流式实验——红细胞的裂解材料针对外周血,组织中红细胞。方法:1、裂解小鼠脾脏红细胞通常一个脾脏使用5mi裂解液,裂解5分钟左右,最长不超15min。裂解人类组织同小鼠。裂解小鼠外周血可以按照裂解液与血液体积比10:1的比例来裂解。 2、裂解至溶液透亮后加入2倍以上体积的PBS,终止裂解。然后离心,PBS洗涤一次。
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2015.06.25
研发隐球菌疫苗可行性有多高?是一种有囊膜的真菌,也是隐球菌病的首要病原体。这种隐球菌病可能会引起真菌性肺炎和中枢神经系统病变。或者包括比较严重的疾病如脑膜炎。该真菌可以通过人体吸入菌体或者干燥孢子而感染人体,很多人呈现出无明显症状;症状严重者通常伴随着免疫系统的强烈反应。据估计全球每年大约一百万例脑膜炎,其中有大约62.5万例死亡。现有的治疗方法并不能有效清除这些真菌,其原因在于该菌的耐药性、药物副作用和高昂的价格。《Plos Pathogens》发文讨论了研制针对隐球菌的疫苗的可行性。 那么,针对C. neoformans开发疫苗会不会是一个明智的选择呢?对于免疫力低下的患者,试图重建免疫功能确实能够导致隐球菌发病减少。但是隐球菌病相关的免疫重建炎症通常是非常致命的。这种炎症常常出现在同时携带者HIV并进行过抗反转录病毒治疗的患者,以及免疫抑制治疗的器官移植患者身上。如果要研制疫苗,那么就需要明确,疫苗会不会加重免疫系统对人体的伤害? 免疫保护在免疫缺陷患者身上可以实现么?实验证明,针对隐球菌病,人体免疫保护机制是通过TH1型CD+4 T淋巴细胞介导触发的。通过一系列的细胞因子、干扰素、肿瘤坏死因子完成对 C. neoformans的抑制。而在免疫缺陷患者身上,这些TH1型CD+4 T淋巴细胞数量很低。而CD8+T淋巴细胞可能也参与了C. neoformans的免疫反应,而且可以弥补TH1型CD+4 T淋巴细胞的不足。而通过抗体介导的免疫一直以来常常被用于疫苗介导的抗病毒或者病原菌。有研究表明,针对TH1型C. neoformans的抗体具有较好效果,然而还需要更深入的证明。还有其他证据也证明了,抗C. neoformans感染的疫苗可能会有长期的抗菌效果。 还有种设想是通过“训练”天然抗菌免疫细胞更好地杀死隐球菌。有证据表明,巨噬细胞对抗原存在一定的记忆。如果有一种治疗方法针对这些巨噬细胞,让它们有更强大的免疫能力,可能会帮助免疫缺陷患者抵抗隐球菌。 最后,作者总结道,针对隐球菌的疫苗还是可行的。但是还是需要更具体的考量。对于免疫缺陷患者,问题更加复杂,会让普通疫苗效果大减。通过训练巨噬细胞的策略,利用其有“记忆”能力的特点,可能会导致机体对隐球菌有长效的免疫抵抗作用。
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2015.06.25
中科院科学家在淀粉样纤维的生物纳米材料研究取得新进展2015年6月1日,中国科学院生物物理研究所柯莎(Sarah Perrett)课题组在《ACS Nano》在线发表了题为“Enzymatically Active Microgels from Self-Assembling Protein Nanofibrils for Microflow Chemistry”的研究成果,介绍了该课题组发展的将蛋白淀粉样纤维应用为生物纳米材料的新方法。淀粉样纤维是蛋白或多肽自发组装形成的一种高度有序的纤维状聚集体,不仅与哺乳动物的神经退行性疾病相关,而且也会参与生物体正常生理功能。而目前在该领域出现的挑战在于如何能够使这些淀粉样蛋白不经过外界的强刺激在温和条件下实现其自组装。多年来,柯莎课题组致力于研究淀粉样纤维的形成以及传播机制。同时,柯莎课题组也开展了淀粉样纤维作为生物材料的应用研究,因为淀粉样纤维作为一种由蛋白自发组装形成的有序聚集体,具有良好的稳定性和形态多样性,体现出良好的生物纳米材料特性。微凝胶作为一种微米尺寸的三维网状胶体颗粒,具有独特而重要的应用价值。在生物医学领域,微凝胶可以被应用为药物的运输和缓释载体,也可以被制备成微型生物反应器,还可以被应用到组织修复中等。然而,目前对于微凝胶的制备,还主要集中于利用化学有机分子形成的高聚物,应用于生物医学领域时,难以克服生物相容性和可生物降解等问题。通常来讲,利用生物体内天然存在的大分子制备凝胶能够更好地模拟生物体条件或不引起强烈的免疫排斥。在之前的研究中,柯莎组已经利用酵母淀粉样性质蛋白Ure2作为纳米骨架分子,实现了活性酶分子在淀粉纤维表面的高效固定化展示。基于此研究,柯莎组结合微流控技术,将融合有活性酶分子的Ure2蛋白制备成均一的微米液滴,通过蛋白在液滴内自发组装形成淀粉样纤维,制备出结构和性质良好的微凝胶,并具有相应生物酶活性。与传统的以化学有机分子为材料制备的微凝胶相比,蛋白微凝胶或具有更好的生物医学应用前景。
会展
2015.06.23
大鼠组织因子(TF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T8ng/L - 240ng/L 使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中组织因子(TF)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠组织因子(TF)水平。用纯化的大鼠组织因子(TF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入组织因子(TF),再与HRP标记的组织因子(TF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的组织因子(TF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠组织因子(TF)浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(480ng/L) 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个 标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。240ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 120ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 60ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 30ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 15ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结: 计算 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月
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2015.06.23
人白介素17(IL-17)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 48T0.7 ng/L -20 ng/L 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、龈沟液及相关液体样本中白介素17(IL-17)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素17(IL-17)水平。用纯化的人白介素17(IL-17)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素17(IL-17),再与HRP标记的白介素17(IL-17)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素17(IL-17)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白介素17(IL-17)浓度。 试剂盒组成 1 20倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 3ml×1瓶 2 酶标试剂 3ml×1瓶 8 标准品(40ng/L) 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×3条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 3ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 3ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 3ml×1/瓶 12 密封袋 1个 标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。20 ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 10 ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 5 ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 2.5 ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 1.25 ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结: 计算 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月
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2015.06.23
2015年SCI影响因子新鲜出炉!北京时间6月19日,汤森路透《SCI期刊分析报告》(Journal Citation Reports)新鲜出炉,今年的报告涵盖82个国家237个大类11149本期刊,其中53%的期刊影响因子较去年有所增加,43%的期刊有所下降。三甲依然不变,CA-Cancer J Clin,NEJM和CHEM REV。第4-7位分别为Lancet,Nature Reviews Drug Discovery,Nature Biotech,Nature,Nature系列可谓是大丰收。影响因子在一定程度上的确是一本杂志质量高低的标准之一,并且能够带来科学以外太多的东西:教职、基金申请、学术影响力等。尽管很多学者批评过杂志的影响因子,但是在发表论文时,他们仍旧是顶级杂志的拥趸。在医学类期刊中,医学类排在第一的是Ca-Cancer J Clin,影响因子为115.84,去年为162.500,第二的是NEJM,影响因子为55.873,去年为54.420,CHEM REV杂志依旧占据第三位46.568,去年为45.661。三大著名的杂志影响因子分别为:Nature(41.456,相对于去年下降),Cell(32.242,相对于去年下降),Science(33.611,相对于去年上升)。中国期刊Cell Research达到了12.4分;Molecular Plant为6.3分;Journal of Molecular Cell Biology为6.771;Acta Biochimica et Biophysica Sinica为2.19;而Neuroscience Bulletin达到了2.5。
厂商
2015.06.19
上海信裕2015端午节放假通知 尊敬的客户,公司各职员: 您们好!感谢大家长期关注上海信裕生物动态,根据国家法定假期的规定,并结合公司实际情况,现对端午节放假做如下安排:一、放假时间6月20日至22日(星期六至星期一)放假,共3天。其中,6月20日(星期六)为端午节假期,6月21日(星期日),6月22日(星期一)为法定节假日照常补休。二、请公司各职员做好自己的节前工作安排。三、放假期间本公司不安排人员值班,如有订购产品请发送留言至我司网站平台,我们会在节后上班第一时间及时为您办理订货发货。各网站均有在线留言咨询栏。对此给您带来的不便我们深感抱歉。感谢你的支持与理解。 上海信裕 特此通知!
厂商
2015.06.19
Human Clostridium Difficile Tox B 人难辨梭状芽孢杆菌毒素B(CDTB)英文说明书定性FOR RESEARCH USE ONLY 96 determinationsPurposeThis kit allows for the determination of CDTB expression in Human serum, and other biological fluids.Principle of the assayThe kit assay CDTB level in the sample,use Purified CDTB antibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then add CDTB to wells, Combined With CDTB, after washing and removing non-combinative antibody and other components ,then Combined CDTB antibody which with HRP labeled become antibody – antigen - enzyme- antibody complex, after washing Completely, Add TMB substrate solution,, TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. Compared with the CUTOFF value, according to this to judge CDTB exist in the sample or not.Materials provided with the kit1 wash solution 20ml×1bottle 7 Stop Solution 6ml×1 bottle 2 HRP-Conjugate reagent 6ml×1 bottle 8 Positive control 0.5ml×1 bottle 3 Microelisa stripplate 12well×8strips 9 Negative control 0.5ml×1bottle 4 Sample diluent 6ml×1 bottle 10 Instruction 1 5 Chromogen Solution A 6ml×1 bottle 11 Closure plate membrane 2 6 Chromogen Solution B 6ml×1 bottle 12 Sealed bags 1 Specimen requirements1. extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.2. Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.Assay procedure1.Number: to sample correspond microtitration well and Number Sequence, each plate should be set feminine comparison 2 wells, masculine comparison 2 wells, blank comparison 1 well(don’t add sample and HRP-Conjugate reagent to blank comparison well, other each step the operation are same).2.add sample:separately add Positive control and Negative control 50μl to the Positive and Negative well . add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl. add sample to the bottom of ELISA plates coated well , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃. 4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water until 600ml,and reserve.5.washing:Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.6.add enzyme:Add HRP-Conjugate reagent 50μlto each well, except the blank well. 7.incubate:Operation with 3.8.washing:Operation with 5.9.color:Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃10.Stop the reaction:Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).11. assay:take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.Determine the resultTest validity: the average of Positive control well≥1.00; the average of Negative control well ≤0.10.Calculate Critical(CUT OFF) : Critical= the average of Negative control well + 0.15.Negative control: sample ODPositive control: ample OD≥ Calculate Critical(CUT OFF) is CDTB Positive control.Important notes1.Please according to use instruction strictly, Do not mix reagents with those from other lots.2.The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature then use, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.3.washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.4.Closure plate membrane only limits the disposable use, in order to avoid the overlapping pollution5.The substrate please evade the light preservation.6.The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard, when use dual-wavelength to assay, Reference wavelength is 630nm.7.All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process. Stopp Solution is 2M sulphuric acid. You must pay attention to safe when use .Storage and validity1.Storage: 2-8℃.2.validity: six months.
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2015.06.17
人囊虫IgG抗体(CYT-IgG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。96T使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中囊虫IgG 抗体(CYT-IgG)表达。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人囊虫IgG 抗体(CYT-IgG)表达。用纯化的人甲肝病毒抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中囊虫IgG 抗体(CYT-IgG)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP 标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF 值相比较,从而判定标本中人囊虫IgG 抗体(CYT-IgG)的存在与否。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 阳性对照0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 阴性对照0.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。尿液:用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。6.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结:计算和结果判定:试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定:样品OD 值阳性判定:样品OD 值≥ 临界值(CUT OFF)者为囊虫IgG 抗体(CYT-IgG)阳性。注意事项1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物请避光保存。6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M 的硫酸,使用时必须注意安全。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 个月
百态
2015.06.17
HIV家族树可揭示病毒传播机制HIV病毒非常善于躲避免疫系统的追踪同时也让HIV的疫苗研究停滞不前。这种“特异功能”或许也正可以成为HIV病毒的致命弱点。最新一期的《Science》发表了一篇评论文章,分析了如何通过分析HIV病毒的家族进化树来研究病毒的传播扩散。HIV病毒是一种RNA病毒,变异速率很快。这就导致每一代的新的HIV病毒和他们的父辈在遗传物质上略有差异。如果两株分离的HIV病毒遗传物质的核酸序列越接近,他们可能越晚从共同的祖先那分开。了解到这样信息,我们可以追踪病毒的传播扩散方式,进而制定精准的干扰治疗策略来针对HIV病毒。这个方法的核心假设是,如果两个人携带的HIV病毒的核酸序列差异小于1.5%,那么很可能这两个人来自于同一个“传染群体”(transmission cluster),他们HIV感染事件是密切相关的。通常认为,HIV病毒在传代过程中的突变率是恒定的,研究者可以据此构建一个生物分子钟来估算携带者是何时感染病毒的。再结合在同一个地理区域内的HIV携带者那得到的信息,研究者能够构建类似航线图那样的图像来估测HIV病毒的传播方向和速率。已经有几个课题组进行了类似的研究。一个雄心勃勃的团队(PANGEA_HIV)计划测序超过2万人携带的HIV病毒基因组。这些携带者将来自于四个泛撒哈拉地区的国家。这个团队旨在测试是否可以通过HIV病毒的系统进化来预测新的感染的发生率,进而反过来可以揭示对HIV的感染的干预措施是否能够有效。然而,通过测序分析HIV病毒的家族系谱也存在一些局限性。同性恋在HIV的传播中起着很大作用,尤其是男同性恋。已经有些国家判定传播HIV和成为同性恋者是犯罪行为,有些人担心那些政府会获取这些研究的证据,从而发现这些同性恋者的私人信息。来自美国纽约的Mark Harrington说:”用这个研究并不能证明到底是谁传染了谁HIV病毒,只能表明他们在HIV传染中是密切关联的。我们并不希望看到在各种法庭出现HIV传播的诉讼,因为仅凭不同携带者感染了类似的HIV并不能确定是谁感染了谁。“那些男同性恋们该膝盖一痛了,他们或许会受到“责备”,因为研究者或许会给出他们能够感染周围的女性的结论,即便他们或许根本不会通过某些途径传播HIV给女性。
新品
2015.06.17
人糖基化血红蛋白(GHb)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T50nmol/L - 3000nmol/L使用目的:本试剂盒用于测定人血红细胞样本中糖基化血红蛋白(GHb)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人糖基化血红蛋白(GHb)水平。用纯化的人糖基化血红蛋白(GHb)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入糖基化血红蛋白(GHb),再与HRP 标记的糖基化血红蛋白(GHb)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的糖基化血红蛋白(GHb)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人糖基化血红蛋白(GHb)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(4800nmol/L) 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。尿液:用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。6.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2400nmol/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液1200nmol/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液600nmol/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液300nmol/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液150nmol/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 个月
标准
2015.06.15
人铁蛋白(FE)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T15ng/ml-400ng/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中铁蛋白(FE)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人铁蛋白(FE)水平。用纯化的人铁蛋白(FE)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入铁蛋白(FE),再与HRP标记的铁蛋白(FE)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的铁蛋白(FE)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人铁蛋白(FE)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(800ng/ml) 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。400ng/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液200ng/ml 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液100ng/ml 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液50ng/ml 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液25ng/ml 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液:将20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水20 倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 个月
标准
2015.06.15
治疗前列腺癌——看基因选药在一项小型临床研究中,来自约翰霍普金斯基梅尔癌症中心和詹姆斯布坎南布拉迪泌尿学研究所的科学家们发现患有晚期前列腺癌同时携带雄激素受体剪切突变7(AR-V7)的男性患者对传统化疗方法的药物应答情况与不携带突变的前列腺癌患者一样好。近日,相关研究结果发表在国际学术期刊JAMA Oncology。 研究人员指出,这项研究发现可能对于携带AR-V7突变的病人具有非常重要的意义,他们的研究显示携带AR-V7基因突变的病人通常不会对激素类治疗药物阿比特龙和恩杂鲁胺产生药物应答,但携带这一突变对于使用传统化疗药物进行治疗来说并没有任何不利之处。 这项研究共有37名前列腺癌患者参与,他们都接受了多西他奇和卡巴他赛两种化疗药物中的一种进行治疗,其中有17名携带AR-V7突变的晚期前列腺癌病人。结果在进行了化疗治疗后,与不携带该基因突变的病人相比,携带突变的病人并没有在前列腺癌特异性抗原(PSA)表达水平,癌症进展所需时间以及总体生存率上存在显著性差异。并且这17人中有7名患者的前列腺特异性抗原(PSA)的水平下降了50%。 总得来说,如果这项研究结果能够在更大的临床实验中得到验证,将表明AR-V7基因突变的出现或可作为一种生物标记物,可帮助前列腺癌病人做出更合理的治疗决策,因此这项研究对于前列腺癌的合理治疗,提高治疗效果具有重要意义。
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2015.06.15
人血小板衍生生长因子(PDGF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T0 ng/L -20 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中血小板衍生生长因子(PDGF)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血小板衍生生长因子(PDGF)水平。用纯化的人血小板衍生生长因子(PDGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血小板衍生生长因子(PDGF),再与HRP 标记的血小板衍生生长因子(PDGF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血小板衍生生长因子(PDGF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人血小板衍生生长因子(PDGF)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(40 ng/L) 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。20 ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液10 ng/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液5 ng/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液2.5 ng/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液1.25 ng/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 个月
标准
2015.06.10
非小细胞肺癌铂类联合化疗的遗传药理学研究尹继业,医学博士,副教授,硕士研究生导师,中南大学临床药理研究所细胞与分子生物学实验室主任、分子遗传药理研究室副主任、湘雅医学检验所技术副总监。尹主任在2014肿瘤转化医学研讨会上就非小细胞肺癌铂类联合化疗的遗传药理学研究做了演讲分享,该视频已上传至行云学院供交流学习。肺癌是我国和全世界范围危害人类生命健康的常见肿瘤,到目前为止,铂类联合化疗仍然是非小细胞肺癌主要的治疗方案,尤其对于进展期肿瘤。但在临床实践中,不同患者的化疗疗效存在巨大差异,随着遗传药理学研究的深入,越来越多的证据支持基因变异对非小细胞肺癌铂类联合化疗化疗敏感性的影响。因此,了解基因变异与铂类药物化疗敏感性的关系有助于建立肺癌患者个体化治疗体系。但当前尚缺乏可以用于准确预测铂类药物化疗敏感性的基因变异。因此,尹主任及其团队分析了铂类药物通路31个关键基因 (ATP7A, ATP7B, AQP2, AQP9, MVP, OCT2, TMEM205, SLC2A1, SIRT1, HSPB1, HSPE1, HSPA4, RAC1, RhoA, HMGB1, HMGB2, SSRP1, MLH1, MSH2, MSH3, MSH4, MSH5, MSH6, ABCG2, XPA, ERCC5, SRCC1, GSTT1, WISP1, eIF3a, VCP) 的214个多态与非小细胞肺癌铂类化疗敏感性的关系,其中发现OCT2 (rs195854, rs195854), TMEM205 (rs896412), AQP9 (rs1516400), AQP2 (rs7314734), ATP7B (rs9535828, rs9535826), eIF3a (rs3740556) 与铂类化疗疗效显着相关。为发现新的与非小细胞肺癌铂类化疗敏感性相关的遗传突变,挑选了17对铂类化疗明显耐药和敏感的患者进行全外显子组测序研究。发现 adenylate cyclase 1的 rs2280497和 rs2293106与非小细胞肺癌铂类化疗敏感性相关,并在小样本人群得到了初步验证。
标准
2015.06.10
为什么“天才”与“疯子”只有一线之差?一项新的研究指出,一些与创造力相关的基因同时也会加重患精神分裂与狂躁型忧郁症等疾病的症状。这项研究是由伦敦国王学院心理学、精神学与神经科学研究所的科学家们做出。之前的研究已经发现了创造力与心理紊乱(比如狂躁型抑郁症)之间的关系。然而这一相关性是否在基因水平上有关联仍不清楚。这项发表在《nature neuroscience》上的文章提供了相关证据证明一些人群中与创造力相关的基因同时能够影响精神分裂与狂躁型忧郁症等疾病。 尽管创造力难以用科学方法定义,研究者们认为有创造力的人通常会萌发一些新鲜的想法,这些想法的思维逻辑不同于通常的想法或表达方式。精神分裂与狂躁型忧郁症是思维与精神状态紊乱的表现,也就意味着患该类疾病的人群会表现出思维方式的异常。 长久以来,很多证据认为创造力与精神异常在某些程度上是相似的,比如文森特·梵高。这一类人长期受到心理疾病的困扰。之前的研究发现心理异常,尤其是狂躁型抑郁症,与创造性表现在家族遗传方面具有高度的相关性。然而,这一相关性无法排除是否受到了环境因素或者社会经济状态等因素的影响。 这项研究调查了来自冰岛的86292名参与者,并检测了他们患心理疾病的遗传风险值。其中国家艺术协会的表演者、艺术家、舞蹈家、视觉艺术家以及作家被认为是具有创造力的人群。 研究者们发现心理疾病的遗传风险值在具有创造力的人群中明显高于其它人群。这一发现说明对创造力有影响的遗传因素同时能够对心理疾病的发生产生影响。 该文章的第一作者,Robert Power认为:"我们对大部分心理紊乱疾病的内在因素的了解都十分有限,我们对于创造力与心理疾病在遗传水平上的相关性的研究能够帮助大家了解思维过程的转变有可能会导致心理疾病的发生。"
标准
2015.06.10
人脂肪酸合成酶(FAS)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T0.5nmol/L - 16nmol/L 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中脂肪酸合成酶(FAS)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人脂肪酸合成酶(FAS)水平。用纯化的人脂肪酸合成酶(FAS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂肪酸合成酶(FAS),再与HRP标记的脂肪酸合成酶(FAS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂肪酸合成酶(FAS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人脂肪酸合成酶(FAS)浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(32nmol/L) 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个 标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。16nmol/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 8nmol/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 4nmol/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 2nmol/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 1nmol/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结: 计算 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月
标准
2015.06.08
为何从古至今女人都长寿?人类中的超级百岁老人(即年龄超过110岁的人)至少都会有一个共同点,即超过95%的百岁老人都是女性,科学家们通过长期研究观察当人们衰老时不同性别之间个体的差异,但研究者目前并不清楚为何女性会活的更久一些。近日,刊登在国际杂志Cell Stem Cell上的一篇研究报道中,来自斯坦福大学的研究人员通过对干细胞的行为和性别差异进行研究,揭示了男性和女性随着机体老化而表现出的再生能力下降的差异,相关研究或为解释雌激素和睾酮调节修饰个体寿命的分子机制提供了新的希望。我们都知道雌激素对雌性小鼠机体的干细胞群体具有直接的作用,其可以增加血液干细胞的数量,这在个体怀孕期间非常有帮助;同时雌激素又可以增强处于发情期小鼠大脑肝细胞再生的能力;这些改变是否对个体的寿命有直接影响目前有待于进一步研究,而近来有研究发现雌激素补充剂可以增加雄性小鼠的寿命,相比未去势的雄性个体而言,雌激素补充剂可以使得去势的雄性个体寿命延长14年。研究者表示,后期还需要进行更多研究来理解在不同性别之间遗传因素影响干细胞老化的分子机理,当前研究者发现,敲除小鼠机体不同基因的表达会增加某一性别个体的长寿效应,而对另一性别并无影响,而在配对研究中研究者发现雄性个体相比雌性个体具有较短的端粒,端粒较短就意味着细胞寿命较短。于是研究者推测,似乎性别在决定个体寿命和健康寿命上扮演着重要的角色,而且性别引发的效应或许对个体寿命和健康寿命并不等同;科学家们一直在寻找可以改善机体老化及维持机体干细胞再生的方法,而本文研究中研究者强调到,我们或许不应该忘掉最有效的一个老化调节修饰子:那就是性别。
百态
2015.06.08
掉了几颗牙?看你健康不牙齿提前脱落通常表明一个人口腔疾病的历史。芬兰赫尔辛基大学与国家卫生福利研究院的研究人员在广泛的队列研究结果后,发现牙齿提前脱落与未来心血管事件,糖尿病和死亡有关。缺牙的数目可能作为医生评估慢性疾病风险因素时的一个有用的附加指标。这篇文章发表在Journal of Dental Research。The National FINRISK 1997研究是以芬兰人口为基础的调查。对8446位年龄在25至75岁的个进行全面的问卷调查,并进行相关临床检查。研究人员以缺牙的数目记录为基线,进行了长达13年对冠心病、急性心肌梗塞、中风和各种原因引起的死亡信息的跟踪,试图找到牙齿掉落与他们之间的统计学联系。为何进行这项研究?非传染性疾病,如心血管疾病和糖尿病,是世界范围内导致死亡的最常见原因。这几种疾病也知与炎性口腔疾病,如牙周炎有一定关系。牙周炎是牙齿支持组织发生的一种慢性炎症性疾病,临床表现有牙龈出血,增加牙齿的活动性和加深牙周袋,可能会导致牙齿的脱落。如果不进行治疗,牙周炎也是中年和老年人中牙齿脱落的最常见的原因。根据最后的数据,研究人员分析发现缺牙数目超过五个,冠状动脉心脏疾病事件和心肌梗塞的风险增加了高达140%。缺牙数超过九个以上指向各种疾病风险增加——心血管疾病(51%)、糖尿病(31%)和死亡(37%)。无牙患者相应的风险增加40-68%。传统的危险因素在统计分析过程中也考虑在内。口腔疾病与全身健康之间的关联最近已经引起人们的重视,世界卫生组织也承认口腔保健在预防致命性的慢性疾病的重要性。牙齿脱落情况,已经被提出替代当前或过去的牙周炎病史作为指示心血管疾病,糖尿病和各种原因死亡率的风险。
标准
2015.06.08
人白细胞介素-18(IL-18)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T5 ng/L -180 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆,组织样本中人白细胞介素-18(IL-18)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-18(IL-18)水平。用纯化的人白细胞介素-18(IL-18)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-18(IL-18),再与HRP 标记的白细胞介素-18(IL-18)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-18(IL-18)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-18(IL-18)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(320 ng/L) 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。尿液:用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。6.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160ng/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液80ng/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液40ng/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液20ng/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液10ng/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 个月
标准
2015.06.05
人白细胞介素-8(IL-8)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T40 ng/L -1200 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-8(IL-8)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-8(IL-8)水平。用纯化的人白细胞介素-8(IL-8)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-8(IL-8),再与HRP 标记的白细胞介素-8(IL-8)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-8(IL-8)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-8(IL-8)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(2400 ng/L) 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。1200ng/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液600 ng/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液300 ng/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液150 ng/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液75 ng/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 个月
标准
2015.06.05
诺奖得主 泛素化降解的发现者Irwin Rose本周去世加利福尼亚大学新闻发言人发表申明称,2004年诺贝尔化学奖获得者欧文·罗斯(Irwin Rose)于本周二(6月2日)去世,享年88岁。据他的家人称,欧文·罗斯在睡梦中安详过世,过世时身处马萨诸塞州(Massachusetts)的迪尔菲尔德(Deerfield)。2004年,欧文·罗斯与两位以色列科学家阿龙-西查诺瓦、阿弗拉姆-赫尔什科共同分享了当年的诺贝尔化学家,以表彰他们在泛素调节蛋白质降解领域的杰出研究。泛素化修饰自20世纪70-80年代发现以来,已经被证实是介导真核细胞内蛋白质降解的最主要的途径,在进化中具有重要的生物学功能,现在已经了解到细胞内的诸多生命活动过程都离不开泛素化修饰的精细调控,比如细胞周期调控、细胞凋亡、细胞信号转导等等。欧文·罗斯的研究帮助科学家更好地了解癌症和其他疾病的分子活动。欧文·罗斯于1926年7月16日在美国纽约州纽约市布鲁克林区出生,父亲哈利·罗斯(Harry Royze)与母亲埃拉·格林瓦(Ella Greenwald)是世俗犹太人,经营一家装潢建材行。罗斯曾在二战时进入美国海军服役,此前一年则就读于华盛顿州立大学。战争结束后,罗斯重拾书本,1952年在芝加哥大学获得了生物化学博士学位。1954年至1963年间,罗斯任教于耶鲁大学医学院生物化学学系;1963年进入福克斯·蔡斯癌症中心(Fox Chase Cancer Center),工作直至1995年退休。罗斯在1970年代时成为宾夕法尼亚大学生物化学教授。他生前也是加州大学尔湾分校医学院生理学和生物物理学驻校教授。
标准
2015.06.05
人CD3分子(CD3)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T2.5 IU/ml -80 IU/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中CD3 分子(CD3)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人CD3 分子(CD3)水平。用纯化的人CD3 分子(CD3)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入CD3 分子(CD3),再与HRP 标记的CD3 分子(CD3)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的CD3 分子(CD3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人CD3 分子(CD3)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(160 IU/ml) 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。尿液:用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。6.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80 IU/ml 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液40 IU/ml 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液20 IU/ml 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液10 IU/ml 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液5 IU/ml 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 个月
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2015.06.03
ELISA试剂盒注意事项1. 在具备高质量HRP的条件下,所要标记的抗体也要活性高,效价高(最低1∶16),纯度高,亲和力好,这是保证标记物效价高,免疫活性好的首要条件。"2. 所使用试剂的PH和浓度及用量必须严格掌握。所用试剂,最好(或必需)新鲜配制。如在戊二醛标记法中所用戊二醛应为新鲜纯品,因戊二醛储存过久可形成缩和体(杂质)。否则,影响标记效果。3. 室温搅拌时须避光,室内温度一般在25℃为宜。标记物每次透析前,须认真检查,防止漏液。4. 浓的标记物相当稳定,常加入30~40%甘油于-10℃下保存。4℃可保存1~2年,但稀释成1∶10,只能保存数周。已配制的使用液应在12小时内用完。切忌反复冻融。
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2015.06.03
年轻人和老年人得结肠癌竟有基因差异虽然结肠癌的整体发病率正在下降,但结肠癌在年轻病人中的发病率却在逐渐增加。之前一些研究表明结肠癌在小于50岁的人群中,侵袭性可能比年龄较大的病人强,近日,来自科罗拉多大学癌症中心的研究人员在美国临床肿瘤学年会上提出一些初步证据,他们发现在年轻病人和老年病人中,结肠癌存在一些基因差异,因此指出对抗年轻病人体内的结肠癌可能需要不同的治疗手段和策略。 研究人员指出,他们发现两个年龄段的结肠癌病人在PPAR和IGF1R两条重要的信号途径上存在一些差异,这两条途径都在调节细胞发育,代谢和生长过程中具有重要功能,而且已经有许多研究发现这两条途径的改变参与多种癌症的发生。 在这项研究中,研究人员将平均年龄为31岁的5名年轻结肠癌病人的样本与平均年龄为73岁的6名老年病人的肿瘤样本进行了对比,对每个肿瘤样本进行了四千五百万个"reads"的测序。他们发现除了PPAR和IGF1R两条重要的信号途径,年轻病人的肿瘤样本在调节药物代谢的一些信号途径上存在富集。 研究人员指出,化疗手段能够对癌细胞进行杀伤,年轻病人可能在药物代谢方面与老年病人存在不同,这也解释了为什么传统的化疗方法对于患有转移性结肠癌的年轻病人效果更差。 研究人员最后表示,他们希望能够在更大的人群中对这些发现进行进一步的验证,如果结果能够证实PPAR和IGF1R两条途径对于年轻病人的发病具有重要驱动作用,他们将开发针对这两条途径的靶向药物,用以治疗年轻人群中发生的结肠癌。
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2015.06.03
兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分,冬季室温低,可将兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒置37℃温箱20分钟。每个实验室可以根据自己的条件,选用临床中心提供的质控血清,或按以下方法自己制备。使用的质控血清(以乙肝质控血清为例)。1)收集新鲜的无溶血、无黄疸、无细菌污染的阳性血清。2)56℃加热10小时来活。3)离心或过滤除去沉淀。4)用10%的小牛血清或正常人血清(PBS缓冲液)将收集的血清稀释至所需的浓度。如能用正常的人血清稀释更好,因其成份更接近于检测标本。5)抽滤除菌。按一次使用的量分装小安瓿,封口,20℃保存备用。不可反复冻融。被检物要求检出的水平常被认为是质控血清应选择的水平。如果该试验还有其它要求,则应加所要求浓度的质控物。6)标定含量。20-30次测定结果删除>±2SD数据的均值作为靶值,并与已知定值血清对比测定。公司目前已承接了“Elisa酶联免疫实验”“荧光定量PCR”、“基因克隆”、“蛋白表达纯化”、“多抗制备”、“Western Blot”、“免疫荧光”、“免疫组化”等多种技术服务兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒 注意事项:【1】洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。【2】一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。【3】请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。【4】如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。【5】在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。【6】底物请避光保存。小鼠白血病L1210细胞ATCC
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2015.06.01
我们开始害怕人工智能,但Watson已经长大成“人”了!一月的第一个周末,很多人工智能领域的顶尖研究人员来到波多黎各参加一个不同寻常的私人会议。这个会议之所以不同寻常,一定程度上是因为它的主题:智能机器的崛起对人类而言是福是祸。公众一直在不断探讨这个问题,然而科学家们自己却很少这样做。会议由一个名为未来生活研究所(Future of Life Institute)的新兴智库组织,其负责人是麻省理工学院(MIT)宇宙学家马克思·泰格马克(Max Tegmark)。泰格马克曾经出版过一本书,假设宇宙可能仅仅是数学结构的结合。参会的研究人员拿到了两个命题。第一个命题是,我们是异常突破性进展的管理者。MIT的经济学家埃里克·布伦乔尔森(Erik Brynjolfsson)称:“我们生活在一次最伟大的历史事件之中。”参会人员被要求预测机器在什么时候可以在所有人类工作领域战胜我们,他们的预测结果平均值是2050年。第二个命题比较复杂,因为它要求研究人员考虑人工智能的突破性进展也许是一件坏事这个问题。众多著名的技术人员早就警告过我们人工智能可能带来的威胁,其中就包括史蒂夫·沃兹尼亚克(Steve Wozniak)、比尔·盖茨(Bill Gates)和斯蒂芬·霍金(Stephen Hawking)。霍金最近表示:“完全人工智能的发展可能毁灭人类。”而埃隆·马斯克(Elon Musk)也说:“发展人工智能技术,实际上是在召唤魔鬼。”泰格马克组织私人会议的目的是描绘这个“魔鬼”的样子,以便研究人员能够像科幻领域那样严肃地认识到人工智能给人们带来的担忧。布伦乔尔森和其他经济学家称,随着机器逐步适应各个领域的工作,很多工作岗位会被渐渐淘汰,而设计和投资机器的人则会发家致富。这样一来,我们面临的经济失调风险也逐步提升。学界和业界的研究人员详细地说明了机器的大脑究竟是如何渐渐聪明起来的。现在,人工智能已经可以理解和形成类似于“信念”这样概念的东西。法学界则表示,给负责识别轰炸目标或者提供导航路线的电脑设定法律责任是一件困难的事情。在1月4日晚上名为“人工智能大爆炸”的会议上,研究人员探讨了机器可能迅速地远远超过人类能力的可能性。这个假设由牛津大学哲学家尼克·博斯特伦(Nick Bostrom)提出。人工智能公司DeepMind研发了一个算法,从而使得电脑可以玩经典的打砖块游戏。这个游戏要求参与者用小球击打砖块并尽可能获得多的得分。最初,人工智能程序并不了解球或者球拍的概念,也不知道如何才能获得得分。两个小时之内,它就能灵活的掌握游戏。而四个小时内,程序就弄清楚了如何才能获胜(让小球通过通道穿越砖块,这样就可以在相对封闭区域里击打更多砖块)。这让我们看到了一点未来的样子,既令人着迷又令人恐惧。对于那些担心人工智能的人而言,机器每变聪明一次,他们就会提出一次如何控制机器的问题。资本领域有这样一个好的经验法则:如果亿万富翁开始发出警告,表示你现在从事的事情存在伦理内涵隐患,那么这证明你手头的工作是意义重大的。马斯克很快会未来生活研究所投资1000万美元,从而资助人工智能的研究和超过1000名顶尖人工智能实践人员的工作。参加这次会议的研究人员将签署一份由泰格马克起草的宣言,保证自己会确保智能机器对社会有益。当被问及为何人工智能的安全性突然成为一个急迫的问题时,泰格马克说:“人工智能发展很快,即将走出实验室进入社会了。”机器早就能很好地了解周围的世界并完成各类工作:无人驾驶汽车已经成为现实,全自动厨房(机器可以自己摆盘)也将于2017年问世。在帮助机器增加社会属性这个领域,我们取得了不小的进步。现在机器已经达到了“接近人类”的水平, 而我们也可以教育机器理解人类面部表情之后隐藏的情感从而将我们的经历模型化。参会的研究人员中有一些是人工智能领域的实践创业者,他们每天都在处理解决机器的缺点。在他们看来,人工智能的发展是一个机会而不是一个威胁。因此,他们觉得有些人的“警告”有点“夸张”了。俄勒冈州立大学教授、人工智能进步协会主席汤姆·迪克里奇(Tom Dietterich)表示:“算法并不是像博斯特伦假设的那样工作的。人们总是询问机器和人类之间的关系。在我看来答案很明显:机器是我们的奴隶。”不过迪克里奇还是签署了泰格马克的宣言。几周之内他组织召开了人工智能进步协会年会,花了很长时间重点讨论机器人伦理学问题。其实,所有的担忧都可以被归结成一个问题——机器已经完全社会化了。人们之所以对这个问题关注度提升,原因是IBM公司研发总部的一个小团队历经数十年努力终于开发出了一台名为Watson的智能机器。IBM工程师最初着手打造人工智能的目的是为了让机器参加智力游戏节目 《Jeopardy!》,战胜所有人类选手。为此人工智能必须对语言精通,包括微妙的韵律变化、引喻和双关。Watson在2011年的胜利是人机对抗比赛的里程碑,但自那以后它就在不断进化。Watson的想法越来越富有创造力,设计更加贴切,因此它可以更好地满足人们的需求。目前工程师在训练Watson关于分子生物学和财务金融领域的知识,还教它写食谱。另外,Watson还参与了石油勘探方面的工作实践,并能帮助我们解决犯罪问题。Wired网站预测,Watson将很快成为世界上最完美的医学诊断专家。IBM介绍称,Watson可以与我们的世界无缝衔接,已经在17个国家的75个产业中发挥了作用。目前,成千上万的人正在自己的工作中使用与Watson有关的应用程序。这样一来,Watson就成了我们探索人类与智能机器关系的早期试验品。在与它的工作过程里,我们要解决这样的问题:我们需要智能机器为我们做什么?它们能填补什么空白?它们又会带来什么恐惧?偶然的灵光一闪才是解决哲学问题最诚实可靠的途径。Watson的创造者中有很多人从这个项目启动之初就加入了进来,他们对这台人工智能机器的看法与泰格马克截然不同。他们看到了Watson的成长历程,看到了它一点点学会新的技能,在失败中得到经验教训。有些人甚至认为与Watson的工作经历给他们带来了私人感情,好像自己是父母而这台机器是自己的孩子一般。去年十月,IBM将这个项目迁移到了一个环境更好的新办公区,这让Watson经历了与人类差不多的发展历程:在郊外度过了具有家庭氛围的早期研发阶段,接着接受各种教育以便自己能够适应更为复杂的外界世界,最后为了赚钱而搬进曼哈顿东村的办公室并努力寻找工作。
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2015.06.01
一颗药丸,摆脱肥胖本期《Nature Communications》上发表的一项研究,报告了一种小分子物质,可以通过促进肥胖小鼠体内的白色脂肪组织转化为其他的脂肪组织,进而将多余热量燃烧掉来促进其减肥。在哺乳动物体内,一般地,脂肪组织分为三种:一种是白色脂肪组织(white adipose tissue),这种脂肪主要用来存储脂肪,细胞内存在很少的线粒体和细胞质,和很大的脂肪粒,因此呈现出白色;另外一种是褐色脂肪组织(brown adipose tissue),这种组织细胞中存在很多的线粒体和小的脂肪颗粒,因而主要功能是通过脂肪的氧化分解来产生热量而消耗脂肪;第三种介于白色和褐色脂肪组织之间,叫做米色脂肪组织(beige adipose tissue),这种脂肪组织一般是从白色脂肪组织细胞转化而来,可以分解脂肪产热而消耗脂肪。科学家们发现了一种化学分子, 能够让小鼠产生更多棕色和米色脂肪,而这些脂肪是专门燃烧脂类分子,来产生热量的组织,从而可以消耗脂肪减少肥胖。德国的Alexander Pfeifer及同事发现,可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)驱动的一个细胞信号作用通道,能够激发肥胖小鼠体内的褐色和米色脂肪的比例增加,白色脂肪减少。在用刺激sGC的一种实验药物处理之后,小鼠燃烧掉了更多脂质,而这使得它们体型变得更瘦,原因是白色(贮存)脂肪减少了。虽然该分子还没有进行过人体试验,但作者猜测它可能是比较安全的。这是因为,它与瑞司瓜特(最近被批准用于肺高血压治疗的药物),在化学特性上相似,并属于同一类别。作者希望,他们的发现也许能为肥胖症和某些相关疾病的治疗提供一种潜在的候选药物。或许不久的未来,我们不用自己运动,吃一片药丸也能轻松摆脱肥胖了。
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2015.06.01
ELISA试剂盒有多少种?首先我们应该根据实验的不同选择合适的试剂盒,厂家也有很多,进口ELISA试剂盒要比国产ELISA试剂盒的价格贵,质量也要好,稳定性高。一般试剂盒都是分人elisa试剂盒、小鼠elisa试剂盒、大鼠elisa试剂盒等等,elisa双抗夹心试剂盒,假如检测人的抗原就要用人的试剂盒,那这几种试剂盒又有什么区别呢?在临床上,不能用小鼠的单抗包被酶标制成的试剂盒吗?换句话说,检测人的elisa试剂盒是怎么做出来的呢? 测人的试剂盒用的抗体是抗人的,好比测人乙肝病毒,可以用小鼠抗人乙肝病毒,而多抗用一样的并没有什么不一样,这样这个抗体才能与人乙肝病毒抗原反应。elisa试剂盒测定技术的发展,临床测定技术的发展主要在于方法学的发展,而方法学的发展依托于试剂出产技术不断提高更新和型标记物的应用。夹心法中,包被的抗体与酶标抗体,假如是单抗,理论是不能用一样的,不外商品化的单抗有可能是混合单抗,识别不同的表位的抗体混在一起,这样就又可以用一样的。有间接法,阻断法,竞争法,夹心法等,试剂盒都是商品化出产,每批的批号也会不一样。目前,分子生物学正在并终极肯定会让我们对整个生命科学有一个全面而彻底的熟悉,其对免疫测定技术发展的影响也是直接而又有效的,它使我们对以前一些难以检测的生物活性物质的测定变得轻而易举,并且大大进步了检测的敏捷度和特异性。按照来源不同可以分为良多种:例如人elisa试剂盒,大鼠elisa试剂盒,小鼠elisa试剂盒,进口ELISA试剂盒,兔elisa检测试剂盒,牛elisa试剂盒,狗elisa试剂盒等等。
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2015.05.29
你的论文是“睡美人”吗?谁又是她的王子?科学研究工作的一个重要组成部分是将研究成果写成论文发表,以便和同时代以及未来的科学家进行有效的交流。有很多论文一发表就成为大家讨论和引用的热点,这些论文的引用数在短时间内扶摇直上。但也有很多文章并不被热捧,那么,在如山的文献堆中那么多无人问津的论文就一定没有价值吗?答案是否定的。历史上也有不少文章,在埋没于厚厚的灰尘中数十年或上百年后,突然重见天日,被科学界追捧并大量引用。这类文章被称为科学文献中的“睡美人”。美国印第安纳大学伯明顿分校研究复杂网络的研究员Filippo Radicchi及其同事,研究分析了2,200万篇科学论文,希望从中找出这些“睡美人”,并试图发现那些最具传奇色彩的“睡美人”论文。一般来说,一篇论文的引用率在经过初期一段时间的增长后会下降。之前的研究表明,文章的命运往往是由其在发表后的头五年内的引用率决定。但是,有一些论文会在沉寂多年之后突然被发现非常重要而出现井喷式的引用暴涨。2004年,荷兰莱顿大学的科学和技术研究中心的文献计量学专家Anthony van Raan为其取名为“睡美人现象”。也许最有名的例子就是爱因斯坦、Boris Podolsky和Nathan Rosen在1935年发表的量子力学论文,它在长达数十年的时间里享受着无人问津的寂寞,直至最后被发现。根据一篇文章获得的引用数量以及发表多久时间后得到这些引用的情况,Radicchi和他的同事们设计出了“睡美人系数”(B)。他们在《PNAS》上发表的论文中描述道,如果一篇论文的引用数随时间线性增长,则其“睡美人系数”为0,而如果一篇文章在沉寂了100年后才突然出名,则其“睡美人系数”的值会在10,000以上。
标准
2015.05.29