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使用 Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱和 Agilent 1260 Infinity II 液相色谱系统对 18 种抗生素进行有关物质分析
2018/11/14 10:27
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方案摘要：
产品配置单：
Agilent 1260 Infinity II 液相色谱系统
型号： 1260 Infinity II
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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Agilent 1290 Infinity II Multisampler
型号： 1290 Infinity II Multisampler
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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方案详情：
摘要
本文介绍了使用 Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱及 Agilent 1260 Infinity II 液相色谱系统对 18 种抗生素进行有关物质分析的结果。本实验使用《中国药典》建议的流动相，能够获得出色的分离度及稳定的分析结果。本文提供的相关图谱可作为抗生素 SEC 分析的参考。
前言
抗生素是临床常用的药物之一，较易发生过敏反应。抗生素中的高分子聚合物杂质是引发过敏反应的真正过敏原，因此严格控制抗生素药物中的高分子聚合物含量具有重要意义。聚合物含量通常照分子排阻色谱法测定。目前大多采用葡聚糖凝胶柱，但此类填料的机械强度差且柱效低，因此聚合物分析填料逐渐发展为球状亲水硅胶。
《 中国药典》已有数个品种以有关物质 II 的检测项目形式收载了使用球状亲水硅胶 SEC 的方法。目前市面上主要有两种类型的球状亲水硅胶基质：键合二醇基的硅胶 (USP L20) 和键合亲水涂层的硅胶 (USP L59)。较为传统的 USP L20 键合相由于存在较多的残留硅醇基，通常需要较高离子强度的流动相以克服非特异性相互作用。而 Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱（L59 型）采用聚合物亲水涂层，残留硅醇基数目大幅减少，从而能够有效抑制非特异性相互作用，实现聚集体的准确定量分析。此外，2.7 μm的填料粒径以及更大的孔容设计，都有助于进一步提升色谱分离效果。
结论
本文使用 AdvanceBio SEC 130Ǻ , 7.8 × 300 mm, 2.7 μm 色谱柱，采用《中国药典》现有球状亲水硅胶 SEC 柱的分析方法，对 18 种抗生素进行了有关物质分析，分离度与 TSK G2000SWxl 相比提升 20%；传统 G-10 柱聚合物峰与主峰不能达到基线分离，使用 AdvanceBio SEC 130Ǻ , 7.8 × 300 mm, 2.7 μm 色谱柱，主峰相邻峰与主峰基本能实现基线分离，获得了出色的分离度及稳定的结果 。该方法可以作为各个生产企业及检测机构抗生素质量控制中有关物质 II 检项的参考。
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