建议收藏！参考这些稳定性因素可大大降低ADCs开发过程的风险

单克隆抗体: 可能是已经存在的抗体，其相互作用的抗原已知且特征明确。或者，您可能正在开发针对新靶标抗原的抗体，或者与原始抗体具有不同的特性的抗体。

小分子药物: 与单抗一样，这种小分子药物可能已经被用作独立的治疗药物，或者可能是从合成药物库中提取出来的。它也可以从片段库构建。可能需要对药物进行额外的修饰，以防止与抗体的干扰，或为Linker提供空间。

Linker: Linker必须将小分子连接到抗体上，使小分子的活性部分能够接触到目标蛋白质。在构建最终ADCs时，Linker的长度、与抗体的连接方法以及释放小分子的能力是关键考虑因素。

有许多偶联的方法，这取决于linker连接的位置。

偶联反应通常需要孵育30分钟到几个小时，偶联缓冲液可能对作为蛋白质的单抗来说是“苛刻”。但是，长时间的孵育会增加小分子的连接。

偶联程度的影响。这里有一个具体的例子可以让你更容易理解为什么这是一个重要的考虑因素：

1. 对于通过赖氨酸末端氨基连接的药物，偶联反应将发生在任何暴露在溶液中的赖氨酸和linker的活性端之间。

2. 单克隆抗体每个分子含有多达80个赖氨酸，其中许多是溶液暴露的。

3. 这意味着每个ADC分子可能是多个药物偶联一个抗体。

4. 存在药物与抗原结合区域的赖氨酸结合的风险，从而使抗体的靶向功能降低或丧失。

小分子靠近抗体会改变其化学环境，从而影响其稳定性。如果小分子对抗体结构的影响太大，ADC就会展开或聚集。

确保充分去除偶联后的游离药物分子。自由移动的小分子会影响ADC的构象稳定性。

降低药物对抗体结构影响的一种方法是改变linker长度。

Linker必须对单克隆抗体没有任何结构上的影响；此外，将其与单克隆抗体和小分子连接所需的化学物质不得破坏两者的结构或构象完整性。

Linker有许多化学方面的考虑，包括确保它最终将药物释放到靶细胞中。

一旦确定了偶联方法、linker和与抗体偶联的药物，您还需要优化其缓冲制剂配方，能够稳定单克隆抗体的缓冲液用于ADC时，可能不会使单克隆抗体保持相同的稳定性。

偶联方法:确定您将使用的偶联方法是否具有灵活性，并对替代方法进行实验

单抗的稳定性:在与所需偶联反应兼容的缓冲液中配制或测试其稳定性，以确保其在偶联过程中保持活性

单抗暴露于偶联条件下:如果无法优化偶联缓冲液，并且您知道缓冲液不稳定，则需要减少单抗暴露于偶联条件下

Liner长度:测试linker长度;药物会改变单抗的化学环境，这将影响其稳定性