AsPC-1/GEM人转移胰腺腺癌细胞吉西他滨耐药株

AsPC-1/GEM人转移胰腺腺癌细胞吉西他滨耐药株

商品介绍：

细胞名称：AsPC-1/GEM人转移胰腺腺癌细胞吉西他滨耐药株

细胞特性

1）来源：ASPC-1耐药筛选

2）形态：上皮细胞样，贴壁生长

3）含量：>1×10⁶细胞数            

4）用途：仅供科研使用

细胞运输、保存及注意事项：干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照以下处理方法操作：

1、收到细胞请先就培养瓶/冻存管的外观、细胞的状态，进行拍照并保存，如有问题请及时联系我们；

2、收到的复苏细胞，若有较多细胞飘起，可能由于运输导致。请先置于37℃细胞培养箱中静置2~4h，待细胞贴壁后再做处理；

3、复苏细胞充液培养基为不含药物的维持培养基，收到细胞后请及时更换为培养基；

4、建议收到细胞后，首先进行扩增，并冻存部分细胞以备用。

细胞耐药诱导过程

待细胞生长稳定后，开始倍增药物诱导剂量，每个剂量保持至细胞可以稳定生长至汇合度达50%以上。递增药物浓度依次为：0.03μg/mL、0.3μg/mL、1.5μg/mL、3μg/mL、6μg/mL、12μg/mL、18μg/mL。约10个月后，细胞可在18μg/mL GEM药物浓度下稳定生长，视为耐药细胞株构建成功，并命名为ASPC-1/GEM。

细胞培养试剂的配制

1）GEM药物的配制及保存

建议将GEM药物配制成18mg/mL的母液：即使用1mL DMSO溶液溶解18mg GEM药物，使其溶解。

注意：可根据用量配置药物，并将药物分装保存，避免反复冻融导致药物失效。溶解后的GEM，4℃保存1周，-20℃保存1个月，-80℃保存6个月。

2）冻存液的配制

90%优质胎牛血清+10%DMSO，现用现配。

参考资料(来源文献)

‌细胞系与细胞株特性与应用‌：

细胞系：

细胞系可以连续传代培养，通常可以无限期地保持下去，具有无限繁殖能力。

细胞系在基础生物学研究、药物筛选、毒性测试等领域广泛应用，常用于探究细胞的生物学特性、疾病机制以及药物开发等方面。

著名的例子包括HeLa细胞系，它来自于1951年Henrietta Lacks的宫颈癌组织，被广泛用于医学研究，但也引发了一系列伦理和法律问题。‌

细胞株：

细胞株具有较高的同质性，细胞在传代培养的过程中能够保持较稳定的性状和功能。

细胞株常用于特定的实验或应用中，因为它们具有一些特定的生物学特性或标志，这些特性或标志在培养期间必须始终存在。

细胞系培养步骤：

‌细胞系培养‌的步骤主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。

细胞复苏‌：

将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。

将融化的细胞移入离心管中，加入37℃预热的DMEM完全培养基中（其中胎牛血清约为10%），轻轻吹匀，离心，500g离心2min，弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗，弃上清液。加入DMEM完全培养基，轻轻吹打混匀，制成细胞悬液，接种于培养皿/瓶中，在含5% CO2的细胞培养箱中培养。

细胞传代‌：

当细胞密度达到80%~90%时，去掉完全培养基，用1X PBS清洗2次。

加入胰蛋白酶进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。

加入适量DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM完全培养基清洗，弃上清液。加入DMEM完全培养基，轻轻吹打混匀，吸取10微升进行计数，然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。

‌细胞冻存‌：

当细胞密度达到80%~90%时，去掉完全培养基，用1X PBS清洗2次。

加入胰蛋白酶进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。

加入DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM完全培养基清洗，弃上清液。

这些步骤确保了细胞的生长和繁殖能够在体外环境中得到有效的维持和扩展，为科学研究提供了大量的细胞样本‌。

‌细胞系培养‌的步骤主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。

细胞复苏‌：

将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。

将融化的细胞移入离心管中，加入37℃预热的DMEM完全培养基中（其中胎牛血清约为10%），轻轻吹匀，离心，500g离心2min，弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗，弃上清液。加入DMEM完全培养基，轻轻吹打混匀，制成细胞悬液，接种于培养皿/瓶中，在含5% CO2的细胞培养箱中培养。

细胞传代‌：

当细胞密度达到80%~90%时，去掉完全培养基，用1X PBS清洗2次。

加入胰蛋白酶进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。

加入适量DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM完全培养基清洗，弃上清液。加入DMEM完全培养基，轻轻吹打混匀，吸取10微升进行计数，然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。

细胞冻存‌：

当细胞密度达到80%~90%时，去掉完全培养基，用1X PBS清洗2次。

加入胰蛋白酶进行消化，放入细胞培养箱中约2-3min。

加入DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化，转移至离心管后500g离心2min，弃上清液，再加入DMEM完全培养基清洗，弃上清液。

这些步骤确保了细胞的生长和繁殖能够在体外环境中得到有效的维持和扩展，为科学研究提供了大量的细胞样本‌

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