什么是PBS缓冲液，PBS的清洗方式、次数及时间的选择

　　什么是PBS缓冲液，PBS的清洗方式、次数及时间的选择

　　PBS是磷酸缓冲盐溶液一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用为广泛的一种缓冲液，主要成分为Na₂HPO₄、KH₂PO₄、NaCl和KCl。PBS缓冲液不仅伪狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。

　　由于Na₂HPO₄和KH₂PO₄它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广；而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl₂和0.5 mmol/L MgCl₂，以提供双价阳离子。

　　pbs缓冲液的配制方法

　　含0.05%吐温－20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS－T)配制方法为：

　　称取磷酸/二氢钾(KH2PO4)，磷酸/氢二钠(Na2HPO4·12H2O)，氯/化钠(NaCl)，氯/化钾(KCl)，吐温－20，加水。

　　PBS:Phosphate Buffered Saline

　　PBS 1L配方pH7.4：磷酸/二氢钾(KH2PO4)：0.27g，

　　磷酸/氢二钠(Na2HPO4)：1.42g，

　　氯/化钠(NaCl)：8g，

　　氯/化钾(KCl)0.2g，

　　加去离子水约800mL充分搅拌溶解，然后加入浓盐酸调pH至7.4，后定容到1L

　　pbs缓冲液的作用

　　PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称，不仅伪狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。

　　原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用，蒸馏水不具有盐平衡作用，可以破坏生物蛋白的结构及生物特性；生理盐水不具有调整pH的作用，对完整的、具有活性的物质不能保证其在适条件下参与生物反应，所以使用PBS是首/选。

　　PBS也不是的，有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高，就需要在平衡缓冲液中加入多的成分，维持佳的条件保证生物活性物质保持其完整的特性。

　　（1）单独冲洗，防止交叉反应造成污染。

　　临床上每天检测的例zi很多，所用的抗体种类及项目也多，如果在加入一抗孵育完后，将它们在一个缸内洗，这样就会造成交叉污染，影响后的结果。正确的做法是单独地进行冲洗，冲洗的PBS为一次性，保证切片没有相互交叉污染的机会。

　　（2）温柔冲洗，防止切片的脱落。

　　冲洗切片，取出切片，将PBS从上轻轻地冲洗，让PBS自上而下流下来，不要拿起切片将PBS对准切片冲洗，这样由于冲出的PBS有一定的冲击力，很容易使切片周边引起松动，导致切片的脱落。

　　（3）冲洗的时间要足够，才能彻底洗去结合的物质。

　　冲洗切片有人提出用微振荡器振染，振下未结合的各种物，使之不产生背景，此种做法一是浪费时间，二是很容易导致切片的脱落。切片的冲洗据实践认为，用一小烧杯柔和地于切片上冲洗，就能彻底冲洗去未结合的物质，无需附加其它条件，冲洗好于切片上再注入PBS，持续2分钟左右就完全足够了。

　　（4）PBS的PH和离子强度的使用和要求。

　　中性及弱硷性条件（PH7-8）有利于免疫复合物的形成，而酸性条件则有利于分解；低离子强度有利于免疫复合物的形成，而高离子强度则有利于分解。

　　（5）常用试剂的配制和使用。

　　在免疫组织化学的染色过程中，用得多的试剂就是缓冲液，因为切片在整个染色中，抗体的加、换、切片的冲洗，DAB的配制都离不开缓冲液。可见缓冲液在整个染色中都起至关键的作用，缓冲液的过酸或偏碱，都将影响染色的结果。

　　什么是PBS缓冲液，PBS的清洗方式、次数及时间的选择上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。