兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒
兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分,冬季室温低,可将兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒置37℃温箱20分钟。
每个实验室可以根据自己的条件,选用临床中心提供的质控血清,或按以下方法自己制备。
使用的质控血清(以乙肝质控血清为例)。
1)收集新鲜的无溶血、无黄疸、无细菌污染的阳性血清。
2)56℃加热10小时来活。
3)离心或过滤除去沉淀。
4)用10%的小牛血清或正常人血清(PBS缓冲液)将收集的血清稀释至所需的浓度。如能用正常的人血清稀释更好,因其成份更接近于检测标本。
5)抽滤除菌。按一次使用的量分装小安瓿,封口,20℃保存备用。不可反复冻融。被检物要求检出的水平常被认为是质控血清应选择的水平。如果该试验还有其它要求,则应加所要求浓度的质控物。
6)标定含量。20-30次测定结果删除>±2SD数据的均值作为靶值,并与已知定值血清对比测定。公司目前已承接了“Elisa酶联免疫实验”“荧光定量PCR”、“基因克隆”、“蛋白表达纯化”、“多抗制备”、“Western Blot”、“免疫荧光”、“免疫组化”等多种技术服务
兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒 注意事项:
【1】洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
【2】一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
【3】请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
【4】如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。
【5】在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
【6】底物请避光保存。小鼠白血病L1210细胞ATCC
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