导读
01
复旦大学生命科学学院唐惠儒教授团队在期刊《Journal of the American Chemical Society》上发表了题为“Detecting Submicromolar Analytes in Mixtures with a 5 min Acquisition on 600 MHz NMR Spectrometers”的研究论文,研究人员报告了一种新策略,通过结合探针诱导的灵敏度增强和基于NUS的1H-13C HSQC 2D NMR(PRISE-NUS-HSQC),在经济高效的常规600 MHz光谱仪上进行5分钟采集,即可同时检测复杂混合物中的亚微摩尔氨基化合物。
研究背景
02
氨基化合物广泛存在于化学、生物学、医学、食品和环境科学等领域的复杂混合物中,涉及药物杂质、蛋白质代谢、生物系统中的生物胺、神经递质和嘧啶等。核磁共振(NMR)光谱是一种优秀的工具,可以同时鉴定和定量这些混合物中的化合物,但其检测限度(LOD)在几微摩尔以上(>5 μM)。
研究发现
03
研究人员开发了一种敏感而快速的方法,通过结合探针诱导的灵敏度增强和非均匀采样基于1H-13C HSQC 2D-NMR(PRISE-NUS-HSQC),引入了两个13CH3标记物,分别增加了每个分析物的1H和13C丰度,最多可增加6倍和200倍。这使得能够在5 mm试管中以5分钟采集时间在600 MHz光谱仪上高分辨率检测0.4-0.8μM的分析物混合物。该方法比传统的1H-13C HSQC方法(约50μM,>10小时)更敏感且更快。此外,研究人员使用磺胺酸作为单一参考物,建立了一个数据库,涵盖了100多个化合物的化学位移和相对响应因子,从而实现了可靠的鉴定和定量。
研究结果
04
综上所述,研究人员通过将探针诱导的灵敏度增强与基于NUS的1H-13C HSQC 2D-NMR相结合,开发出了一种同时定量复杂混合物中氨基化合物的新策略。该方法在多种生物基质中展示了良好的定量线性、准确性、精密度和适用性,为化学、药物、代谢组学、食品和其他混合物的大规模定量分析提供了一种快速而敏感的方法。
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