基于 Orbitrap 技术的高分辨质谱 Q Exactive 大规模兽药筛查整体解决方案

目前常见的兽药主要有喹诺酮类、β-受体激动剂类、磺胺类、大环内脂类、激素类、氯霉素类、头孢类、青霉素类等化合物。过量服用这些药物的畜禽可通过代谢途径进入动物体内，最终通过食物链在人体内蓄积，导致过敏反应和使人体产生抗药性的副作用，甚至是更严重的危害。相关标准和文献报道的多种类兽药同时分析尚不多见，主要原因一方面是兽药及其代谢物多达几百种，化学特性差异极大，既有强极性的水溶性化合物又有完全非极性的脂溶性化合物；另外，肉类样品含有较多的蛋白质（15-25%）、脂肪（5-25%）和磷脂（1-3%），使得基质非常复杂。开发有效、快速、化合物通量高的的样品前处理方法便成为实现利用 LC-MS/MS 对多种类兽药同时筛查和确证的必要前提；同时开发多兽药残留检测的 LC/MS/MS 仪器方法也具有相当的挑战性，对仪器的灵敏度、抗基质干扰能力、分辨率等性能均有较高的要求。因此，亟需一套完整可靠的分析方法对肉类食品中的多种兽药残留进行筛查， 以提高食品安全监管水平，保障公众健康和安全。

Q-Exactive 是赛默飞世尔科技推出的新型高分辨质谱仪， 它将高性能四极杆的离子选择与 Orbitrap 高分辨准确质量（HR/AM）测量技术相结合，具有高达 140000 FWHM 的分辨率和长期稳定的高质量精度，可获得高质量的一级、二级质谱图，保证筛查结果的可靠和准确性；并提供各种高分辨扫描功能以适应不同的应用需要。同时具有媲美高端三重四极杆的定量能力，可轻松定量复杂基质中痕量兽药残留。

本应用旨在解决上述具有挑战性难题，研究开发了一套专门针对动物源食品中常见兽药残留快速筛查和确证的LC/MS/MS 方法。实验选择了猪肉、鸡肉、鸭肉进行实验， 并在样品中添加了 200 多种常见兽药，加标浓度为 1.0 µg/Kg 和 5.0 µg/Kg。实验采用酸化乙腈/ 水进行提取并沉淀蛋白， 使用 HyperSep Retain-PEP SPE 小柱对样品进行快速有效的净化，结合高分辨质谱 Q-Exactive 快速筛查和确证样品中多兽药残留。实验结果表明，1.0 µg/Kg 添加浓度在基质中兽药残留检出率均在 84% 以上，5.0 µg/Kg 添加浓度在基质中兽药残留检出率均在 92% 以上。

本应用针对目前多兽药残留的各种挑战，开发了一种专门针对动物源食品中常见兽药残留快速筛查和确证的LC/MS/MS 方法，并取得了满意的效果。结果表明：添加浓度为 1.0 µg/Kg，基质中所有化合物的检出率 > 84%； 添加浓度为 5.0 µg/Kg，基质中所有化合物的检出率 > 92%。该方法使用 HyperSep Retain-PEP SPE 小柱对样品进行快速有效的净化处理，然后由高分辨质谱 Q Exactive 分析，结合 Accucore RP-MS 低流失质谱柱和 TraceFinder 软件从多个维度对目标物进行确证，从而实现对动物组织样品中多兽药残留的准确、快速筛查。Accucore RP-MS 选择性与 C18 类似，且同时具备高效率和低拖尾因子，是MS 检测的首选。Q Exactive 具有高达 140000 的分辨率、出色的质量精度、高灵敏度和宽动态范围等特点，具有非常优异定性和定量表现，是食品安全领域未知残留物的大范围筛查和定性定量分析的最佳平台。