麻痹性贝类毒素的LC-MS分析（参考GB 5009.213-2016）

麻痹性贝类毒素的LC-MS分析（参考GB 5009.213-2016）

海洋毒素是由海洋中的有毒藻类通过食物链传递给藻食性的鱼、虾及贝类等生物，并在其体内蓄积形成的有毒高分子化合物。海洋毒素种类繁多,其中贝类毒素是危害较大者之一。

麻痹性贝类毒素是毒性很强的毒素之一，其毒性与河豚毒素相当。这也意味着贝类食品中麻痹类贝类毒素的检测至关重要。

GB 5009.213-2016中使用亲水性氨基甲酰键合凝胶柱作为分析色谱柱，需要耗时35min完成一个梯度（见下图），且峰形略宽。

因此，我们在国标条件基础上，筛选了色谱柱，最终选择磷酸胆碱键合的HILIC型色谱柱——PC HILIC S5;2.0 mm i.d.×150 mm，并对梯度条件进行调节，最终结果如下面的图所示。在15min内可以将10种贝类毒素良好洗脱，峰形良好，3对同分异构体GTX1和4、GTX2和3以及dcGTX2和3均得到良好分离。

HPLC Conditions ：

色谱柱：PC HILIC S5;2.0 mm i.d.×150 mm

流动相：A：10 mmol/L甲酸铵+0.1%甲酸  B：乙腈

         B% 80%(0min) ->80%(2min) ->50%(8min) ->50%(10min) ->80%(10.1min) ->80%(15min)

流速：0.4 mL / min

温度：35°C

检测：SCIEX 5500; MRM;m/z数据见国标,CE DP等数值根据仪器调谐

样品浓度：客户提供：GTX1、2、5，dcGTX2，neoSTX，STX，dcSTX 200ppb；GTX3 84.8ppb；dcGTX3 58.7ppb；GTX4 63ppb

进样量：5 µL

在以上实验的基础上，我们也尝试使用了更高柱效的核壳型PC色谱柱——CAP CELL CORE PC S2.7; 2.1 mm i.d.×150 mm进行分析，该色谱柱具有高柱效低压力的特点，在常压及超高效液相上均可以使用，得到结果如下图所示，色谱峰形较全多孔型色谱柱更好。

HPLC Conditions ：

色谱柱：CORE PC S2.7;2.1 mm i.d.×150 mm

流动相：A：10 mmol/L甲酸铵+0.1%甲酸  B：乙腈

         B% 80%(0min) ->80%(2min) ->50%(8min) ->50%(10min) ->80%(10.1min) ->80%(15min)

流速：0.3 mL / min

温度：35°C

检测：SCIEX 5500; MRM;m/z数据见国标,CE DP等数值根据仪器调谐

样品浓度：客户提供：GTX1、2、5，dcGTX2，neoSTX，STX，dcSTX 200ppb；GTX3 84.8ppb；dcGTX3 58.7ppb；GTX4 63ppb

进样量：5 µL

在这个实验中，因为使用的CAPCELL CORE PC核壳柱为2.7 μm 且柱长为150mm，考虑系统压力的原因，流速选择了0.3 mL/min，若希望更快地得到分析结果，可以考虑使用更高的流速或使用更短柱长的色谱柱。

综上所述，使用PC HILIC S5; 2.0 mm i.d.×150 mm或CAPCELL CORE PC S2.7; 2.1 mm i.d.×150 mm色谱柱，参考国标方法，重新调整梯度条件后，能够获得良好分析结果。