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原来还可以用这种方法代替动物实验！？

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分享： 2024/08/02 15:29:10

重组人体表皮（RhE）可以部分替代动物实验、甚至可能比动物实验更能作为人体情况预测参考的系统，因此在刺激性和腐蚀性化学品的危害识别和监管领域（如OECD TG 431试验）具有重要的价值。制药和化妆品等领域也始终在尝试借助人造人体组织开展耐受性、毒理学和刺激性研究，从而尽可能地减少开展动物实验。

用于监管决策的RhE必须经过验证满足一定的质量标准，才能够可靠地区分化学品的潜在危害性。研究人员用BRAND Insert 2in1嵌套培养小室体系，采用先浸没培养、后气液相（ALI）培养的方式构建出了RhE，并对其形态、屏障功能和化学品体外腐蚀进行了检测。

结果显示，用BRAND Insert 2in1嵌套培养小室建立的RhE模型在形态学、屏蔽功能检测和体外腐蚀性测试实验的检测结果与其他品牌小室内建立的没有显著差异，并且在体外腐蚀性测试实验结果统计中表现出更小的标准偏差。

形态学检测

对RhE模型的横截面进行HE染色，可以看到清晰的组织结构。

图1. 对在BRAND Insert 2in1嵌套培养小室（左）与某品牌小室（右）中培养的RhE模型进行HE染色，人源性角质形成细胞发育成了具有多层角质的结构。

屏障功能检测（EC50）

在570nm波长下检测出给定的时间里暴露于化学品的培养物平均存活率大于50%，显示RhE模型具有明显的屏障功能。

图2. 用MTT法检测暴露于PBS和Triton X-100的RhE模型活性。

体外腐蚀性测试实验

阴性对照测试比对结果显示，在BRAND Insert 2in1嵌套培养小室与某品牌小室中培养的RhE模型存活率相近，并且由BRAND Insert 2in1嵌套培养小室建立的RhE模型存活率结果的数据标准偏差更小。

表1. MTT法检测暴露于PBS的RhE模型活性

为了测试RhE模型是否可用于鉴别化学物质的潜在腐蚀性，将建立的RhE模型暴露在一组化学物质中3分钟或60分钟后，对其进行MTT检测，并将检测结果进行归一化处理。结果显示，暴露后，RhE模型在非腐蚀性物质，如4-（甲硫基）-苯甲醛中可以保持大于50%的活性，而在预评估为腐蚀性物质的甲酸、乳酸中以及阳性对照组实验中的活性显著降低。

图3. 不同化学物质的腐蚀性比较（NC，阴性对照。PC，阳性对照）

综上所述，BRAND Insert 2in1嵌套培养小室建立的RhE模型，具有良好的形态，清晰的组织结构，完整的屏障功能，可用于体外化学腐蚀性分析，并能带来更稳定的检测数据。

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[来源：普兰德（上海）贸易有限公司]

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