海鲜组织中的兽药分析——实时直接分析 (DART) 和高效液相色谱 (HPLC) 与 Agilent 6400 系列三重四极杆质谱仪 (QQQ-MS) 联用系统

前言

水产养殖是一个不断增长的全球性行业；预计 2030 年以后全球产量可能超过 93000 吨。随着产量提高而不断增加的兽药使用量已成为全球关注的问题。虽然针对水产养殖用兽药和非处方抗生素的使用有相应的控制和监管措施，但某些国家对耐药性和毒性的担忧仍在不断增加。美国食品进口量持续增长，因而愈发需要一种快速灵敏的筛查技术，用于检测海鲜中未经批准的水产养殖用兽药。多家制造商已经开发出使用酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 来测定兽药残留的快速筛查方案。性能最佳、灵敏度最高的仪器方法当选高效液相色谱 (HPLC) 与串联质谱（MS/MS或三重四极杆/MS）联用系统，该仪器平台可显著降低背景信号，还能够准确定量测定样品基质中浓度极低的兽药。

另一方面，Ionsense, Inc. 的实时直接分析质谱 (DART-MS) 有利于对组织制品中的各类兽药进行实时实验室分析，同时省去了典型 HPLC-MS 所需的标准方案和程序。通常采用费时的 ELISA 试剂盒分析个别的目标兽药，借助 DART-MS 进行分析可以实时、同步地检测多种兽药类别。

开发如 DART-MS 的离子源技术，以便在大气压/地电位（分子电离至带电状态所消耗的最低能量）对材料和样品基质进行快速、非接触分析。将挥发性样品引入到一个真空源中，在那里与亚稳态原子相反应而发生电离。该技术诞生于 2005 年，首先在州和联邦实验室中用于筛查人用非法药物，并且已通过 HPLC-MS 技术验证为确证性方法。它已经有一些成功应用的示例，包括药物、代谢物、肽和低聚糖、合成有机物、有机金属化合物、滥用药、爆炸物和有毒工业化学品等的检测。DART-MS 当前用于混凝土、沥青、人体皮肤、货币、航空公司登机牌、名片、水果、蔬菜、香料、饮料、体液、园艺树叶、鸡尾酒杯和服装等各种表面，它可以实时地提供瞬间响应，这对于提高通量和增强分析能力至关重要。

三重四极杆 (QQQ) MS 技术已得到成功应用。它以 Agilent iFunnel 技术的高性能为基础，其中包括 Agilent 6495 三重四极杆液质联用系统，该系统能够检测极低浓度的兽药。6495 系统将分析灵敏度、动态范围、耐用性、精密度和准确度提升至前所未有的水平。本应用简报介绍了安捷伦专利技术 iFunnel QQQ 与 DART 离子源的实时分析能力结合的新用途，即，对添加兽药混标至海鲜组织中的虾和鱼类海鲜基质进行分析。

使用 Agilent 6400 系列三重四极杆/MS，以全面考察 DART 和 HPLC-ESI（电喷雾离子化）的功能，这是通过 Agilent 1290 HPLC-6495 系统和 DART-6495 系统并行地分析一系列兽药来实现。

结论

DART-MS/MS/MS 分析平台用于检测海鲜中兽药的有害浓度时操作简便、速度极快且试剂用量极低，是进行初步评估筛查，尤其是与确证性 HPLC-QQQ/MS 方法联用时的理想之选。DART-QQQ/MS 和 HPLC-QQQ/MS 均是为使用 Agilent 6400 系列三重四极杆/MS 检测兽药而开发的方法；其中一种分析方法是与 Agilent 6495 三重四极杆/MS 联用的 DART 作离子源从而实现快速、多种类分析的药物筛查，而另一种低浓度定量技术则使用配备 ESI 源的 Agilent 1290 HPLC 样品分离系统和 6495 系列三重四极杆/MS。进一步的系列实验，应是使用本应用简报中介绍的两种方法来加强对水产养殖药物的分析。