利用 Agilent Poroshell 120 4 μm 色谱柱轻松实现方法转移并改善性能

摘要

本研究中将最初在 4.6 × 100 mm, 5 µm 色谱柱上开发的分离九种酚类化合物的方法转移至采用 4 µm 和 2.7 µm 颗粒的 Agilent Poroshell 120 EC-C18, 4.6 × 100 mm 色谱柱。将这些色谱柱的性能与填充以 1.8 µm 全多孔颗粒的尺寸类似的色谱柱的性能进行比较。同时对梯度和流速进行扩展，并保持恒定的保留因子，以确定每种色谱柱的最佳流速。通过切换为 Poroshell 120 EC-C18 4 µm 色谱柱并对梯度进行优化，峰容量由 50 增加至 67。本应用简报提供了简单的方法转移指南。采用 4 µm 色谱柱的方法的背压低于 200 bar，这种方法可轻松转移至任何 HPLC 系统。

前言

多酚类物质是植物的次级代谢物，通常参与抵御紫外线辐射或病原体。过去十年来，人们日益关注膳食植物中的多酚类物质。

食品中的多酚类物质可影响苦味、涩味、色泽、味道、气味和氧化稳定性。所有植物性酚类化合物都是由共同的中间体苯丙氨酸或类似的前体莽草酸转化而来。在植物中发现的酚类-黄酮类化合物包括鞣花酸、儿茶酚、没食子酸、槲皮素、间苯二酚、丹宁酸、香草醛、水杨酸、乙酰水杨酸和苯甲酸。

环境中的酚类化合物主要在工业生产中产生。这些酚类化合物包括塑料中所用的抗氧化剂、农药中的酚类、煤炭、石油和木材的燃烧以及酚醛树脂生产过程中产生的酚类物质。在许多情况下，酚类化合物由自然过程产生。但是，当这些化合物排放到地下水时，它们会严重影响许多水生生物。因此，酚类化合物的分析测定非常重要，因为这些化合物具有毒性且使用广泛。

多年来，这类化合物的分析普遍采用5 μm HPLC 色谱柱。许多研究人员愿意为避免高压、不熟悉的仪器和可能的色谱柱堵塞问题牺牲效率和稳定性。与使用类似尺寸的 5 μm 色谱柱的方法相比，Agilent Poroshell 120 4 μm 色谱柱可改善分离能力。Poroshell 120 4 μm 色谱柱的背压仅略高于5 μm 色谱柱，可轻松用于相同的仪器。此外，其使用与5 μm 色谱柱相同的2 μm 滤芯，使其有助于避免色谱柱堵塞，并且无需额外的样品前处理。

本研究将梯度方法从4.6 × 100 mm, 5 μm 色谱柱转移至 Poroshell 120, 4.6 × 100 mm, 4 μm 色谱柱或Poroshell 120 2.7 μm 色谱柱。为确定最佳峰容量下的流速，我们对梯度进行了扩展。最后，我们比较了各实验的背压，证明Poroshell 120 色谱柱能够轻松应用于任何液相色谱系统。

结论

与填充以传统全多孔颗粒的色谱柱相比，填充以表面多孔颗粒的HPLC 色谱柱具有许多优势。Agilent Poroshell 120 EC-C18, 4 μm 色谱柱相比于5 μm 全多孔色谱柱大幅提升了柱效和峰容量。

表面多孔型2.7 μm Poroshell 120 EC-C18 色谱柱提供了与 1.8 μm Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 色谱柱类似的柱效和选择性，同时不会产生较高的背压。由于Poroshell 120 EC-C18 和ZORBAX Eclipse Plus C18 色谱柱之间具有类似的选择性，因此可轻松转移方法以缩短运行时间、改善通量并提高峰容量。