人白细胞介素6(IL-6)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
0.8 ng/L -20 ng/L
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素6(IL-6)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素6(IL-6)水平。用纯化的人白细胞
介素6(IL-6)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素
6(IL-6),再与HRP 标记的白细胞介素6(IL-6)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,
经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下
转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素6(IL-6)呈正相关。用酶标仪在450nm
波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素6(IL-6)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶
2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(40ng/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份
5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张
6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个
标本要求
1. 血清:
室温血液自然凝固10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保
存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2. 血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心20
分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
尿液:
用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀
形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。
人白细胞介素6(IL-6)ELISA试剂盒5.培养细胞:
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100 万/ml 左右。
通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左
右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6.组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化
后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀
浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检
测,其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进
行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
8.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
20 ng/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
10 ng/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
5 ng/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2.5 ng/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
1.25 ng/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
人白细胞介素6(IL-6)ELISA试剂盒操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
人白细胞介素6(IL-6)ELISA试剂盒注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
人白细胞介素6(IL-6)ELISA试剂盒
人纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA试剂盒 | Human Fibroblast surface protein,FSP ELISA试剂盒 |
人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA试剂盒 | Human secretory leukocyte protease inhibitor,SLPI ELISA试剂盒 |
人阿黑皮素原(POMC)ELISA试剂盒 | Human pro-opiomelanocortin,POMC ELISA试剂盒 |
人不对称二甲基精氨酸(ADMA)ELISA试剂盒 | Human asymmetrical dimethylarginine,ADMA ELISA试剂盒 |
人血清素/血清胺(ST)ELISA试剂盒 | Human Serotonin,ST ELISA试剂盒 |
人细胞毒素(CTX)ELISA试剂盒 | Human cytotoxin,CTX ELISA试剂盒 |
人α突触核蛋白(α-SYN)ELISA试剂盒 | Human α-Synuclein,α-SYN ELISA试剂盒 |
人糖链抗原19-9(CA19-9)ELISA试剂盒 | Human Carbohydrate antigen19-9,CA19-9 ELISA试剂盒 |
人水蛭素(HRD)ELISA试剂盒 | Human Hirudin,HRD ELISA试剂盒 |
人他克莫司(FK506)ELISA试剂盒 | Human Tacrolimus-FK506 ELISA试剂盒 |
人上皮特异性抗原(ESA)ELISA试剂盒 | Human epithelial specific antigen,ESA ELISA试剂盒 |
人上皮膜抗原(EMA)ELISA试剂盒 | Human Epithelial membrane antigen,EMA ELISA试剂盒 |
人凝聚素(CLU)ELISA试剂盒 | Human clusterin,CLU ELISA试剂盒 |
人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)ELISA试剂盒 | Human anti-OJ-antibody,OJ/IleRS ELISA试剂盒 |
人抗着丝点抗体(ACA/CENP)ELISA试剂盒 | Human Anticentromere Antibody,ACA/CENP ELISA试剂盒 |
人肌细胞生成素(MYOG)ELISA试剂盒 | Human myogenin,MYOG ELISA试剂盒 |
人A组链球菌菌壁多糖抗体(ASP)ELISA试剂盒 | Human antibody to group A streptococcal polysaccharide,ASP ELISA试剂盒 |
人活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA试剂盒 | Human activated protein C resistance,APCR ELISA试剂盒 |
人N端外显肽(Ext-N)ELISA试剂盒 | Human N-terminal extein,Ext-N ELISA试剂盒 |
人分泌成分(SC)ELISA试剂盒 | Human secretory component,SC ELISA试剂盒 |
人二磷酸腺苷(ADP)ELISA试剂盒 | Human Adenosine diphosphate,ADP ELISA试剂盒 |
人蛋白聚糖(PG)ELISA试剂盒 | Human Proteoglycan,PG ELISA试剂盒 |
人吡啶酚(PYD)ELISA试剂盒 | Human Pyridinoline,PYD ELISA试剂盒 |
人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒 | Human 5-hydroxyindolacetic acid,5-HIAA ELISA试剂盒 |
人12羟二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA试剂盒 | Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid,12-HETE ELISA试剂盒 |
人羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒 | Human hydroxyproline,Hyp ELISA试剂盒 |
人一氧化氮(NO)ELISA试剂盒 | Human nitric oxide,NO ELISA试剂盒 |
人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒 | Human Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA试剂盒 |
人维生素C(VC)ELISA试剂盒 | Human Vitamin C,VC ELISA试剂盒 |
人维生素B6(VB6)ELISA试剂盒 | Human Vitamin B6,VB6 ELISA试剂盒 |
人可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒 | Human soluble P-selectin,sP-selectin ELISA试剂盒 |
人基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 | Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA试剂盒 |
人维生素D(VD)ELISA试剂盒 | Human Vitamin D,VD ELISA试剂盒 |
人维生素K1(VK1)ELISA试剂盒 | Human Vitamin K1,VK1 ELISA试剂盒 |
人维生素B12(VB12)ELISA试剂盒 | Human Vitamin B12,VB12 ELISA试剂盒 |
人维生素D3(VD3)ELISA试剂盒 | Human Vitamin D3,VD3 ELISA试剂盒 |
人维生素D2(VD2)ELISA试剂盒 | Human Vitamin D2,VD2 ELISA试剂盒 |
人维生素E(VE)ELISA试剂盒 | Human Vitamin E,VE EELISA试剂盒 |
人维生素A(VA)ELISA试剂盒 | Human Vitamin A,VA ELISA试剂盒 |
人鸟苷酸交换因子(GEF)ELISA试剂盒 | Human Guanine Exchange Factor,GEF ELISA试剂盒 |
人维生素D受体(VD R)ELISA试剂盒 | Human Vitamin D Receptor,VD R ELISA试剂盒 |
人毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA试剂盒 | Human toxic shock syndrome toxin,TSST-1 ELISA试剂盒 |
人金葡菌肠毒素(SE)ELISA试剂盒 | Human staphylococcus aureus enterotoxins,SE ELISA试剂盒 |
人钙联蛋白(CNX)ELISA试剂盒 | Human calnexin,CNX ELISA试剂盒 |
人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA试剂盒 | Human Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone,MIS/AMH ELISA试剂盒 |
人β细胞素(BTC) ELISA试剂盒 | Human beta cellulin,BTC ELISA试剂盒 |
人胎球蛋白A(FETU-A)ELISA试剂盒 | Human Fetuin A,FETU-A ELISA试剂盒 |
人胎盘核糖核酸抑止剂(HPRI)ELISA试剂盒 | Human placental ribonuclease inhibitor,HPRI ELISA试剂盒 |
人胎盘蛋白(PP)ELISA试剂盒 | Human placental protein,PP ELISA试剂盒 |
人胎盘催乳素(HPL)ELISA试剂盒 | Human placenta lactogen,HPL ELISA试剂盒 |
人胎儿血红蛋白(HBF)ELISA试剂盒 | Human anti-cytomegalovirus IgM antibody,anti-CMV IgM ELISA试剂盒 |
人抗巨细胞病毒抗体IgM(anti-CMV IgM)ELISA试剂盒 | Human anti-cytomegalovirus IgM antibody,anti-CMV IgM ELISA试剂盒 |
人抗弓形体IgM抗体(anti-tox IgM)ELISA试剂盒 | Human anti-toxoplasma IgG antibody,anti-tox IgG ELISA试剂盒 |
人抗风疹病毒IgG抗体(anti-RV IgG)ELISA试剂盒 | Human anti-rubella virus IgG antibody,anti-RV IgG ELISA试剂盒 |
人抗EB病毒抗体(EBV)ELISA试剂盒 | Human anti-Epstein-Barr virus antibody,EBV ELISA试剂盒 |
人孕酮受体(PGR)ELISA试剂盒 | Human progesterone receptor,PGR ELISA试剂盒 |
人新生儿促甲状腺素(N-TSH)ELISA试剂盒 | Human Neonatal Thyroid Stimulating Hormone,N-TSH ELISA试剂盒 |
人妊娠特异性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA试剂盒 | Human Pregnancy Specificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-G ELISA试剂盒 |
人胎盘泌乳素(PL)ELISA试剂盒 | Human placetal lactogen,PL ELISA试剂盒 |
人雄激素结合蛋白(ABP)ELISA试剂盒 | Human Androgen Binding Protein,ABP ELISA试剂盒 |
人抗滋养膜细胞抗体(ATA)ELISA试剂盒 | Human anti-trophoblast antibody,ATA ELISA试剂盒 |
人抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 | Human anti-zona pellucida antibody,aZP ELISA试剂盒 |
人抗卵巢抗体(AOAb)ELISA试剂盒 | Human Anti-Ovary Antibody,AOAb ELISA试剂盒 |
人抗巨细胞病毒抗体IgG(anti-CMV IgG)ELISA试剂盒 | Human anti-cytomegalovirus IgG antibody,anti-CMV IgG ELISA试剂盒 |
人碱性胎儿蛋白(BFP)ELISA试剂盒 | Human basic fetoprotein,BFP ELISA试剂盒 |
人抗风疹病毒IgM抗体(anti-RV IgM)ELISA试剂盒 | Human anti-rubella virus IgM antibody,anti-RV IgM ELISA试剂盒 |
人催产素(OT)ELISA试剂盒 | Human oxytocin,OT ELISA试剂盒 |
人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒 | Human pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA试剂盒 |
人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒 | Human Endometrium Antibody,EMAb ELISA试剂盒 |
人抗精子抗体(AsAb)ELISA试剂盒 | Human anti-sperm antibody,AsAb ELISA试剂盒 |
人妊娠疱疹抗体(HG)ELISA试剂盒 | Human Herpes Gestation,HG ELISA试剂盒 |
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