人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒检测说明书

　　标签：白介素6 古朵生物 人试剂盒 ELISA试剂盒

　　人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒检测说明书

　　中文名：人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒

　　别名：人白介素6(IL-6)ELISA Kit

　　规格：48t/96t

　　保存：2-8℃低温保存

　　有效期：6个月

　　试剂盒成分：酶标板，试剂，标准品等。

　　用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

　　特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。

　　检测种属：大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。

　　人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒组成：

　　1，30倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶

　　2，酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液 6ml×1 瓶

　　3，显色剂A 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶

　　4，终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶

　　5，标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份

　　6，封板膜 2 张; 12 密封袋 1 个

　　人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒组织结构：

　　1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心28分钟将血红细胞迅速小心地分离。

　　2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒。

　　3、 细胞上清液：1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。

　　4、 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心33分钟，取上清液。

　　5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

　　人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒检测说明书液体类标本：

　　包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

　　1)血清：

　　室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　2)血浆：

　　应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　3)尿液：

　　用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

　　4)细胞培养上清：

　　检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　5)组织标本：

　　切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

　　人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒操作步骤：

　　1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

　　2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

　　3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL;

　　4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

　　5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

　　6. 所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7. 所有孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

　　人白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒注意事项：

　　1.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

　　2.实验中不用的试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

　　3.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

　　4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

　　5.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

　　6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

　　7.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

　　8.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

　　9.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

　　10.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

　　人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒检测说明书 上海古朵生物科技有限公司，由具有资深行业背景和丰富市场经验的专业人士组成，致力于为生命科学研究领域提供产品，为广大科研工作者提供服务。既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生化试剂，标准物质、天然植物提取物及中药标准品，核酸、酶、缓冲剂、显色底物，医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。品种类超过2万种，广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。