蜂蜜中大环内酯类药物残留量测定

大环内酯类抗生素是利用放线杆菌或小单孢菌生产的具有大环内酯的抗生素的总称，是由二个糖基与一个巨大内酯结合而成的，它对革兰阳性菌、支原体、衣原体有较强的抑制能力，属一种中谱抗生素，按其大环结构含碳的不同，可分为14元、15元和16元环大环内酯类抗生素。近年来，作为动物饲料添加剂的大环内酯类抗生素已成为世界范围内需求量和销售速度增长最快的抗生素之一，已占世界抗生素市场销售总值的8.5%，此类抗生素在全球饲料中的使用量仅次于四环素类抗生素。

自1952年发现红霉素（EM）以来，已连续有竹桃霉素（OM) 、螺旋霉素（SPM)、吉他霉素（KT)、罗红霉素、麦迪霉素、交沙霉素（ JM )、克拉霉素及的衍生物问世，并出现动物专用品种如泰乐菌素（TS )、替米考星（TLM）等。属十四碳大环的有红霉素、竹桃霉素；属十六碳大环的有泰乐菌素、吉他霉素和螺旋霉素，替米考星是泰乐菌素的半合成化合物，相比于其他大环内酯类抗生素有相似或更强的抗菌活性。

大环内酯类抗生素经口服后能很好地被吸收，广泛分布于组织，特别是肝、肺、肾组织。细菌对此类抗生素易产生耐药性。动物经过长期喂食后，抗生素及其代谢物在动物组织及器官内蓄积，可造成前庭和耳蜗神经的损害，导致眩晕和听力减退，重者造成肝肾的严重损害。如不能很好地控制残留，会对人类健康构成严重威胁。因此我国制定了红霉素，螺旋霉素，替米考星，泰乐菌素等7种大环内酯类抗生素的最大残留量。

Masakazu Horie等采用0.2%偏磷酸-甲醇（60/40，V/V）提取，然后通过OASIS HLB进行净化：用甲醇水活化后，加入样品，再用水淋洗，最后用甲醇洗脱，该方法在加标0.2μg/g时，样品加标回收率为70.4%~93.2%。

GB/T 23408-2009蜂蜜中大环内酯类药物残留量测定 液相色谱-质谱/质谱法。

样品溶液：称取蜂蜜5.00g，于50mL离心管中，加入15mL 0.1mol/L 碳酸钠缓冲溶液，涡旋混匀1min。 

BRP固相萃取柱（60mg，3mL），用3mL甲醇，5mL水活化；

提取液过柱，弃去；

用5mL水，5mL甲醇+水（2+8）淋洗，弃去，抽干；

5mL甲醇洗脱并收集。

洗脱液50 ℃氮吹至干，加入1mL甲醇+水（4+6），混匀，过0.22μm滤膜，上机。

结论：

使用月旭Welchrom^® BRP 60mg，3mL检测蜂蜜中替米考星、螺旋霉素-I、竹桃霉素、红霉素、罗红霉素、泰乐菌素、交沙霉素回收率分别为86.5%、79.4%、87.2%、114.8%、91.5%、71.9%、71.7%，样品回收率满足要求。