M-MLV One-Setp qRT-PCR(Probe) Kit （探针法qRT-PCR反转录荧光定量Mix一步法试剂盒）

M-MLV One-Setp qRT-PCR(Probe) Kit （探针法qRT-PCR反转录荧光定量Mix一步法试剂盒）

商品属性：

 产品介绍：

【贮藏及有效期】  试剂盒-20℃以下冷冻避光保存，有效期为 12 个月
【产品简介】
采用了探针法 (TaqMan) 一步RT-qPCR 方案。反转录与qPCR 反应在同一反应体系中连续进行，反应中不需添加任何试剂，操作简 单，并能有效防止污染。RT Enzyme Mix含有反转录酶与RNA酶抑制剂，Taq HS(5U/μl)为抗体修饰的Taq酶，具有热启动，检测精确度更高，灵敏度更高的特点。本制品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对多种丰度的靶基因进行准确定量检测，重复性好，可信度高。

操作方法：

*1 通常引物终浓度为 0.2 μM 可以得到较好结果。反应性能较差时，可以在 0. 1~1.0 μM 范围内调整引物浓度。
*2 探针浓度与使用的 Real Time PCR 扩增仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针 的具体使用要求进行。
*3 模板使用量依据具体实验而定，建议RNA 使用量在10 pg- 100 ng。

【产品特点】

1.RT Enzyme Mix含有反转录酶与RNA酶抑制剂，可对微量RNA进行反转录。
2.qPCR使用了Taq HS(5U/μl)，可以进行热启动法PCR反应，与产品Buffer系统结合，具有扩增效率高，灵敏度高的特点。
3.只能使用特异引物，不能使用Oligo(dT)和Random Primer。

pcr相关试剂实验结果分析：

PCR实验结果的分析涉及多个方面，‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等，‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：‌

循环次数过多：‌增加模板量减少循环次数，‌缩短退火时间及延伸时间，‌或改用两种温度的PCR循环，‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低：‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增，‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题：‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题，‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题：‌运输储存不当可能引起试剂盒失效，‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板：‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果：‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果，‌需要注意以下几点：‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染，‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析，‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

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