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使用 Agilent Bond Elut Plexa SPE 和 LC/MS/MS 测定血清中的激素
2018/08/28 15:58
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方案摘要：
产品配置单：
Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统
型号： 1290 Infinity II
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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Agilent 1290 Infinity II Multisampler
型号： 1290 Infinity II Multisampler
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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方案详情：
摘要
本研究开发出一种用于测定血清中的 13 种激素及其相应的内标的方法。首先使用 Agilent Bond Elut Plexa 固相萃取 (SPE) (30 mg, 1 mL) 小柱从血清中萃取激素。在 Agilent InfinityLab Poroshell HPH-C8 色谱柱 (2.1 ×50 mm, 2.7 μm) 上将激素分离，随后通过液相色谱-串联质谱联用系统(LC/MS/MS) 进行分析。在正负离子电喷雾电离 (ESI) 模式下使用 1 mM 氟化铵流动相分析激素，以改善两种模式下的激素响应。总体回收率在 80%至 105% 范围内，相对标准偏差 (RSD) 介于 2.8% 和 5.8% 之间。本应用简报证明了 Bond Elut Plexa SPE 小柱能够简便且高效地测定血清中的激素。
前言
本研究开发出一种用聚合物固相萃取 (SPE) 测定血清中的类固醇激素的方法。Agilent Bond Elut Plexa具有独特的聚合物架构，且有羟基化、无保留性、不含酰胺的表面。蛋白质和脂类极少结合到聚合物表面，使得样品更干净，并降低了基质干扰效应。非极性 PS-DVB 内核非常适合保留激素等小分子。本应用简报证明了 Bond Elut Plexa SPE 小柱的简便易用性和有效性。
结论
本研究开发出一种使用 Agilent Bond Elut Plexa SPE 小柱测定血清中的 13 种激素及其相应内标的方法。通过加入 1 mM 氟化铵，在 Agilent 6460 三重四极杆 LC/MS/MS 的正负离子模式下，分析物的响应均获得很大增加。采用 Agilent InfinityLab Poroshell HPH-C8 (2.1 mm × 50 mm, 2.7 μm) 色谱柱可快速完成分析，使三对同质量异构体得到基线分离，获得更高重现性的积分和定量。此外，该色谱柱适用的 pH 范围较宽，是方法开发的理想色谱柱。本文所述的方法提供了优异的回收率 (80%-105%) 和较低的 RSD 值 (2.8%-5.8%)。Agilent Bond Elut Plexa SPE 产品几乎无需方法开发，且简便易用，因此是生物分析的理想选择。
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