由于分辨率是由整个光学系统决定的,而MAICO模块本身不带光路,因此没有单独的分辨率概念。其分辨率需结合物镜和放大倍率来考虑。
等效像素尺寸说明
分辨率公式:宽场显微镜VS共聚焦显微镜
滨松共聚焦模块MAICO的XY方向分辨率最大可达到120-200 nm之间,Z轴可达到250-400 nm(以100× NA1.5为例),具体数值依激光波长不同而有所变化。
或者复制如下链接进入下载页面:https://www.hamamatsu.com/jp/en/product/life-science-and-medical-systems/mems-confocal-unit/resolution-simulator.html
为了达到最佳的分辨率,理论上针孔尺寸应当越小越好,不过为了在分辨率和图像灵敏度两者之间取得平衡,可以适当地设置针孔尺寸以达到最合适的图像质量。
针孔尺寸的选择
MAICO为每个通道设置了三档可选的针孔尺寸:S(小)、M(中)、L(大)。
弱荧光样品:推荐使用L(大)针孔,以提高图像信噪比。
强荧光样品:推荐使用M(中)或者S(小)针孔,以获得更高的分辨率。
物镜选择建议
由于光学设计方面限制的原因,我们推荐使用20-100倍的物镜,且物镜NA与放大倍率m满足如下关系:
其中,NA为数值孔径,m为放大倍率。
通过合理配置物镜、放大倍率和针孔尺寸,滨松共聚焦模块MAICO能够提供卓越的分辨率和图像质量,满足各种科研和应用的需求。利用MAICO Resolution Simulator工具,用户可以轻松查询并优化其共聚焦系统的分辨率。
[来源:滨松光子学商贸(中国)有限公司]
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