反应结束后,物料对刚果红试纸呈强酸性(显蓝色),离心分离,并用洁净水淋洗重氮盐。注意:重氮化合物不能干燥,也不能置于高温处,否则将会爆炸。将结晶亚硫酸钠溶于1.5倍量(质量)的水中,在0~5℃和强烈搅拌下,慢慢加入重氮盐,当物料显亮橘红色并对酚酞试液呈弱碱性时,再继续搅拌保温反应1h。然后将料液加热至沸,慢慢加入盐酸(约0.5h),料液逐渐变为微黄色,继续搅拌,并慢慢加入锌粉直至料液无色为止,并有白色片状结晶析出。冷却过夜、分离、干燥得苯肼对磺酸。柠檬黄的生产将双羟基酒石酸溶解于1.5倍量(质量)的水中,慢慢加入盐酸,并加热至30℃;然后将苯肼对磺酸加入3倍量(质量)的水中,并加入氢氧化钠溶液,搅拌;再将其加入双羟基酒石酸钠溶液中,在80 ℃下反应约1h。冷却至室温,静置12h,析出黄色沉淀,过滤得粗品。可将粗品溶于60℃的水中,加{入适量的碳酸钠使其显弱碱性,再加入精制盐,冷却结晶、分离干燥得成品。也可由对氨基苯磺酸经重氮化后与1-(对磺苯基)-3-羧基-5-吡唑酮偶合制得。柠檬黄铝色淀的制备由氯化铝、硫酸铝等的铝盐与碳酸钠等的碱类制取氢氧化铝,并添加柠檬黄水溶液,沉淀而得产品。

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2018.07.24

无水氯化铁存在哪些安全风险吗?

中文名称:无水氯化铁英文名称:FERRIC CHLORIDE, ANHYDROUS纯度:>98%包装信息:500mg,1g,5g,10g,100g分子式:    FeCl3储存方式:密封干燥保存。化学性质:暗色叶状或块状结晶,直射光下呈暗红色。 产品简介:氯化铁是一种共价化合物。又名三氯化铁,是黑色粉末。熔点306℃、沸点315℃,易溶于水并且有强烈的吸水性,能吸收空气里的水分而潮解,由六水三氯化铁失去六个结晶水制得。 主要用途:用途:有机合成催化剂。分析铜、硒和砷,测定酚、胆固醇和胆碱时作指示剂。用途:用于污水处理、线路板蚀刻、不锈钢腐蚀以及媒染剂,是固体三氯化铁的良好替代品,其中HPFCS高纯型用于电子行业高要求的清洗及蚀刻。用途:液体三氯化铁是城市污水及工业废水处理的高效廉价絮凝剂,具有显著的沉淀重金属及硫化物、脱色、脱臭、除油、杀菌、除磷、降低出水COD及BOD等功效。 安全风险 健康危害侵入途径:吸入、食入、经皮吸收。 [2]健康危害:吸入该品粉尘对整个呼吸道有强烈刺激腐蚀作用,损害粘膜组织,引起化学性肺炎等。对眼有强烈腐蚀性,重者可导致失明。皮肤接触可致化学性灼伤。口服灼伤口腔和消化道,出现剧烈腹痛、呕吐和虚脱。慢性影响:长期摄入有可能引起肝肾损害。毒理学资料及环境行为。急性毒性:LD50:1872mg/kg(大鼠经口)危险特性:受高热分解产生有毒的腐蚀性气体氯化氢。燃烧(分解)产物:氯化物。 泄漏处理隔离泄漏污染区,周围设警告标志,建议应急处理人员戴好防毒面具,穿化学防护服。不要直接接触泄漏物,避免扬尘,收集运至废物处理场所处置。使其溶于a.水、b.酸、或c.氧化成水溶液状态,再加硫化物发生沉淀反应,然后废弃。也可以用大量水冲洗,经稀释的洗水放入废水系统。如大量泄漏,收集回收或无害处理后废弃。 防护措施呼吸系统防护:可能接触其粉尘时,应该佩带防尘口罩。必要时佩带防毒面具。眼睛防护:戴化学安全防护眼镜。防护服:穿工作服(防腐材料制作)。手防护:戴橡皮手套。其它:工作后,淋浴更衣。单独存放被毒物污染的衣服,洗后再用。保持良好的卫生习惯。急救措施皮肤接触:立即用水冲洗至少15分钟。若有灼伤,就医治疗。眼睛接触:立即提起眼睑,用流动清水或生理盐水冲洗至少15分钟。就医。吸入:迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。必要时进行人工呼吸。就医。食入:患者清醒时立即漱口,给饮牛奶或蛋清。就医。灭火方法:雾状水、火场周围可用的灭火介质。 风险术语R22吞食有害。R38刺激皮肤。R41对眼睛有严重伤害。 安全术语S26不慎与眼睛接触后,请立即用大量清水冲洗并征求医生意见。S39戴护目镜或面具。S36/37/39穿戴适当的防护服、手套和护目镜或面具。

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2018.07.24

CAS:7782-63-0硫酸亚铁使用说明书

中文名称:硫酸亚铁,七水合物英文名称:Iron(II) sulfate heptahydrateCAS:7782-63-0纯度:AR包装信息:500g/27.6分子式:    FeH14O11S分子量:     278.01EINECS号:    238-676-6储存条件: 2-8°C化学性质:蓝绿色单斜晶系结晶或颗粒,无气味。 溶于水,微溶于醇,溶于无水甲醇。主要用途:用途:用作分析试剂及制铁氧体原料用途:作为饲料添加剂的铁强化剂。用途:农业上可用作农药,能防治小麦黑穗病,苹果和梨的疤痂病、果树的腐烂病;也可用作肥料,能除去树干的青苔及地衣。是制造磁性氧化铁、氧化铁红和铁蓝无机颜料、铁催化剂及聚硫酸铁的原料。医药上用作局部收敛剂及补血剂。此外还用作色谱分析试剂等。食用级用作营养增补剂,如铁质强化剂、果蔬发色剂。饲料级硫酸亚铁,在饲料加工中作为铁的补充剂。用途:作食品铁强化剂.我国规定可用于夹心糖和食盐,使用量为3000~6000mg/kg;在高铁谷类及其制品(每日限食这类食品50g)中为860~960mg/kg;在乳制品和婴幼儿食品中为300- 500mg/kg;在谷类及其制品中为120~140mg/kg;在饮料中为50~100mg/kg。用途:用于制铁盐、氧化铁颜料、媒染剂、净水剂、防腐剂、消毒剂等,医药上作抗贫血药.生产方法:1、生产钛白粉副产法钛铁矿用硫酸分解制钛白粉时,生成硫酸亚铁和硫酸铁,三价铁用铁丝还原成二价铁。经冷冻结晶可得副产硫酸亚铁。5H2SO4+2FeTiO3→2FeSO4+TiOS04+Ti(SO4)2+5H2O硫酸法将铁屑溶解于稀硫酸与母液的混合液中,控制反应温度在80℃以下,否则会析出一水硫酸亚铁沉淀。反应生成的微酸性硫酸亚铁溶液经澄清除去杂质,然后冷却、离心分离即得浅绿色硫酸亚铁。Fe+H2SO4→FeSO4+H2↑2、  硫酸法硫酸与母液混合,用蒸汽加热至80℃时,将废铁屑溶解于反应液中,反应生成的微酸性硫酸亚铁溶液经澄清去除杂质后,再经冷却结晶、离心脱水,制得硫酸亚铁。其Fe+H2SO4→FeSO4+H2↑钛白副产法将硫酸分解钛铁矿制造钛白粉生产中经沉淀、冷冻、分离的副产硫酸亚铁,经重结晶精制,制得硫酸亚铁成品。其FeTio2+2H2SO4→FeSO4+TiOSO4+TiOSO4+2H2O3、(1)生产钛白粉副产法。钛铁矿用硫酸分解制钛白粉时,生成硫酸亚铁和硫酸铁,三价铁用铁丝还原成二价铁。经冷冻结晶可得副产硫酸亚铁。(2)硫酸法。将铁屑溶解于稀硫酸与母液的混合液中,控制反应温度在80℃以下,否则会析出一水硫酸亚铁沉淀。反应生成的微酸性硫酸亚铁溶液经澄清除去杂质,然后冷却,离心分离即得浅绿色硫酸亚铁。 

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2018.07.24

CAS:147-85-3,L-脯氨酸的主要用途有哪些?

中文名称:L-脯氨酸英文名称:2-Pyrrolidinecarboxylic acidCAS:147-85-3纯度:98% 包装信息:MG;100G;500G;1KG分子式: C5H9NO2分子量: 115.13EINECS号: 205-702-2 化学性质:     无色结晶,无臭,味甜;易溶于水(25℃水中溶解度为162.3 g/100 ml)和乙醇,不溶于丁醇及乙醚,遇水合茚三酮试液呈黄色,冰乙酸酸化后显红色;pI6.3,分解点为220-222℃;比旋光度[α]20D-85°(0.5-2.0 mg/ml,H2O),[α]20D-60.4°(0.5-2.0 mg/ml,5 mol/L HCl)。 主要用途:1、  用于生化研究,医药上用于营养不良、蛋白质缺乏症、肠胃疾病、烫伤及术后蛋白质的补充等。2、氨基酸类药。为复方氨基酸大输液原料之一, 用于营养不良, 蛋白质缺乏症, 严重肠胃道疾患, 烫伤及外科手术后的蛋白质补充3、营养增补剂。风味剂,与糖共热发生氨基-羰基反应,可生成特殊的香味物质。按我国GB 2760-86规定可用作香料。4、医药原料及食品添加剂。5、用于生化研究,医药上用于营养不良、蛋白质缺乏症、肠胃疾病、烫伤及术后蛋白质的补充等。氨基酸类药。为复方氨基酸大输液原料之一, 用于营养不良, 蛋白质缺乏症, 严重肠胃道疾患, 烫伤及外科手术后的蛋白质补充。6、营养增补剂。风味剂。与糖共热发生氨基酸-羰基反应,可生成特殊的香味物质

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2018.07.23

血清培养基主要问题以及血清的质量标准

      天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少.血清培养基主要问题1. 血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难。2. 血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制。3. 对大多数细胞,在体内状态,血清不是它们接触的生理学液体,只是在损伤愈合以及血液凝固过程中才接触血清,因此使用血清有可能改变某种细胞在体内的正常状态,血清可能促进某些细胞的生长(成纤维细胞)同时抑制另一类细胞生长(表皮细胞)。4. 血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌毒素等都会影响细胞生长,甚至造成细胞死亡。5. 动物个体不同,血清产地、批号不同,每批质量差异甚大,其成分不能保持一致。6. 取材中可能带入支原体、病毒,对细胞产生潜在影响,可能导致实验失败或实验结果不可靠性。7. 大规模生产中,血清来源越来越困难,价格昂贵,是构成动物细胞培养对生产成本的主要部分之一。血清的质量标准       血清质量高低取决于两方面因素:一是取材对象,二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内,取材过程应严格按照操作规程执行,制备出的血清要经过严格的质量鉴定。WHO公布的《用动物细胞体外培养生产生物制品规程》中的要求:1. 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。2. 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。3. 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。4. 血清要通过滤膜过滤除菌,保证无菌。5. 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染,有些国家要求无细菌噬菌体污染。6. 对细胞有良好的支持繁殖作用。      我国在对牛血清的质量2000年版《中国生物制品主要原辅料质控标准》中提出比较严格的标准要求。包括蛋白质含量,细菌、真菌、支原体、牛病毒、大肠杆菌噬菌体、细菌内毒素,支持细胞增殖检查。

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2018.07.23

在ELISA实验中ELISA试剂盒有哪些操作方法呢?

      Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。那么,在ELISA检测中有哪些操作方法呢?下面远慕生物为您详细介绍一下吧!双抗体夹心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;2.次日洗涤3次;3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;6.’最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

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2018.07.23

培养基的配置原则有哪些?

 培养基的配置原则: 1、选择适宜的营养物质  总体而言,所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源,但由于微生物营养类型复杂,不同微生物对营养物质的需求是不一样的,因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。自养型微生物能从简单的无机物合成自身需要的糖类、脂类、蛋白质、核酸、维生素等复杂的有机物,因此培养自养型微生物的培养基完全可以(或应该)由简单的无机物组成。例如,培养化能自养型的氧化硫硫杆菌(Thiobacillus thiooxdans)的培养基组成见表3.9。在该培养基配制过程中并未专门加入其他碳源物质,而是依靠空气中和溶于水中的CO2为氧化硫硫杆菌提供碳源。  就微生物主要类型而言,有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类及病毒之分,培养它们所需的培养基各不相同。在实验室中常用牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)培养细菌,用高氏I号合成培养基培养放线菌,培养酵母菌一般用麦芽汁培养基,培养霉菌则一般用查氏合成培养基。  2、营养物质浓度及配比合适  培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在抗生素发酵生产过程中,可以通过控制培养基中速效氮(或碳)源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与抗生素的合成协调。  3、控制pH条件  培养基的pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的最适pH条件各不相同,一般来讲,细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是,在微生物生长繁殖和代谢过程中,由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累,会导致培养基pH发生变化,若不对培养基pH条件进行控制,往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降。因此,为了维持培养基pH的相对恒定,通常在培养基中加入pH缓冲剂,常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐(如KH2PO4 和K2HPO4)组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性,KH2PO4溶液呈酸性,两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时,H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物,培养基pH不会过度降低;如果培养基中OH-浓度增加,OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物,培养基pH也不会过度升高。  但KH2PO4 和K2HPO4缓冲系统只能在一定的pH范围内(6.4-7.2)起调节作用。有些微生物,如乳酸菌能大量产酸,上述缓冲系统就难以起到缓冲作用,此时可在培养基中添加难溶的碳酸盐(如CaCO3)来进行调节,CaCO3难溶于水,不会使培养基pH过度升高,但它可以不断中和微生物产生的酸,同时释放出CO2,将培养基pH控制在一定范围内。  在培养基中还存在一些天然的缓冲系统,如氨基酸、肽、蛋白质都属于两性电解质,也可起到缓冲剂的作用。  4、控制氧化还原电位(redox potential)  不同类型微生物生长对氧化还原电位(F)的要求不一样,一般好氧性微生物在F值为+0.1V以上时可正常生长,一般以+0.3一+0.4V为宜,厌氧性微生物只能在F值低于+0.1V条件下生长,兼性厌氧微生物在F值为+0.1V以上时进行好氧呼吸,在+0.1V以下时进行发酵。F值与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产物的影响。在pH相对稳定的条件下,可通过增加通气量(如振荡培养、搅拌)提高培养基的氧分压,或加入氧化剂,从而增加F值;在培养基中加入抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等还原性物质可降低F值。  5、原料来源的选择  在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分,特别是在发酵工业中,培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值。例如,在微生物单细胞蛋白的工业生产过程中,常常利用糖蜜(制糖工业中含有蔗糖的废液)、乳清(乳制品工业中含有乳糖的废液)、豆制品工业废液及黑废液(造纸工业中含有戊糖和己糖的亚硫酸纸浆)等都可作为培养基的原料。再如,工业上的甲烷发酵主要利用废水、废渣作原料,而在我国农村,已推广利用人畜粪便及禾草为原料发酵生产甲烷作为燃料。另外,大量的农副产品或制品,如鼓皮、米糠、玉米浆、酵母浸膏、酒糟、豆饼、花生饼、蛋白胨等都是常用的发酵工业原料。  6、灭菌处理  要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言,更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。在高压蒸汽灭菌过程中,长时间高温会使某些不耐热物质遭到破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖,因此含糖培养基常在0.56kg/ cm2,112.6℃15-30分钟进行灭菌,某些对糖类要求较高的培养基,可先将糖进行过滤除菌或间歇灭菌,再与其他已灭菌的成分混合;长时间高温还会引起磷酸盐、碳酸盐与某些阳离子(特别是钙、镁、铁离子)结合形成难溶性复合物而产生沉淀,因此,在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时,常需在培养基中加入少量螯合剂,避免培养基中产生沉淀,常用的螯合剂为乙二胺四乙酸(EDTA)。还可以将含钙、镁、铁等离子的成分与磷酸盐、碳酸盐分别进行灭菌,然后再混合,避免形成沉淀;高压蒸汽灭菌后,培养基pH会发生改变(一般使pH降低),可根据所培养微生物的要求,在培养基灭菌前后加以调整。  在配制培养基过程中,泡沫的存在对灭菌处理极不利,因为泡沫中的空气形成隔热层,使泡沫中微生物难以被杀死。因而有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生,或适当提高灭菌温度。

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2018.07.20

血清的主要作用以及鉴别方法有哪些?

   我们大家都知道血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。那么,我们提取血清的主要目的有哪些呢?又应该来如何鉴别血清呢?远慕生物为您详细讲解:血清的主要作用:1、提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。2、提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。3、提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。4、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。5、对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。鉴别方法:血清:  血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。  血浆:  血浆是血液的液体成分,血细胞悬浊于其中。人体含有2750-3300毫升血浆,约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水(体积的90%),其中溶解的物质主要是血浆蛋白,还包括葡萄糖、无机盐离子、激素以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血细胞,同时也是运输分泌产物的主要媒介。  将新鲜血液离心,使血细胞沉降,上层淡黄色清液即是血浆。血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子。

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2018.07.20

HEPES缓冲液的配制和使用方法有哪些?

在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。那么,HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?上海远慕生物有限公司为您详细介绍. HEPES缓冲液是一种弱势,在开放式的培养条件中,若加入HEPES,可防止培养基内pH氧化升高,从而将PH维持在7.0左右。 HEPES分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸,分子式: C8H18N2O4S。 HEPES常用于生物缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2,用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。 在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。那么,HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势,在开放式的培养条件中,若加入HEPES,可防止培养基内pH氧化升高,从而将PH维持在7.0左右。 HEPES分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸,分子式: C8H18N2O4S。 HEPES常用于生物缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2,用在生化诊断试剂盒、DNA/rna提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。 HEPES使用方法有两种:(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 调pH至7.2,滤过除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L。 (2)亦可配成 100 x 贮存液(l mol/L),使用前取 99ml培养液加入 lml贮存液,最终应用浓度仍为10mmol/L。l mol/L(100 x)HEPES贮存液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中,用lN NaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。 关于HEPES 缓冲溶液的配制,不同的文献资料有不同的说法。根据用途,一种是单纯的HEPES+NaOH,另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下: 一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH 范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。 二、加少量盐的HEPES Buffer配方(500ml)HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值,最后定容。 三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水,用0.5M NaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。 需要注意的是,HEPES缓冲液的使用终浓度为10-50mmol/L,对细胞无毒性作用。一般情况下,浓度为20mmol/L的HEPES即可达到缓冲能力。现在市售HEPES为约10g包装的小瓶,大家根据实际情况正确灵活配制就OK了。

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2018.07.20

ELISA试剂盒检测过程中的常见问题以及解决方法

  ELISA试剂盒检测过程中的常见问题还是很多的下面所提到的是我司在检测过程中所遇到的一些ELISA产品会出现的问题及解决方法:  1. 加入反应终止液后,没有吸光值或吸光值偏低。  a.原因:未加入酶标记物。  解决办法:请按照操作步骤进行。  b.原因:试剂盒内容物未能充分回。  解决办法:确定试剂盒内容物回温后再进行操作。  c.原因:室温太低。  解决办法:若室温太低(  d.原因:未使用试剂盒的清洗液清洗。  解决办法: 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。  e.原因:试剂盒已过有效期限。  解决办法:请更换成仍在有效期限内的试剂盒。  2. 标准曲线线性不佳,或是平行性不好。  a.原因:温育位置避光不好或受到气流干扰。  解决办法: 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。  b.原因:操作时间拖太久。  解决办法:请在方法熟练后再进行操作。  c.原因:微孔间相互污染。  解决办法: 加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。  d.原因:标准品或酶标记物所加入的量不一致。  解决办法:请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合性。  e.原因:添加样品或试剂的操作方法不正确。  解决办法:加样品或试剂时,吸头请勿接触微孔。  f.原因:洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。  解决办法:请随时监控洗板机洗板过程,洗完后立即进行下一步骤。  3. 吸光值均偏高(或线性不够陡)。  a.原因:室温太高(>25℃)。  解决办法: 若无法降低室内温度,请适当缩短步骤4的温育时间。  b.原因:底物溶液受到污染。  解决办法: 若发现底物溶液已呈现淡蓝色,请不要再使用。  c.原因:反应时间超过太久。  解决办法:请控制反应时间。  d.原因:酶标记物污染了盒内其它试剂。  解决办法:使用过的吸头应立即丢弃,可避免试剂间相互污染,凡是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清洗干净。(先以漂白水浸泡,再以清水冲洗干净,可确保无残留)  4. 阴性标准品的吸光值低于阳性标准品的吸光值。  a.原因:微孔中的试剂未能充分混合。  解决办法: 试剂加完后,需轻敲盘四周使其充分混合均匀。  b.原因:洗板过程发生问题。  解决办法:请随时监控洗板机洗板过程,洗完后立即进行下一步骤。    c.原因:添加样品或酶标记物的量不一致。  解决办法: 请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合性。

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2018.07.19

上海远慕生物为您讲解:ELISA试剂盒的原理以及组成

   Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测.  ELISA试剂盒的基本原理有:    (1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;    (2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;    (3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。ELISA试剂盒由哪些部分组成:    (1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);    (2)酶标记的抗原或抗体(结合物);    (3)酶的底物;    (4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);    (5)结合物及标本的稀释液;    (6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;    (7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的最终体积而异,在板式ELISA中一般采用2mol/L。

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2018.07.19

山羊脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒操作时注意事项有哪些?

中文名:山羊脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒别名:山羊脂蛋白脂酶(LPL)ELISA Kit供应商:上海远慕规格:48t/96t保存:2~8℃有效期:6个月样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。运输方式:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。山羊脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒操作注意事项:(1).实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。(2).试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。(3).使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。(4).不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。  (5).洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。(6).使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。(7).加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。(8).按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。(9).底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。山羊脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒特点:1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置山羊脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒相关产品:大鼠连环蛋白β1,88kDa(钙粘蛋白相关蛋白)(CTNNB1)ELISA试剂盒兔肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)ELISA试剂盒鸡腺苷酸环化酶4(ADCY4)ELISA试剂盒人DcR3;TNFRSF6B()ELISA试剂盒兔原钙黏素1(PCDH1)ELISA试剂盒猴嗜铬粒蛋白A(CgA)ELISA试剂盒大鼠羧酸酯酶1(CES1)ELISA检测试剂盒犬Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)ELISA试剂盒小鼠抗兰尼碱受体钙释放通道抗体(RyR-Ab)ELISA试剂盒人多功能蛋白聚糖(versican)ELISA试剂盒猪免疫球蛋白D(IgD)ELISA试剂盒猪丝氨酸蛋白酶1(PRSS1)ELISA试剂盒人补体成分1,Q子,C链(C1QC)ELISA试剂盒

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