图像数据采集和分析为深入分析高度异质的肿瘤细胞和可塑多变的肿瘤微环境提供了宝贵的空间分布信息,这是传统组化或2D成像的方法无法企及的,伴随样本前期制备必需步骤切片而带来伪信号、人为偏碍和后期数据叠加拟合引入误差等因素带来巨大局限性。
三维整体光片成像该技术为肿瘤免疫治疗药物开发早期阶段开展药物递送途径、监测免疫细胞浸润等研究提供更直观的数据依据。
以CAR-T细胞用于实体肿瘤治疗为例,CAR-T细胞向肿瘤实体内部有效浸润、分布及持续存在时间是开发构建CAR-T细胞早期的重要评价依据,但现有研究技术缺乏能获取相关数据的方案,更无法使之可视化。在用于胰腺癌细胞治疗方案前期开发中,科学家构建了CD66c-LNGFR+ 的二代CAR T细胞,并采用较长波长可激发的荧光染料Vio® 667 Dye对之进行标记(可有效提升光片成像信号强度并降低信噪比)。三维成像图中可清晰观察到实体肿瘤内部坏死区域(黑色无信号),CD66c-LNGFR+ CAR-T治疗可令肿瘤血管化程度明显提高(Rhodamin-Lectin标记血管)但该CAR-T细胞不具备较好浸润肿瘤实质的作用(Vio667仅位于肿瘤表层的信号分布)。
三维立体成像效果:
类器官3D光片成像
在当前领先的肿瘤类器官在个体化治疗的药物筛选应用中,类器官鼻祖Hans Clevers也极为认同三维整体成像技术能更好提取类器官立体空间中特定细胞位置与分化的关系,是类器官研究的技术趋势。
同时结合高通量成像方法,可有效降低不同实验批次的组内差异,为获得治疗有效性预测提供稳定可靠的依据。
作为目前较领先的成像技术,完整组织三维光片成像技术尚未普及。基于当前最先进光片成像系统美天旎UltraMicroscope和在肿瘤免疫学的专业积淀,我们将介绍当前最为领先的完整组织三维立体成像的方法实现高分辨率的实体肿瘤微环境可视化分析。
此次网络课程包含如下内容:
大样本组织三维立体光片成像的基本原理
满足光片成像的样本制备解析
大样本组织三维立体光片成像技术在肿瘤免疫学中的应用
概述如何针对多个肿瘤样本进行图像采集及数据分析
实例展示光片成像在细胞浸润肿瘤实体并进行示踪的应用
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(可收看直播和回放)
[来源:德国美天旎生物技术公司]
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