化妆品中禁用物质米诺地尔的测定（GB/T 35837-2018）

化妆品中禁用物质米诺地尔的测定（GB/T 35837-2018）

米诺地尔，化学名为6-（1-哌啶基）-2,4-嘧啶二胺,3-氧化物，为白色或类白色结晶性粉末。实验室参考国标方法（GB/T 35837-2018）对米诺地尔进行分析，并对方法学进行考察。

高效液相色谱法 CAPCELL PAK C18 ACR

1.1      标准品分析结果

大曹实验室按照国标方法，流动相使用0.3%三氟乙酸溶液，酸性较强，色谱柱选择使用耐酸型色谱柱CAPCELL PAK C18 ACR S5; 4.6 mm i.d.×250 mm对标准品进行分析，结果下图所示。米诺地尔主峰保留时间5min左右，理论塔板数7707，不对称因子1.06，峰形良好。

HPLC Conditions

色谱柱：CAPCELL PAK C18 ACR S5;4.6 mm i.d.×250 mm

流动相：甲醇 : 0.3%三氟乙酸水溶液= 45:55（体积比）

流速：1.0 mL / min

温度：30°C

检测：PDA 230nm

进样量：10 µL

浓度：10mg/L，70%甲醇溶解稀释

1.2      方法学考察

标准曲线的绘制：

按照国标方法配制浓度为0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L的标准工作溶液，浓度依次由低向高进样测定，以峰面积-浓度作图，绘制标准工作曲线，如下图所示。标准曲线在浓度范围内线性良好，线性系数R2=0.9994。

精密度：

连续进样6针标准品溶液（5 mg/L），计算相对标准偏差，RSD=1.39%，精密度良好，结果如下表所示。

检出限和定量限：

计算得到米诺地尔检出限为0.24 mg/L，定量限为0.80 mg/L。

回收率：

按照国标方法分别对乳液和水剂样品进行加标回收实验，添加量为5 mg/L，对空白样品和加标样品进行分析，计算得到回收率结果，如下面两个谱图以及下面的表所示。乳液样品加标回收率为114.7%，水剂样品加标回收率为96.0%，回收率较好，无基质干扰。

HPLC Conditions

色谱柱：CAPCELL PAK C18 ACR S5; 4.6 mm i.d.×250  mm

流动相：甲醇 : 0.3%三氟乙酸水溶液=45 : 55（体积比）

流速：1.0 mL / min

温度：30 °C

检测：PDA 230 nm

进样量：10 µL

浓度：空白样品和加标样品（乳液、水剂），添加量5mg/L，70%溶解

样品处理：

乳液：称取0.5 g试样（精确值0.001 g）置于10 mL具塞塑料离心管中，加入1 g氯化钠，加入70%甲醇水溶液10 mL，摇匀，超声提取20 min，5000 r/min离心15min后，上清液经0.22 μm滤膜过滤即得。

水剂：称取0.5 g试样（精确值0.001 g）置于10 mL具塞塑料离心管中，加入70%甲醇水溶液10 mL，摇匀，超声提取20 min，5000 r/min离心15 min后，上清液经0.22 μm滤膜过滤即得。

液质确认试验 CAPCELL PAK C18 MG III

大曹实验室参考国标附录B确认试验方法，对流动相比例进行调整后，使用低柱流失C18色谱柱 CAPCELL PAK C18 MG III S3；2.0 mm i.d.×150 mm对米诺地尔标准品和加标样品进行分析，结果如下面两张图所示。标准品和加标样品保留和峰形良好。

HPLC Conditions

色谱柱：CAPCELL PAK C18 MG III S3; 2.0 mm i.d.×150 mm

流动相：A:0.1%甲酸溶液 B:乙腈

        B(%):10%(0 min)→10%(2min) →40%(4min) →40%(6min) →10%(6.1min)

流速：0.3 mL / min

温度：40°C

检测：QTRAP 5500; ESI Positive 离子源4500V 450°C; MRM 210.1>193.1(CE=19) 210.1>164.1(CE=28) DP=60

进样量：5 µL

浓度：标准品10 ppb，水剂样品添加量50 ppb，70%溶解，纯水稀释。

总结

参考国标方法GB/T 35837-2018，使用CAPCELL PAK C18 ACR S5; 4.6 mm i.d.×250 mm色谱柱可得到良好分析结果，线性、精密度和回收率良好（HPLC）。使用CAPCELL PAK C18 MG III S3; 2.0 mm i.d.×150 mm色谱柱可完成确认试验（HPLC-MS），分析结果良好。

注：图中色谱峰线条不平滑是由于图像在复制过程中解像度问题引起的。