应用 Agilent Bond Elut Plexa PCX 和 Agilent Poroshell 120 对尿液中的苯甲酰爱康宁进行 SAMHSA 标准的 LC/MS/MS 分析

摘要

由美国药物滥用与精神健康服务管理局（SAMHSA）颁布，于2010 年10 月生效的新准则，允许在政府认证的药物检测实验室采用LC/MS/MS 法确认初步药物测试结果。由于LC/MS/MS 法不需要衍生步骤，因此它远比以前应用的GC/MS 法要简便的多。我们提出了一种满足最新SAMHSA 准则要求的苯甲酰爱康宁的分析方法，并对其线性、检测限（LOD）、准确度和精密度进行论证，还对该方法的基质效应、萃取回收率和总处理效率进行了考察。这是涵盖所有SAMHSA 监控药物类别的一系列六种简便检测方法之一，该方法主要使用安捷伦产品进行分析，包括Agilent Bond Elut Plexa PCX 混合模式聚合物SPE 吸附剂，Agilent Poroshell 120 EC-C18，2.7μm 表面多孔LC 色谱柱，Agilent 1200 Infinity LC 系统以及采用安捷伦喷射流技术（AJST）增强电喷雾离子源的Agilent 6460 Triple Quadrupole LC/MS 系统。

前言

苯甲酰爱康宁（BE）是可卡因存在于尿液中的一种主要代谢产物，可卡因是强烈的具有成瘾性的神经系统兴奋剂和局部麻醉剂。可卡因可在酶催化下水解为苯甲酰爱康宁（发生在肝脏），也可以不经过酶催化，而在碱性pH 条件下生成苯甲酰爱康宁（Anon.，2011）。苯甲酰爱康宁可在摄入可卡因后的几天内在尿液中检出。在冷冻贮藏的尿样中苯甲酰爱康宁相对稳定，而在较高温度和碱性条件下，它能进一步发生水解。SAMHSA 规定苯甲酰爱康宁的最高限量浓度为100 ng/mL，其检测限为限量浓度的 10%，即10 ng/mL。

由于Agilent Bond Elut Plexa 吸附剂的独特性质，本文所描述的提取方法实现了对苯甲酰爱康宁萃取的高回收率提取，且重复性好。不像其它聚合物吸附剂，Plexa 颗粒具有无氨基的羟基化表面，避免了蛋白质的结合。从而获得了最小的离子抑制作用和最高的检测灵敏度。高流速和良好重现性的实现，主要得益于Plexa柱填料的窄粒径分布，并且不存在容易导致堵塞的细颗粒。

采用Agilent Poroshell 120 EC-C18，3 × 50 mm，2.7 μm 色谱柱是由于其具有较高的载样量和极佳的分离性能。填充表面多孔 2.7 μm 颗粒的Poroshell 120 色谱柱能提供与亚2 μm UHPLC 色谱柱类似的柱效，但其背压却减少了约40%。因此，它甚至允许用户在耐压400 bar 的常规液相系统上采用较高的流速来提高分辨率，并同时缩短分析时间和再平衡的时间。

在较小的样品进样体积（2 μL）且无样品预富集的条件下，该方法具有极佳的信噪比（样品浓度10 ng/mL 时>400:1，此浓度是 SAMHSA 规定限量浓度的10%），这得益于采用了AJST 技术的 Agilent 6460 Triple Quadrupole LC/MS 系统电喷雾离子源增强了检测灵敏度。

安捷伦以前的分析方法（由Moorman 和Hughes 开发, 2010）采用的是Agilent 6410 Triple Quadrupole LC/MS 系统和其它的 SPE/LC 产品和操作步骤。

结论

本文所描述的固相萃取样品制备与LC/MS/MS 检测相结合的分析方法完全符合SAMHSA 要求，为认证实验室的药物测试或其它有类似要求的分析环境的测试提供高准确度、高精密度、高重现性的有法律效力的数据结果。其硬件配置与 2011 版SAMHSA 方法中的相同均来自安捷伦。这些方法特别为安捷伦1100 和安捷伦1200 LC 系列的所有用户开发，这些LC 系统的最高背压均不超过400bar。采用其它型号的安捷伦三重四极杆LC/MS 系统应用本方法时，离子源参数可以很容易地进行修改。安捷伦科技可提供电子版本的LC/MS/MS 数据采集和定量分析方法。