人补体3a（C3a）ELISA试剂盒操作说明

人补体3a（C3a）酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：                                                          96T

8μg/ml - 160μg/ml

使用目的：

人补体3a（C3a）ELISA试剂盒

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中补体3a（C3a）含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人补体3a（C3a）水平。用纯化的人补体3a（C3a）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入补体3a（C3a），再与HRP标记的补体3a（C3a）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的补体3a（C3a）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人补体3a（C3a）浓度。 

试剂盒组成 

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

7

终止液

6ml×1瓶

2

酶标试剂

6ml×1瓶

8

标准品（320μg/ml）

0.5ml×1瓶

3

酶标包被板

12孔×8条

9

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

4

样品稀释液

6ml×1瓶

10

说明书

1份

5

显色剂A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2张  

6

显色剂B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1个

标本要求 

人补体3a（C3a）ELISA试剂盒

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

160μg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

80μg/ml

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

40μg/ml

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

20μg/ml

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

10μg/ml

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作程序总结：

人补体3a（C3a）ELISA试剂盒

计算

  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

保存条件及有效期

人补体3a（C3a）ELISA试剂盒

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月

人原钙黏素1(PCDH1)ELISA试剂盒      Human protocadherin 1,PCDH1 ELISA试剂盒    

人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒      Human Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA试剂盒    

人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒     Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK ELISA试剂盒    

人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)ELISA试剂盒     Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK ELISA试剂盒    

人B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA试剂盒      Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1 ELISA试剂盒    

人结缔组织活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA试剂盒      Human connective tissue-activating peptide Ⅲ,CTAPⅢ ELISA试剂盒    

Human Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor,M-CSFR ELISA试剂盒    

人免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA试剂盒      Human Receptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin A,FcαRⅠ ELISA试剂盒    

人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA试剂盒      Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin E,FcεRⅡ ELISA试剂盒    

人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA试剂盒      Human Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA试剂盒    

人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA试剂盒      Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA试剂盒    

人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA试剂盒      Human Receptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA试剂盒    

人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA试剂盒      Human Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA试剂盒    

人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA试剂盒      Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA试剂盒    

人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA试剂盒      Human ReceptorⅠfor the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA试剂盒     

人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA试剂盒     Human granulocyte chemotactic protein-2,GCP-2 ELISA试剂盒     

Human Interferon ω,IFN-ω ELISA试剂盒    

人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA试剂盒      Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1,GlyCAM-1 ELISA试剂盒    

人干扰素调节因子(IRF)ELISA试剂盒      Human interferon Regulatory Factor,IRF ELISA试剂盒    

人淋巴毒素β(LTB)ELISA试剂盒      Human lymphotoxinβ,LTB ELISA试剂盒    

人淋巴毒素α(LTA)ELISA试剂盒      Human lymphotoxinα,LTA ELISA试剂盒    

人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA试剂盒     Human CC-chemokine receptor 1,CCR1 ELISA试剂盒    

人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA试剂盒     Human CX3C-chemokine receptor 1,CX3CR1 ELISA试剂盒    

人肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA试剂盒      Human pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA试剂盒    

人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA试剂盒     Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1,MAdCAM-1 ELISA试剂盒    

人β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒     Human Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA试剂盒     

人可溶性CD38(sCD38)ELISA试剂盒     Human Soluble Cluster of differentiation 38,sCD38 ELISA试剂盒    

人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA试剂盒      Human Soluble Cluster of differentiation 21,sCD21 ELISA试剂盒    

人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒     Human Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA试剂盒    

人Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒     Human Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA试剂盒    

人转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒      Human transforming growth factors β2,TGFβ2 ELISA试剂盒     

人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒      Human monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA试剂盒     

人白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒     Human leukotriene D4,LT-D4 ELISA试剂盒    

人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)ELISA试剂盒      Human Neural-Cadherin, N-Cad ELISA试剂盒    

Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF ELISA试剂盒    

人红细胞刺激因子(ESF)ELISA试剂盒      Human erythropoiesis stimulating factor,ESF ELISA试剂盒    

人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)ELISA试剂盒      Human TNF related activation induced cytokine,TRANCE ELISA试剂盒    

人生长激素释放因子(GH-RF)ELISA试剂盒      Human growth hormone relasing factor,GH-RF ELISA试剂盒    

人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒      Human macrophage chemotatic factor,MCF ELISA试剂盒    

人α/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA试剂盒      Human Interferon α/βReceptor,IFN-α/βR ELISA试剂盒    

人B细胞生长因子(BCGF)ELISA试剂盒      Human B cell growth protein,BCGF ELISA试剂盒    

人B细胞分化因子(BCDF)ELISA试剂盒      Human B cell differetiation factor,BCDF ELISA试剂盒    

人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA试剂盒      Human Epithelial Cell Adhesion Molecule,Ep-CAM ELISA试剂盒    

人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒      Human soluble adhesion molecules,Sam ELISA试剂盒    

人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒     Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISA试剂盒    

人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA试剂盒     Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISA试剂盒    

人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒     Human thymic stromal lymphopoietin,TSLP ELISA试剂盒    

人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒     Human Perforin/Pore-forming protein,PF/PFP ELISA试剂盒    

人多效生长因子(PTN)ELISA试剂盒     Human pleiotrophin,PTN ELISA试剂盒    

人可溶性CD28(sCD28)ELISA试剂盒     human soluble cluster of differentiation 28,sCD28 ELISA试剂盒     

人淋巴细胞因子ELISA试剂盒     Human lymphocyte factor ELISA试剂盒    

人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA试剂盒      Human thymus activation regulated chemokine,TARC ELISA试剂盒    

人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒      Human Neural cell adhesion molecule ligand 1,NCAM-L1 ELISA试剂盒    

人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒      Human Cobra venom neuronal protective factor,CVNPF ELISA试剂盒    

人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)ELISA试剂盒     Human soluble Tumor Necrosis Factorαreceptor,sTNFαR ELISA试剂盒    

人可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA试剂盒     Human soluble cytokine receptor,sCKR ELISA试剂盒    

人可溶性凋亡相关因子配体(sFASL)ELISA试剂盒     Human soluble Factor-related Apoptosis ligand,sFASL/Apo-1 ELISA试剂盒    

人细胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA试剂盒     Human inhibitor of apoptosis,IAP ELISA试剂盒    

人集落刺激因子(CSF)ELISA试剂盒     Human colony-stimulating factor,CSF ELISA试剂盒    

人γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA试剂盒     Human monocyte interferon gamma inducing factor,MIGF ELISA试剂盒    

人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)ELISA试剂盒     Human Interferon inducible T-cell Chemoattractant,I-TAC ELISA试剂盒    

人CD14分子(CDl4)ELISA试剂盒     Human cluster Of differentiation,CDl4 ELISA试剂盒