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- 组织来源:胎盘组织
- 用途:仅用于科研研究实验
本司产品仅用于科研，不用于临床诊断和治疗
1.产品名称：小鼠胰腺上皮细胞
2.组织来源：胰腺组织
3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞简介：
小鼠胰腺上皮细胞分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌生长抑素，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰腺干细胞在发育上被认为分离自内胚层胰腺上皮，在随后的胰腺发育过程中，胰腺干细胞分化为胰岛细胞(α、β、δ、PP细胞)、导管上皮细胞以及腺泡细胞。胰腺组织中还存在大量的间充质来源的细胞，包括成纤维细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞以及星形细胞，其中以成纤维细胞占主要部分。要离体分离培养获得胰腺上皮细胞就要排除间充质来源的细胞，尤其是成纤维细胞。目前常用的去除成纤维细胞方法有机械刮除法、胰蛋白酶消化以及胶原酶消化法等，胰腺上皮细胞的病变与急慢性胰腺炎的发生具有重大意义。
注意事项如下：
（1）无菌操作：细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因，必须加强对无菌操作的观念，以预防为主，一旦污染，通常难以消除。
（2）培养基：所使用的培养基必须满足细胞存活和生长的必要条件。由于细胞来源的动物种类、组织类型不同，对培养基的要求也会有一定差异，必要时可通过预实验选择适宜的培养基。
（3）小牛血清：小牛血清对于维持培养细胞的存活和促进细胞增殖起着至关重要的作用。可以选择多个不同批次的小牛血清进行小样分析。一旦确定了某一厂家某一批次的小牛血清，就应坚持使用至实验结束。
（4）胶原酶溶液：必须新鲜配制，贮存时间过长（即使是低温保存在-20℃），也会影响消化效力，导致消化时间过长，增加细胞损伤。
（5）L-谷氨酰胺：几乎所有细胞对谷氨酰胺都有较高的需求，细胞需要谷氨酰胺来合成核酸和蛋白质，缺乏谷氨酰胺会导致细胞生长不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中不太稳定，在4℃冰箱贮存两周以上时，应重新加入相同量的谷氨酰胺。
（6）静置培养：原代细胞在消化分离后，放置于CO2培养箱的前24～48h（必要时达到72小时）内，应处于绝对静止状态，切忌频繁取出培养瓶观察生长情况，这会使原代分离细胞难以附着于壁面，更谈不上伸展和增殖。
（7）消化时间：通常消化至肉眼可见微小组织颗粒即可，因为此时组织颗粒已松散，稍加吹打即可形成细胞团或单个细胞，过长的消化时间往往导致细胞损伤加重，细胞培养成活率降低。
（8）其他生长因子：经过以上处理，一般原代分离细胞培养都可以成功。对于少数特殊类型的细胞，也可以考虑添加一些特殊的生长因子，例如胰岛素可以促进细胞对葡萄糖和氨基酸的摄取。此外，内毒素、EGF、FGF等也具有促进有丝分裂的作用，但费用较高。
原代细胞培养具体步骤如下：
1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30-60分钟。
4、剪切：用眼科剪把组织切成2-3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30-50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。
下列是公司正在出售的产品：
| CKMB人激动异构酶/细胞分裂素MB酶联免疫试剂盒 | CK 18-M30细胞角蛋白18-M30ELISA试剂盒 |
| SDF-1β/SDF1B人基质细胞衍生因子1β酶联免疫试剂盒 | CK-18细胞角蛋白18ELISA试剂盒 |
| SDF1A人基质细胞衍生因子1a酶联免疫试剂盒 | CK17细胞角蛋白17ELISA试剂盒 |
| MAT人基质裂解蛋白/基质溶素酶联免疫试剂盒 | CK-13细胞角蛋白13ELISA试剂盒 |
| TIMP-1人基质金属蛋白酶组织抑制因子1酶联免疫试剂盒 | CTLA-4/CD152细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4ELISA试剂盒 |
| TIMP-4人基质金属蛋白酶抑制因子4酶联免疫试剂盒 | CagA细胞毒素相关蛋白AELISA试剂盒 |
| TIMP-3人基质金属蛋白酶抑制因子3酶联免疫试剂盒 | CTX细胞毒素ELISA试剂盒 |
| TIMP-2人基质金属蛋白酶抑制因子2酶联免疫试剂盒 | IAP细胞凋亡抑制因子ELISA试剂盒 |
| MMP-9/GelatinaseB人基质金属蛋白酶9/明胶酶B酶联免疫试剂盒 | PYCARD细胞凋亡相关斑点样蛋白ELISA试剂盒 |
| MMP-8人基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶酶联免疫试剂盒 | SLE系统性红斑狼疮ELISA试剂盒小鼠胰腺上皮细胞 |
| MMP-7人基质金属蛋白酶7酶联免疫试剂盒 | NSE烯醇化酶ELISA试剂盒 |
| MMP-5人基质金属蛋白酶5酶联免疫试剂盒 | SELENBP1硒结合蛋白1ELISA试剂盒 |
| MMP-4人基质金属蛋白酶4酶联免疫试剂盒 | SELS硒蛋白SELISA试剂盒 |
| MMP3/STR1人基质金属蛋白酶3/基质裂解素1酶联免疫试剂盒 | SEPP1硒蛋白PELISA试剂盒 |
| MMP25人基质金属蛋白酶25酶联免疫试剂盒 | 44440硒蛋白1ELISA试剂盒 |
| MMP-2/GelatinaseA人基质金属蛋白酶2/明胶酶A酶联免疫试剂盒 | IgG戊型肝炎病毒抗体ELISA试剂盒 |
| Pro-MMP-1人基质金属蛋白酶1酶原酶联免疫试剂盒 | HEV-IgM戊型肝炎病毒IgMELISA试剂盒 |
| MMP-14人基质金属蛋白酶14酶联免疫试剂盒 | HEV-IgG戊型肝炎病毒IgGELISA试剂盒 |
| MMP-13人基质金属蛋白酶13酶联免疫试剂盒 | HIP1舞蹈病蛋白相互作用蛋白1ELISA试剂盒 |
| MMP-12人基质金属蛋白酶12酶联免疫试剂盒 | PTX3五聚素3ELISA试剂盒 |
| MMP-10人基质金属蛋白酶10酶联免疫试剂盒 | FCN2无花果酶2ELISA试剂盒 |
