兔补体蛋白4(C4)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
7μg/ml -200μg/ml
兔补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒使用目的:
本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中补体蛋白4(C4)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔补体蛋白4(C4)水平。用纯化的兔补体蛋白
4(C4)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入补体蛋白4(C4),再
与HRP 标记的补体蛋白4(C4)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后
加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄
色。颜色的深浅和样品中的补体蛋白4(C4)呈正相关。兔补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度
(OD 值),通过标准曲线计算样品中兔补体蛋白4(C4)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(400μg/ml) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,兔补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
200μg/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
100μg/ml 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
50μg/ml 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
25μg/ml 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
12.5μg/ml 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,兔补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
猪Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒 Porcine Bcl-2 Assaciated X protein,BAX ELISA试剂盒
猪氢化可的松(HYD)ELISA试剂盒 Porcine Hydrocortisone,HYD ELISA试剂盒
猪一氧化氮(NO)ELISA试剂盒 Porcine nitric oxide,NO ELISA试剂盒
猪内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 Porcine Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA试剂盒
猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 Porcine Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA试剂盒
猪血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒 Porcine Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA试剂盒
猪血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA试剂盒 Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA试剂盒
猪血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒 Porcine Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA试剂盒
猪乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 Porcine acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA试剂盒
猪热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒 Porcine Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA试剂盒
猪热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒 Porcine Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA试剂盒
猪热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒 Porcine Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA试剂盒
猪热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒 Porcine Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA试剂盒
猪C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 Porcine C-reactive protein,CRP ELISA试剂盒
猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒 Porcine Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA试剂盒
猪主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA试剂盒 swine major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡ ELISA试剂盒
猪可溶性P选择素(sP-Selectin)ELISA试剂盒 Porcine soluble P-selectin,sP-Selectin ELISA试剂盒
猪白介素17(IL-17)ELISA试剂盒 Porcine interleukin 17,IL-17 ELISA试剂盒
猪髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 Porcine myelin basic protein,MBP ELISA试剂盒
猪生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒 Porcine Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA试剂盒
猪α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 Porcine Interferon α,IFN-α ELISA试剂盒
猪磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒 Porcine phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA试剂盒
猪乙酰胆碱(ACh)ELISA试剂盒 Porcine acetylcholine,ACH ELISA试剂盒
猪主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA试剂盒 swine major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢ ELISA试剂盒
猪肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒 Porcine Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA试剂盒
猪雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒 Porcine Estradiol receptor,ER ELISA试剂盒
猪补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒 Porcine Complement 3,C3 ELISA试剂盒
猪骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒 Porcine Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA试剂盒
猪肾上腺素(EPI)ELISA试剂盒 Porcine Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA试剂盒
猪脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 Porcine lipoprotein α,Lp-α ELISA试剂盒
猪促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒 Porcine thyrotropin-releasing hormone,TRH ELISA试剂盒
猪抗凝血酶受体(ATR)ELISA试剂盒 Porcine anti-thrombin receptor,ATR ELISA试剂盒
猪组胺(HIS)ELISA试剂盒 Porcine Histamine,HIS ELISA试剂盒
猪雌二醇(E2)ELISA试剂盒 Porcine Estradiol,E2 ELISA试剂盒
猪转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 Porcine transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA试剂盒
猪肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 Porcine tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA试剂盒
猪脂联素(ADP)ELISA试剂盒 Porcine adiponectin,ADP ELISA试剂盒
猪载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 Porcine apoprotein B100,apo-B100 ELISA试剂盒
猪载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒 Porcine apoprotein A1,apo-A1 ELISA试剂盒
猪胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒 Porcine insulin-like growth factors binding protein 3,IGFBP-3 ELISA试剂盒
猪胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒 Porcine insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA试剂盒
猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒 Porcine insulin-like growth factors-1,IGF-1 ELISA试剂盒
猪胰岛素(INS)ELISA试剂盒 Porcine Insulin,INS ELISA试剂盒
猪血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒 Porcine platelet activating factor,PAF ELISA试剂盒
猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒 Porcine Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA试剂盒
猪血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒 Porcine Fibrinogen,Fbg ELISA试剂盒
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