人白细胞介素-8（IL-8）ELISA试剂盒操作说明

人白细胞介素-8（IL-8）酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：人白细胞介素-8（IL-8）ELISA试剂盒                                                          96T

40 ng/L -1200 ng/L

使用目的：

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-8（IL-8）含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-8（IL-8）水平。用纯化的人白细胞介素-8（IL-8）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-8（IL-8），再与HRP标记的白细胞介素-8（IL-8）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-8（IL-8）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-8（IL-8）浓度。 

试剂盒组成 

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

7

终止液

6ml×1瓶

2

酶标试剂

6ml×1瓶

8

标准品（2400 ng/L）

0.5ml×1瓶

3

酶标包被板

12孔×8条

9

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

4

样品稀释液

6ml×1瓶

10

说明书

1份

5

显色剂A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2张  

6

显色剂B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1个

标本要求 

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

人白细胞介素-8（IL-8）ELISA试剂盒

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

1200ng/L

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

600 ng/L

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

300 ng/L

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

150 ng/L

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

75 ng/L

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作程序总结：

计算

人白细胞介素-8（IL-8）ELISA试剂盒

  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书人白细胞介素-8（IL-8）ELISA试剂盒有异，以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月

人协同刺激分子受体(CMR)ELISA试剂盒      Human costimulatory molecules recptor,CMR ELISA试剂盒    

人肽聚糖(PG)ELISA试剂盒      Human peptidoglycan,PG ELISA试剂盒    

人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA试剂盒      Human Lipoarabinomannan,LAM ELISA试剂盒    

人甘露糖(MN)ELISA试剂盒      Human Mannose,MN ELISA试剂盒    

人甘露糖受体(MR)ELISA试剂盒      Human mannose receptor,MR ELISA试剂盒    

人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA试剂盒      Human CpG oligodeoxynucleotide,CpG-ODN ELISA试剂盒    

人甲酰甲硫氨酸(fMet)ELISA试剂盒      Human formylmethionine,fMet ELISA试剂盒    

人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA试剂盒      Human ICE protease-activating factor,IRAP ELISA试剂盒    

人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA试剂盒      Human nonmethylated oligonucleotide,NON ELISA试剂盒    

人蛋白Z(Protein Z)ELISA试剂盒     Human Protein Z ELISA试剂盒    

人蛋白S(Protein S)ELISA试剂盒     Human Protein S ELISA试剂盒    

人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒     Human soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA试剂盒    

人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)ELISA试剂盒     Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon,C/EBPε ELISA试剂盒     

人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA试剂盒     Human CCAAT/enhancer binding protein deta,C/EBPδ ELISA试剂盒    

人CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)ELISA试剂盒     Human CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα ELISA试剂盒     

人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA试剂盒     Human 2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPG ELISA试剂盒    

人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)ELISA试剂盒     Human lumican,LUM ELISA试剂盒    

人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA试剂盒     Human Na+/H+ exchanger 3,NHE3 ELISA试剂盒    

人孤腓肽(OFQ/N)ELISA试剂盒     Human orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA试剂盒    

人基质裂解素(ST1)ELISA试剂盒      Human Stromelysin-1,ST1 ELISA试剂盒    

人基质裂解素(ST2)ELISA试剂盒      Human Stromelysin-2,ST2 ELISA试剂盒    

人基质裂解素(ST3)ELISA试剂盒      Human Stromelysin-3,ST3 ELISA试剂盒    

人脂氧素A4(LXA4)ELISA试剂盒      Human Lipoxin A4,LXA4 ELISA试剂盒    

人蛋白酶3特异性抗中性粒细胞胞质抗体(PR3-ANCA)ELISA试剂盒     Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody,PR3-ANCA ELISA试剂盒    

人β-促脂素(β-LPH)ELISA试剂盒      Human β-lipotropic hormone,β-LPH ELISA试剂盒    

人脂磷壁酸(LTA)ELISA试剂盒      Human lipoteichoic acids,LTA ELISA试剂盒    

人乙胺碘呋酮(AD)ELISA试剂盒      Human amiodarone,AD ELISA试剂盒    

人唾液酸(SA)ELISA试剂盒      Human Sialic acid,SA ELISA试剂盒    

人鞘磷脂(SM)ELISA试剂盒      Human sphingomyelin,SM ELISA试剂盒    

人尿游离皮质醇(UFC)ELISA试剂盒      Human urinary free cortisol,UFC ELISA试剂盒    

人硫酸软骨素(CS)ELISA试剂盒      Human chondroitin sulfate,CS ELISA试剂盒    

人硫酸皮肤素(DS)ELISA试剂盒      Human dermatan sulfate,DS ELISA试剂盒    

人硫酸类肝素(HS)ELISA试剂盒      Human heparan sulfate,HS ELISA试剂盒    

人硫酸角质素(KS)ELISA试剂盒      Human keratan sulfate,KS ELISA试剂盒    

人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒      Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody,ASCA ELISA试剂盒    

人迟现抗原4(VLA4)ELISA试剂盒      Human very late appearing antigen 4,VLA4 ELISA试剂盒    

人吖啶橙(AO)ELISA试剂盒     Human Acrine Orange,AO ELISA试剂盒    

人甲胺喋呤(MTX)ELISA试剂盒      Human methotrexate,MTX ELISA试剂盒    

人对氨基苯甲酸(PABA)ELISA试剂盒      Human para-aminobenzoic acid,PABA ELISA试剂盒    

人苯丙氨酸(LPA)ELISA试剂盒      Human L-phenylalanine,LPA ELISA试剂盒    

人免疫核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒      Human Immune RNA,Irna ELISA试剂盒    

人β萘酚(β-Nph)ELISA试剂盒      Human Beta-naphthol,β-Nph ELISA试剂盒    

人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒      Human β-Lactamase inhibitors,BLI ELISA试剂盒    

人α半乳糖基抗体(Gal)ELISA试剂盒      Human α-galactoyl,Gal ELISA试剂盒    

人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒      Human αN-acetylglucosaminidase,αNAG ELISA试剂盒    

人α2纤溶酶抑制物(α2-PI)ELISA试剂盒      Human α2-plasmin inhititor,α2-PI ELISA试剂盒    

人烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA试剂盒      人高香草酸(HVA) ELISA试剂盒    

人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)ELISA试剂盒     Human cadherln-related neuronal receptor1,CNR-1 ELISA试剂盒    

人毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)ELISA试剂盒     Human Ataxia telangiectasia mutated,ATM ELISA试剂盒    

人芳香烃受体(AhR)ELISA试剂盒      Human aryl hydrocarbon receptor,AhR ELISA试剂盒    

人特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)ELISA试剂盒      Human Specifie Macrophage Arming Paetot,SMAF ELISA试剂盒    

人促有丝分裂因子(MF/MPF)ELISA试剂盒      Human maturation promoting factor,MF/MPF ELISA试剂盒    

人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISA试剂盒     Human activating transcription factor-1,ATF-1 ELISA试剂盒    

人抗鼠抗体(HAMA)ELISA试剂盒      Human antimous antibody,HAMA ELISA     

人抗鼠抗体(HAMA)ELISA试剂盒      Human antimous antibody,HAMA ELISA     

人钙离子通道抗体(VGCC)ELISA试剂盒     Human voltage-gated calcium channel,VGCC ELISA试剂盒    

人溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒      Human Bromodeoxyuridine,BrdU ELISA试剂盒    

人纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA试剂盒     Human Fibroblast surface protein,FSP ELISA试剂盒    

人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA试剂盒     Human secretory leukocyte protease inhibitor,SLPI ELISA试剂盒    

人阿黑皮素原(POMC)ELISA试剂盒     Human pro-opiomelanocortin,POMC ELISA试剂盒    

人不对称二甲基精氨酸(ADMA)ELISA试剂盒     Human asymmetrical dimethylarginine,ADMA ELISA试剂盒    

人血清素/血清胺(ST)ELISA试剂盒      Human Serotonin,ST ELISA试剂盒