其他参数
本司产品仅用于科研,不用于临床诊断和治疗
1.产品名称:小鼠胰腺导管上皮细胞
2.组织来源:胰腺组织
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培
养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠胰腺导管上皮细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌生长抑素,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。成体胰腺导管上皮细胞作为胰腺前体细胞,已证实具多向分化潜能,在合适的外源性刺激下可分化成胰岛样细胞,胰腺导管上皮细胞转分化的胰岛样细胞免疫原性如何,转分化的胰岛样细胞在治疗糖尿病时是否发生免疫排斥反应,对干细胞临床治疗糖尿病具有重要意义。
注意事项如下:
(1)无菌操作:细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因,必须加强对无菌操作的观念,以预防为主,一旦污染,通常难以消除。
(2)培养基:所使用的培养基必须满足细胞存活和生长的必要条件。由于细胞来源的动物种类、组织类型不同,对培养基的要求也会有一定差异,必要时可通过预实验选择适宜的培养基。
(3)小牛血清:小牛血清对于维持培养细胞的存活和促进细胞增殖起着至关重要的作用。可以选择多个不同批次的小牛血清进行小样分析。一旦确定了某一厂家某一批次的小牛血清,就应坚持使用至实验结束。
(4)胶原酶溶液:必须新鲜配制,贮存时间过长(即使是低温保存在-20℃),也会影响消化效力,导致消化时间过长,增加细胞损伤。
(5)L-谷氨酰胺:几乎所有细胞对谷氨酰胺都有较高的需求,细胞需要谷氨酰胺来合成核酸和蛋白质,缺乏谷氨酰胺会导致细胞生长不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中不太稳定,在4℃冰箱贮存两周以上时,应重新加入相同量的谷氨酰胺。
(6)静置培养:原代细胞在消化分离后,放置于CO2培养箱的前24~48h(必要时达到72小时)内,应处于绝对静止状态,切忌频繁取出培养瓶观察生长情况,这会使原代分离细胞难以附着于壁面,更谈不上伸展和增殖。
(7)消化时间:通常消化至肉眼可见微小组织颗粒即可,因为此时组织颗粒已松散,稍加吹打即可形成细胞团或单个细胞,过长的消化时间往往导致细胞损伤加重,细胞培养成活率降低。
(8)其他生长因子:经过以上处理,一般原代分离细胞培养都可以成功。对于少数特殊类型的细胞,也可以考虑添加一些特殊的生长因子,例如胰岛素可以促进细胞对葡萄糖和氨基酸的摄取。此外,内毒素、EGF、FGF等也具有促进有丝分裂的作用,但费用较高。
原代细胞培养具体步骤如下:
1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30-60分钟。
4、剪切:用眼科剪把组织切成2-3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30-50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5、消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6、分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500-1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7、计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2-7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8、培养:置于37℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞,纱布塞易生霉菌,每次换液时需要换新塞。
下列是公司正在出售的产品:
MSTN人肌抑素酶联免疫试剂盒 | MALT Lymphoma Ab胃粘膜相关淋巴样组织淋巴瘤抗体ELISA试剂盒 |
dystrophin人肌养蛋白酶联免疫试剂盒 | GIP胃抑素ELISA试剂盒 |
MYOG人肌细胞生成素酶联免疫试剂盒 | GIF胃内因子ELISA试剂盒 |
CK-MM人肌酸激酶同工酶MM酶联免疫试剂盒 | 胃泌酸调节素ELISA试剂盒胃泌酸调节素ELISA试剂盒ELISA试剂盒 |
CK-MB人肌酸激酶同工酶MB酶联免疫试剂盒 | GCA胃泌素细胞抗体ELISA试剂盒 |
CK-BB人肌酸激酶同工酶BB酶联免疫试剂盒 | ProGRP胃泌素释放肽前体ELISA试剂盒 |
MUSKAb人肌肉骨骼受体酪氨酸激酶抗体酶联免疫试剂盒 | GRP胃泌素释放多肽ELISA试剂盒 |
MLCK人肌球蛋白轻链激酶酶联免疫试剂盒 | MTL胃动素ELISA试剂盒 |
MYS人肌球蛋白酶联免疫试剂盒 | GKN2胃动蛋白2ELISA试剂盒 |
DMPK人肌强直蛋白蛋白激酶酶联免疫试剂盒 | 胃蛋白酶原IIELISA试剂盒胃蛋白酶原IIELISA试剂盒ELISA试剂盒 |
TTN人肌联蛋白酶联免疫试剂盒 | 胃蛋白酶原IELISA试剂盒胃蛋白酶原IELISA试剂盒ELISA试剂盒 |
TN-R人肌腱蛋白R酶联免疫试剂盒 | GT胃蛋白酶ELISA试剂盒 |
MYO/MB人肌红蛋白酶联免疫试剂盒 | 胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒ELISA试剂盒小鼠胰腺导管上皮细胞 |
Cr人肌酐酶联免疫试剂盒 | 胃癌抗原MG7-AgELISA试剂盒胃癌抗原MG7-AgELISA试剂盒ELISA试剂盒 |
GHRL人饥饿激素酶联免疫试剂盒 | 胃癌标志物ELISA试剂盒胃癌标志物ELISA试剂盒ELISA试剂盒 |
ROS人活性氧酶联免疫试剂盒 | 未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒ELISA试剂盒 |
ALK1人活化素受体样激酶1酶联免疫试剂盒 | CpG-ODN未甲基化寡聚脱氧核苷酸ELISA试剂盒 |
ACV-A人活化素A酶联免疫试剂盒 | PYGO2/PP7910尾肢同源蛋白2ELISA试剂盒 |
FXa人活化凝血因子X酶联免疫试剂盒 | 尾加压素ⅡELISA试剂盒尾加压素ⅡELISA试剂盒ELISA试剂盒 |
FⅫa人活化凝血因子Ⅻ酶联免疫试剂盒 | UST2尾加压素2ELISA试剂盒 |
APC人活化蛋白C酶联免疫试剂盒 | PROZ维生素K依赖蛋白ZELISA试剂盒 |
MLKL人混合系列蛋白激酶样结构域酶联免疫试剂盒 | VK1维生素K1ELISA试剂盒 |
MLR-Bf人混合淋巴细胞反应封闭因子酶联免疫试剂盒 | VH维生素HELISA试剂盒 |
IgM人蛔虫抗体酶联免疫试剂盒 | VE维生素EELISA试剂盒 |
LH人黄体生成素酶联免疫试剂盒 | DBP维生素D结合蛋白ELISA试剂盒 |