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Agilent AdvanceBio 脱盐反相小柱在 mAb 的 LC/MS 分析中的应用——一维和二维 LC/MS 研究
2018/09/04 17:18
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方案摘要：
产品配置单：
Agilent 1290 Infinity II 二维液相色谱解决方案
型号： 1290 2D-LC
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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OpenLAB 软件
型号： OpenLAB
产地： 美国
品牌： 安捷伦
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Agilent 1290 Infinity II Multisampler
型号： 1290 Infinity II Multisampler
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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方案详情：
摘要
本应用简报介绍了经液相色谱分离的单克隆抗体 (mAb) 在质谱表征前，如何通过 Agilent AdvanceBio 脱盐反相小柱进行高效脱盐处理。高度重现的质谱和总离子流色谱图 (TIC) 表明 AdvanceBio 脱盐反相小柱具有始终如一的性能。Agilent 1290 Infinity 二维 LC/MS 解决方案可以使用中心切割技术对 mAb 进行在线脱盐和表征。
前言
单克隆抗体 (mAb) 代表一类主要的治疗性蛋白质。监测 mAb 异质性时需要使用多种分析工具。液相色谱/质谱 (LC/MS) 是表征这些生物分子的常用技术。为便于制备和储存，mAb 通常含有非挥发性盐分和增溶剂。这些试剂的存在会对质谱分析产生负面影响，通过抑制离子化使 LC/MS 的应用受到局限。因此，十分有必要在质谱分析前去除这些盐分和表面活性剂。本研究评估了新型脱盐小柱在一维和二维 LC/MS 蛋白质应用中的作用。脱盐反相液相色谱方法使用聚合物型脱盐材料开发而成。为实现高效的脱盐性能，本研究进行了含盐样品（一维）分析以及两个多维分离实验（离子交换色谱和反相色谱）。本应用简报所述的脱盐方法证明了如何通过结合脱盐小柱与质谱来改善溶液中含有盐和表面活性剂样品的蛋白质质谱。
结论
经液相色谱分离的单克隆抗体 (mAb) 在进行质谱表征前，可利用 Agilent AdvanceBio 脱盐反相小柱进行高效脱盐处理。进样间重现性为 AdvanceBio 脱盐反相小柱的高性能提供了支持。Agilent 1290 Infinity 二维 LC/MS 解决方案可以使用中心切割技术对 mAb 进行在线脱盐和表征。
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