影响峰漂移的常规因素有哪些？

如果我们观察到保留时间漂移，首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常平衡需要10-20个柱体积的流动相，但如果在流动相中加入少量添加剂（如离子对试剂）则需要相当长的时间来平衡色谱柱。

固定相稳定性

固定相是否稳定也是保留时间漂移原因之一，固定相的稳定性都是有限的，即使在推荐的PH范围内使用，固定相也会慢慢水解。例如，硅胶基质在pH4时水解稳定性最好。水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定；长链键合相比短链键合相稳定；烷基键合相比氰基键合相稳定的多。

其他硅胶基质键合相在高比例水溶液环境中也可以发生水解，如氨基键合相等。

流动相组成

流动相组成的缓慢变化也是保留时间漂移的常见原因。如流动相中易挥发组分的挥发及循环使用流动相等。流动相污染也可能是原因之一。溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上，从而造成保留时间的漂移。建议及时更换新的流动相。

疏水坍塌

当反相填料色谱柱使用接近100%的水为流动相时，有时会发生分离突然丧失及被分析物质保留明显降低或完全不保留的现象，这就是疏水坍塌。此现象是由流动相不浸润固定相表面而致。当色谱柱出现疏水坍塌也是保留时间漂移的常见原因。常规的C18柱已经可以在95%左右的水相环境下正常使用而不发生疏水塌陷现象。纯水中使用，则建议使用经过修饰改性的专用耐水柱进行实验（例如月旭的Ultimate^® AQ-C18)。

色谱柱污染

保留时间漂移的另一个常见原因是色谱柱污染。如方法已经建立，在开始时没问题，在使用一段时间后出现这个问题，可能是由于色谱柱污染引起的。这时需要对色谱柱加强冲洗，即使用比方法流动相更强的溶剂冲洗色谱柱。也可以在检测样品基质比较脏时提前加保护柱。

其他因素

如果泵或者管路中有气泡，保留时间会前后漂移，可通过排气等将气泡赶出。泵单向阀中的宝石球磨损，造成流动相倒流，压力不稳定，保留时间会前后漂移。解决办法是更换部件。泵比例阀控制失灵，不同流路流动相比例不断变化，保留时间会前后漂移。解决方法是更换部件。泵活塞杆密封垫老化，流动相渗漏。解决办法是换密封垫。在线混合器混合能力变差，不接梯度测试混合能力，并同手工配置流动相比较。