人白细胞介素-18（IL-18）ELISA试剂盒操作说明

人白细胞介素-18（IL-18）酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
5 ng/L -180 ng/L
使用目的：

人白细胞介素-18（IL-18）ELISA试剂盒

本试剂盒用于测定人血清、血浆，组织样本中人白细胞介素-18（IL-18）含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-18（IL-18）水平。用纯化的人白
细胞介素-18（IL-18）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细
胞介素-18（IL-18），再与HRP 标记的白细胞介素-18（IL-18）抗体结合，形成抗体-抗原-
酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，
并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-18（IL-18）呈正相
关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介
素-18（IL-18）浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶
2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（320 ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份
5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张
6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个
标本要求
1. 血清：
室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保
存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
2. 血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20
分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
尿液：
用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀
形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。
人白细胞介素-18（IL-18）ELISA试剂盒5.培养细胞:
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。
通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左
右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
6.组织标本:
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化
后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀
浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检
测，其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进
行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
160ng/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
80ng/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
40ng/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
20ng/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
10ng/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此
重复5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
操作程序总结：
人白细胞介素-18（IL-18）ELISA试剂盒计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。
人白细胞介素-18（IL-18）ELISA试剂盒注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计
算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月

人凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒     Human apoptosis inducing factor,AIF ELISA试剂盒    

人白细胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA试剂盒     Human leukocyte common antigen,LCA/CD45 ELISA试剂盒    

人CD4分子(CD4)ELISA试剂盒     Human cluster Of differentiation,CD4 ELISA试剂盒    

人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA试剂盒     Human Placenta Cadherin,P-cad ELISA试剂盒    

人角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒     Human Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISA试剂盒    

人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒     Human Platelet-Derived Growth Factor-BB,PDGF-BB ELISA试剂盒     

人CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒     Human CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISA试剂盒    

人CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒     Human CXC-chemokine receptor 3,CXCR3 ELISA试剂盒    

人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒     Human interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA试剂盒    

人基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒     Human Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA试剂盒    

人淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒     Human lymphotactin,Lptn/LTN ELISA试剂盒    

人α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒     Human Interferon α,IFN-α ELISA试剂盒    

人可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒     Human soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISA试剂盒    

人白介素27(IL-27)ELISA试剂盒     human Interleukin 27,IL-27 ELISA试剂盒     

人白介素23(IL-23)ELISA试剂盒     Human Interleukin 23,IL-23 ELISA试剂盒     

人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒     Human Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA试剂盒    

人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒     Human Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA试剂盒    

人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒     Human interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA试剂盒    

人白介素1(IL-1)ELISA试剂盒     Human Interleukin 1,IL-1 ELISA试剂盒    

人白介素17(IL-17)ELISA试剂盒     Human Interleukin 17,IL-17 ELISA试剂盒     

人白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒     Human Interleukin 1β,IL-1β ELISA试剂盒     

人表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒     Human Epidermal growth factor,EGF ELISA试剂盒     

人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒     Human basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA试剂盒     

人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒     Human macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA试剂盒     

人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒     Human soluble E-selectin,sE-selectin ELISA试剂盒    

人可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒     Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA试剂盒     

人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒     Human intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA试剂盒    

人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒     Human intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA试剂盒     

人结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒     Human connective tissue growth factor,CTGF ELISA试剂盒    

人白介素18(IL-18)ELISA试剂盒     Human Interleukin 18,IL-18 ELISA试剂盒     

人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA试剂盒      Human mucosae associated epithelia chemokine,MEC ELISA试剂盒    

人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA试剂盒      Human mucosae associated epithelia chemokine,MEC ELISA试剂盒    

人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA试剂盒      Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor,BAFF-R ELISA试剂盒    

人血管内皮细胞生长因子受体3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA试剂盒     Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)ELISA试剂盒     Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,VEGFR-1/Flt1 ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒     Human Vascular Endothelial cell Growth Factor D,VEGF-D ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒     Human Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒     Human Vascular Endothelial cell Growth Factor D,VEGF-D ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒     Human Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒     Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒      Human Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒      Human Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA试剂盒     

人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA试剂盒      Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL ELISA试剂盒     

人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒     Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 4,TRAIL-R4 ELISA试剂盒    

人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA试剂盒     Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA试剂盒    

人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA试剂盒     Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1,TRAIL-R1 ELISA试剂盒    

人肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒     Human Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA试剂盒     

人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒      Human Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA试剂盒     

人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒     Human Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA试剂盒     

人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒     Human Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-ⅠELISA试剂盒     

人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒     Human Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA试剂盒     

人转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒     Human transforming growth factor α,TGF-α ELISA试剂盒    

人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒      Human Stromal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISA试剂盒    

人干细胞因子受体(SCFR)ELISA试剂盒     Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA试剂盒     

人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒     Human Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA试剂盒     

人可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒      Human Soluble Cluster of differentiation 40 ligand,sCD40L ELISA试剂盒     

人可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒      Human Soluble Cluster of differentiation 30 ligand,sCD30L ELISA试剂盒     

人正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA试剂盒      Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA试剂盒     

人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA试剂盒     Human P-Selectin/CD62P/GMP140 ELISA试剂盒     

人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒     Human Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA试剂盒     

人血血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒     Human Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA试剂盒     

人神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒     Human Neurotrophin 4,NT-4 ELISA试剂盒     

人神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒     人神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒    

人的神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒      Human Nerve growth factor,NGF ELISA试剂盒     

人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒     Human Macrophage Inflammatory Protein-3β,MIP-3β ELISA试剂盒     

人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA试剂盒     Human Macrophage Inflammatory Protein-3α,MIP-3α ELISA试剂盒     

人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒      Human Macrophage Inflammatory Protein-1β,MIP-1β ELISA试剂盒    

人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒     Human Macrophage Inflammatory Protein-1α,MIP-1α ELISA试剂盒     

人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒     Human Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA试剂盒     

人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒     Human Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA试剂盒     

人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒     Human Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA试剂盒     

人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA试剂盒     Human monocyte chemotactic protein 3,MCP-3 ELISA试剂盒    

人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA试剂盒     Human monocyte chemotactic protein 2,MCP-2 ELISA试剂盒     

人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒     Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA试剂盒    

人L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒     Human L-Selectin ELISA试剂盒     

人白介素9(IL-9)ELISA试剂盒     Human Interleukin 9,IL-9 ELISA试剂盒     

人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒      Human Interleukin 8,IL-8 ELISA试剂盒     

人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒      Human Interleukin 6,IL-6 ELISA试剂盒     

人白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒     Human Interleukin 5,IL-5 ELISA试剂盒     

人白介素4(IL-4)ELISA试剂盒     Human Interleukin 4,IL-4 ELISA试剂盒