兔补体蛋白3(C3)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
15μg/ml -400μg/ml
兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒使用目的:
本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中补体蛋白3(C3)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔补体蛋白3(C3)水平。用纯化的兔补体蛋白
3(C3)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入补体蛋白3(C3),再
与HRP 标记的补体蛋白3(C3)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后
加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄
色。颜色的深浅和样品中的补体蛋白3(C3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度
(OD 值),通过标准曲线计算样品中兔补体蛋白3(C3)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(800μg/ml) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
400μg/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
200μg/ml 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
100μg/ml 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
50μg/ml 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
25μg/ml 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
猪透明质酸(HA)ELISA试剂盒 Porcine Hyaluronic acid,HA ELISA试剂盒
猪瘦素(LEP)ELISA试剂盒 Porcine Leptin,LEP ELISA试剂盒
猪生长抑素(SS)ELISA试剂盒 Porcine Somatostatin,SS ELISA试剂盒
猪生长激素(GH)ELISA试剂盒 Porcine growth hormone,GH ELISA试剂盒
猪皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒 Porcine Corticosterone,CORT ELISA试剂盒
猪皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒 Porcine Cortisol ELISA试剂盒
猪脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒 Porcine brain natriuretic peptide,BNP ELISA试剂盒
猪内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒 Porcine endothelin 1,ET-1 ELISA试剂盒
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猪免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒 Porcine Immunoglobulin G,IgG ELISA试剂盒
猪免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 Porcine Immunoglobulin E,IgE ELISA试剂盒
猪可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒 Porcine soluble Vascuolar cell adhesion molecules 1,sVCAM-1 ELISA试剂盒
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猪睾酮(T)ELISA试剂盒 Porcine Testoterone,T ELISA试剂盒
猪肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 Porcine hepatocyte growth factor,HGF ELISA试剂盒
猪γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 Porcine Interferon γ ,IFN-γ ELISA试剂盒
猪端粒酶(TE)ELISA试剂盒 Porcine telomerase,TE ELISA试剂盒
猪促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒 Porcine growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA试剂盒
猪促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒 Porcine Follicle-stimulating hormone,FSH ELISA试剂盒
猪Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 Porcine Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA试剂盒
猪表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒 Porcine Epithelial growth factor,EGF ELISA试剂盒
猪白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒 Porcine interleukin 8,IL-8 ELISA试剂盒
猪白介素6(IL-6)ELISA试剂盒 Porcine Interleukin 6,IL-6 ELISA试剂盒
猪白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 Porcine interleukin 4,IL-4 ELISA试剂盒
猪白介素3(IL-3)ELISA试剂盒 Porcine interleukin 3,IL-3 ELISA试剂盒
猪白介素2(IL-2)ELISA试剂盒 Porcine interleukin 2,IL-2 ELISA试剂盒
猪白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒 Porcine Interleukin 1β,IL-1β ELISA试剂盒
猪白介素18(IL-18)ELISA试剂盒 Porcine Interleukin 18,IL-18 ELISA试剂盒
猪白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒 Porcine leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA试剂盒
猪白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 Porcine interleukin 10,IL-10 ELISA试剂盒
猪白介素1(IL-1)ELISA试剂盒 Porcine Interleukin 1,IL-1 ELISA试剂盒
猪Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 Porcine N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA试剂盒
猪Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA试剂盒 Porcine Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISA试剂盒
猪细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒 Porcine intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA试剂盒
猪细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒 Porcine intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA试剂盒
猪纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒 Porcine plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA试剂盒
猪纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒 Porcine plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA试剂盒
猪血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒 Porcine Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA试剂盒
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猪血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒 Porcine platelet-derived growth factor,PDGF ELISA试剂盒
猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒 Porcine oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA试剂盒
猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒 Porcine Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA试剂盒
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