2018/06/29 13:14
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前言
采用分光光度法监控反应底物的减少或反应产物的增加,可以跟踪对-硝基苯基乙酸酯 (pNPA) 的水解反应过程。监控浓度变化的速率可以确定反应的速率。
Agilent Cary 8454 紫外-可见二极管阵列分光光度计只需 0.1 秒的时间就能够获得全光谱。您可以根据需要随时从储存的光谱数据中提取出随时间变化的吸光度。由于包含整个波长范围的数据是在同一个实验里同时获得的,因此,可以对不同波长的结果进行准确的阐释,为反应机理的研究提供有用的信息。
采用传统的扫描分光光度计,通常能够比较方便地在单一波长或者选定的几个波长上跟踪反应的动力学过程,如果反应非常快速,则使用分光光度计是必需的。对于 pNPA 的水解反应过程,可以在 270 nm 下监控 pNPA 的消耗或在 405 nm 下监控对-硝基苯酚的生成。然而,由于没有监控整个光谱范围,有可能漏掉实现数据准确分析所必需的重要数据。
除了快速、精确的测量,精确的温度控制对于准确的动力学测量也是至关重要的。根据所研究的反应不同,仅仅 1 °C 的变化就有可能导致观测到的反应速率发生重大变化。Agilent
Cary 8454 提供的帕尔贴温度控制附件(部件号 89090A)可以精确控制温度,能够加热或冷却样品,还能利用温度探头测量样品的温度。
结论
Agilent Cary 8454 可见-紫外光分光光度计是酶催化反应或化学反应动力学分析的理想工具。本文展示了帕尔贴温度附件在反应温度可靠控制方面的有效性,它使得仪器在整个动力学分析期间具有卓越的稳定性。
二极管阵列分光光度计具有许多优点,其全光谱采样时间仅仅只需 0.1 秒。
全光谱采集功能让用户能够获得反应相关的所有数据。它能让用户在数据采集之后方便快捷地在任何波长下对反应速率进行处理。另一方面,通过监控一定的波长范围,光谱可用于多组分分析以确定在各个测量时间点反应底物和产物的浓度。
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